protean重组蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介绍

protean重组蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介绍

Pro3C (HRV-3C, Prescission) 蛋白酶是一种来自人鼻病毒 3C (HRV3C) 的转基因序列特异性半胱氨酸蛋白酶。由于其高序列特异性,它经常用于融合蛋白的切割以及体外和体内重组蛋白的标签去除。

这种重组蛋白酶是人鼻病毒 3C 的基因改良版本。它包含位于蛋白质 N 末端的 His6 标签,使其能够固定在 Ni 基亲和树脂上并从裂解反应中去除。它在很宽的温度范围内(4-34°C)都具有活性。最佳温度为 30°C,但对于温度敏感目标,它在 4°C 时也能发挥作用。优选的识别序列是Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln|Gly-Pro (LEVLFQ|GP)。请使用我们的3C 底物 #1409FRET 底物作为阳性对照。

protean重组蛋白——Pro3C HRV-3C 蛋白酶介绍

应用

蛋白质纯化后从融合蛋白中切割亲和标签。直接在溶液中或固定在亲和树脂上切割融合蛋白。 Protean Ltd. 提供的酶是在符合 ISO 9001 和 ISO 13485 国际标准的认证环境中生产的,符合下游 GMP 认证流程的使用条件。

纯化方法

亲和层析

公式

50 mM Tris pH 7.0、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM DTT、50% 甘油

特异性

其八氨基酸序列具有高度特异性和活性,且脱靶效应最小。活性取决于靶蛋白的类型。应针对每种目标蛋白测试最佳酶用量。

贮存

-20°C,请勿储存在-80°C

ubiqbio:去泛素化酶和 Ubl 蛋白酶应用

ubiqbio:去泛素化酶和 Ubl 蛋白酶应用

UbiQ 可以通过广泛的基于活动的探针来帮助您发现 UPS 中的目标。

应用

  • 结构研究

  • 用于目标验证的细胞裂解物的表型蛋白质分析

  • 用于靶标鉴定的化学蛋白质组学 (即下拉、纯化、蛋白质印迹、MS)

目标

  • E1-E2-E3 酶 – 使用我们基于 UbiQ 活性的 Triple E 探针

  • 所有主要 DUB 家族(UCH、USP 和 OTU)和 Ubl 蛋白酶 – 使用我们基于活性的 DUB 探针

  • 蛋白酶体 – 使用我们基于活性的探针 UbiQ-018

服务

  • 高级试剂的定制开发, 例如根据底物情况

经验

  • UbiQ 已为一系列客户开发了超过 15 种定制探针

  • 许多 DUB(例如 USP4、UCH-L5 和病毒性卵巢肿瘤 DUB)已通过我们基于活性的探针成功结晶

  • 传染病中 DUB、E1 和 E2 酶的靶标验证和鉴定(格拉斯哥大学、约克大学、葛兰素史克)

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

IgASAP Sub1 是一种 IgA1 特异性蛋白酶,可在铰链上方的一个特定位点消化人类 IgA1,产生完整且同质的 Fab 和 Fc 片段。

该酶能够生成完整的单价 Fab 片段以及 IgA1 的中水平分析,从而有助于在疫苗、治疗和诊断等开发过程中进行 IgA1 表征。

  • 实现IgA1 的中层表征质量控制

  • 快速– 在 1 小时内生成均质的 Fab 和 Fc 片段

  • 高度特异性– 人类 IgA1 铰链上方有一个消化位点

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

人类 IgA1 的位点特异性消化

为了证明 IgASAP Sub1 的位点特异性,将市售的人骨髓瘤 IgA1 用冻干的 IgASAP Sub1 在 37°C 下消化 1 小时,并与未消化的 IgA1 进行比较。由于 IgA1 携带多个 N- 和 O- 聚糖,因此使用 OmniGLYZOR 试剂盒处理样品,包括在变性条件下使用 PNGaseF 冻干进行额外的去糖基化步骤,以去除所有 N-聚糖,以方便数据解释。
使用 IgASAP Sub1 的消化快速、简单,并且在生理条件下进行,酶的特异性可防止 IgA1 的过度消化。尽管起始材料不同,但数据清楚地显示了人 IgA1 上铰链区 (VPSTPP / TPSPST) 的单个消化位点,并强调了使用中级工作流程为此类复杂样品生成高分辨率质量数据的优势。

