日度归档：2024年3月16日

Cell Meter 钙检测免洗和免丙磺舒检测试剂盒*适用于酶标仪*-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Meter 钙检测免洗和免丙磺舒检测试剂盒*适用于酶标仪*价格 5670
产品规格

100 Tests

产品货号

Cell Meter 钙检测免洗和免丙磺舒检测试剂盒*适用于酶标仪*

产品参数
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Cell Meter 钙检测免洗和免丙磺舒检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测葡萄糖的试剂盒，Cell Meter 无洗涤和无丙磺舒钙测定试剂盒可实现均相荧光测定，用于检测细胞内钙动员，无需使用动力学读数模式。它可用于具有底部读取模式的荧光酶标仪，其没有内置液体分配器或动力学读数的能力。将Fluo-8E AM染料加入感兴趣的细胞后，无需洗涤步骤，可以通过液体分配器或手动移液器简单地添加钙通量激动剂，然后通过荧光读数器在Ex / Em = 490 /读取板525纳米。 Fluo-8E AM可通过扩散被动地穿过细胞膜。一旦进入细胞内，Fluo-8E AM的亲脂性阻断基团被酯酶切割，产生带负电荷的荧光染料，留在细胞内。它的荧光大大增强，并且在与钙结合后持久。当用激动剂刺激表达目的GPCR的细胞时，该受体发出细胞内钙的释放信号，这显着增加了Fluo-8E 的荧光。其高灵敏度，> 100倍荧光增强和持久荧光信号的特性使Fluo-8E 成为荧光酶标仪上细胞钙测量的理想指标，不具备流体转移和动态读数模式的能力。 Cell Meter 无洗涤和无丙磺舒的终点钙测定试剂盒可以96孔或384孔板进行实验。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 钙检测免洗和免丙磺舒检测试剂盒。 

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适用仪器

荧光酶标仪  
激发: 490nm
发射: 525nm
Cutoff： 515nm
推荐孔板： 黑色透明
读取模式： 底读模式
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中准备细胞
2.添加Fluo-8E AM染料加载溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
3.在37°C孵育60分钟
4.加入50 µL钙通量刺激剂
5.监测Ex / Em = 490/525 nm的荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Fluo-8E AM储备方案：
在Fluo-8E AM（组分A）小瓶中加入10 µL DMSO，并充分混合。 注意：10 µL Fluo-8E AM储备溶液足以进行50次测定（96孔板的一半）。 注意：如果试管密封严密，可以将未使用的Fluo-8E AM储备溶液分装并在<-20℃下保存1个月以上。 避光并避免重复的冻融循环。

1.2 分析缓冲液（1X）：
将9 mL的HHBS（组分C）加入10XPluronic®F127 Plus（1 mL，组分B）中，并充分混合。 注意：10毫升测定缓冲液（1X）足以用于一块板。 分装并在<-20°C下存储未使用的1X分析缓冲液。 避光并避免重复的冻融循环。

 

2.工作溶液

Fluo-8E AM染料：
将10 µL Fluo-8E AM储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液（1X）中，并充分混合。 注意：此工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

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样品操作及实验分析

1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Fluo-8E™AM染料加载溶液添加到细胞板中。 不要从细胞板上除去生长培养基。

2.在细胞培养箱中将染料加载板孵育45-60分钟。
 
3.用HHBS或所需的缓冲液准备钙刺激剂溶液（5X）。

4.加入50个准备好的刺激物，并通过底部读取模式通过监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度立即运行钙通量测定。 注意：为获得结果，重要的是在添加激动剂后1分钟内进行测定。 确保激动剂添加到实际读数开始之间的时间对于所有样品保持恒定也很重要。

 

参考文献

Fluorescence absorbance inner-filter decomposition: the role of emission shape on estimates of free Ca(2+) using Rhod-2
Authors: Territo PR, Heil J, Bose S, Evans FJ, Balaban RS.
Journal: Appl Spectrosc (2007): 138

Kinetic characterization of novel NR2B antagonists using fluorescence detection of calcium flux
Authors: Bednar B, Cunningham ME, Kiss L, Cheng G, McCauley JA, Liverton NJ, Koblan KS.
Journal: J Neurosci Methods (2004): 247

Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements
Authors: Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR.
Journal: Cell Calcium (2004): 509

Protein kinase C and myocardial calcium handling during ischemia and reperfusion: lessons learned using Rhod-2 spectrofluorometry
Authors: Stamm C, del Nido PJ.
Journal: Thorac Cardiovasc Surg (2004): 127

