PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月22日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*价格 4957
产品规格

100 Tests

产品货号

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ADP的试剂盒，ADP参与许多生物反应，例如蛋白激酶。我们的ADP分析试剂盒可通过监测ADP的形成来普遍用于分析蛋白激酶反应，而ADP的形成与酶磷酸转移酶的活性成正比，并通过荧光法进行测量。该试剂盒提供了一种快速，简单且均一的测定ADP形成或消耗的测定方法。该测定是连续的，并且可以容易地适于自动化。该套件很方便，需要少的动手时间。由于蛋白激酶与诸如癌症和其他增生性疾病，炎性疾病，代谢紊乱和神经系统疾病等疾病的广泛相关性，因此参与药物开发的研究人员对蛋白激酶很感兴趣。大多数商业化的蛋白激酶检测试剂盒都是基于对磷酸肽形成或ATP缺失的监测。我们的ADP检测试剂盒比大多数商业激酶检测试剂盒对蛋白质激酶的检测更稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*。

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	540 nm
Em：	590 nm
Cutoff：	570 nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.运行激酶反应（20 µL）
2.添加ADP传感器缓冲液（20 µL）
3.添加ADP传感器（10 µL）
4.在室温下孵育15分钟-1小时
5.检测荧光强度

溶液制备

1.储备溶液制备

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1.1ADP Sensor I库存解决方案（50X）：
将20 µL DMSO（组分B3）添加到ADP探针I（组分B1）的小瓶中。

1.2ADP探针储备溶液（1X）：
将20 µL 50X ADP Sensor I储备溶液添加到ADP Sensor II（组件B2）的小瓶中。

1.3ADP标准溶液（300 mM）：
将100 µL H2O加入ADP标准液（组分C）中，制成300 mM ADP储备液。

2.标准溶液

ADP标准
通过包括不含ADP的样品来测量背景荧光，在激酶反应缓冲液中进行ADP标准品的系列稀释。注意：通常，ADP浓度范围为0.05至30 µM是合适的。

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ADP标准品和测试样品的布局。 SD = ADP标准（SD1-SD7，0.05至30 uM）; BL =空白对照； TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
SD1	SD1	…	…
SD2	SD2	…	…
SD3	SD3
SD4	SD4
SD5	SD5
SD6	SD6
SD7	SD7

表2.每个孔的试剂组成。

孔	容积	试剂
SD1-SD7	20ul	连续稀释（0.05至30 µM）
BL	20ul	ADP分析缓冲液
TS	20ul	激酶反应

1.运行激酶反应（此步骤未提供试剂）：

1.1根据需要准备20 µL激酶反应溶液。激酶反应的成分应根据需要进行优化（例如，特定的激酶反应可能需要优化的缓冲液系统）。在大多数情况下，如果您没有优化的激酶缓冲液，也可以使用ADP分析缓冲液（组分D）进行激酶反应。

1.2Amplite 荧光ADP测定试剂盒用于确定ADP的形成。在DTT和β-巯基乙醇等硫醇存在下，ADP传感器不稳定。终硫醇浓度高于10 µM会大大降低测定的动态范围。

2.运行Amplite ADP分析：

2.1向装有20 µL激酶反应溶液的每个孔中加入20 µL ADP传感器缓冲液（组分A）和10 µL ADP Sensor储备溶液，使ADP测定总体积为50 µL /孔。注意：在DTT和β-巯基乙醇等硫醇存在下，ADP传感器不稳定。终硫醇浓度高于10 µM会大大降低测定的动态范围。注意：ADP分析应在6.5至7.4的pH值下进行。

2.2将反应混合物在室温下孵育15分钟至1小时。

2.3使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm处监控荧光强度。

参考文献

Discovery of Non-ATP-Competitive Inhibitors of Polo-like Kinase 1
Authors: Taikangxiang Yun, Tan Qin, Ying Liu, Luhua Lai
Journal: ChemMedChem (2016): 713–717

Cell polarity kinase MST4 cooperates with cAMP-dependent kinase to orchestrate histamine-stimulated acid secretion in gastric parietal cells
Authors: Hao Jiang, Wenwen Wang, Yin Zhang, William W Yao, Jiying Jiang, Bo Qin, Wendy Y Yao, Fusheng Liu, Huihui Wu, Tarsha L Ward
Journal: Journal of Biological Chemistry (2015): 28272–28285

Regulation of NDR1 activity by PLK1 ensures proper spindle orientation in mitosis
Authors: Maomao Yan, Lingluo Chu, Bo Qin, Zhikai Wang, Xing Liu, Changjiang Jin, Guanglan Zhang, Marta Gomez, Alexander Hergovich, Zhengjun Chen
Journal: Scientific reports (2015): 10449

Trypanosoma brucei vacuolar transporter chaperone 4 (TbVtc4) is an acidocalcisome polyphosphate kinase required for in vivo infection
Authors: Noelia Lander, Paul N Ulrich, Roberto Docampo
Journal: Journal of Biological Chemistry (2013): 34205–34216

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PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒蓝色荧光	Cat#21611
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PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒蓝色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月15日由上海金畔生物科技有限公司

