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如何选择正确的二抗？

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如何选择正确的二抗？

二级抗体用于几种免疫分析中，以检测一级抗体的存在。这些抗体与酶、生物分子或荧光染料结合，以检测一抗。与一级抗体不同，二级抗体是针对一级抗体的种类和同种型产生的，通过在多个位置与一级抗体结合来检测一级抗体。

为了成功选择您的第二抗体，您应该考虑以下因素:

确保匹配良好–宿主物种是产生第二抗体的动物，应始终与第一抗体的宿主不同。例如，如果您使用在兔子中产生的一抗，您将需要在不同于兔子的物种（如山羊、驴或小鼠）中产生的抗兔二抗（图1）。

如何选择正确的二抗？

完整抗体还是片段？–实际上，真正的问题应该是“您的主要抗体是单克隆抗体还是多克隆抗体？”这两个问题的答案通常取决于应用程序。单克隆一抗包含单一同种型的免疫球蛋白。因此，使用特异性识别同种型的二抗至关重要。此外，单克隆动物通常饲养在小鼠、兔和大鼠中。因此，如果主要单克隆抗体是小鼠IgG1，您将需要抗小鼠IgG或特异性较低的F（ab）片段抗小鼠IgG。抗体片段适合用于免疫组织化学和免疫荧光，因为它们的体积较小，能够穿透组织。然而，较小的大小可能会限制与片段结合的染料或酶的选择，导致二抗可能不如全抗体敏感。

多克隆一抗包含几种同种型免疫球蛋白g的混合物。因此，为了最大限度地检测目标，最好使用能识别所有同种型的二抗。多克隆抗体通常以全抗体形式（重链+轻链）饲养在兔、山羊、绵羊和驴中，因此第二宿主物种必须用来自不同物种的IgG池进行免疫，从而使纯化的第二抗体能够识别所有形式。例如，如果初级多克隆抗体是山羊IgG，您将需要抗山羊IgG（H+L）。然而，全抗体可能导致高背景和较低的特异性，因为所有免疫球蛋白共享轻链，这增加了交叉反应性（图2）。

如何选择正确的二抗？

根据您的应用选择共轭物-这取决于第二抗体如何检测信号。例如，免疫组织化学、ELISA和蛋白质印迹应用使用基于生物素标记的比色和化学发光检测来放大信号和提高灵敏度，以及与辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）作用的酶反应。然而，对于免疫标记、荧光显微镜和流式细胞仪实验，使用荧光染料如Alexa Fluor检测信号，这些荧光染料直接与抗体结合以放大信号和灵敏度。

亲和纯化抗体与交叉吸附抗体–该步骤用于提高抗体的特异性，并可在亲和纯化和交叉吸附中进行区分。大多数二抗通过亲和层析纯化，产生高亲和力抗体。这种抗体通常在IHC使用，因为它们产生最小的非特异性结合，也用于蛋白质印迹检测低丰度蛋白。交叉吸附的第二抗体通常经过额外的纯化步骤，以过滤掉与非靶免疫球蛋白种类结合的成员。这一步骤增加了它们的特异性并减少了非特异性背景。这些抗体是为免疫组织化学等特殊应用而设计的。

总之，二级抗体的选择取决于手头的应用和目标丰度所需的灵敏度和纯化水平以及非特异性结合的风险。

BMA是BMA Biomedicals的缩写，是一家位于瑞士北部巴塞尔地区的小型生物技术公司。

由一群免疫学家、生物化学家和生物学家于1989年创建，其主要活动领域是抗体的开发、生产和营销。2005年，BMA被Chemoforma Inc .收购，chemo forma Inc .是一家长期活跃于免疫支持饲料添加剂生产领域的商业合作伙伴。2013年，Chemoforma Inc .收购了总部位于加州的半岛实验室国际公司，该公司专门从事抗肽抗体和放射免疫分析。

