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瑞典 IsoSep AB 化合物概述

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瑞典 IsoSep AB 化合物概述

瑞典 IsoSep AB提供一系列天然来源的复杂寡糖和鞘糖脂、合成制备的糖蛋白缀合物、单糖前体和参考混合物。

成立于1991 年，一直为研究界提供复杂的碳水化合物和糖复合物。我们在碳水化合物研究领域拥有长期经验，并与世界各地大学和研究所合作。  我们专门从事寡糖及相关物质的纯化和衍生化，主要来自母乳和小牛脑等天然来源，但我们也提供合成和半合成化合物。  我们的化合物已用于众多研究项目，其中一些您可以在我们的参考列表中找到。  我们在有机合成、固相和酶合成、复杂产品混合物的分离以及从天然来源中分离化合物方面拥有丰富的知识。  我们提供寡糖，例如 2'-岩藻糖基乳糖、乳-N-岩藻五糖和二唾液酰乳糖-N-四糖，神经节苷脂，例如 GT1b 和 GM1，糖复合物，例如 Sialyl-Lex-HSA 和 Lewis b-HSA。我们提供 100 多种单独的产品。

IsoSep AB 从哺乳动物和天然来源中分离出低聚糖、糖脂和神经节苷脂。一些寡糖是合成来源的。我们的化合物的来源在我们的在线目录中有说明。  

合成制备的糖复合物（新糖蛋白）是通过将寡糖与蛋白质 HSA、BSA 或 KLH 共价连接来制备的。蛋白质中寡糖的掺入程度在每次交付随附的分析证书中有。  

我们的化合物尚未经过内毒素筛查。  

可用产品 IsoSep 提供以下产品类别：  

低聚糖及其衍生物 

糖蛋白 

新糖蛋白（低聚糖-蛋白质缀合物） 

固定在 fractogel 上的寡糖 

鞘糖脂 

神经节苷脂 

标准混合物


缩写 

  • APD Acetylphenylenediamine

  • APE Aminophenylethyl

  • BSA Bovine serum albumin

  • GEL -NHAcCHCHOH-acrylamidegel (amino activated Fractogel)

  • HSA Human serum albumin

  • KLH Keyhole Limpet Hemocyanin

  • PA8 Phenyl-Alkyl-8, -NHAcPh(C8H17)

  • OA Ovalbumin

  • PA14 Phenyl-Alkyl-14, -NHAcPh(C14H29)

  • PAP p-Aminophenyl, -PhNH2

  • PNP p-Nitrophenyl , -PhNO2

  • TAPE Trifluoroacetamidophenylethyl, -CH2CH2PhNHCOCF3

  • TPAP Trifluoroacetamidophenyl, -PhNHCOCF3

白蛋白结合物

应该注意的是，连接子 APE 和 PAP 以糖苷方式连接到碳水化合物上，异头构型完整，如各自的物质所示。另一方面，APD 连接体通过还原糖单元的还原胺化连接到碳水化合物上，使还原糖以开链单元的形式存在，而不是以其原始的环构型存在。  缀合物以冻干粉末形式提供。储存温度-20°C。

合成糖脂 (PA8) 

疏水残基苯基烷基（C8 或 C14）（PA8、PA14）通过还原胺化作用与寡糖连接。通过此过程，末端还原糖（葡萄糖）被修饰为开链单元，并且不再以其原始环构型存在。  这些物质的一种可能应用是作为糖基转移酶测定中的受体，因为它们是水溶性的，但对 C18-二氧化硅材料具有良好的亲和力。

ozbiosciences转染试剂：Ab-DeliverIN™652800N01

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ozbiosciences转染试剂：Ab-DeliverIN™

简要描述：Ab-DeliverIN™ 转染试剂是第一个专用于细胞内递送全功能抗体的试剂。ozbiosciences转染试剂：Ab-DeliverIN™

详细介绍

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品牌 OZ Biosciences 供货周期 一个月
应用领域 食品,化工,生物产业,农业,制药

ozbiosciences转染试剂：Ab-DeliverIN™

Ab-DeliverIN™ 转染试剂是第一个专用于细胞内递送全功能抗体的试剂。Ab-DeliverIN开辟了蛋白质组学研究的新领域，例如阐明复杂的分子机制或设计新的潜在疗法。

 

  • 功能活性抗体的细胞内递送

  • 在许多原代细胞和细胞系中非常有效

  • 血清兼容

  • 可生物降解且无毒

  • 简单的实验方案和即用型试剂

 

