酶显色底物ADP-ribose-pNP-AAT Bioquest荧光染料

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酶显色底物ADP-ribose-pNP价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

酶显色底物ADP-ribose-pNP

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 724.37 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

酶显色底物ADP-ribose-pNP是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂,ADP-核糖-pNP是用来评估多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)活性的一种显色底物。在405nm处可检测释放的p-硝基酚吸光度。标准曲线的斜率通常用来转换产生的ADP-核糖-pNP比色底物的的吸光度。使用ADP-核糖-pNP作为显色底物,PARP-1具有大Km和Vmax数值(分别为151 uM和1.30nmolmin-1mg-1),其次是Tankyrase-1(82uM和18pmolmin-1mg-l)和VPARP(46uM和2 pmolmin-1mg-l)。显色底物通常用来决定PARP-1,tankyrase-1和VPARP 的动力学参数,然后筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP小分子抑制剂。由于ADP-核糖-pNP连续实验分析比标准的非连续PARP试验更有优势,因此其可用于高通量筛选PARP-1,tankyrase-1和VPARP的活性以及相关抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的酶显色底物ADP-ribose-pNP。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 405nm
推荐孔板: 纯白色孔板
实验方案

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 ADP-核糖-pNP原液:
在H2O中制备5-10mM的储备溶液。 注意:应立即使用原液。

 

2.工作溶液

ADP-核糖-pNP工作溶液:
通过用测定缓冲液(50mM Tris,10mM MgCl 2,pH 8.0)稀释储备溶液来制备0.25mM测定溶液。

 

样品操作步骤

1.将0.01mL /孔的样品溶液加入0.09mL /孔测定溶液中,使96孔透明板中的终体积为0.1mL。

2.使用吸光度酶标仪在405nm处监测平板。

 

参考文献

A colorimetric substrate for poly(ADP-ribose) polymerase-1, VPARP, and tankyrase-1
Authors: Nottbohm AC, Dothager RS, Putt KS, Hoyt MT, Hergenrother PJ.
Journal: Angew Chem Int Ed Engl (2007): 2066

Pharmacological identification of P2X1, P2X4 and P2X7 nucleotide receptors in the smooth muscles of human umbilical cord and chorionic blood vessels
Authors: Valdecantos P, Briones R, Moya P, Germain A, Huidobro-Toro JP.
Journal: Placenta (2003): 17

Poly(ADP-ribose) polymerase as a key player in excitotoxicity and post-ischemic brain damage
Authors: Meli E, Pangallo M, Baronti R, Chiarugi A, Cozzi A, Pellegrini-Giampietro DE, Moroni F.
Journal: Toxicol Lett (2003): 153

Interactions of nucleotide cofactors with the Escherichia coli replication factor DnaC protein
Authors: Galletto R, Rajendran S, Bujalowski W.
Journal: Biochemistry (2000): 12959

Kinetic mechanism of nucleotide cofactor binding to Escherichia coli replicative helicase DnaB protein. stopped-flow kinetic studies using fluorescent, ribose-, and base-modified nucleotide analogues
Authors: Bujalowski W, Jezewska MJ.
Journal: Biochemistry (2000): 2106

Effects of caffeine and adenine nucleotides on Ca2+ release by the sarcoplasmic reticulum in saponin-permeabilized frog skeletal muscle fibres
Authors: Duke AM, Steele DS.
Journal: J Physiol (1998): 43

Adenine nucleotides regulate ADP-ribosylation of membrane-bound actin and actin-binding to membranes
Authors: Schroeder P, Just I, Aktories K.
Journal: Eur J Cell Biol (1994): 3

Trimeric G-proteins of the trans-Golgi network are involved in the formation of constitutive secretory vesicles and immature secretory granules
Authors: Barr FA, Leyte A, Mollner S, Pfeuffer T, Tooze SA, Huttner WB.
Journal: FEBS Lett (1991): 239

Inhibition and labeling of the Ca2(+)-ATPase from sarcoplasmic reticulum by periodate oxidized ATP
Authors: Mignaco J, Scofano HM, Barrabin H.
Journal: Biochim Biophys Acta (1990): 305

荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]-AAT Bioquest荧光染料

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荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]价格 7092
产品规格

100 nmol

产品货号

荧光标记的ADP-TAMRA conjugate [5-TAMRA-eda-ADP]

产品参数
Ex (nm) 552 Em (nm) 578
分子量 1309.30 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:磷酸二酯酶PDE V底物 FAM-cGMP 绿色荧光

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:~800

溶剂:DMSO

激发波长(nm):492

发射波长(nm):515

 

产品介绍

磷酸二酯酶PDE V底物 FAM-cGMP 绿色荧光是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,这种绿色荧光cGMP衍生物是磷酸二酯酶(PDE)V的特异性底物。它可以与FRET读数或FP格式的抗cGMP抗体一起用于测定PDE V活性或筛选PDE V抑制剂。 PDE是一组降解第二种信使分子的酶:环状核苷酸cAMP和cGMP。它们调节亚细胞域内环状核苷酸信号传导的定位,持续时间和幅度。因此,PDE是这些第二信使分子介导的信号转导的重要调节剂。 PDE酶由于其独特的组织分布,结构和功能特性,经常成为药理抑制的靶标。 PDE抑制剂可通过抑制PDE的降解来延长或增强cAMP或cGMP介导的生理过程的作用。在诸如肺动脉高压,冠心病,痴呆,抑郁症和精神分裂症等领域,PDE抑制剂被确定为新的潜在剂。例如,西地那非(Viagra)是cGMP特异性PDE V的抑制剂,可增强cGMP在海绵体中的血管舒张作用,并用于勃起功能障碍。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的磷酸二酯酶PDE V底物 FAM-cGMP 绿色荧光。 

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参考文献

cAMP is a ligand for the tandem GAF domain of human phosphodiesterase 10 and cGMP for the tandem GAF domain of phosphodiesterase 11
Authors: Gross-Langenhoff M, Hofbauer K, Weber J, Schultz A, Schultz JE.
Journal: J Biol Chem (2006): 2841

cAMP phosphodiesterase activity evaluation in human carcinoma of salivary glands
Authors: Spoto G, della Malva M, Rubini C, Fioroni M, Piattelli A, Serra E, Di Nicola M, Santoleri F.
Journal: Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids (2006): 1113

cAMP phosphodiesterase-4A1 (PDE4A1) has provided the paradigm for the intracellular targeting of phosphodiesterases, a process that underpins compartmentalized cAMP signalling
Authors: Huston E, Houslay TM, Baillie GS, Houslay MD.
Journal: Biochem Soc Trans (2006): 504

Characterization of a novel cAMP-binding, cAMP-specific cyclic nucleotide phosphodiesterase (TcrPDEB1) from Trypanosoma cruzi
Authors: Diaz-Benjumea R, Laxman S, Hinds TR, Beavo JA, Rascon A.
Journal: Biochem J (2006): 305

Compartmentalization of cAMP-Dependent Signaling by Phosphodiesterase-4D Is Involved in the Regulation of Vasopressin-Mediated Water Reabsorption in Renal Principal Cells
Authors: Stefan E, Wiesner B, Baillie GS, Mollajew R, Henn V, Lorenz D, Furkert J, Santamaria K, Nedvetsky P, Hundsrucker C, Beyermann M, Krause E, Pohl P, Gall I, Macintyre AN, Bachmann S, Houslay MD, Rosenthal W, Klussmann E.
Journal: J Am Soc Nephrol. (2006)

DdPDE4, a novel cAMP-specific phosphodiesterase at the surface of dictyostelium cells
Authors: Bader S, Kortholt A, Snippe H, Van Haastert PJ.
Journal: J Biol Chem (2006): 20018

Expression and Activity of cAMP Phosphodiesterase Isoforms in Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells from Patients with Pulmonary Hypertension: Role for PDE1
Authors: Murray F, Patel HH, Suda RY, Zhang S, Thistlethwaite P, Yuan JX, Insel PA.
Journal: Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. (2006)