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PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *蓝色荧光*价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *蓝色荧光*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测焦磷酸的试剂盒，焦磷酸盐（PPi）通过许多生化反应产生，例如ATP水解，DNA和RNA聚合，腺苷酸环化酶形成的环AMP和脂肪酸的酶促活化以形成它们的辅酶A酯。我们的PhosphoWroks 焦磷酸盐检测试剂盒提供了强大的分光光度法测量焦磷酸盐。该试剂盒使用我们专有的荧光焦磷酸盐，其荧光强度成比例地取决于焦磷酸盐的浓度。我们的测定法比酶偶联焦磷酸盐方法更容易和更稳健，这些方法需要至少两种酶用于焦磷酸盐检测。该试剂盒提供了测定焦磷酸盐的所有必需成分。该试剂盒已成功用于高通量筛选（HTS）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒。

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	316 nm
Em：	456 nm
Cutoff：	420 nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

实验方案

操作步骤

简要概述

准备焦磷酸盐标准品和/或测试样品（50μL）
加入焦磷酸盐工作溶液（50μL）
在室温下孵育10至30分钟
监测Ex / Em = 316/456 nm处的荧光强度（截止= 420 nm）

溶液制备

1.制备储存溶液

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 PPi探针储备溶液（200X）：
将50μLDMSO（组分D）加入到PPi探针（组分B）的小瓶中以制备200X PPi探针储备溶液。避光。注意：对于一个96孔板，25μLPPi探针储备溶液就足够了。

1.2焦磷酸盐标准溶液（1 mM）：
将10μL50mM焦磷酸盐标准品（组分C）加入490μLddH2 O或50mM Hepes缓冲液（pH 7）中，制成1mM焦磷酸盐标准溶液。

2.制备标准溶液

焦磷酸盐标准溶液制备
将50μL的1mM焦磷酸盐标准溶液加入到450μLDdH2O或50mM Hepes缓冲液中，得到100μM焦磷酸盐标准溶液（PS7）。取100μM焦磷酸盐标准溶液，在ddH2O或50mM Hepes缓冲液中进行1：3连续稀释，得到连续稀释的焦磷酸盐标准品（PS6-PS1）。

3.制备工作溶液

将25μL的200X PPi Sensor储备溶液加入到5 mL的分析缓冲液（组分A）中并充分混合以制备PPi工作溶液。注意：由于该检测方法对PPi具有高灵敏度，因此使用不含PPi的实验室器具和试剂非常重要。 DTT≥1mM会增加背景，MgCl2≥2mM会降低反应。

样品试验方案

表1.固体黑色96孔微孔板中焦磷酸盐标准品和测试样品的布局

PS =焦磷酸盐标准品（PS1-PS7,0.3至100μM），BL =空白对照，TS =测试样品

BL	BL	TS	TS
PS1	PS1	…	…
PS2	PS2	…	…
PS3	PS3
PS4	PS4
PS5	PS5
PS6	PS6
PS7	PS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	规格	试剂
PS1-PS7	50ul	连续稀释液（0.3至100μM）
BL	50ul	分析缓冲液
TS	50ul	测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备焦磷酸盐标准品（PS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向焦磷酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLPPi工作溶液，使焦磷酸盐总测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μLPPi工作溶液，总体积为50μL/孔。彻底混合试剂。

3.在室温下孵育10至30分钟。

4.用Ex / Em = 316 / 456nm（截止= 420nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

数据分析

从空白标准孔获得的读数（对照％）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算PPi，ATP，Pi样本。我们建议使用在线四参数物流计算器，可在以下位置找到：

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *蓝色荧光*

图1.使用PhosphoWorks Fluoremetric焦磷酸盐测定试剂盒在固体黑色96孔板中使用荧光酶标仪测量焦磷酸盐，ATP和磷酸盐剂量响应。

参考文献

RANKL Expression Is Increased in Circulating Mononuclear Cells of Patients with Calcific Aortic Stenosis
Authors: Marcello Rattazzi, Elisabetta Faggin, Elisa Bertacco, Roberta Buso, Massimo Puato, Mario Plebani, Martina Zaninotto, Davide Condotta, Giacomo Zoppellaro, Leopoldo Pagliani
Journal: Journal of Cardiovascular Translational Research (2018): 1–10

Biological studies and target-engagement of the 2-C-methyl-D-erythritol 4-phosphate cytidylyltransferase (IspD)-targeting antimalarial agent (1R, 3S)-MMV008138 and analogs
Authors: Maryam Ghavami, Emilio Fernando Merino, ZhongKe Yao, Rubayet Elahi, Morgan Simpson, Maria Fernandez-Murga, Joshua Hayden Butler, Michael Casasanta, Priscilla Krai, Maxim Totrov
Journal: ACS Infectious Diseases (2017)

Structural Insights into Inhibition of Escherichia coli Penicillin-binding Protein 1B
Authors: Dustin T King, Gregory A Wasney, Michael Nosella, Anita Fong, Natalie CJ Strynadka
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): 979–993

Biomarkers identified by urinary metabonomics for noninvasive diagnosis of nutritional rickets
Authors: Maoqing Wang, Xue Yang, Lihong Ren, Songtao Li, Xuan He, Xiaoyan Wu, Tingting Liu, Liqun Lin, Ying Li, Changhao Sun
Journal: Journal of proteome research (2014): 4131–4142