Ab-Deliverin™配有 100 µL FITC 标记的 IgG 阳性对照。

尺寸：
  • 100μL：50-100 次检测
  • 250 µL：125-250 次检测
  • 500 µL：250-500 次检测
  • 1000 µL：500-1000 次检测
 

储存：+4°C Ab-deliverIN / FITC 标记的 IgG

运输条件：室温

AI20100：100 uL

AI20250：250 uL

AI20500：500 uL

AI21000：1 mL


上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

Turbo293 Ab™ Transfection KitPXX1005

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Turbo293 Ab™ Transfection Kit

简要描述：Turbo293 Ab™ Transfection Kit，产品型号：PXX1005。
贮存：在 4°C 下储存 6 个月。不要冻结。

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品牌 speed Biosystems 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Turbo293 Ab™ Transfection Kit，产品型号：PXX1005。

Turbo293 Ab™ Transfection Kit，具有的配方，专门优化用于在悬浮培养的 HEK293 细胞中生产单克隆抗体。该试剂和伴随的协议将 Ab 产量提高。


特征


★ 专为抗体生产而优化。

★ 最高的抗体产量。

★ 最小的细胞毒性。

★ 转染后无需更换培养基。

★ 源自非动物来源。

★ 协议扩展容易。

应用程序 用于在 HEK293 细胞中生产单克隆抗体
航运 用冰袋运送。
贮存 在 4°C 下储存 6 个月。不要冻结。

特征




上海金畔生物代理speedbiosystems中国的业务，speedbiosystems代理、speedbiosystems上海代理、speedbiosystems华南代理、speedbiosystems华东代理、speedbiosystems华西代理、speedbiosystems华北代理，上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品供应，欲购从速（敬请咨询。）

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。

ludger 2-AB 聚糖标记试剂盒LT-KAB-A2

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ludger 2-AB 聚糖标记试剂盒

简要描述：ludger 2-AB 聚糖标记试剂盒 产品代码：LT-KAB-A2
2-AB（2-氨基苯甲酰胺）是糖基化分析中使用广泛的荧光标记之一。

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月

ludger  2-AB 聚糖标记试剂盒   产品代码：LT-KAB-A2

2-AB（2-氨基苯甲酰胺）是糖基化分析中使用广泛的荧光标记之一。 LudgerTag 2-AB 标记试剂盒包含标记多达 24 个聚糖样品所需的所有试剂。

有两种套件可供选择，其所提供的还原剂类型有所不同：氰基硼qing化na或无毒的 2-甲基吡啶硼*。

部件号 还原剂
LT-KAB-A2 氰基硼qing化钠 – 24 个样品
LT-KAB-VP24 2-甲基吡啶*烷 – 24 个样品

用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 标记游离聚糖。氰基*氢hua钠还原剂。套件足以容纳 24 个样品。

产品规格

应用：用于用 2-氨基苯甲酰胺酸 (2-AB) 标记游离聚糖。

描述：该试剂盒包含通过还原胺化反应将染料缀合至聚糖的游离还原端的试剂。

传统的 2-AA 和 2-AB 标记试剂盒在聚糖标记过程中使用氰基硼氢hua钠作为还原剂。该试剂有毒，因此在操作过程中应使用通风柜。为了符合新兴的健康和安全法规，我们现在将其替换为新的 VP 聚糖套件，该套件使用甲基吡啶*烷，这是一种明显更安全的还原剂。

2-AB 标记试剂盒包含两套以下试剂（每套 15 个样品），装在玻璃安瓿中，在纯氮气下密封：

LT-KAB-A2
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲亚砜 (DMSO)乙酸…

LT-KAB-VP24
2-氨基苯甲酰胺（2-AB 染料）
二甲基亚砜 (DMSO) / 乙酸溶液
2-甲基吡啶硼*

样品数量一个 2-AB 标记套件包含可标记多达 30 个独立分析样品的试剂

HPLC 测定染料纯度>99%

分子量137

Lambda-Ex 250 nm

Λ-Em 428 nm

样品量每个样品含有 25 pmol 至 25 nmol 聚糖。

合适的样品任何具有游离还原末端的纯化聚糖都可以被标记。

结构完整性未检测到（< 2 摩尔%）唾液酸、岩藻糖、硫酸盐或磷酸盐的损失。

标记效率通常 > 85 %（取决于样品）。

标记选择性本质上是化学计量标记。

方案
1. 纯化聚糖：LudgerClean EB10 柱 (LC-EB10-A6) 设计用于从蛋白质、盐和洗涤剂中纯化聚糖。

2. 将样品转移到反应瓶中：对于从典型糖蛋白获得的聚糖库，样品量应在 100 皮摩尔 – 50 纳摩尔范围内。使用单个纯聚糖，只需 5 皮摩尔即可在后续 HPLC 分析中进行标记和检测。合适的反应瓶包括小型聚丙烯微量离心管和用于 PCR 工作的管。