Cytosolic calcium in the ischemic rabbit heart: assessment by pH- and temperature-adjusted rhod-2 spectrofluorometry
Authors: Stamm C, Friehs I, Choi YH, Zurakowski D, McGowan FX, del Nido PJ.
Journal: Cardiovasc Res (2003): 695

Calcium measurements in perfused mouse heart: quantitating fluorescence and absorbance of Rhod-2 by application of photon migration theory
Authors: Du C, MacGowan GA, Farkas DL, Koretsky AP.
Journal: Biophys J (2001): 549

Calibration of the calcium dissociation constant of Rhod(2)in the perfused mouse heart using manganese quenching
Authors: Du C, MacGowan GA, Farkas DL, Koretsky AP.
Journal: Cell Calcium (2001): 217

Changes in mitochondrial Ca2+ detected with Rhod-2 in single frog and mouse skeletal muscle fibres during and after repeated tetanic contractions
Authors: Lannergren J, Westerblad H, Bruton JD.
Journal: J Muscle Res Cell Motil (2001): 265

Rhod-2 based measurements of intracellular calcium in the perfused mouse heart: cellular and subcellular localization and response to positive inotropy
Authors: MacGowan GA, Du C, Glonty V, Suhan JP, Koretsky AP, Farkas DL.
Journal: J Biomed Opt (2001): 23

Mitochondrial free calcium levels (Rhod-2 fluorescence) and ultrastructural alterations in neuronally differentiated PC12 cells during ceramide-dependent cell death
Authors: Muriel MP, Lambeng N, Darios F, Michel PP, Hirsch EC, Agid Y, Ruberg M.
Journal: J Comp Neurol (2000): 297

十二烷基三甲基氯化铵;Dodecyltrimethylammonium chloride; CAS:112-00-5; 品牌:Vetec (Sigma-Aldrich旗下品牌)

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详细描述

品牌： Vetec 产地： 中国
产品英文名称： Dodecyltrimethylammonium chloride CAS编号： <产品号JPS-2314/">112-00-5
别名： 分子式： CH3(CH2)11N(CH3)3Cl
含量： % 产品规格： 100g

产品信息
中文名：十二烷基三甲基氯化铵
英文名：Dodecyltrimethylammonium chloride
货号：V900884
品牌：Vetec
MDL号：MFCD00041974
CAS 号：112-00-5
线性分子式：CH3(CH2)11N(CH3)3Cl
分子量：263.89
熔点：246 C (dec.)(lit.)
产品包装：瓶装
产品规格：100g
产品起订量：1
产品库存：国内现货 

品牌信息 Vetec 品牌是 Sigma-Aldrich 旗下新成员，以极具亲和力的本地价格为用户提供质量可靠的常用生化和化学产品。 Vetec 以满足日常实验要求为标准制定产品的检测指标，依托 Sigma-Aldrich 全球统 一的质量体系对每批产品进行严格的测试，以确保产品的批次稳定性。优异的可靠性可以让您每天放心地使用 Vetec 产品，不再担心因为质量问题给实验带不必要的干扰。

上海金畔生物科技有限公司

文章号：1974549-1974549

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订购热线：15221999938

微信:jinpanbio

Phenomenex耗材 7HK-G013-22

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产品货号: 7HK-G013-22 产品名称: Phenomenex耗材 7HK-G013-22 产品品牌: Phenomenex（美国飞诺美）

Phenomenex耗材 7HK-G013-22 Zebron ZB-WAX-Plus Capillary GC Column 30m x 0.53mm x 1.00um Ea

详细介绍 美国Phenomenex公司提供多种色谱耗材产品，核-壳技术Kinetex超高效液相色谱柱、 Lux**固定相手性柱、传统C1281柱如Gemini（双子星)色谱柱，Luna(月神)色谱柱，还有Synergi、Jupiter、Zebron等知名液相气相色谱柱；以及拥有**技术的SecurityGuard保护柱和Strata固相萃取柱，专业应用的Axia制备级色谱柱等 Zebron ZB-WAX-Plus Capillary GC Column 30m x 0.53mm x 1.00um Ea

其他化学试剂Cy3 Methyltetrazine1018

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其他化学试剂Cy3 Methyltetrazine

简要描述：其他化学试剂Cy3 Methyltetrazine销售：试剂click chemistry tools供应。
上海金畔生物新代理*在中国的业务，click chemistry tools代理，click chemistry tools代理，click chemis上海代理，click chemistry tools华南代理