Host-Pathogen Interaction and Signaling Molecule Secretion Are Modified in the dpp3 Knockout Mutant of Candida lusitaniae
Authors: Ayman Sabra, Jean-Jacques Bessoule, Vessela Atanasova-Penichon, Thierry Noel, Karine Dementhon
Journal: Infection and immunity (2014): 413–422

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PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月14日由上海金畔生物科技有限公司

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PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT – Free*价格 2111
产品规格

1 Plate

产品货号

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，腺苷三磷酸（ATP）在细胞能量学，代谢调节和细胞信号传导中起重要作用。 PhosphoWorks ATP检测试剂盒提供快速，简单和均匀的发光检测，用于测定哺乳动物细胞中的细胞增殖和细胞毒性。可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行测定。该测定的高灵敏度允许在许多生物系统，环境样品和食物中检测ATP。该PhosphoWorks ATP检测试剂盒不使用DTT，并且具有长达4小时的稳定发光信号。它具有稳定的发光，不需要混合或分离，并配制成具有小的手动操作时间。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒。

适用仪器

发光酶标仪
推荐孔板:	白色孔板

实验方案

操作步骤

简要概述

1.用测试化合物（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）制备细胞（样品）
2.加入等体积的ATP工作溶液（100μL/ 96孔板或25μL/ 384孔板）
3.在室温下孵育10-20分钟
4.监测发光强度

制备工作溶液

1.将10 mL反应缓冲液（组分C）转移到ATP传感器（组分B）中并充分混合。

2.将20μLATP监测酶（组分A）加入到组分B + C的瓶中并充分混合以制备ATP工作溶液。注意：避免来自外源生物来源的潜在ATP污染。

有关细胞样品制备的指南（点击查看）

样品实验方案

1.运行ATP测定：

1.1用测试化合物处理细胞（或样品），在96孔板中加入10μL10X化合物，或在所需化合物缓冲液中加入5μL5X化合物用于384孔板。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相应量的化合物缓冲液。

1.2将细胞板在37℃，5％CO 2培养箱中孵育所需的一段时间，例如24,48或96小时。

1.3向每个孔中加入100μL（96孔板）或25μL（384孔板）的ATP工作溶液。

1.4在室温下孵育10-20分钟。

1.5用标准发光计监测发光强度。

2.生成标准ATP校准曲线：

如果需要计算样品中ATP的绝对量，则应与上述分析一起生成ATP标准曲线。

2.1通过包含不含ATP的样品（作为对照）在含有0.1％BSA的PBS缓冲液中制备ATP系列稀释液以测量背景发光。注意：通常ATP浓度范围为0.1 nM至1μM是合适的。

2.2将相同量的稀释的ATP溶液加入空板中（对于96孔板为100μL或对于384孔板为25μL）。

2.3加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ATP工作溶液。

2.4将反应混合物在室温下孵育10至20分钟。

2.5用标准发光计记录发光强度。

2.6生成ATP标准曲线。

数据分析

从空白标准孔获得的读数（RLU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算ATP样品。我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：

PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒* DTT - Free*

图1.使用NOVOstar板读数器（BMG Labtech）在96孔白板上用PhosphoWorks TM发光ATP测定试剂盒* DTT-Free *测量ATP剂量响应。该试剂盒可在20分钟内检测到（3 pmole /孔）0.03 nM ATP。积分时间为1秒。半衰期超过2小时。

参考文献

High throughput cell-based assay for identification of glycolate oxidase inhibitors as a potential treatment for Primary Hyperoxaluria Type 1
Authors: Mengqiao Wang, Miao Xu, Yan Long, Sonia Fargue, Noel Southall, Xin Hu, John C McKew, Christopher J Danpure, Wei Zheng
Journal: Scientific Reports (2016)

NT1014, a novel biguanide, inhibits ovarian cancer growth in vitro and in vivo
Authors: Lu Zhang, Jianjun Han, Amanda L Jackson, Leslie N Clark, Joshua Kilgore, Hui Guo, Nick Livingston, Kenneth Batchelor, Yajie Yin, Timothy P Gilliam
Journal: Journal of Hematology & Oncology (2016): 91

The Different Effects of Atorvastatin and Pravastatin on Cell Death and PARP Activity in Pancreatic NIT-1 Cells
Authors: Ya-Hui Chen, Yi-Chun Chen, Chin-San Liu, Ming-Chia Hsieh
Journal: Journal of Diabetes Research (2016)

BPA-induced DNA hypermethylation of the master mitochondrial gene PGC-1α contributes to cardiomyopathy in male rats
Authors: Ying Jiang, Wei Xia, Jie Yang, Yingshuang Zhu, Huailong Chang, Juan Liu, Wenqian Huo, Bing Xu, Xi Chen, Yuanyuan Li
Journal: Toxicology (2015): 21–31

Glutamine promotes ovarian cancer cell proliferation through the mTOR/S6 pathway
Authors: Lingqin Yuan, Xiugui Sheng, Adam K Willson, Dario R Roque, Jessica E Stine, Hui Guo, Hannah M Jones, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Endocrine-related cancer (2015): 577–591