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

图 1. IgA1 的位点特异性消化。 a)工作流程示意图。来自人骨髓瘤的市售 IgA1的 N-和 O-去糖基化b)重链 (HC) 以及 N-和 O-去糖基化c) scFc 片段和d) 的解卷积质谱使用 IgASAP Sub1 在 37°C 消化 1 小时后的 Fd 片段。 HC 和 scFc 片段的异质性源自多个 C 末端截断和剩余的延伸 O-聚糖,未被 OmniGLYZOR 去除。通过反相色谱(ACQUITY Premier Protein BEH C4,300 Å,1.7 µm 2.1 x 100 mm,Waters™)分离样品,并使用 ESI-QTOF MS(Bruker Impact II)进行分析。

IgASAP Sub1 冻干   货号:I0-IA1-010

用于 IgA1 以上铰链消化的冻干酶。

IgASAP Sub1 冻干剂以冻干粉末形式提供,装在 1000 单位小瓶中,用于消化 1 mg IgA1。

  • 方法开发的灵活格式

  • 可以组合酶以提高效率

  • 适合自动化工作流程

  • 即可使用——只需加水即可!

biozyme 基质金属蛋白酶底物


biozyme 基质金属蛋白酶底物

简要描述:biozyme 基质金属蛋白酶底物:MMP 底物(荧光) – PEPDAB008

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药

biozyme 基质金属蛋白酶底物

该 mmp 底物可用于评估 MMP 家族中酶的活性。这种 mmp 底物已用于酶促和细胞检测中,以评估 MMP 的活性,因为它对该金属蛋白酶家族具有特异性。它与 Bickett 等人在下面的出版物 4 中描述的底物相同,只是它具有 Dabcyl/Fam 作为荧光团对,因此更敏感。它最初被描述为 MMP9 底物和 MMP1 底物。它对所有这些酶表现出相当强的活性,特异性常数 k cat /K m (M -1 s -1 ) 范围约为 10 3至 10 6。请参阅我们的产品表其底物特异性概况。通常,将肽溶解在 DMSO 中,制成浓度约为 10mM 的储备溶液。当用于体外测定时,底物通常以约10uM浓度使用。请记住将最终反应中的 DMSO 浓度保持在 1% 或以下,以避免 DMSO 对反应产生影响,并记住背景孔中应有同等百分比的 DMSO。为了与 MMP 一起使用,缓冲液应含有 50 mM Tris、pH 7.5、150 mM NaCl、2 mM CaCl 2、5 µM ZnSO 4和 0.01% Brij-35。激发和发射波长分别为 485 和 530 nm。

分子量:

1388.3克/摩尔

纯度:

通过 HPLC 和质谱评估,大于 95%。

溶解度:

1 mg/ml 溶于 10% 甲酸的水中

外貌:

红色冻干粉

船运

肽粉末在室温下运输。

贮存:

收到后,肽应保存在-70 o C 下。避免重复冻融循环。如果溶解在液体(例如 DMSO)中,请等分到单独的管中,以尽量减少冻融循环次数。

稳定:

样品对光敏感,在 -70 o C下可稳定保存长达 6 个月。

biozyme 基质金属蛋白酶底物

胱天蛋白酶家族荧光测定试剂盒TBS2055


胱天蛋白酶家族荧光测定试剂盒

简要描述:胱天蛋白酶家族荧光测定试剂盒(Caspase-Family Fluorometric Assay Kit)细胞凋亡在许多正常生物过程以及几种疾病状态中起着重要作用。细胞凋亡可以由各种刺激诱导,这些刺激都产生相同的最终结果:系统和有序的细胞死亡。炎症小体是一个大的多蛋白复合物,其组装导致caspase-1的激活,caspase-1促进促炎细胞因子白介素-1β(IL-1β)和IL-18的成熟。

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品牌 其他品牌 货号 TBS2055
供货周期 一个月

胱天蛋白酶家族荧光测定试剂盒(Caspase-Family Fluorometric Assay Kit)

细胞凋亡在许多正常生物过程以及几种疾病状态中起着重要作用。细胞凋亡可以由各种刺激诱导,这些刺激都产生相同的最终结果:系统和有序的细胞死亡。炎症小体是一个大的多蛋白复合物,其组装导致caspase-1的激活,caspase-1促进促炎细胞因子白介素-1β(IL-1β)和IL-18的成熟。Tribo胱天蛋白酶家族荧光检测试剂盒为检测胱天蛋白酶家族成员(胱天蛋白酶-1、2、3、4、5、6、8、9和10)的活性提供了一种简单方便的方法。该分析基于从标记底物上切割后游离AFC荧光的检测。可以使用荧光计或荧光微量滴定板读数器在Ex400/Em505nm下对游离AFC进行定量。将凋亡样品中AFC的荧光与未诱导的对照进行比较,可以确定胱天蛋白酶家族成员活性的增加倍数。