详细介绍

产品咨询

品牌 Click Chemistry tools 供货周期 两周
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,石油,制药

其他化学试剂Cy3 Methyltetrazine销售

上海金畔生物科技有限公司　是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域，以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及，细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。


点击化学（Click chemistry）—蛋白质组学研究和新药研发的理想技术。美国一家小众里生物公司，国内通常称呼为CCT，生产有浓缩介质，代谢标记试剂，生物素标记试剂，荧光染料以及交联剂.“点击化学”的基本思想就是利用碳-杂原子成键反应快速实现分子多样性，一般由叠氮化物（azide）和炔烃（alkyne）作用形共价键，具有稳定，高特异性等优点。反应不受PH影响，能在常温条件下的水中进行,甚至能在活细胞中进行。


甲基四嗪激活的 Cy3 探针通过逆电子需求 Diels-Alder 反应与含 TCO 的化合物反应形成稳定的共价键，不需要铜催化剂或高温。TCO与四嗪的反电子需求Diels-Alder环加成反应是一种生物正交反应，具有优异的动力学（k > 800 M -1 -1）和选择性。这种出色的反应速率常数是迄今为止描述的任何其他生物正交反应对都好的。

Abs/Em 最大值
553/569 纳米
消光系数
150,000
流式细胞术激光线
532 或 555 纳米
显微镜激光线
532 或 555 纳米
光谱相似染料
Alexa Fluor® 555、Atto™ 555、CF™ 555 染料、DyLight™549
分子量
908.07
中国科学院
1676067-48-3
溶解度
水、DMSO、DMF、甲醇
纯度
>95%（高效液相色谱法）
外貌
红色固体
储藏条件
-20℃。干燥
运输条件
环境温度


试剂click chemistry tools供应 其他化学试剂Cy3 Methyltetrazine销售

德国MZ色谱柱Superspher Si 60 4µm, Pk/5 Precolumn Cartridges 5 x 4.6mm

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产品货号: MZ0214-VK0546 产品名称: 德国MZ色谱柱Superspher Si 60 4µm, Pk/5 Precolumn Cartridges 5 x 4.6mm 产品品牌: MZ

德国MZ色谱柱Superspher Si 60 4µm, Pk/5 Precolumn Cartridges 5 x 4.6mm

详细介绍 上海金畔生物供应德国MZ公司各类色谱产品，色谱柱型号齐全，若需获取更多的产品详情，请来电咨询。

如何选择适合自己的细胞培养板

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如何选择适合自己的细胞培养板

　　细胞培养板因为能给细胞实验节约时间，节约试剂材料费用，可以同时设立多个动态变量方便观察检测等，是细胞培养实验中常用和重要的耗材。但是，你能根据自身需求选择正确的培养板么？
　　细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型)，培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等。
　　1、平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择
　　不同形状的培养板有不同用途。培养细胞，通常是选用平底的，这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。因此做MTT等实验时，无论是贴壁和悬浮细胞，一般选用平底板。测吸光值一定要使用平底的培养板。
　　U型或V型板，一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面，当做两种不同淋巴细胞混合培养时，需要二者相互接触刺激，这时一般会选用U型板，因为细胞会由于重力的作用而聚集在很小的范围内内。圆底培养板还会用于同位素掺入的实验，需要用细胞收集仪收集细胞的培养，如“混合淋巴细胞培养”等。V型板常用做细胞杀伤、免疫学血凝集实验。细胞杀伤这种实验也可用U型板替代(加入细胞后，低速离心)。
　　2、细胞培养板与酶标板的区别
　　酶标板一般要比细胞培养板贵，细胞板主要做细胞培养，也可以用来测蛋白浓度；酶标板包括包被板和反应板，一般不用做细胞培养，它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测，需要更高的要求和特定的酶标工作液。
　　3、常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量
　　不同孔板所加培养液的液面都不宜太深，一般在2~3mm范围，结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。