JQ1 suppresses tumor growth through downregulating LDHA in ovarian cancer
Authors: Haifeng Qiu, Amanda L Jackson, Joshua E Kilgore, Yan Zhong, Leo Li-Ying Chan, Paola A Gehrig, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Oncotarget (2015): 6915

Loss of histone deacetylase Hdac1 disrupts metabolic processes in intestinal epithelial cells
Authors: Alexis Gonneaud, Naomie Turgeon, Frančois-Michel Boisvert, Frančois Boudreau, Claude Asselin
Journal: FEBS letters (2015): 2776–2783

A neutrophil intrinsic impairment affecting Rab27a and degranulation in cystic fibrosis is corrected by CFTR potentiator therapy
Authors: Kerstin Pohl, Elaine Hayes, Joanne Keenan, Michael Henry, Paula Meleady, Kevin Molloy, Bakr Jundi, David A Bergin, Cormac McCarthy, Oliver J McElvaney
Journal: Blood (2014): 999–1009

Fluorescence lifetime imaging unravels C. trachomatis metabolism and its crosstalk with the host cell
Authors: Márta Szaszák, Philipp Steven, Kensuke Shima, Regina Orzekowsky-Schroder, Gereon Huttmann, Inke R Konig, Werner Solbach, Jan Rupp
Journal: PLoS pathogens (2011): e1002108

G protein coupled receptor kinase 2 interacting protein 1 (GIT1) is a novel regulator of mitochondrial biogenesis in heart
Authors: Jinjiang Pang, Xiangbin Xu, Michael R Getman, Xi Shi, Stephen L Belmonte, Heidi Michaloski, Amy Mohan, Burns C Blaxall, Bradford C Berk
Journal: Journal of molecular and cellular cardiology (2011): 769–776

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PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒温和发光	Cat#21609
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PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 PPi选择性高-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月14日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高*价格 4957
产品规格

200 Tests

产品货号

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测焦磷酸的试剂盒，焦磷酸盐（PPi）通过许多生化反应产生，例如ATP水解，DNA和RNA聚合，腺苷酸环化酶形成的环AMP和脂肪酸的酶促活化以形成它们的辅酶A酯。我们的PhosphoWroks 焦磷酸盐检测试剂盒提供了强大的分光光度法测量焦磷酸盐。该试剂盒使用我们专有的荧光焦磷酸盐，其荧光强度成比例地取决于焦磷酸盐的浓度。与磷酸盐和ATP相比，该试剂盒中使用的PPi探针对PPi具有相当高的选择性。我们的测定法比酶偶联焦磷酸盐方法更容易和更稳定，这些方法需要至少两种酶用于焦磷酸盐检测。该试剂盒提供了测定焦磷酸盐的所有必需成分。该试剂盒已成功用于高通量筛选（HTS）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒。

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	370 nm
Em：	470 nm
Cutoff：	455 nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

实验方案

操作步骤

简要概述

准备PPi探针工作溶液（50μL）
添加焦磷酸盐标准品和/或测试样品（50μL）
在室温下孵育10至30分钟
检测Ex / Em = 370/470 nm处的荧光强度（cutoff= 455 nm）

溶液制备

1.制备储备溶液

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 PPi探针储备溶液（200X）：
将50μLDMSO（组分D）加入到PPi探针（组分B）的小瓶中以制备200X PPi探针储备溶液。注意：对于一个96孔板，25μLPPiSensor储备溶液就足够了。

2.制备标准溶液

焦磷酸盐标准
通过将10μL50mM焦磷酸盐标准品（组分C）加入490μL测定缓冲液（组分A）或您选择的缓冲液（优选50 mM Hepes缓冲液，pH 7）中制备1 mM焦磷酸盐标准品，制成1 mM焦磷酸盐标准品。取1 mM焦磷酸盐标准品（PS7）进行1：3连续稀释，得到连续稀释的焦磷酸盐标准品（PS6-PS1）和测定缓冲液（组分A）。

3.制备工作溶液

将25μL200XPPi Sensor储备溶液加入5 mL分析缓冲液（组分A）中，并充分混合。注意：由于该检测方法对PPi具有高灵敏度，因此使用不含PPi的实验室器具和试剂非常重要。注意：DTT（1 uM）会增加背景，MgCl2≥2mM会降低反应。

样品实验方案

表1.实心黑色96孔微孔板中焦磷酸盐标准品和测试样品的布局。

PS =焦磷酸盐标准，BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
PS1	PS1	…	…
PS2	PS2	…	…
PS3	PS3
PS4	PS4
PS5	PS5
PS6	PS6
PS7	PS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	规格	试剂
PS1-PS7	50ul	连续稀释（1至1000μM）
BL	50ul	分析缓冲液（组分A）
TS	50ul	样品

根据表1和2中提供的布局制备焦磷酸盐标准品（PS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

向焦磷酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLPPiSensor工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μLPPiSensor工作溶液，总体积为50μL/孔。

在室温下孵育反应10-30分钟，避光。

使用荧光酶标仪在Ex / Em = 370/470 nm（截止= 455 nm）下检测荧光

数据分析

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算PPi样本。我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：

PhosphoWorks 荧光法焦磷酸检测试剂盒 *PPi选择性高*

图1.使用PhosphoWorks Fluoremetric焦磷酸盐测定试剂盒在固体黑色96孔板中使用荧光酶标仪测量焦磷酸盐，ATP和磷酸盐剂量响应。

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PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月14日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒价格 5670
产品规格