贮藏条件

将细胞裂解缓冲液和检测缓冲液储存在4℃下,将所有其他成分储存在-20℃下。保质期六个月。

胱天蛋白酶家族荧光测定试剂盒(Caspase-Family Fluorometric Assay Kit)

胱天蛋白酶家族比色分析试剂盒TBS2050


胱天蛋白酶家族比色分析试剂盒

简要描述:胱天蛋白酶家族比色分析试剂盒(Caspase-Family Colorimetric Assay Kit)细胞凋亡在许多正常生物过程以及几种疾病状态中起着重要作用。细胞凋亡可以由各种刺激诱导,这些刺激都产生相同的最终结果:系统和有序的细胞死亡。

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胱天蛋白酶家族比色分析试剂盒(Caspase-Family Colorimetric Assay Kit)

组蛋白是染色质的主要蛋白质成分。它们就像缠绕DNA的线轴。组蛋白通过乙酰化和去乙酰化的共价修饰影响染色质结构并调节基因表达。组蛋白高乙酰化与转录增加密切相关,而低乙酰化与转录抑制相关。组蛋白去乙酰化酶(HDACs)催化组蛋白上ɛ-N-acetyl赖氨酸氨基酸乙酰基的去除,并作为基因的转录阻遏物。组蛋白去乙酰化酶被分为三类。第一类(HDAC 1、2、3、8)和第二类(HDAC 4、5、6、7和9)是含锌水解酶。III类由sirtuin酶家族成员组成(Sir 1至7)。正在研究HDAC I类和II类抑制剂作为癌症和神经退行性疾病(如亨廷顿舞蹈症和阿尔茨海默病)的治疗方法。sir tuin 1(III类)酶代表了治疗年龄相关疾病和II型糖尿病的靶点。

The TriboHDAC活性检测试剂盒为各种酶源的DAC活性检测提供了一种快速、准确、简单的方法。该试剂盒使用荧光底物进行HDAC活性检测。乙酰化的底物与含HDAC的样品一起孵育。在HDAC显色剂的存在下,底物的脱乙酰化产生强荧光,可在Ex354nm/Em442nm处检测到。试剂盒中包含的底物是细胞可渗透的,该试验可以在96孔板的细胞培养中直接测量HDAC活性,而无需耗时的细胞提取步骤。该试剂盒也可用于具有提取物或纯化酶的HDAC抑制剂的HTS。

贮藏条件

将基材储存在–20°C的避光环境中。其他成分可储存在4°c下。保质期:12个月。

胱天蛋白酶家族比色分析试剂盒(Caspase-Family Colorimetric Assay Kit)

兔产生的抗组织蛋白酶H多克隆抗体01-12-030108


兔产生的抗组织蛋白酶H多克隆抗体

简要描述:兔产生的抗组织蛋白酶H多克隆抗体,产品编码:01-12-030108。athens research&technology Anti-Cathepsin H Polyclonal Ab produced in rabbit
储存:+2至8°C

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

兔产生的抗组织蛋白酶H多克隆抗体,产品编码:01-12-030108。

athens research&technology  Anti-Cathepsin H Polyclonal Ab produced in rabbit01-12-030108描述:

物种反应性:人类

宿主:兔子

免疫原来源:人肝

形式:通过硫酸铵沉淀获得的Ig级分(标准抗血清)。

缓冲液:磷酸盐缓冲盐水,含0.05%NaN3作为防腐剂

储存:+2 至 8°C

蛋白质浓度:21.43毫克/毫升

工作稀释度:通过间接ELISA>1:512

蛋白质印迹:在1:8000的稀释度下,抗体与0.06和0.15ug纯化的人肝组织蛋白酶H反应,不与组织蛋白酶B,D或L反应。

不适合 IEP。

用于制备这种抗体的组织蛋白酶H免疫原在雅典研究与技术实验室纯化。它是一种天然蛋白质,全分子,从人类肝脏中分离出来。

请注意:本产品是实验室试剂,不得用于人类或用于任何药物目的。仅供研究使用。

海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

sydlabs:蛋白酶K溶液MB112


sydlabs:蛋白酶K溶液

简要描述:sydlabs:蛋白酶K溶液(肽酶 K、内切蛋白酶 K、内肽酶 K、蛋白酶 K、内肽酶 K、Tritirachium 碱性蛋白酶、Tritirachium 蛋白丝氨酸蛋白酶)