ADAM32 Polyclonal Antibody-赛默飞世尔科技Thermofisher

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  • 技术资料
    • 货号：

      PA547732

    • 抗体名：

      ADAM32 Polyclonal Antibody

    • 靶点：

      ADAM32

    • 浓度：

      0.2 mg/ml

    • 应用范围：

      Immunoprecipitation, Western Blot

    • 宿主：

      Sheep

    • 适应物种：

      Human

    • 克隆性：

      单克隆

    • 保存条件：

      -20° C, Avoid Freeze/Thaw Cycles

    • 形态：

      Lyophilized

    • 亚型：

      IgG

    • 免疫原：

      CHO-derived recombinant human ADAM32 Ser17-Thr476

    • 规格：

      100 µg

    风险提示：仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

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nunc

Phenomenex耗材 7KG-G014-11-C

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产品货号: 7KG-G014-11-C 产品名称: Phenomenex耗材 7KG-G014-11-C 产品品牌: Phenomenex（美国飞诺美）

Phenomenex耗材 7KG-G014-11-C Zebron ZB-1HT Capillary GC ** CUSTOM ** Column 60m x 0.25mm x 0.25um Ea

详细介绍 美国Phenomenex公司提供多种色谱耗材产品，核-壳技术Kinetex超高效液相色谱柱、 Lux**固定相手性柱、传统C1411柱如Gemini（双子星)色谱柱，Luna(月神)色谱柱，还有Synergi、Jupiter、Zebron等知名液相气相色谱柱；以及拥有**技术的SecurityGuard保护柱和Strata固相萃取柱，专业应用的Axia制备级色谱柱等 Zebron ZB-1HT Capillary GC ** CUSTOM ** Column 60m x 0.25mm x 0.25um Ea

ALDH2 Polyclonal Antibody-赛默飞世尔科技Thermofisher

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    • 货号：

      PA511489

    • 抗体名：

      ALDH2 Polyclonal Antibody

    • 靶点：

      ALDH2

    • 浓度：

      0.5 mg/ml

    • 应用范围：

      Immunocytochemistry, Immunofluorescence, Western Blot

    • 宿主：

      Rabbit

    • 适应物种：

      Human, Mouse, Rat

    • 克隆性：

      单克隆

    • 保存条件：

      -20° C, Avoid Freeze/Thaw Cycles

    • 形态：

      Liquid

    • 亚型：

      IgG

    • 免疫原：

      KLH conjugated synthetic peptide between 52-81 amino acids from the N-terminal region of human ALDH2

    • 规格：

      400 µL

    风险提示：仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

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nunc

Extra Long Transfer Pipettes Non sterile 25 drop b70968-26

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Extra Long Transfer Pipettes Non sterile 25 drop b

简要描述：Extra Long Transfer Pipettes Non sterile 25 drop bulb 400/pk，产品型号：70968-26。
超长移液器非无菌
包装: 400 包

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Extra Long Transfer Pipettes Non sterile 25 drop bulb 400/pk，产品型号：70968-26。

Extra Long Transfer Pipettes Non sterile 25 drop bulb 400/pk，描述：

这些转移移液器非常适合传代培养、收获、取样 15、50、100 毫升试管和烧瓶，从细胞培养物中去除上清液和培养基，清洗细胞，离心后去除细胞层，柱中层/柱中转移，加载凝胶，现场检测、血培养瓶等。 

长度厘米 茎径 总上限 灯泡 滴/毫升
22.5 5.0 6.0 2.3 25


上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

N-(2,4,6-三氯苯基)硫脲 英文名：N-(2,4,6-Trichlorophenyl)thiourea CAS号：31118-87-3 品牌：Aldrich

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详细描述

品牌： 产地：
产品英文名称： N-(2,4,6-Trichlorophenyl)thiourea CAS编号： <产品号JPS-22149/">31118-87-3
别名： 分子式： C7H5Cl3N2S
含量： % 产品规格： 1G
中文名：N-(2,4,6-三氯苯基)硫脲

英文名：N-(2,4,6-Trichlorophenyl)thiourea

CAS号：31118-87-3

MDL号：MFCD00041153

分子式：C7H5Cl3N2S

含量：97%

产品规格：1G

品牌：Aldrich

货号：598143

产地：原装进口

Aldrich一直以来都是全球有机和无机化学领域的领导者。我们通过综合的创新能力和完整的产品线为化学研究、医药研发、材料研究等众多领域提供包括化学结构单元、试剂、先进材料和稳定同位素在内的数以十万计的产品，同时我们也为您的基本实验提供基础试剂和实验室溶剂产品。每年会有超过3000余种全新化合物会出现在我们的目录中。