3. 干燥样品：如果样品体积超过10 μL，则干燥样品。
如果样品需要干燥，则应使用离心蒸发器来完成。如果不可能，则可以谨慎使用冷冻干燥（冻干）（特别是确保样品在小瓶底部干燥成小而致密的物质）。请勿将样品置于高温 (>28°C) 或一定 pH 条件下，因为这些条件会导致酸催化的唾液酸损失（高温、低 pH 值）或聚糖还原末端的差向异构化（高 pH 值）。
样品干燥后，将聚糖重新溶解在 10 μL 水中。

4.（仅限 LT-KAB-A2）制备 DMSO-乙酸混合物：将 150 μL 冰乙酸添加到 DMSO 瓶中，并通过移液器动作混合。

5. 添加染料：将 DMSO-乙酸混合物添加到装有 2-AB（2-氨基苯甲酰胺酸）染料的小瓶中，并混合直至染料溶解。

6. 添加还原剂：将溶解的染料添加到装有氰基硼氢hua钠或甲基吡啶甲硼*的小瓶中，并通过移液器动作混合直至还原剂全溶解，制成最终的标记试剂。

7. 将标记试剂添加到样品中：将标记试剂添加到每个干燥的聚糖样品中，盖上微管，充分混合。

8. 孵育：将反应瓶放入加热块、沙盘或设定为 65°C 的干燥箱中，孵育 3 小时。在大多数情况下，孵育时间可以缩短至 2 小时或延长至 4 小时，而不会显着改变标记反应的结果。

9. 离心并冷却：孵育期结束后取出样品，短暂离心微管，然后让其冷却至室温。

10. 样品清理：建议进行标记后样品清理，以去除多余的染料和其他标记试剂。

Ludger 提供全系列的产品和耗材，用于使用液相色谱 (LC)、质谱 (MS)、LC-MS 或毛细管电泳 (CE) 等分析平台进行糖基化样品制备、表征和分析。这包括用于释放和标记单糖或唾液酸的试剂盒、N-或O-聚糖标记试剂盒以及聚糖清理/纯化和富集系统。我们还提供系统适用性标准品、定性和定量控制、高效液相色谱 (HPLC) 和超高效液相色谱 (uHPLC) 色谱柱和缓冲液，为您的所有聚糖分析需求提供一站式服务！


ludger  2-AB 聚糖标记试剂盒   产品代码：LT-KAB-A2

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*价格 2517
产品规格

100 mg

产品货号

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 N/A 溶剂 MeCN
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*是美国AAT Bioquest生产的淬灭剂，TQ1被设计为DABCYL的优异猝灭剂替代品。与DABCYL相比，TQ1具有（a）吸收更强; （b）淬火效率更高; （c）具有所需溶解度的多功能反应形式，用于标记寡核苷酸和肽。该TQ1产物主要用于寡核苷酸的合成内标记。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的荧光淬灭剂Tide Quencher 1 CPG *1000Å*。 

点击查看光谱

实验方案

操作步骤

用Tide Quencher 染料标记氨基修饰的寡核苷酸

以下方案已经过优化，可用于标记200μg（~6 A260 nm单位）的专有寡核苷酸。您需要修改协议，以通过多次实验为您的特定应用程序获得佳结果。您的氨基改性OLIGO必须进行处理以去除快速反应并消耗染料SUCCINIMIDYL酯的氨。

1.制备Oligo溶液（溶液A）将氨基修饰的oligo（~200μg）溶解在四硼酸盐缓冲液（100μL，pH 8.5±0.5）中。

注1：寡核苷酸必须在5’末端用胺基合成。参见Appenxidx 1纯化氨基修饰的寡核苷酸。

注2：避免使用含有伯胺的缓冲液，如Tris，因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

2.准备染料溶液（溶液B）

2.1通过上下吸移将1mg染料SE溶解在100μLDMSO中（如果可能，> 10mg / mL）。将小瓶侧面的溶液原液离心至小瓶底部。

注意：在开始缀合之前准备DMSO染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMSO染料溶液以备将来使用。