Expression of cAMP and cGMP-phosphodiesterase isoenzymes 3, 4, and 5 in the human clitoris: immunohistochemical and molecular biology study
Authors: Oelke M, Hedlund P, Albrecht K, Ellinghaus P, Stief CG, Jonas U, Andersson KE, Uckert S.
Journal: Urology (2006): 1111

Expression of cAMP and cGMP-phosphodiesterase isoenzymes 3, 4, and 5 in the human clitoris: immunohistochemical and molecular biology study
Authors: Sampaio F.
Journal: Int Braz J Urol (2006): 483

Helix-1 of the cAMP-specific phosphodiesterase PDE4A1 regulates its phospholipase-D-dependent redistribution in response to release of Ca2+
Authors: Huston E, Gall I, Houslay TM, Houslay MD.
Journal: J Cell Sci (2006): 3799

 

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PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*-AAT Bioquest荧光染料

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PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*价格 4957
产品规格

100 Tests

产品货号

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*是美国AAT Bioquest生产的用于检测ADP的试剂盒,ADP参与许多生物反应,例如蛋白激酶。 我们的ADP分析试剂盒可通过监测ADP的形成来普遍用于分析蛋白激酶反应,而ADP的形成与酶磷酸转移酶的活性成正比,并通过荧光法进行测量。 该试剂盒提供了一种快速,简单且均一的测定ADP形成或消耗的测定方法。 该测定是连续的,并且可以容易地适于自动化。 该套件很方便,需要少的动手时间。 由于蛋白激酶与诸如癌症和其他增生性疾病,炎性疾病,代谢紊乱和神经系统疾病等疾病的广泛相关性,因此参与药物开发的研究人员对蛋白激酶很感兴趣。 大多数商业化的蛋白激酶检测试剂盒都是基于对磷酸肽形成或ATP缺失的监测。 我们的ADP检测试剂盒比大多数商业激酶检测试剂盒对蛋白质激酶的检测更稳定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的PhosphoWorks 荧光法ADP检测试剂盒 *红色荧光*。

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 540 nm
Em: 590 nm
Cutoff: 570 nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.运行激酶反应(20 µL)
2.添加ADP传感器缓冲液(20 µL)
3.添加ADP传感器(10 µL)
4.在室温下孵育15分钟-1小时
5.检测荧光强度

 

溶液制备

1.储备溶液制备

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1ADP Sensor I库存解决方案(50X):
将20 µL DMSO(组分B3)添加到ADP探针I(组分B1)的小瓶中。

1.2ADP探针储备溶液(1X):
将20 µL 50X ADP Sensor I储备溶液添加到ADP Sensor II(组件B2)的小瓶中。

1.3ADP标准溶液(300 mM):
将100 µL H2O加入ADP标准液(组分C)中,制成300 mM ADP储备液。

 

2.标准溶液

ADP标准
通过包括不含ADP的样品来测量背景荧光,在激酶反应缓冲液中进行ADP标准品的系列稀释。 注意:通常,ADP浓度范围为0.05至30 µM是合适的。

 

样品示例及操作

表1.黑色96孔微孔板中ADP标准品和测试样品的布局。 SD = ADP标准(SD1-SD7,0.05至30 uM); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成。

容积 试剂
SD1-SD7 20ul 连续稀释(0.05至30 µM)
BL 20ul ADP分析缓冲液
TS 20ul 激酶反应

1.运行激酶反应(此步骤未提供试剂):

1.1根据需要准备20 µL激酶反应溶液。激酶反应的成分应根据需要进行优化(例如,特定的激酶反应可能需要优化的缓冲液系统)。在大多数情况下,如果您没有优化的激酶缓冲液,也可以使用ADP分析缓冲液(组分D)进行激酶反应。

1.2Amplite 荧光ADP测定试剂盒用于确定ADP的形成。在DTT和β-巯基乙醇等硫醇存在下,ADP传感器不稳定。终硫醇浓度高于10 µM会大大降低测定的动态范围。