上海金畔生物科技有限公司

文章号：5721846-5721846

邮箱：sales@jinpanbio.com

订购热线：15221999938

微信:jinpanbio

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒价格 1386
产品规格

1 Plate

产品货号

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) 495 Em (nm) 516
分子量 – 溶剂 –
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Screen Quest 免洗Fluo-8钙检测试剂盒是美国AAT Bioquest研发的用于检测钙离子的试剂盒，Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒提供均匀的荧光测定，用于检测细胞内钙动员。表达通过钙发出信号的感兴趣的GPCR的细胞预加载有可以穿过细胞膜的Fluo-8 NW。一旦进入细胞内，Fluo-8 NW的亲脂性阻断基团被酯酶裂解，导致带电荷的荧光染料留在细胞内。与钙结合后，其荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体发出细胞内钙的释放信号，这显着增加了Fluo-8 NW的荧光。 Fluo-8 NW具有长波长，高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性，是测量细胞钙的理想指标。 Screen Quest Fluo-8 NW钙测定试剂盒为监测G蛋白偶联受体和钙通道提供了一种优化的检测方法。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙检测试剂盒。

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适用仪器

荧光酶标仪  
Ex: 490 nm
Em： 525 nm
Cutoff： 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底部读取/分液处理

 

其他可用仪器  
ArrayScan, FDSS, FLIPR, FlexStation, IN Cell Analyzer, NOVOStar, ViewLux  
实验方案

样品分析方案

概述

用含有0.5-1％FBS的Fluo-8 NW染料加载溶液

在生长培养基中制备细胞（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）

在室温下孵育1小时

监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度

 

操作步骤

1.准备细胞：
1.1对于贴壁细胞：在生长培养基中将细胞过夜，对于96孔板，具有0.5-1％FBS，40,000至80,000个细胞/孔/100μL，或者对于384孔板，为10,000至20,000个细胞/孔/25μL。

1.2对于非贴壁细胞：从培养基中离心细胞，然后将细胞沉淀悬浮于等量的HHBS和Fluo-8 NW染料加载溶液中（参见下面的步骤2.4），125,000至250,000细胞/孔/100μL 用于96孔poly-D赖氨酸平板或30,000至60,000细胞/孔/25μL用于384孔聚-D赖氨酸平板。 在实验之前，在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。
注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定细胞内钙动员的细胞密度。

 

2.准备Fluo-8 NW染料加载溶液：
2.1在使用前，在室温下1小瓶Fluo-8 NW（组分A），1瓶10XPluronic®F127Plus（组分B）和HHBS（组分C）。

2.2Make Fluo-8 NW储备溶液::加入20μL（Cat＃36314）或200μL（Cat＃36315和＃36316）DMSO到Fluo-8 NW（A组分）小瓶中，混匀。
注意：20μLFluo-8 NW原液足以用于一个平板。如果管子密封，未使用的Fluo-8 NW储备溶液可以等分并在<-20摄氏度下储存超过一个月。避光，避免反复冻融循环。

2.3制备1X测定缓冲液：
A）。对于Cat＃36314（1个试剂盒）和＃36315（10个试剂盒试剂盒），通过将9mL HHBS（组分C）加入10X Pluronic F127 Plus（1mL，组分B）中制备1X测定缓冲液，并充分混合。

B）。对于Cat＃36316（100个试剂盒试剂盒），将整瓶10XPluronic®F127Plus（10 mL，组分B）加入90 mL HHBS缓冲液（不包括在试剂盒中）中，制成1X试剂缓冲液，并充分混合。
注意：对于一个平板，10 mL的1X测定缓冲液就足够了。在<-20℃下等分并储存未使用的1X测定缓冲液。避光，避免反复冻融循环。

2.4为一个细胞板制备Fluo-8 NW染料加载溶液：将20μLFluo-8 NW储备溶液（来自步骤2.2）加入10 mL 1X分析缓冲液（来自步骤2.3），并充分混合。该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

3.运行钙测定：
3.1将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Fluo-8 NW染料加载溶液（来自步骤2.4）加入到细胞板中。
注意：或者，在含有5-10％FBS的生长培养基中培养细胞以细胞生长。在这种情况下，重要的是用HHBS缓冲液替换生长培养基以小化背景荧光和化合物干扰血清。 [我们为那些喜欢保持培养基去除步骤的人提供2个独立的中等去除钙测定试剂盒（Cat＃36308和36309）]。

3.2将染料加载板在细胞培养箱中孵育30分钟，然后将板在室温下再孵育30分钟。
注1：如果测定需要37℃，立即进行实验，无需进一步室温孵育。
注2：如果细胞在室温下运行时间较长，可在室温下孵育细胞板1-2小时（建议孵育时间不超过2小时。）