BMA的主要专长在于抗体在免疫组织化学和酶免疫分析（ELISAs）中的应用。生产已适应无胎牛血清的培养基。这不仅是对可持续发展和动物福利的重要贡献，而且产品不含污染性牛抗体。它们通常仅供体外研究使用，但支持将适当的产品给诊断领域的公司。

BMA经营自己的设施，拥有先进的分析和生产基础设施。我们的技术诀窍在于单克隆和多克隆抗体的生产和衍生，以及它们在免疫学技术中的应用。BMA还许可外部组织的产品。这些产品可能处于早期开发阶段，最终将由公司进行生产更新。

BMA的产品范围以客户为导向，包括许多专注于有限或专业应用的产品。有些是由BMA自己生产的，有些是有大量出版记录的常规产品。

BMA的产品重点包括以下领域

  • 炎症和传染病
  • 止血
  • 肿瘤相关疾病
  • 兽医试剂，特别是抗猪组织的抗体

如何选择正确类型的灯泡？

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如何选择正确类型的灯泡？

现在大多数人都知道，市场上的 LED 灯可以取代许多常用的灯。然而，您可能注意到它们比要更换的灯泡类型贵几倍。是否值得冒险投资更持久、更高效的替代方案？这取决于几件事，包括你支付多少电费、你每天使用光源多少小时、你所比较的两种灯有多贵，以及更换灯有多困难。

存在一个简单的公式，可以使用以下输入来计算灯一年的运行成本：

  • 每千瓦时电价

  • 电源消耗的瓦数

  • 源平均每天打开的小时数

为了计算灯泡一年的使用成本，我们使用以下公式：

如何选择正确类型的灯泡？

使用这个公式，我们可以比较几种光源每年的使用成本，然后可以了解切换到 LED 可以多快地收回更昂贵的初始成本。您所在地区的电价越贵，灯每天打开的时间越长，LED 就能更快地“收回成本”。

 

我住在纽约，电费相对昂贵。平均价格为23美分/千瓦时。例如，以下是我为客户的一栋办公楼运行的一些样本数字：

每周使用50小时； .23/千瓦时

每根荧光灯管每年的电费：19.14 美元

每个 LED 灯管每年的电力成本：8.97 美元

每个 20 杆卤素灯每年的电力成本：29.90 美元

每个 20 杆 LED 每年的电力成本：每年 3.59 美元

比较不同灯的平均预期寿命也很有用。白炽灯和卤素光源通常可持续使用一到数千小时。荧光源的使用寿命通常为 5 至 15,000 小时。 LED 光源需要每 25 至 5 万小时更换一次。考虑到一年通常有 8760 小时，您可以根据平均日常使用情况快速了解您预计灯泡可以使用多少年。如果一两年需要更换一盏灯，那么改用更高效、更耐用的光源通常是一个合乎逻辑的财务决策。

Bulbtronics 于 1976 年开始生产普通的特种汽车替换灯泡产品线，作为稀缺灯泡供应商。随着我们的成长，Bulbtronics 成为特定市场的各种灯泡、灯、LED、电池和配件的可行来源。我们为自己的知识感到自豪，并致力于追求高标准。 

如何选择正确的参考材料质量等级

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如何选择正确的参考材料质量等级

质量等级、分析证书和计量可追溯性及其对您的意义

谁使用参考资料？

标准物质是分析测试工作流程的关键组成部分。通过测量系统的校准、方法的验证和质量控制程序，参考材料可确保测试的准确性。从有证标准物质 (CRM) 和其他质量等级的标准物质，到分析证书、计量可追溯性和其他概念，标准物质的世界非常广阔，有时甚至令人困惑。 

参考材料的计量溯源性和 SI 单位

计量溯源性是标准物质领域的一个重要概念。计量溯源性中的一个基本术语是 SI 测量单位。国际单位制 (SI) 将七种测量单位定义为可以派生所有其他 SI 单位的基本集合。用于参考物质可追溯性的两个最常见的 SI 测量单位是千克和摩尔。