2.运行Amplite ADP分析:

2.1向装有20 µL激酶反应溶液的每个孔中加入20 µL ADP传感器缓冲液(组分A)和10 µL ADP Sensor储备溶液,使ADP测定总体积为50 µL /孔。注意:在DTT和β-巯基乙醇等硫醇存在下,ADP传感器不稳定。终硫醇浓度高于10 µM会大大降低测定的动态范围。注意:ADP分析应在6.5至7.4的pH值下进行。

2.2将反应混合物在室温下孵育15分钟至1小时。

2.3使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540/590 nm处监控荧光强度。

 

参考文献

Discovery of Non-ATP-Competitive Inhibitors of Polo-like Kinase 1
Authors: Taikangxiang Yun, Tan Qin, Ying Liu, Luhua Lai
Journal: ChemMedChem (2016): 713–717

Cell polarity kinase MST4 cooperates with cAMP-dependent kinase to orchestrate histamine-stimulated acid secretion in gastric parietal cells
Authors: Hao Jiang, Wenwen Wang, Yin Zhang, William W Yao, Jiying Jiang, Bo Qin, Wendy Y Yao, Fusheng Liu, Huihui Wu, Tarsha L Ward
Journal: Journal of Biological Chemistry (2015): 28272–28285

Regulation of NDR1 activity by PLK1 ensures proper spindle orientation in mitosis
Authors: Maomao Yan, Lingluo Chu, Bo Qin, Zhikai Wang, Xing Liu, Changjiang Jin, Guanglan Zhang, Marta Gomez, Alexander Hergovich, Zhengjun Chen
Journal: Scientific reports (2015): 10449

Trypanosoma brucei vacuolar transporter chaperone 4 (TbVtc4) is an acidocalcisome polyphosphate kinase required for in vivo infection
Authors: Noelia Lander, Paul N Ulrich, Roberto Docampo
Journal: Journal of Biological Chemistry (2013): 34205–34216

 

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ADP比色/荧光测定试剂盒(ADP Colorimetric/Fluorometric Assay TBS2020


ADP比色/荧光测定试剂盒(ADP Colorimetric/Fluorometric Assay

简要描述:ADP比色/荧光测定试剂盒(ADP Colorimetric/Fluorometric Assay Kit)

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 货号 TBS2020
供货周期 一个月 主要用途 ADP比色/荧光测定

ADP比色/荧光测定试剂盒(ADP Colorimetric/Fluorometric Assay Kit)

ADP是ATP去磷酸化的产物,可以再磷酸化为ATP。ADP水平调节参与中间代谢的几种酶。ADP转化为ATP主要发生在线粒体和叶绿体内,尽管细胞质中也有几个这样的过程。

Tribioscience的ADP比色和荧光检测试剂盒旨在提供一种稳定、简单的方法,将ADP转化为ATP和丙酮酸。生成的丙酮酸可通过比色法(吸光度= 570 nm)或荧光法(Ex/Em 530/590 nm)进行定量。该检测方法简单、灵敏、稳定且具有高通量适应性。该试验可以检测各种生物样品中低至1 M的ADP。

应用程序

直接分析:细胞和其他生物样品中低至1 M的ADP。

关键特征

  • 灵敏准确:

    使用10微升样品。96孔板检测中的检测范围为1-1000 M。
  • 简单:

    只需加载和培养程序;耗时不到60分钟。
  • 高通量:

    试剂盒旨在成为高通量的稳健方法。

贮藏条件

将试剂盒储存在-20°c下,保质期为三个月。除了酶以外,使用前将所有成分加热至室温。打开之前,短暂离心所有小瓶。

标准曲线

ADP比色/荧光测定试剂盒(ADP Colorimetric/Fluorometric Assay TBS2020

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简要描述:ADP/ATP比率检测试剂盒(生物发光)Tribioscience的ADP/ATP比率检测试剂盒利用生物发光法检测ADP和ATP水平,同时快速筛查哺乳动物细胞中的凋亡、坏死、生长停滞和细胞增殖。