3.运行共轭反应

3.1在搅拌或摇动（保持反应混合物避光）的同时向染料溶液（B，20-50μL）中加入寡聚物溶液（A，100μL）。

3.2在室温下在旋转器或振荡器上旋转或摇动反应混合物4-6小时。

注意：在第一个小时内每10分钟轻轻涡旋一下小瓶，以确保反应溶液保持充分混合。不要剧烈混合，因为材料可能留在小瓶的两侧。六小时后，应标记50-90％的胺修饰的寡核苷酸分子。如果更方便的话，反应可以孵育过夜。然而，在大多数情况下，过夜孵育不会导致更高的标记效率。

4.纯化染料 – 寡糖结合物

4.1通过乙醇沉淀标记的寡核苷酸进行初步纯化

a.将20μL（一般十分之一反应溶液体积）的3M NaCl和300μL冷无水乙醇（通常为两个半反应溶液体积）加入反应小瓶中。

b.充分混合溶液并将其置于-20℃下30分钟。

c.将该溶液在微量离心机中以10,000至15,000×g离心30分钟。

d.注意：如果离心时间不够长，可能会导致样品丢失。

f.小心取出上清液，用冷的70％乙醇冲洗沉淀1-3次并短暂干燥。

g.注意：一些未反应的标记试剂可能在反应过程中沉淀或可能粘在反应瓶的壁上。在离心之前，通过大量涡旋混合将该材料完全再溶解。重新溶解标记试剂可确保沉淀的寡核苷酸少被未反应的标记物污染。

4.2通过HPLC或凝胶电泳进行终纯化

 

使用Tide Quencher 染料标记肽

以下方案已经过优化，用于标记10 mg仅含有一个游离氨基的专利肽（MW~2000）。您需要修改方案，以便通过多个实验为您的特定应用程序提供佳结果。

1.制备肽溶液（溶液A）

1.1将肽（~10 mg）溶解在DMF（~1 ml）中。

注1：肽必须用碱如三乙胺或碳酸钾中和。

注2：避免使用含有伯胺的缓冲液，如Tris，因为它们与胺反应性化合物竞争结合。

2.准备染料溶液（溶液B）

2.1通过上下吸移将5mg染料SE溶解在500μLDMF中（如果可能，> 10mg / mL）。

2.2注意：在开始缀合之前准备DMF染料溶液。染料溶液的长期储存可降低染料活性。任何含有染料的溶液都应避光。我们不建议您存储DMF染料溶液以备将来使用。

3.运行共轭反应

3.1向染料溶液（B，500μL）中加入肽溶液（A，1mL），搅拌或摇动（保持反应混合物不发光）。

3.2在室温下搅拌反应混合物4-6小时。

4.纯化染料 – 肽缀合物

4.1浓缩反应溶液并在C18柱上纯化，得到所需的缀合物。通过HPLC分析级分，合并> 97％纯度的级分并冻干。

4.2注1：HPLC纯化条件：TEAB缓冲液（三乙基碳酸氢铵，0.25mmol，pH = 7.0-8.0）用作缓冲液A，乙腈用作缓冲液B. HPLC在60分钟内从0％B至30％B进行（流速：100毫升/分钟）。

4.3注2：操作过程中避免强光。

 

参考文献

A mechanistic model to predict effects of cathepsin B and cystatin C on β-amyloid aggregation and degradation
Authors: Tyler J Perlenfein, Regina M Murphy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2017): jbc–M117

Real-Time Detection of a Self-Replicating RNA Enzyme
Authors: Charles Olea, Gerald F Joyce
Journal: Molecules (2016): 1310

Development of Multi-Parametric/Multimodal Spectroscopy Apparatus for Characterization of Functional Interfaces
Authors: Lang Zhou, Mary Arugula, Christopher J Easley, Curtis Shannon, Aleksandr Simonian
Journal: ECS Transactions (2015): 9–16

Maternal serum glycosylated fibronectin as a point-of-care biomarker for assessment of preeclampsia
Authors: Juha Rasanen, Matthew J Quinn, Amber Laurie, Eric Bean, Charles T Roberts, Srinivasa R Nagalla, Michael G Gravett
Journal: American journal of obstetrics and gynecology (2015): 82–e1