计量可追溯性意味着可以对不同地点、不同时间、不同人员使用不同设备进行的测量进行有意义的比较。测量结果必须通过记录的、不间断的校准链与参考相关联，追溯到 SI 测量单位

国家计量标准（例如 NIST、JRC、NMI Australia）
药典标准（例如 USP、EP、BP、JP、IP）

  • 由机构签发

  • 被认为提供高水平的准确性和可追溯性

认证标准物质 (CRM)（ISO 17034、17025）

  • 被认为能够为 SI 测量单位提供高水平的准确性、不确定性和可追溯性

  • 由经认可的参考材料生产商制造

参考材料 (RM) (ISO 17034)

  • 满足比 CRM 要求更低的 ISO 要求

  • 由经认可的参考材料生产商制造

分析标准（ISO 9001）

  • 提供分析证书

  • 认证级别各不相同

试剂级/研究化学品

  • 可能附带分析证书

  • 不适合用作参考材料


标准物质层次结构包括五个主要质量等级，从国家计量和其他主要标准到认证标准物质 (CRM)、标准物质 (RM)、分析标准品以及研究级或研究化学品。每个更高级别的认证级别和可追溯性要求都会增加。当国家政府向最高层提供标准化时，具体的 ISO 指南则为 CRM 和 RM 提供标准化。这些 ISO 要求包括 ISO 17034、ISO/IEC 17025 和 ISO Guide 31。

标准物质生产商必须满足这些 ISO 要求才能制造 CRM 或 RM。对于这两个质量等级，必须提供分析证书，并且其中包含的信息由上述 ISO 指南定义。最后两个级别的质量规格由每个生产商定义，而不是由国家政府或特定于 CRM 和 RM 的 ISO 认证定义。

每个等级的参考材料测量什么？

材料的纯度和特性通常包含在五个质量等级中每个等级的分析证书中。主要标准或 ISO 定义的 CRM 和 RM 需要内容和稳定性。

分析标准品和研究化学品可能包括也可能不包括这两个参数，因为它们的包含取决于生产商。在某些情况下，分析标准品也可以是符合 ISO 指南 80 的质量控制材料。

初级标准、CRM 和 RM 要求具有同质性，但较低质量等级不会出现此参数。不确定性和可追溯性信息仅限于主要标准和 CRM。在制药领域，二级标准可以是 CRM 或 RM，但这里有两种不同类型的可追溯性 – ISO 定义的 CRM 的 SI 测量单位以及对主要药典标准的可追溯性，这是一项要求具体到药品二级标准。

如何正确校准余氯测定仪

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如何正确校准余氯测定仪

余氯测定仪是带微处理器的水质在线检测仪器。仪表主要采用LCD液晶显示屏；智能型中文菜单操作；具有电流输出，测量范围自由设定，高低超限报警提示和两组继电器控制开关、迟滞量范围可调；电极多种自动标定方式。目前，余氯测定仪广泛应用于饮用水处理厂、饮用水分布网、游泳池、工业污水、冷却循环水，对水中的余氯含量进行连续监测和控制。