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 货号 TBS2015
供货周期 一个月 主要用途 ATP比色/荧光测定试剂盒

ADP/ATP比率检测试剂盒(生物发光)

ADP/ATP比率的变化已被用于区分细胞死亡和存活的不同模式。Tribioscience的ADP/ATP比率检测试剂盒利用生物发光法检测ADP和ATP水平,同时快速筛查哺乳动物细胞中的凋亡、坏死、生长停滞和细胞增殖。该测定利用荧光素酶催化ATP和荧光素形成光,并且可以使用光度计或β计数器测量光。ADP水平通过其转化为ATP来测量,随后使用相同的反应来检测。该测定可以全自动进行高通量,并且比用于细胞生存力测定的其他方法更灵敏(可以检测100个哺乳动物细胞/孔)。

应用程序

  • 细胞增殖
  • 细胞毒性和细胞凋亡
  • 高强度钢(High Tensile Steel的缩写)

关键特征

  • 灵敏准确:

    可以精确定量低至100个细胞。
  • 简单且高通量:

    程序简单;可在HTS液体处理系统上轻松实现自动化。

贮藏条件

将试剂盒储存在-20℃下。保质期三个月。使用前将所有成分(酶除外)预热至室温。打开之前,短暂离心所有小瓶。

ADP/ATP比率检测试剂盒(生物发光)

Anti-poly(ADP-ribose), polyclonal antibody, IgY1023


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Anti-poly(ADP-ribose), polyclonal antibody, IgY高度纯化的 IgY 多克隆抗体可识别 PAR 化蛋白质中的聚(ADP-核糖)聚合物 (PAR) 和游离聚合物。

免疫原是由纯化的牛聚 (ADP-核糖) 聚合酶酶促产生的聚 (ADP-核糖) 聚合物。它已经过广泛测试,可用于蛋白质印迹(见下文)、ELISA 和免疫染色。IgY抗体是从鸡蛋中产生和纯化的

供应形式:含 1 mg/mL IgY 的 PBS 加防腐剂。


上海金畔生物代理Tulipbiolabs中国的业务,Tulipbiolabs代理、Tulipbiolabs上海代理Tulipbiolabs华南代理、Tulipbiolabs华东代理、Tulipbiolabs华西代理Tulipbiolabs华北代理,上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品供应,欲购从速(敬请咨询。)

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

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Human Adiponectin, ADP ELISA KitE1550Hu


Human Adiponectin, ADP ELISA Kit

简要描述:Human Adiponectin, ADP ELISA Kit,产品型号:E1550Hu 。
尺寸: 48T , 96T
灵敏度:0.11mg/L
检测范围:0.2-60mg/L
样本类型:血清、血浆、细胞培养上清液
反应对象:人类

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Human Adiponectin, ADP ELISA Kit,产品型号:E1550Hu 。

Human Adiponectin, ADP ELISA Kit,描述:

背景

参与控制脂肪代谢和胰岛素敏感性的重要脂肪因子,具有直接的抗糖尿病、抗动脉粥样硬化和抗炎活性。刺激肝脏和骨骼肌中的 AMPK 磷酸化和激活,增强葡萄糖利用和脂肪酸燃烧。通过负向调节其在各种组织(例如肝脏和巨噬细胞)中的表达并抵消其作用来拮抗 TNF-α。通过 cAMP 依赖性途径抑制内皮 NF-kappa-B 信号转导。可能通过结合和隔离具有不同结合亲和力的各种生长因子,在细胞生长、血管生成和组织重塑中发挥作用,具体取决于复合物的类型、LMW、MMW 或 HMW。

检测类型

三明治

尺寸

48T , 96T

灵敏度

0.11毫克/升

检测范围

0.2-60毫克/升

样本类型

血清、血浆、细胞培养上清液

物种

人类

贮存

2-8ºC

检测时间

1 小时 30 米

UniProt加入

Q15848

质量(Da)

26,414

基因编号

9370

基因名称

APM1

研究领域

其他的

目标蛋白

APM1

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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。