Array of biodegradable microrafts for isolation and implantation of living, adherent cells
Authors: Yuli Wang, Colleen N Phillips, Gabriela S Herrera, Christopher E Sims, Jen Jen Yeh, Nancy L Allbritton
Journal: RSC advances (2013): 9264–9272

Development of SNAP-Tag Fluorogenic Probes for Wash-Free Fluorescence Imaging
Authors: Xiaoli Sun, Aihua Zhang, Brenda Baker, Luo Sun, Angela Howard, John Buswell, Damien Maurel, Anastasiya Masharina, Kai Johnsson, Christopher J Noren
Journal: ChemBioChem (2011): 2217–2226

FERRAMENTAS PARA ESTUDO DA BIOLOGIA DE GPCRS (G-PROTEIN COUPLED RECEPTORS)
Authors: Frederico Marianetti Soriani, Remo Castro Russo
Journal: Unknown

 

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G-Biosciences： F(ab)2 Fragmentation Kit786-864

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G-Biosciences： F(ab)2 Fragmentation Kit

简要描述：G-Biosciences： F(ab)2 Fragmentation Kit 设计用于从 IgG 分子中生成和分离 F(ab)2 片段。该试剂盒使用我们的固定化胃蛋白酶树脂。

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品牌 G-Biosciences 供货周期 一个月
应用领域 环保,化工,生物产业,能源

G-Biosciences： F(ab)2 Fragmentation Kit

上海金畔生物代理G-Biosciences在中国的业务，G-Biosciences代理，G-Biosciences代理，G-Biosciences上海代理，G-Biosciences华南代理，G-Biosciences华东代理，G-Biosciences华西代理，G-Biosciences华北代理，

上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品供应，欲购从速（敬请咨询）

G-biosciences公司位于美国圣路易斯州。该公司以生产核酸与分子生物学产品起家。随着蛋白组学和功能基因组学时代的到来,该公司将开发的重点转向蛋白质组学研究,现已形成了整套的蛋白质研究产品路线,并且形成了新的子品牌G-biosciences。

F(ab)2 Fragmentation Kit 设计用于从 IgG 分子中生成和分离 F(ab)2 片段。该试剂盒使用我们的固定化胃蛋白酶树脂。胃蛋白酶是一种蛋白水解酶，通常用于从免疫球蛋白 G (IgG) 生成 F(ab)2 片段。胃蛋白酶具有切割铰链区附近的重链的能力。连接铰链区重链的一个或多个二硫键被保留，因此抗体的两个 Fab 区保持连接在一起，产生二价分子（包含两个抗体结合位点），因此命名为 F(ab) 2.轻链保持完整并与重链相连，而 Fc 片段被消化成小肽。固定化胃蛋白酶具有消除 F(ab)2 片段的酶污染。胃蛋白酶消化后，使用提供的蛋白 A 或蛋白 G 离心柱将 F(ab)2 片段与未消化的 IgG 和大的 Fc 片段分离。蛋白质 A 或 G 树脂结合 IgG 和 Fc 分子，并且由于旋转形式设计而快速收集 F(ab)2。此外，SpinOUT™ GT-600 脱盐柱确保初始抗体样品处于最佳状态对于 F(ab)2 碎片。 F(ab)2 Fragmentation 试剂盒针对小鼠、兔和人 IgG 进行了优化，使用 0.25-4mg/0.5ml 样品

G-Biosciences： F(ab)2 Fragmentation Kit786-864

储存条件套件在环境温度下运输。收到后在 4°C 下储存，请勿冷冻。

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其他试剂品牌供应AB Vector

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其他试剂品牌供应AB Vector

简要描述：AB Vector 成立于 2001 年，是设计和开发促进蛋白质折叠的新型载体。我们是高级真核表达系统的供应商，该系统在能够帮助大量表达的外源蛋白正确折叠的水平上合成分子伴侣的集合。其他试剂品牌供应AB Vector

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品牌 Tulip Biolabs 供货周期 两周
应用领域 环保,化工,生物产业,能源