3.3用HHBS或所需的缓冲液制备复合板。

3.4通过监测Ex / Em = 490 / 525nm处的荧光强度来运行钙通量测定。
注意：在实验前进行信号测试非常重要。不同的仪器有自己的强度范围。将信号测试强度调整到大仪器强度计数的10％至15％的水平。例如，FLIPR-384的大荧光强度计数为65,000，因此应调整仪器设置以使信号测试强度在7,000到10,000左右。

 

参考文献

A Long-Acting PYY3–36 Analog Mediates Robust Anorectic Efficacy with Minimal Emesis in Nonhuman Primates
Authors: Shamina M Rangwala, Katharine D’Aquino, Yue-Mei Zhang, Lindsay Bader, Wilson Edwards, Songmao Zheng, Annette Eckardt, Ann Lacombe, Rebecca Pick, Veronica Moreno
Journal: Cell Metabolism (2019)

Oxidative Insults and Mitochondrial DNA Mutation Promote Enhanced Autophagy and Mitophagy Compromising Cell Viability in Pluripotent Cell Model of Mitochondrial Disease
Authors: Dar-Shong Lin, Yu-Wen Huang, Che-Sheng Ho, Pi-Lien Hung, Mei-Hsin Hsu, Tuan-Jen Wang, Tsu-Yen Wu, Tsung-Han Lee, Zo-Darr Huang, Po-Chun Chang
Journal: Cells (2019): 65

Prosocial effects of an oxytocin metabolite, but not synthetic oxytocin receptor agonists, in a mouse model of autism
Authors: Sheryl S Moy, Brian L Teng, Viktoriya D Nikolova, Natallia V Riddick, Catherine D Simpson, Amy Van Deusen, William P Janzen, Maria F Sassano, Cort A Pedersen, Michael B Jarstfer
Journal: Neuropharmacology (2019): 301–311

Human iPS cell-derived cardiac tissue sheets for functional restoration of infarcted porcine hearts
Authors: Masanosuke Ishigami, Hidetoshi Masumoto, Takeshi Ikuno, Takayuki Aoki, Masahide Kawatou, Kenji Minakata, Tadashi Ikeda, Ryuzo Sakata, Jun K Yamashita, Kenji Minatoya
Journal: PloS one (2018): e0201650

Structural characterization of agonist binding to protease-activated receptor 2 through mutagenesis and computational modeling
Authors: Amanda J Kennedy, Flavio Ballante, Johan R Johansson, Graeme Milligan, Linda Sundström, Anneli Nordqvist, Jens Carlsson
Journal: ACS Pharmacology & Translational Science (2018): 119–133

2-OMe-lysophosphatidylcholine analogues are GPR119 ligands and activate insulin secretion from βTC-3 pancreatic cells: Evaluation of structure-dependent biological activity
Authors: Anna Drzazga, Agata Sowińska, Agnieszka Krzemińska, Andrzej Okruszek, Piotr Paneth, Maria Koziolkiewicz, Edyta Gendaszewska-Darmach
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular and Cell Biology of Lipids (2017)

A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: A Menegon, S Pitassi, N Mazzocchi, L Redaelli, R Rizzetto, JF Rolland, C Poli, M Imberti, A Lanati, F Grohovaz
Journal: Scientific Reports (2017)

Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Xiaoyuan Gong, Wenbin Xie, Bin Wang, Lingchuan Gu, Fuyou Wang, Xiang Ren, Cheng Chen, Liu Yang
Journal: Scientific reports (2017): 17093

Analysis of Ca2+ response of osteocyte network by three-dimensional time-lapse imaging in living bone
Authors: Tomoyo Tanaka, Mitsuhiro Hoshijima, Junko Sunaga, Takashi Nishida, Mana Hashimoto, Naoya Odagaki, Ryuta Osumi, Taiji Aadachi, Hiroshi Kamioka
Journal: Journal of Bone and Mineral Metabolism (2017): 1–10

Aryl-and alkyl-phosphorus-containing flame retardants induced mitochondrial impairment and cell death in Chinese hamster ovary (CHO-k1) cells
Authors: Chao Huang, Na Li, Shengwu Yuan, Xiaoya Ji, Mei Ma, Kaifeng Rao, Zijian Wang
Journal: Environmental Pollution (2017): 775–786

 

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