100 Tests

产品货号

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起重要作用。 AAT Bioquest提供了多种生物发光测定试剂盒，可通过重组萤火虫荧光素酶（目录号21610和21609）确定ATP的纳摩尔（nM）范围。这些试剂盒需要酶标仪，通常用于细胞活力或细胞毒性测定。 PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒基于一系列ATP诱导的酶偶联反应，产生过氧化氢，用我们的Amplite 红色底物在OD 570 nm处进行分光光度法定量。该测定法可在100 µL反应体积中检测到约3 µM ATP，而不受ADP和AMP的干扰。它为测定生物样品中的ATP水平提供了一种强大，简单且方便的测定方法。 PhosphoWorks 比色ATP分析是我们基于荧光素酶的ATP分析试剂盒的补充。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒。

适用仪器

吸光度酶标仪
吸光度:	570 nm
推荐孔板:	透明底板

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备ATP工作溶液（50 µL）
2.添加ATP标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测570 nm处的吸光度

溶液配制

1.制备储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1.1Amplite 红色底物储备液（200X）：
将30 µL DMSO（组分E）加入小瓶AmpliteTM Red Substrate（组分A）中，制成200X AmpliteTM Red Substrate储备液。

1.2ATP标准溶液（10mM）：
将0.5 mL的ddH2O加入到ATP标准溶液（组分D）的小瓶中，制成10 mM ATP标准溶液。

2.制备标准溶液

ATP标准

将10 µL的10 mM ATP标准溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成100 µM ATP标准溶液（AS7）。取100 µM ATP标准溶液（AS7），并按1：2进行系列稀释，以用1X PBS缓冲液获得系列稀释的ATP标准溶液（AS6-AS1）。

3.制备工作溶液

3.1将5ml测定缓冲液（组分C）添加到酶混合瓶（组分B）中，并充分混合。

3.2将25 µL 200X Amplite Red Substrate储备溶液添加到Enzyme Mix瓶中，并充分混合以制成ATP工作溶液。

样品示例及操作

表1.透明底部96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 AS = ATP标准品（AS1-AS7，1.56至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
AS1	AS1	…	…
AS2	AS2	…	…
AS3	AS3
AS4	AS4
AS5	AS5
AS6	AS6
AS7	AS7

表2.每个孔的试剂组成。

孔	容积	试剂
AS1-AS7	50ul	连续稀释（1.56至100 µM）
BL	50ul	1 X PBS缓冲液
TS	50ul	测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备ATP标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

2.将50 µL ATP工作溶液添加到ATP标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，以使ATP总测定体积为100 µL /孔。对于384孔板，将25 µL ATP工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.用吸光度板读数器在570 nm的OD值处监测吸光度的增加。

参考文献

ATP-based cell viability assay is superior to trypan blue exclusion and XTT assay in measuring cytotoxicity of anticancer drugs Taxol and Imatinib, and proteasome inhibitor MG-132 on human hepatoma cell line HepG2
Authors: E. Nowak
Journal: Clin Hemorheol Microcirc (2018): 327-336

High-content image analysis (HCIA) assay has the highest correlation with direct counting cell suspension compared to the ATP, WST-8 and Alamar blue assays for measurement of cytotoxicity
Authors: H. Tahara
Journal: J Pharmacol Toxicol Methods (2017): 92-99

Combination of immunoprecipitation (IP)-ATP_Glo kinase assay and melanogenesis for the assessment of potent and safe PAK1-blockers in cell culture
Authors: B. C. Nguyen
Journal: Drug Discov Ther (2015): 289-95

相关产品

产品名称	货号
PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒蓝色	Cat#21665
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒温和发光	Cat#21609
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒明亮发光	Cat#21610

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月14日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒价格 5670
产品规格

100 Tests

产品货号

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ATP的试剂盒，三磷酸腺苷（ATP）在细胞能量，代谢调节和细胞信号传导中起着基本作用。它被称为细胞内能量转移的“货币分子单位”，以驱动活细胞中的许多过程和化学合成。 ATP也是细胞通讯的信号分子，在DNA和RNA合成中起重要作用。 AAT Bioquest提供了多种生物发光测定试剂盒，可通过重组萤火虫荧光素酶（目录号21610和21609）确定ATP的纳摩尔（nM）范围。这些试剂盒需要酶标仪，通常用于细胞活力或细胞毒性测定。 PhosphoWorks 荧光ATP分析试剂盒基于一系列ATP诱导的酶偶联反应，产生过氧化氢，该过氧化氢用我们的Amplite Red底物通过分光光度法定量。该测定法可在100 µL反应体积中检测到约0.4 µM ATP，而不受ADP和AMP的干扰。它为测定生物样品中的ATP水平提供了一种强大，简单且方便的测定方法。 PhosphoWorks 荧光ATP分析是我们基于荧光素酶的ATP分析试剂盒的补充。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光ATP检测试剂盒。

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	540 nm
Em：	590 nm
Cutoff：	570 nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备ATP工作溶液（50 µL）
2.添加ATP标准液或测试样品（50 µL）
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）的荧光增加

