genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

发表于由

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

IgASAP Sub1 是一种 IgA1 特异性蛋白酶，可在铰链上方的一个特定位点消化人类 IgA1，产生完整且同质的 Fab 和 Fc 片段。

该酶能够生成完整的单价 Fab 片段以及 IgA1 的中水平分析，从而有助于在疫苗、治疗和诊断等开发过程中进行 IgA1 表征。

  • 实现IgA1 的中层表征和质量控制

  • 快速– 在 1 小时内生成均质的 Fab 和 Fc 片段

  • 高度特异性– 人类 IgA1 铰链上方有一个消化位点

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

人类 IgA1 的位点特异性消化

为了证明 IgASAP Sub1 的位点特异性，将市售的人骨髓瘤 IgA1 用冻干的 IgASAP Sub1 在 37°C 下消化 1 小时，并与未消化的 IgA1 进行比较。由于 IgA1 携带多个 N- 和 O- 聚糖，因此使用 OmniGLYZOR 试剂盒处理样品，包括在变性条件下使用 PNGaseF 冻干进行额外的去糖基化步骤，以去除所有 N-聚糖，以方便数据解释。
使用 IgASAP Sub1 的消化快速、简单，并且在生理条件下进行，酶的特异性可防止 IgA1 的过度消化。尽管起始材料不同，但数据清楚地显示了人 IgA1 上铰链区 (VPSTPP / TPSPST) 的单个消化位点，并强调了使用中级工作流程为此类复杂样品生成高分辨率质量数据的优势。

genovis产品介绍—IgA1 特异性蛋白酶

图 1. IgA1 的位点特异性消化。 a)工作流程示意图。来自人骨髓瘤的市售 IgA1的 N-和 O-去糖基化b)重链 (HC) 以及 N-和 O-去糖基化c) scFc 片段和d) 的解卷积质谱使用 IgASAP Sub1 在 37°C 消化 1 小时后的 Fd 片段。 HC 和 scFc 片段的异质性源自多个 C 末端截断和剩余的延伸 O-聚糖，未被 OmniGLYZOR 去除。通过反相色谱（ACQUITY Premier Protein BEH C4，300 Å，1.7 µm 2.1 x 100 mm，Waters™）分离样品，并使用 ESI-QTOF MS（Bruker Impact II）进行分析。

IgASAP ™ Sub1 冻干   货号：I0-IA1-010

用于 IgA1 以上铰链消化的冻干酶。

IgASAP Sub1 冻干剂以冻干粉末形式提供，装在 1000 单位小瓶中，用于消化 1 mg IgA1。

  • 方法开发的灵活格式

  • 可以组合酶以提高效率

  • 适合自动化工作流程

  • 即可使用——只需加水即可！