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品牌 其他品牌 货号 MB112
规格 100毫升 供货周期 一个月

sydlabs:蛋白酶K溶液(肽酶 K、内切蛋白酶 K、内肽酶 K、蛋白酶 K、内肽酶 K、Tritirachium 碱性蛋白酶、Tritirachium 蛋白丝氨酸蛋白酶)

蛋白酶 K 溶液通常用于蛋白质消化、DNA 提取、RNA 纯化、直接 PCR 和基因分型。由于它能非常有效地灭活 DNase 和 RNase,因此在核酸制备过程中添加重组蛋白酶 K,以分离高度天然、未受损的 DNA 或 RNA;它用于直接 PCR 试剂盒,通过破坏细胞裂解物(组织或细胞培养细胞)中的蛋白质来进行基因分型,并释放基因组 DNA。

蛋白酶 K 是一种广谱丝氨酸蛋白酶,最初从真菌 Engyodontium album 中分离出来。该蛋白酶因其消化角蛋白的能力而被命名为“蛋白酶 K”。晶体和分子结构研究表明,该酶属于枯草杆菌蛋白酶家族,其活性位点具有催化三联体 (Asp39-His69-Ser224)。蛋白酶 K 酶没有明显的切割特异性,优先切割位点是邻近疏水性氨基酸的肽键。

在还原剂(例如 5 mM DTT)存在下,蛋白酶 K 表现出更高的蛋白水解活性。蛋白酶 K 被丝氨酸蛋白酶抑制剂(例如 PMSF、DFP 和 AEBSF)抑制。

蛋白酶 K 在 1% Triton X-100 中具有活性,在 0.5% (w/v) SDS 中全具有活性,可使蛋白质底物变性以提高消化率。该酶在 50-200 ug/mL、pH 7.5-8.0、37 °C 时效果佳,并且通常会因后续苯酚提取而变性。孵育时间从 30 分钟到 18 小时不等,蛋白酶 K 可以在长时间孵育期间自动消化。

重组蛋白酶 K 是天然蛋白酶的突变体,具有更高的比活性和产量以及更宽的 pH 和温度范围。大规模重组酶生产具有批次一致性、纯度高和成本效益高等优势。重组蛋白酶 K 的无 DNA 性质使其非常适合分离 PCR 和 RT-PCR 模板。

MB112:蛋白酶 K 溶液,PCR 级(20 毫克/毫升)

重组蛋白酶K来自酵母细胞,克隆了编码Engyodontium album(Tritirachium album)内溶蛋白酶的基因。
CAS 号:39450-01-6。
EC:3.4.21.64。
分子量:29.3 kDa。
等电点:8.9。
pH范围:4.5-12.0;在pH 7.5-11.5范围内具有高活性。
单位定义: 1 个单位的蛋白酶 K 定义为在 37°C、pH 7.5 下每分钟从酪蛋白产生 1 umol 酪氨酸的酶活性。
比活性:≥ 780 单位/ml 蛋白质。
温度曲线:建议温度范围 37-70°C; 70°C 时具有最大活性。
消光系数:E 1%= 14.2; 280 nm,10 mM NaCl 和 5 mM CaCl2,pH 8.0。
纯度:对每批 PCR 级重组蛋白酶 K 溶液进行测试,确保不含 RNase、DNase 和 DNA。在 40 µg 蛋白酶 K 与 2 ug RNA 在 37°C 下孵育 2 小时的质量控制程序中未检测到 RNase。在 40 µg 蛋白酶 K 与 1 ug λ DNA 在 37°C 下孵育 6 小时的质量控制程序中未检测到 DNase。该制剂被认为不含 RNase 和 DNase。
配方:0.2 μM 过滤溶液。
浓度:20毫克/毫升。
溶液配制:PCR 级蛋白酶 K 溶液 (20 mg/ml) 使用 0.22 µm 过滤器进行灭菌,并提供在 50% 灭菌甘油中,以等分试样在 24°C 至 -80°C 的宽温度范围内储存。推荐的蛋白酶 K 稀释缓冲液:20 mM Tris-HCl (pH 7.4)、1 mM CaCl2;或 20 mM Tris-HCl (pH 7.4)、1 mM CaCl2 和 2% 甘油。
活化剂:1-5 mM Ca 2+。为了刺激蛋白酶 K 活性,可以添加1-5 mM Ca 2+ 。使用激活剂进行优化可以显着提高蛋白酶活性。添加EDTA除去钙后,酶活性会降低25%。如果 EDTA-Ca 2+酶活性会降低 80%通过凝胶过滤从酶溶液中除去复合物,同时可以通过添加过量的Ca 2+来部分恢复复合物。
抑制剂:DIFP 或 PMSF。蛋白酶 K 被 DIFP 或 PMSF 灭活(PMSF 最终浓度为 5 mM)。然而,它不受 EDTA、碘乙酸、胰蛋白酶特异性抑制剂 TLCK、胰凝乳蛋白酶特异性抑制剂 TPCK 和对氯汞苯甲酸盐的抑制。