溶液配制

1.制备储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。避免重复冻融循环。
1.1Amplite 红色底物储备液（200X）：
将30 µL DMSO（组分E）加入小瓶Amplite Red Substrate（组分A）中，制成200X Amplite Red Substrate储备液。

1.2ATP标准溶液（10mM）：
将0.5 mL的ddH2O加入到ATP标准溶液（组分D）的小瓶中，制成10 mM ATP标准溶液。

2.制备标准溶液

ATP标准

将10 µL的10 mM ATP标准溶液添加到990 µL 1X PBS缓冲液中，以生成100 µM ATP标准溶液（AS7）。取100 µM ATP标准溶液（AS7）并进行1：3连续稀释，以使用1X PBS缓冲液获得系列稀释的ATP标准溶液（AS6-AS1）。

3.制备工作溶液

3.1将5毫升测定缓冲液（组分C）添加到酶混合瓶（组分B）中，并充分混合。

3.2在Enzyme Mix瓶中加入25 µL 200X AmpliteTM Red Substrate储备液，充分混合以制成APT工作溶液。

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ATP标准品和测试样品的布局。 AS = ATP标准品（AS1-AS7，0.14至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
AS1	AS1	…	…
AS2	AS2	…	…
AS3	AS3
AS4	AS4
AS5	AS5
AS6	AS6
AS7	AS7

表2.每个孔的试剂组成

孔	容积	试剂
AS1-AS7	50ul	连续稀释（0.14至100 µM）
BL	50ul	1 X PBS缓冲液
TS	50ul	测试样品

1.根据表1和2中提供的布局，准备ATP标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂，而不是50 µL。

3.避光保存，室温下孵育反应10-30分钟。

4.使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处监视荧光增加。

参考文献

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产品名称	货号
PhosphoWorks 比色ATP分析试剂盒	Cat#21617
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒温和发光	Cat#21609
PhosphoWorks 发光法ATP检测试剂盒明亮发光	Cat#21610

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 UV吸收-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月21日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ADP的试剂盒，在无机磷酸盐存在下，MESG 通过嘌呤核苷磷酸化酶 (EC 2.4.2.1) 转化为 2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤，吸收波长变为红色。此功能已用于开发我们方便的 MESG 磷酸盐检测试剂盒。我们的试剂盒提供所有必需的试剂，包括 MESG、磷酸化酶和反应缓冲液。在 pH 6.5-8.5 下，MESG 底物在 360 nm 处的吸光度增加，在 pH 7.6 时，消光系数的变化为 11,000 M-1cm-1。该测定法可对溶液中浓度至少低至 2 µM 的磷酸盐进行定量。它可用于通过耦合两种酶促反应来测量磷酸酶（如 GTP 酶和 ATP 酶）释放磷酸盐的动力学。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 比色法MESG磷酸盐检测试剂盒 *UV吸收*。

适用仪器

分光光度计
吸光度:	360 nm

吸光度酶标仪

吸光度

360 nm;

推荐孔板

透明底板;

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.运行激酶反应（20 µL）
2.添加ADP传感器缓冲液（20 µL）
3.添加ADP传感器（10 µL）
4.在室温下孵育15分钟-1小时
5.监控荧光强度

溶液制备

1.标准溶液

磷酸盐标准
向950μL去离子水或酶反应缓冲液中添加50μL1 mM KH2PO4（组分D），得到50μM磷酸盐标准溶液（PS7）。取50μM磷酸盐标准溶液，并进行1：2连续稀释，以用去离子水或酶反应缓冲液连续稀释磷酸盐标准液（PS6-PS1）。

2.工作溶液

2.1将500 µL ddH2O加入小瓶MESG底物（组分B）。涡旋混合均匀，得到MESG底物溶液。注意：250 µl足够一块板。

2.2向小瓶嘌呤核苷磷酸化酶（PNP；组分C）中加入100 µL ddH2O。涡旋混合均匀，得到嘌呤核苷磷酸化酶溶液。

2.3将全部体积的MESG底物溶液和嘌呤核苷磷酸化酶溶液添加到分析缓冲液（组分A）的瓶子中，并充分混合以得到工作溶液。将工作溶液放在冰上。注意：此工作溶液在冰上至少可稳定4小时。不建议将工作溶液冷冻进行其他测定。为了获得理想的结果，需要紫外线透明的板或比色皿。由于该测定法对Pi的敏感性很高，因此使用无Pi的实验室器具极为重要。

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ADP标准品和测试样品的布局。 SD = ADP标准（SD1-SD7，0.05至30 uM）; BL =空白对照； TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
PS1	PS1	…	…
PS2	PS2	…	…
PS3	PS3
PS4	PS4
PS5	PS5
PS6	PS6
PS7	PS7

表2.每个孔的试剂组成。

孔	容积	试剂
PS1-PS7	50ul	连续稀释液（0.78至50 µM）
BL	50ul	不含磷酸盐的水或缓冲液
TS	50ul	测试样品

1.根据表1和表2提供的布局，准备磷酸盐标准品（PS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.将50 µL工作溶液添加到磷酸盐标准液，空白对照和测试样品的每个孔中，以使总测定体积为100 µL /孔。彻底混合试剂。对于384孔板，请向每个孔中添加25 µL工作溶液，总体积为50 µL /孔。