　　余氯测定仪是由信号测量、运算、显示及面板指令等组成。该仪表利用在极化电极和参比电极之间施加特定电压幅度的负电压有针对性的选择余氯参加反应，使其在电极的阴极发生电化学反应，从而形成和余氯浓度成正比的电流信号。仪表通过对电流信号的采集和分析计算出余氯的浓度，因此该仪表具有选择性强，无更换部件，维护量小；电极寿命长；可靠性高等特点。
余氯测定仪校准方法步骤：
　　1.将大约4毫升的Fe(NH4)2·(SO4)2·6H2O加入到大约2升的常规样品或无氯脱盐水中，以此配制氯浓度为零的参比溶液。
　　2.将装有零参比溶液的容器放在距离分析仪至少2英寸的上方。垂直放置系统，以便样品流关闭，从而零参比溶液可以进入到分析仪的适当位置。让分析仪对零参比溶液运作大约10分钟。
　　3.当读数稳定时，设置零参比溶液。
　　①进入“SETUP”菜单；
　　②不断按下箭头键，直到显示“CALZERO”；
　　③按“ENTER”显示当前测出的值；
　　④按“ENTER”将该值强制设置为0。
　　4.配制一种浓度在3至5毫克/升之间的氯标准溶液。将该标准溶液的氯浓度值调整为Z接近0的0.01毫克/升。
　　5.取下装有零参比溶液的容器，放入所配制的氯标准溶液。让分析仪对该标准溶液运作大约10分钟。
　　6.当读数稳定时，进入“SETUP”菜单。
　　7.当显示“CALSTD”时，按“ENTER”。此时将显示当前测出的值。
　　8.按ENTER并编辑该值。再次按ENTER接受经过编辑的值。此时测出的值将被强制设置为您输入的值。按三次“EXIT”键可返回到正常显示模式。
　　9.取出氯标准溶液，将样品流重新进入到分析仪中。仪器现在已被校准好。

你知道如何正确保存实验室试剂吗

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你知道如何正确保存实验室试剂吗

　　正确保存实验室试剂是确保实验结果准确性和实验室安全的重要环节。下面将详细介绍如何正确保存实验室试剂。
　　储存区域：
　　实验室应设立专门的储存区域，用于存放试剂。这个区域应远离火源、阳光直射和高温环境，并且易于控制温度和湿度。储存区域的通风良好，避免有害气体积聚。
　　温度控制：
　　不同的试剂对温度的要求不同，因此应根据试剂的特性设置适当的温度。一般来说，多数试剂需要储存在常温下(15-25摄氏度)，但一些特殊试剂如低温保存的酶类和耐热性试剂需要冷藏或冷冻保存。
　　封闭方式：
　　所有试剂的容器必须完好无损，并且能够有效密封。使用密封盖、橡胶塞或螺纹盖等封闭方式，防止试剂受到空气、水分或污染物的污染。
　　标识和分类：
　　每个试剂容器上都应标注清楚试剂的名称、浓度、存放日期和有效期等信息。试剂应按照类型、危险性和使用频率进行分类，以便快速定位和识别。
　　分装操作：
　　对于大容量试剂或常用试剂，可以将其分装成小容量的子样品，减少反复开封导致的试剂污染和降解。分装后的试剂需正确标识，并确保容器的完整密封。
　　防止光照：
　　一些试剂对光敏感，暴露在光线下可能导致其失效或降解。因此，这类试剂应储存在避光的容器中，或者存放在不透光的柜子或抽屉中。
　　避免反应：
　　不同试剂之间可能发生反应，导致产生有害物质或意外情况。因此，在储存试剂时，应将具有反应性的试剂分开储存，避免直接接触和混合。
　　酸碱分离：
　　强酸和强碱应分开存放，避免因意外接触引发剧烈反应。酸碱试剂的存放区域应有防酸碱溅溉的设施，如酸碱抽风柜或溅溉盘。
　　腐蚀和易燃品：
　　对于具有腐蚀性或易燃性的试剂，应储存在专门的柜子中，以减少事故发生的风险。对于易燃品，还要注意避免接触明火、静电或高温环境。
　　定期检查：
　　储存试剂的区域需要定期进行检查，确认试剂容器完好无损、标识清晰可读、有效期在有效范围内，并及时处理过期或变质的试剂。
　　安全设施：
　　储存区域应配备适当的安全设施，如防火设备、风险警示标识、泄漏收集器等。同时，保持储存区域整洁有序，避免杂乱堆放和混乱管理。
　　储存记录：
　　记录每个试剂的储存信息，包括进货日期、开封日期、容器状态等。记录可以帮助追溯试剂使用情况和处理过程，确保实验的可追溯性和安全性。