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上海金畔生物代理AB Vector在中国的业务，AB Vector代理，AB Vector代理，AB Vector上海代理，AB Vector华南代理，AB Vector华东代理，AB Vector华西代理，AB Vector华北代理，上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品货号现货供应，*，欲购从速（敬请咨询）AB Vector 成立于 2001 年，是设计和开发促进蛋白质折叠的新型载体。我们是高级真核表达系统的供应商，该系统在能够帮助大量表达的外源蛋白正确折叠的水平上合成分子伴侣的集合。我们的伴侣技术使我们能够生产天然构象的困难蛋白质，并促进改进药物筛选和其他基于蛋白质的分析的开发。凭借这一优势，我们开发了基于我们专有的全基因组扩增 (WGA) 技术的先进的植入前基因检测分析 AB-PGT™。，

上海金畔生物科技有限公司，1.国内试剂耗材经销代理2.国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。3。提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。4.进出口货物代理服务。5.公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。


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人抗凝血素抗体（aPT Ab）酶联免疫检测试剂盒简介

发表于由

人抗凝血素抗体（aPT Ab）酶联免疫检测试剂盒简介

用    途：用于人血清、血浆及相关液体样本中抗凝血素抗体（aPT Ab）测定。

工作原理

本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中人抗凝血素抗体（aPT Ab）水平。向预先包被了抗凝血素抗体（aPT Ab）克隆抗体的酶标孔中加入抗凝血素抗体（aPT Ab），温育；温育后，加入生物素标记的抗APT AB抗体。再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中抗凝血素抗体（aPT Ab）的浓度呈正相关。

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1份

1份

封板膜

2片（48）

2片（96）

密封袋

1个

1个

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品：6400pg/ml

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

标准品稀释液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

链霉亲和素-HRP

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

生物素标记的抗APT AB抗体

0.5ml×1瓶

1 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

显色剂B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

终止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

浓缩洗涤液

（20ml×20倍）×1瓶

（20ml×30倍）×1瓶

2-8℃保存

需要而未提供的试剂和器材

1． 37℃恒温箱。

2． 标准规格酶标仪。

3． 精密移液器及一次性吸头

4． 蒸馏水，

5． 一次性试管

6． 吸水纸

注意事项

1． 从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差

3． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4． 为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

5． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6． 底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。

自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求

1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

操作程序

1. 标准品的稀释：(本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

3200pg/ml

5号标准品

120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液

1600pg/ml

4号标准品

120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液

800pg/ml

3号标准品

120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液

400pg/ml

2号标准品

120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液

200pg/ml

1号标准品

120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液

2. 根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样：1）空白孔，空白对照孔不加样品，生物素标记的抗APT AB抗体，链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各步操作相同；2）标准品孔：加入标准品50ul，链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体，故不加)；3）代测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗APT AB抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。

4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

7. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

8. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。

9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

操作程序总结：

1.准备试剂，样品和标准品

2.加入准备好的样品和标准品，生物素标记的二抗和酶标试剂，37℃反应60分钟

3.洗板5次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟

4.加入终止液

5.10分钟内读OD值

6.计算


检测范围：100pg/ml-3500pg/ml

保存：2-8℃。

有效期：6个月(2-8℃)。

Ancell抗CD64（FcRI）F（ab’）2的作用

发表于由

Ancell抗CD64（FcRI）F（ab’）2的作用

Ancell抗CD64（FcRI）F（ab’）2用于阻断调理血小板的吞噬作用

本研究着眼于抗血小板抗体糖基化对输血患者巨噬细胞介导的吞噬清除能力的影响。抗CD64单克隆抗体的F（ab’）2用作体外吞噬阻断对照。

“单核细胞来源的巨噬细胞用不同糖基化的抗HLA hIgG1调理的血小板的吞噬作用”Thijs L，Gesture Vidarsson等。


单核细胞来源巨噬细胞用不同糖基化的抗HLA hIgG1调理的血小板的吞噬作用

免疫介导的血小板难治性 （PR） 仍然是血小板输注情况下的一个重大问题，主要由针对 I 类人白细胞抗原 （HLA） 的同种异体抗体的存在引起。用这些同种抗体调理供体血小板可通过多种机制（包括抗体依赖性细胞吞噬作用 （ADCP））在输血后快速清除。有趣的是，并非所有同种异体免疫患者都会对不匹配的血小板输注产生PR，这表明患者之间HLA特异性IgG反应存在差异。以前，我们观察到抗HLA抗体的糖基化谱在PR患者之间差异很大，特别是在Fc半乳糖基化，唾液酸化和岩藻糖基化方面。在目前的研究中， 我们研究了不同Fc糖基化模式对单核细胞来源的人巨噬细胞吞噬调理血小板的影响，已知对补体沉积和FcγR结合的影响。我们发现，单核细胞来源的M1巨噬细胞对抗体和补体调理的血小板的吞噬作用不受这些定性IgG-聚糖差异的影响。