运输:PCR 级重组蛋白酶 K 溶液 (20 mg/ml) 用冰袋运输。收到后,立即将其存放在下面建议的温度下。
稳定性和储存
使用手动除霜冰箱并避免重复冻融循环。
自收到之日起超过 2 年,在 –20°C 下保存。
自收到之日起>1 年,在 2–8°C 下保存。

sydlabs:蛋白酶K溶液

sigma 弹性蛋白酶 来源于猪胰腺E1250


sigma 弹性蛋白酶 来源于猪胰腺

简要描述:sigma 弹性蛋白酶 来源于猪胰腺
Type I, ≥4.0 units/mg protein

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品牌 Sigma-Aldrich/西格玛-奥德里奇 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药

sigma 弹性蛋白酶 来源于猪胰腺

别名:弹性蛋白酶 来源于猪胰腺, 胰酞酶 E

CAS号:39445-21-1

EC 号:3.4.21.36 (BRENDAIUBMB)

EC 号:254-453-6

MDL编号:MFCD00130998

NACRES:NA.54



应用

来自Sigma的酶已被用于开发弹性蛋白酶灌注的动物模型。该研究证明了烟草暴露是否可以降低AAA(腹主动脉瘤)发展所需的主动脉损伤阈值。[1]它也被用于从人肺中分离出II型肺细胞。[2]

来自猪胰腺的弹性蛋白酶已用于研究弹性蛋白酶的仿生亲和配体的设计、合成和评价。来自猪胰腺的弹性蛋白酶也已用于研究胰蛋白水解酶(胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶)的纯化和部分表征。

来自猪胰腺的弹性蛋白酶已被用于:

· 诱发腹主动脉瘤(AAA)

· 研究吲哚胺2-3双加氧酶1(IDO)对小鼠的影响[3]

· 消化主动脉以分离主动脉平滑肌细胞(SMC)[4]

· 作为蛋白水解消化的阳性对照[5]

 

生化/生理作用弹性蛋白酶是具有240个氨基酸残基的单一多肽链,其含有四个二硫键。分子量约为25.9kDa。该酶被合成为无活性的酶原形式,即原弹性蛋白酶,其随后通过胰蛋白酶在N-末端的有限蛋白水解而转化为活性形式。[6]它是一种具有广泛特异性的丝氨酸蛋白酶。它可切割在羧基侧具有小疏水性氨基酸(如Ile、Gly、Ala、Ser、Val和Leu)的蛋白质。该酶还可水解酰胺和酯,例如N-苯甲酰基-L-丙氨酸甲酯。[6][7]其最适pH为8.0-8.5。它不需要任何活化剂,但其活性可被二异丙基氟磷酸盐、α2-巨球蛋白、α1-抗胰蛋白酶、磺酰氟和对二硝基苯基二乙基磷酸盐、以及高盐浓度抑制。它广泛用于组织和细胞解离程序。弹性蛋白酶可有效分离II型肺细胞。

弹性蛋白酶水解弹性蛋白(弹性纤维的特定蛋白质)并消化血红蛋白、酪蛋白和纤维蛋白。

包装:包装规格取决于蛋白含量                                                                                                                                                                   单位定义:一个单元将在 25℃ 下,每分钟,pH8.0,水解 1.0 μmole 的 N-琥珀酰-L-Ala-Ala-Ala-对硝基苯胺。                                                                                     制备说明:2 次结晶

sigma 弹性蛋白酶 来源于猪胰腺

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)ELISA试剂盒说明书

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)ELISA试剂盒说明书

   用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)测定。

工作原理

本试剂盒采用的生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法ELISA)测定样品中大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)水平。向预先包被了大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2),温育;温育后,加入生物素标记的抗基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1

1

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品9600pg/ml

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

标准品稀释液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

链霉亲和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

生物素标记的抗TIMP-2抗体

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

需要而未提供的试剂和器材

1. 37恒温箱。

2. 标准规格酶标仪。

3. 精密移液器及一次性吸头

4. 蒸馏水,

5. 一次性试管

6. 吸水纸

注意事项

1. 2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差

3. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4. 免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜

5. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融

操作程序

1. 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

4800pg/ml

5号标准品

120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液

2400pg/ml

4号标准品

120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液

1200pg/ml

3号标准品

120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液

600pg/ml

2号标准品

120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液

300pg/ml

1号标准品

120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液

























2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗TIMP-2抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);3)待测样品孔:加入样本40ul,然后各加入TIMP-2抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

7. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

8. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后10分钟以内进行。

9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

操作程序总结:

1.准备试剂,样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟

3.洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟

4.加入终止液

5.10分钟内读OD值

6.计算

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

2.批内与批间应分别小于9%和15%

检测范围:

检测范围:200pg/ml 4800pg/ml

保存条件及有效期:

保存:2-8

有效期:6个月(2-8℃)。

现货供应亮抑酶肽/亮肽素—Applichem(A2183)

亮抑酶肽是一种从几个链霉菌种中分离肽类的抗生素。它是丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶(如纤溶酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、组织蛋白酶B、凝血酶、钙依赖性蛋白酶钙蛋白酶)的可逆抑制剂。该抑制浓度(ID 50)在0.5~10微克/毫升的范围内。工作浓度为10 ~100uM(对应于5 ~ 50微克/毫升),而作为起始浓度2uM(1微克/毫升)可能就足够了。

稳定性:亮抑酶肽易溶于水。储备溶液浓度为1毫克/毫升。亮抑酶肽溶液可在4℃下稳定储存一周左右,在-20℃下储存可长达6个月。

产品参数信息:

物理状态:固体

分子式:C20H38N6O4.½H2SO4

摩尔质量:475.60 g/mol

CAS-No.:103476-89-7

HS-No.:29419000

Storage::-20°C

产品链接:https://www.applichem.com/en/shop/product-detail/as/leupeptin-hemisulfat/?getspecpdf=1

品牌

货号

品名

规格

报价

AppliChem

A2183

Leupeptin hemisulfate

10mg

970.00

AppliChem

A2183

Leupeptin hemisulfate

25mg

2117.00

AppliChem

A2183

Leupeptin hemisulfate

100mg

7349.00

Applichem是欧洲权威生化试剂供应商,ITW基团成员公司,德国著名品牌,产品种类齐全,性价比高。上海金畔生物科技有限公司是Applichem在中国的独家代理商,大量热销产品我们常年备有现货,更多产品咨询与订购,欢迎来电。全国服务热线:021-50837765

瑞典Agrisera专业Ftsh系列植物检测抗体——一级代理

FtsH(Filamentation temperature-sensitive H)是一种广泛存在于原核生物和真核生物中的ATP依赖型金属蛋白酶。是由FtsH基因编码的一种ATP和Zn2+依赖型蛋白。属于AAA蛋白酶家族,同时具有蛋白酶和分子伴侣活性,能介导细菌、线粒体、和叶绿体中膜蛋白的降解和修复,形成一个膜结合蛋白的质量控制系统。

FtsH的亚型也发现了很多,在叶绿体中,主要有FTSH1 (synonymes AAA, FTSH, FTSH Protease 1), Ftsh2 (VAR2, VARIEGATED 2), FtsH5 (VAR1, VARIEGATED 1), FtsH6 (FTSH PROTEASE 6), FtsH7, FtsH8. FtsH9。而在线粒体中,主要是以FtsH3 (FTSH Protease 3), FtsH4, FtsH10, FtsH11这些亚型存在。

同时,FtsH在生物基因组中广泛分布,目前,已经在枯草芽孢杆菌、乳酸乳球菌等原核生物;人、酵母、拟南芥、烟草、苜蓿等多种真核生物中都发现了它的存在。经研究表明,FtsH是通过寡聚化形成一个六聚环形结构,将蛋白水解活性位点埋在六聚复合孔穴的中央,结构分析表明,原核生物和真核生物的FtsH蛋白都具有共同的保守模块,包括N端跨膜域、AAA结构域、锌离子结合模块等。FtsH参与蛋白质量的平衡控制,还与热激、高渗、光胁迫、低温、病害等胁迫响应答等多种植物应激生理反应过程。

全球著名植物抗体专家Agrisera针对FtsH的保守序列设计了独特的抗原,研发了能检测多物种的FtsH系列植物检测抗体。

检测蛋白

货号

规格

FtsH1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11 | ftsh metallo-protease H1+H2+H3+H4+H5+H6+H7+H8+H9+H10+H11

AS11 1789

500 μl

FtsH4 | plant fts metallo-protease H4

AS07 205

200 μg

FtsH10 | plant fts metallo-protease H10

AS07 251

200 μl

FtsZ1 and 2 | plant cell division protein ftsZ1 and ftsZ2

AS09 413

50 μl

FtsZ2 | plant cell division protein ftsZ2

AS13 2651

50 μl

抗原信息、具体检测物种、稀释比例等信息可登陆Agrisera官方网站www.agrisera.com 输入货号点击查询。或拨打Agrisera中国一级代理上海金畔全国客服电话021-50837765咨询更多产品信息。