3.在室温下孵育30分钟。

4.用酶标仪或分光光度计在360 nm处监测吸光度。注意：对于需要总体积大于100 µL的比色杯分析，在测量吸收之前，应按比例将样品和分析试剂的体积相乘。

参考文献

Sacrificial crystal templating of hyaluronic acid-based hydrogels
Authors: Richelle C Thomas, Paul E Chung, Shan P Modi, John G Hardy, Christine E Schmidt
Journal: European Polymer Journal (2016)

Osteogenic cell cultures cannot utilize exogenous sources of synthetic polyphosphate for mineralization
Authors: Marianne B Ariganello, Sidney Omelon, Fabio Variola, Rima M Wazen, Pierre Moffatt, Antonio Nanci
Journal: Journal of cellular biochemistry (2014): 2089–2102

PhosphoWorks 荧光磷酸盐检测试剂盒红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月21日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 荧光磷酸盐检测试剂盒*红色荧光*价格 4245
产品规格

125 Tests

产品货号

PhosphoWorks 荧光磷酸盐检测试剂盒*红色荧光*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

PhosphoWorks 荧光法磷酸盐检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测磷酸盐的试剂盒，细胞利用多种磷酸盐 (Pi) 和多聚磷酸酯作为酶底物、第二信使、膜结构成分和生命能量储存器。磷酸盐参与许多生物过程。例如，磷酸酶、ATP 酶和其他几种酶催化从磷酸酯底物释放无机磷酸盐的生化反应。许多磷酸酯代谢酶的检测很困难，因为没有合适的底物。通常有必要使用繁琐的比色测定或基于放射性同位素的方法来确定无机磷酸盐的释放。这款 PhosphoWorks™ 荧光磷酸盐检测试剂盒专为使用我们的红色荧光磷酸盐探针检测任何 Pi 生成酶的活性而开发。该试剂盒提供对 Pi 的灵敏检测，是危险放射性方法和其他不太敏感的比色测定的替代方法。 Pi 的测量基于我们新型磷酸盐探针的吸光度和荧光变化。我们的试剂盒提供所有必需的试剂，包括磷酸盐探针、磷酸盐标准品和检测缓冲液。该测定法可对溶液中浓度至少低至 0.1 µM 的磷酸盐进行定量。它可用于通过耦合两种酶促反应来测量磷酸酶（如 GTP 酶和 ATP 酶）释放磷酸盐的动力学。该测定可以使用96 孔或 384 孔进行检测，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的PhosphoWorks 荧光法磷酸盐检测试剂盒。

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	540 nm
Em：	590 nm
Cutoff：	570 nm
推荐孔板:	纯黑色孔板

实验方案

操作步骤

简要概述

准备测试样品或磷酸盐标准品（40μL）
加入等体积的分析缓冲液（40μL）
添加磷酸盐工作溶液（20μL）
在室温下孵育15至60分钟
监测Ex / Em = 540/590 nm处的荧光强度（截止= 570 nm）

溶液制备

1.制备储备溶液

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1磷酸盐储备液（125X）：
在磷酸盐（组分B）中加入20μLDMSO，制成125X磷酸盐原液。

2.制备标准溶液

磷酸盐标准溶液
将50μL的1mM KH 2 PO 4（组分C）加入950μL去离子水或酶反应缓冲液中，得到50μM磷酸盐标准溶液（PS7）。取50μM磷酸盐标准溶液（PS7）并进行1：2连续稀释，用去离子水或酶反应缓冲液得到连续稀释的磷酸盐标准品（PS6-PS1）。

3.制备工作溶液

将20μL125X磷酸盐储备溶液加入2.5 mL无菌H₂O中，充分混合，制成磷酸盐工作溶液。避免潜在的Pi污染。注意：避免磷酸盐（组分B）直接暴露在光线下。由于该测定法对Pi的高灵敏度，使用无Pi实验室器皿和试剂极为重要。

样品实验方案

在pH 6.5至7.4下进行磷酸盐测定

表1.实心黑色96孔微孔板中磷酸盐标准品和测试样品的布局。

PS =磷酸盐标准品（PS1-PS7,0.78至50μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
PS1	PS1	…	…
PS2	PS2	…	…
PS3	PS3
PS4	PS4
PS5	PS5
PS6	PS6
PS7	PS7

表2.每个孔的试剂组成。

孔	规格	试剂
PS1-PS7	40ul	连续稀释液（0.78至50μM）
BL	40ul	H₂O或酶反应缓冲液
TS	40ul	样品

1.根据表1和2中提供的布局制备磷酸盐标准品（PS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用20μL试剂代替40μL。

2.向磷酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入40μL测定缓冲液（组分A）和20μL磷酸盐工作溶液，使总磷酸盐测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入20μL测定缓冲液（组分A）和10μL磷酸盐工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应混合物在室温下孵育15至60分钟。

4.用Ex / Em = 540 / 590nm（截止值= 570nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

数据分析

从空白标准孔获得的读数（RFU）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算Pi样本。我们建议使用在线线性回归计算器，该计算器可在以下位置找到：

