标签归档：保存

抗体和重组蛋白使用、保存方法

发表于由

抗体和重组蛋白使用、保存方法

无论是保存还是运输，请避免反复冻融。反复冻融，冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构，导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变，从而降低抗体的结合能力，也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否，直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果，如果保存得当，抗体和重组蛋白活性大部分都可以维持数年。

1. 收到抗体和重组蛋白后的操作

收到抗体和重组蛋白后（大部分抗体和重组蛋白是溶液态），请务必在 4℃，12000rpm，离心 3 分钟，再打开管盖进行分装、溶解和保存（如果抗体和重组蛋白体积小于 50µl，请延长离心时间至 5 分钟，以保证全部抗体和重组蛋白均离心下来，干粉状态的同样适用）。抗体和重组蛋白使用特制的储存管，只有在 12000rpm 离心 3 分钟，才能将附着在管壁或盖内的抗体和重组蛋白全部离心下来（即使是在 10000rpm 离心也会离心不全，导致出现抗体和重组蛋白的量不足的现象）。请详细阅读说明书，并按照推荐的保存条件正确保存和使用抗体和重组蛋白。

2. 抗体和重组蛋白的长期保存

对于大部分抗体和重组蛋白，比较合适的保存方式是：抗体分装后保存在 -20℃，重组蛋白分装后保存在 -80℃。

（1）分装可以大程度的降低反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体和重组蛋白造成的污染可能性。

（2）分装的量以一次实验用完为好，最少不能少于 10 µl 每份。因为分装体积越小，抗体和重组蛋白的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。

（3）复融后的分装抗体和重组蛋白如果一次用不完，将剩余母液保存在 4℃，避免再冻起来。

（4）抗体和重组蛋白工作液应该当天配制当天用完，4℃ 保存尽量不要超过 1 天。

（5）绝对避免将抗体和重组蛋白保存在自动除霜冰箱中，将抗体和重组蛋白保存在冰箱里层，避免温度变化造成反复冻融。

3. 抗体和重组蛋白的短期保存

大部分的抗体和重组蛋白收到后 4℃ 短暂保存 1~2 周，对抗体和重组蛋白活性没有影响。如果抗体和重组蛋白很快会使用（1~2 周内），推荐在 4℃ 保存，这是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体和重组蛋白。

4. 抗体和重组蛋白的运输条件

一般的运输过程需要 1~2 周的时间，所以是在低温 4℃ 的条件下来完成的。4℃ 运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害（如果使用干冰运输，那么收到时抗体和重组蛋白是冻起来的，为了分装就需要解冻，这就多了一次冻融的过程），所以运输过程中一般避免干冰运输。

5. 抗体和重组蛋白的稳定性

（1）抗体的稳定性是自然界长期进化的结果，抗体是免疫系统中最重要的分子之一，其稳定性是自然进化筛选的结果，在众多物种中，抗体分子形成了保守而稳定的结构。

（2）抗体的高Tm值，在室温下，甚至短时间温度达到 50~60℃，抗体分子都能维持正确折叠，保持其应有的活性。

（3）抗体和重组蛋白的纯度。 采用先进的抗体和重组蛋白纯化技术，确保抗体和重组蛋白产品的高纯度，保障其抗体和重组蛋白产品的稳定性。

（4）抗体和重组蛋白的浓度。高浓度的抗体和重组蛋白产品可减少容器表面吸附造成的物质损失，高浓度的抗体和重组蛋白稳定性更好。大部分抗体和重组蛋白浓度为 1mg/ml，抗体和重组蛋白纯度高，特异性好，效价更高。

6. 重组蛋白的特性

重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式，原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态，真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存，这样使得重组蛋白非常稳定，在 -80℃ 条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，其中溶解的方法非常关键，因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意，这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。

（1）原核细胞表达的重组蛋白。 大肠杆菌表达的冻干重组蛋白，已经从包涵体中提纯，添加了蛋白保护剂，使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可，复溶冻干蛋白 100µg，用 86µl 的超纯水，轻轻摇晃使蛋白溶解，再用移液枪的枪头轻吹几下即可全溶解，一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。

（2）真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译，还要进行翻译后的加工，使得蛋白质的空间折叠方式维持正常，所以重组蛋白必须在真核细胞中进行，如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子，对翻译后的蛋白质进行加工，这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存，保持了其良好的活性和稳定性。

（3）重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类，多元醇，聚合物，表面活性剂，某些蛋白和氨基酸等。我们通常加 8%（质量比体积）的海藻糖和甘露醇作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集，甘露醇也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。