上海金畔生物科技有限公司(Seajet Scientific Inc)于2006年成立,由留美归国生物领域专业人士创办。上海金畔生物科技有限公司坚持自己的经营理念,勤奋踏实地整合全球高性价比的产品资源与最先进的技术资源,为高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生产企业提供先进技术与优化的一站式产品服务方案,帮助科研及企业单位缩短科研时间、节约科研成本、提升科研水平、增强企业市场竞争力。作为众多进口抗体品牌的中国区域一级代理代理,上海金畔生物科技有限公司为中国广大客户提供全系列免疫学检测方案。

上海金畔生物科技有限公司除了为广大植物学研究客户提供蛋白检测的专业植物抗体以外,还有德国著名生化试剂生产商Applichem高品质生化试剂,美国植物组培专家Phytotech组培试剂植物组培广谱高效抗菌剂专利产品PPM分子PCR污染完美解决方案DNA-ExitusPlus等众多系列产品为客户提供一站式解决方案。更多产品欢迎致电021-50837765咨询。

抑肽酶Aprotinin (A2132)现货供应代理德国Applichem

中文名:抑肽酶

英文名:Aprotinin

中文别名:屈来赛多、抑胰肽酶

化学式:C284H432N84O79S7

分子量:6511.52 g/mol

CAS登录号:9087-70-1

储存温度:2-8℃

来源:牛肺

理化性质:含58个氨基酸。白色或类白色粉末。溶于水。在高温和中性、酸性条件下较稳定,遇碱液变性。等电点pI10.0。能抑制纤维酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、激肽释放酶、凝血酶及凝血因子IV-XII,能抑制胰蛋白酶及糜蛋白酶,阻止胰脏中其他活性蛋白酶原的激活及胰蛋白酶原的自身激活等。它能与多种蛋白酶的活动中心竞争一个赖氨酰基而抑制其活性。

蛋白酶抑制剂作用:是一种蛋白酶抑制剂。通过抑制病毒编码的蛋白酶,导致处理gag和gag-pol无能,产生无功能病毒。抑肽酶通过按一定化学比例形成的可逆的酶-抑制剂复合物从而抑制人体的胰蛋白酶、纤溶酶、血浆及组织中血管舒缓素。丝氨酸活性的蛋白酶在血管舒缓素-激肽原-激肽系统、补体系统、凝血系统中起着主要作用,而在这些系统中,纤溶酶及血浆血管舒缓素都起关键作用。

品牌

货号

名称

规格

报价

AppliChem

A2132,0010

Aprotinin BioChemica

10mg

591.00

AppliChem

A2132,0025

Aprotinin BioChemica

25mg

1214.00

AppliChem

A2132,0100

Aprotinin BioChemica

100mg

4277.00

产品涉及:
氨基酸、多肽、蛋白质;抗生素、维生素;生物缓冲液;表面活性剂; 酶、蛋白酶代谢酶等抑制剂、酶底物;细胞培养基、微生物培养基;

细胞培养基、微生物培养基;电泳试剂染料、指示剂;PCR试剂、各种转印膜、核酸提取试剂或试剂盒。

AppliChem除提供生化级别Aprotinin外,还可提供更多的工业生产相关产品,AppliChem :是欧洲权威生化试剂生产商,质优价廉,产品有上万种之多,覆盖了免疫学、细胞学、分子生物学、蛋白组学、植物学、制药与诊断试剂研发生产等领域,已经成为多家世界著名品牌试剂的供应商。 官网链接: www.applichem.com。

如果对上述产品感兴趣请致电021-50837765,021-63599871/63599872到上海金畔生物科技有限公司垂询或索取更多产品资料。热线021-50837765。

代理德国Applichem现货AEBSF(A1421)

AEBSF可以不可逆的抑制凝血酶和其它丝氨酸蛋白酶活性,比如蛋白酶K,胰蛋白酶,血纤维蛋白溶酶等,AEBSF是通过磺酰化酶的活性中心,也就抑制了蛋白酶的降解。AEBSF可以完全取代PMSF和DFP,相比之下AEBSF更低毒安全。AEBSF可以高度的溶于水,溶解后显酸性,在这种PH值情况下,具有高度的稳定性。

A1421的主要参数:

性状: 固体

CAS#:30827-99-7

熔点:181 – 185°C

分子量:239.69 g/mol

溶解度:50 g/L (H2O)

储存条件:2-8°C

我们推荐的储存方法如下:用水或者缓冲液配置成20mM或100mM的原液,-20°C储存2个月以上,+4°C条件下大约一周,在使用之前加到实验缓冲液中即可,最终的使用浓度为0.1 – 2 mM。

品牌

货号

品名

规格

报价

AppliChem

A1421

AEBSF hydrochloride BioChemica

25mg

335.00

AppliChem

A1421

AEBSF hydrochloride BioChemica

100mg

605.00

AppliChem

A1421

AEBSF hydrochloride BioChemica

250mg

1398.00

AppliChem

A1421

AEBSF hydrochloride BioChemica

500mg

2432.00

AppliChem

A1421

AEBSF hydrochloride BioChemica

1g

3800.00

Applichem是欧洲权威生化试剂供应商,ITW基团成员公司,德国著名品牌,产品种类齐全,性价比高。上海金畔生物科技有限公司是Applichem在中国的独家代理商,大量热销产品我们常年备有现货,更多产品咨询与订购,欢迎来电全国服务热线:021-50837765

蛋白酶抑制剂混合物II(通用/广谱)——Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose

从细胞或组织中提取纯化蛋白时需要破碎细胞,此时蛋白酶就会被释放出来或被激活,降解蛋白质,最终影响试验结果。为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时尽可能在低温下进行。此外,许多蛋白酶在pH9以上就失活了,因此Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电蛋白酶抑制剂混合物II(通用/广谱)——Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose解质往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持着活性,此时应当使用蛋白酶抑制剂。因此,选择有效的蛋白酶抑制剂对于蛋白纯化路线设计来讲显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂种类繁多,通常使用许多化学物质作为蛋白酶抑制剂,如PMSF 和Leupeptin。而且由于一种蛋白酶抑制剂只对某一类蛋白酶起作用,因此通常建议复合使用蛋白酶抑制剂,如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”,即Protease Inhibitor Cocktail。德国AppliChem提供一系列的蛋白酶抑制剂Protease Inhibitor Cocktail产品,适用于细胞裂解,蛋白提取和多种生化反应。根据不同的样本来源和实验要求,又分为5种Cocktail套装供您选择。这包括了专门用于细胞蛋白提取的Cocktail 1,多用途的蛋白提取Cocktail 2,专用于细菌蛋白提取的Cocktail 3,适用于组织、细胞核细菌蛋白提取的Cocktail 4,通用的细胞组织蛋白提取的Cocktail 5以及专用于细胞中His标签蛋白的提取纯化的Cocktail 6。

上海金畔生物科技有限公司提供的原装进口Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)是一种通用/广谱的蛋白酶抑制剂混合物,适用于各种样本的裂解液的制备,如细胞裂解液、组织裂解液等。由AEBSF、Aprotinin、E-64、EDTA及Leupeptin等组成,可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、类胰蛋白酶以及酯酶等。可以广泛抑制各种蛋白酶,如丝氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶以及类胰蛋白酶等。 其中AEBSF是AppliChem独有的蛋白酶抑制剂,其通过磺酰化蛋白酶活性中心的一个基团,不可逆地抑制凝血酶thrombin和其他一些丝氨酸蛋白酶(chymotrypsin, kallikrein, plasmin, proteinase K, trypsin)。AEBSF是PMSF和DFP的低毒替代品,具有较高的水溶性,溶液状态的pH为酸性,且稳定性较高。EDTA能很好的通过螯合作用抑制金属蛋白酶的活性。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2) A7719_0001 冻干粉形式,用1ml H2O复溶后可得100×浓缩液

上海金畔生物科技有限公司向您推荐德国AppliChem原装进口的Protease Inhibitor Cocktail 2 MultiPurpose(蛋白酶抑制剂混合物2)产品-20°C稳定保存3年以上。用1ml H2O复溶后可得100X浓缩液,溶解后于冷冻保存一个月。

作为多家进口品牌的代理,上海金畔生物科技有限公司将一如既往的为您提供最优质的生化试剂和高品质的产品技术服务。除了多种单独的蛋白酶抑制剂以及专门不同的蛋白酶抑制剂混合物-Protease Inhibitor Cocktail产品,上海金畔生物科技有限公司还有多种蛋白提取、蛋白电泳、免疫学一抗、二抗产品以及显色发光底物等实际。我们能为您提供一站式的产品及实验解决方案。如果您对我们的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询蛋白提取纯化相关的实验解决方案,或者问询您所感兴趣的产品类型。