PhosphoWorks 荧光磷酸盐检测试剂盒*红色荧光*

图1.使用Novostar酶标仪（BMG Labtech），在实心黑色96孔板上用PhosphoWorks 荧光磷酸盐测定试剂盒测量磷酸盐剂量响应。

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PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒蓝色-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月21日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒 *蓝色*价格 2823
产品规格

1000 Tests

产品货号

PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒 *蓝色*

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	在2-8度冷藏保存, 避免光照

产品概述

PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测磷酸盐的试剂盒，磷酸盐参与许多生物反应。例如，磷酸酶，ATP酶和几种其他酶催化无机磷酸盐（Pi）从底物释放的反应。这种PhosphoWorks 磷酸盐检测试剂盒是为测量任何产生磷的酶的活性而开发的。该试剂盒的配方可灵敏检测Pi，为危险的放射性方法和其他灵敏度较低的比色分析提供了替代方案。 Pi的测量基于在钼酸盐存在下孔雀石绿衍生物的吸光度变化。与其他孔雀石染料配方不同，该试剂盒可提供完全稳定的终点信号，不易沉淀。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒。

适用仪器

分光光度计
吸收：	600-660nm
推荐孔板：	透明底板

光吸收酶标仪
吸收：	600-660nm
推荐孔板：	透明底板

实验方案

操作步骤

简要概述

准备测试样品或磷酸盐标准品（80μL）
添加MG Plus 试剂（组分B）（20μL）
在室温下孵育10-40分钟
监测600-660nm的吸光度或分光光度计

制备标准溶液

磷酸盐标准配制

在950μL去离子水或酶反应缓冲液中加入50μL1mM磷酸盐标准品（组分A），得到50μM磷酸盐标准溶液（PS7）。取50μM磷酸盐标准溶液（PS7）并进行1：2连续稀释，用去离子水或酶反应缓冲液获得连续稀释的磷酸盐标准品（PS6-PS1）。

样品实验方案

表1.透明96孔微孔板中磷酸盐标准品和测试样品的布局。

PS =磷酸盐标准品（PS1-PS7,0.78至50μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL	BL	TS	TS
PS1	PS1	…	…
PS2	PS2	…	…
PS3	PS3
PS4	PS4
PS5	PS5
PS6	PS6
PS7	PS7

表2.每个孔的试剂组成。

孔	规格	试剂
PS1-PS7	80ul	连续稀释液（0.78至50μM）
BL	80ul	不含磷酸盐的水或缓冲液
TS	80ul	测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备磷酸盐标准品（PS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用40μL试剂代替80μL。

2.使用前摇匀MG Plus 试剂（组分B）。

3.向磷酸盐标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入20μLMGPlus™试剂（组分B），使总磷酸盐测定体积为100μL/孔。彻底混合试剂。对于384孔板，在每个孔中加入10μLMGPlus™试剂（组分B），总体积为50μL/孔。

4.在含磷酸盐的孔中将在10至40分钟内产生蓝绿色。使用吸光度酶标仪在600 – 660 nm处监测吸光度或使用分光光度计。注意：在高磷酸盐浓度（>100μM）下，可能会形成沉淀。稀释样品并重新进行分析。注意：对于需要总体积大于100μL的比色皿测定，在测量吸收之前，将样品体积和MG Plus 试剂（组分B）按比例加倍或用1M H 2 SO 4或1M HCl稀释最终反应混合物。

数据分析

从空白标准孔获得的读数（吸光度）用作阴性对照。从其他标准的读数中减去该值，以获得基线校正值。然后，绘制标准读数以获得标准曲线和方程。该等式可用于计算磷酸盐样品。我们建议使用在线线性回归计算器（点击查看）

PhosphoWorks 比色法磷酸盐检测试剂盒 *蓝色*

图1.使用SpectraMax Plus酶标仪（Molecular Devices），在透明的96孔板上用PhosphoWorks 比色磷酸盐测定试剂盒测量磷酸盐剂量响应。

参考文献

Modulating bone regeneration in rabbit condyle defects with three surface-structured tricalcium phosphate ceramics
Authors: Rongquan Duan, Davide Barbieri, Florence de. groot, Joost de. bruijn, Huipin Yuan
Journal: ACS Biomaterials Science & Engineering (2018)

Variation of bone forming ability with the physicochemical properties of calcium phosphate bone substitutes
Authors: Rongquan Duan, Davide Barbieri, Xiaoman Luo, Jie Weng, Chongyun Bao, Joost De Bruijn, Huipin Yuan
Journal: Biomaterials Science (2017)

Influence of surface microstructure and chemistry on osteoinduction and osteoclastogenesis by biphasic calcium phosphate discs.
Authors: NL Davison, J Su, H Yuan, JJJP van den Beucken, JD de Bruijn
Journal: (2015)

Submicron-scale surface architecture of tricalcium phosphate directs osteogenesis in vitro and in vivo
Authors: NL Davison, X Luo, T Schoenmaker, V Everts, H Yuan, F Barrere-de Groot, JD de Bruijn
Journal: Eur Cell Mater (2014)

Zinc in calcium phosphate mediates bone induction: in vitro and in vivo model
Authors: Xiaoman Luo, Davide Barbieri, Noel Davison, Yonggang Yan, Joost D de Bruijn, Huipin Yuan
Journal: Acta biomaterialia (2014): 477–485

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