超滤杯UFSC40001-高压高温灭菌

发表于由

【简单介绍】

类型 其他 材质 其他
适用对象 其他 适用范围 净水器

超滤杯UFSC40001，搅拌式超滤装置对于高达 10% 大分子溶质浓度的溶液进行高流速操作。 能进行快速浓缩或脱盐，然后在同一装置中浓缩。超滤膜在出厂前都经消毒和防腐处理，在不开封的情况下可以保存 2 个月，开封后必须湿态保存，保存液为 0.5% 的甲醛溶液。

【详细说明】

超滤杯UFSC40001 

超滤杯，是一种玻璃仪器，容量 80mm/300ml ，可承受压力 0.22Mpa。超滤膜在出厂前都经消毒和防腐处理，在不开封的情况下可以保存 2 个月，开封后必须湿态保存，保存液为 0.5% 的甲醛溶液。
Amicon 搅拌式超滤装置对于高达 10% 大分子溶质浓度的溶液进行高流速操作。 能进行快速浓缩或脱盐，然后在同一装置中浓缩。 使用本页面上显示的等体积透析模式一般可以回收全部的产品。轻轻的磁搅拌可以控制浓差极化且极少产生剪切变性。 所有搅拌式超滤装置都可以进行高压高温灭菌。

超滤杯UFSC40001

材料
超滤盖和
导管固定组件		 尼龙
超滤器筒和滤膜支撑架 聚砜
搅拌组件 乙缩醛，
聚砜
压力导管 聚乙烯
滤过液导管 Tygon® 管
   

20001订购信息： 

搅拌式超滤装置 型号 8003
目录编号 5125		 型号 8050
目录编号UFSC05001
    8010型，5121   8200型，UFSC20001 8400型，UFSC40001
           
zui大处理量，mL 3 10 50 200 400
膜直径，mm 25 25 44.5 63.5 76
有效膜
面积，cm2		 0.9 4.1 13.4 28.7 41.8
滞留量，mL 0.07 0.2 0.5 1.2 1.5
高，cm 7.7 7.7 9.8 12.8 15.5
底座，cm 6 x 6 6 x 6 7 x 7 9 x 9 11 x 11
重量，kg 0.1 0.1 0.2 0.4 0.6

 

你知道如何正确保存实验室试剂吗

发表于由

你知道如何正确保存实验室试剂吗

　　正确保存实验室试剂是确保实验结果准确性和实验室安全的重要环节。下面将详细介绍如何正确保存实验室试剂。
　　储存区域：
　　实验室应设立专门的储存区域，用于存放试剂。这个区域应远离火源、阳光直射和高温环境，并且易于控制温度和湿度。储存区域的通风良好，避免有害气体积聚。
　　温度控制：
　　不同的试剂对温度的要求不同，因此应根据试剂的特性设置适当的温度。一般来说，多数试剂需要储存在常温下(15-25摄氏度)，但一些特殊试剂如低温保存的酶类和耐热性试剂需要冷藏或冷冻保存。
　　封闭方式：
　　所有试剂的容器必须完好无损，并且能够有效密封。使用密封盖、橡胶塞或螺纹盖等封闭方式，防止试剂受到空气、水分或污染物的污染。
　　标识和分类：
　　每个试剂容器上都应标注清楚试剂的名称、浓度、存放日期和有效期等信息。试剂应按照类型、危险性和使用频率进行分类，以便快速定位和识别。
　　分装操作：
　　对于大容量试剂或常用试剂，可以将其分装成小容量的子样品，减少反复开封导致的试剂污染和降解。分装后的试剂需正确标识，并确保容器的完整密封。
　　防止光照：
　　一些试剂对光敏感，暴露在光线下可能导致其失效或降解。因此，这类试剂应储存在避光的容器中，或者存放在不透光的柜子或抽屉中。
　　避免反应：
　　不同试剂之间可能发生反应，导致产生有害物质或意外情况。因此，在储存试剂时，应将具有反应性的试剂分开储存，避免直接接触和混合。
　　酸碱分离：
　　强酸和强碱应分开存放，避免因意外接触引发剧烈反应。酸碱试剂的存放区域应有防酸碱溅溉的设施，如酸碱抽风柜或溅溉盘。
　　腐蚀和易燃品：
　　对于具有腐蚀性或易燃性的试剂，应储存在专门的柜子中，以减少事故发生的风险。对于易燃品，还要注意避免接触明火、静电或高温环境。
　　定期检查：
　　储存试剂的区域需要定期进行检查，确认试剂容器完好无损、标识清晰可读、有效期在有效范围内，并及时处理过期或变质的试剂。
　　安全设施：
　　储存区域应配备适当的安全设施，如防火设备、风险警示标识、泄漏收集器等。同时，保持储存区域整洁有序，避免杂乱堆放和混乱管理。
　　储存记录：
　　记录每个试剂的储存信息，包括进货日期、开封日期、容器状态等。记录可以帮助追溯试剂使用情况和处理过程，确保实验的可追溯性和安全性。