 

介绍

血小板输注是一种经常给药的治疗方法，可降低血小板减少症患者的死亡率和出血性并发症。血小板输注的一个主要问题是血小板难治性（PR），这是指多次血小板输注后血小板计数增加不足。PR 的发病率范围为 5%-15%，因患者特征和血小板制品制备而异 [报价单1–4].在大约 20% 的 PR 病例中，血小板清除是免疫介导的，主要是由针对 I 类人白细胞抗原 （HLA） 的同种抗体的存在引起，偶尔还有人血小板抗原 （HPA） [报价单5–9].用这些同种抗体调理供体血小板可在输血后不久通过抗体依赖性细胞毒性 （ADCC）、补体依赖性细胞毒性 （CDC） 和/或抗体依赖性细胞吞噬作用 （ADCP） 导致清除 [报价单10–16].目前对于大量输血的同种异体免疫患者，目前的主要管理策略是广泛匹配血小板输注产品，以防止 PR 和随后的更差临床结局 [报价单7–9].有趣的是，并非所有同种异体免疫患者都会因血小板输注不匹配而发生 PR [报价单17,报价单18]，提示患者之间HLA特异性IgG反应的定性特征差异。

所有 IgG 分子都含有保守的 N-位于Fc区位置297的连接聚糖，影响抗体的结构和功能。该聚糖由 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和甘露糖残基，可以通过岩藻糖，平分GlcNAc和最多两个半乳糖残基拉长，两者都可以被唾液酸残基覆盖。抗体Fc糖基化变化很大，之前在感染和同种异体免疫的情况下已经描述了改变的模式，已知这些改变会影响抗体效应功能，从而影响相关免疫应答的进展[报价单19–27].例如，岩藻糖残基的缺失导致抗体与FcγRIIIa/b的结合亲和力增加，这可能导致相关效应功能增加，例如ADCC和ADCP [报价单19–22,报价单25,报价单28,报价单29].此外，半乳糖基化与补体活化特别相关[报价单21,报价单24,报价单30,报价单31].我们和其他人最近表明，半乳糖基化通过增强的六聚化增加了抗体激活经典补体途径的能力，这反过来又增加了补体沉积和CDC活性[报价单23,报价单30].唾液酸化略微增强补体活化，进一步增强[报价单21,报价单23,报价单32]，而平分GlcNAc对补体活化和FcγR结合均无影响[报价单21].

之前，我们表征了在接受血小板输注的血液肿瘤患者中检测到的抗HLA I类抗体的糖基化谱[报价单33]和被诊断为 PR 的患者 [报价单20].抗HLA IgG特异性糖基化谱在患者之间差异很大。对于大多数患者，我们观察到与总IgG相比，HLA特异性IgG的Fc半乳糖基化和唾液酸化增加。此外，少数患者（35 名患者中有 2 名）也产生了岩藻糖基化水平极低的抗 HLA 抗体 [报价单33].

在同种异体免疫和 PR 的背景下，输注的血小板主要被认为是在用抗 HLA 或 -HPA 同种抗体调理后被脾脏中的单核巨噬细胞清除 [报价单8,报价单10,报价单11,报价单13,报价单34,报价单35].存在几种途径，其中吞噬细胞可以通过非调理和调理受体检测其吞噬作用靶标。非调理受体对于识别病原体相关分子模式（PAMP）和凋亡细胞至关重要，而调理受体识别用调理素靶向清除的细胞，例如IgG和补体成分。识别IgG的最重要和有效的吞噬受体是FcγRI（CD64），FcγRII（CD32）和FcγRIII（CD16）和补体受体3（CR3或CD11b / CD18），用于识别iC3b和C3d [报价单36,报价单37].脾巨噬细胞具有高表达的CR3，FcγRI，FcγRII和FcγRIII[报价单14,报价单38–41].当血小板被IgG或补体成分调理时，血小板变得容易受到脾巨噬细胞表达的吞噬受体的结合，从而导致随后的吞噬和破坏。血小板通过脾正弦的缓慢通过进一步增强了这一过程[报价单7,报价单11,报价单14].然而，补体系统受累以及血小板内在因素（如血小板凋亡和调理作用时活化）最近也被提出与 PR 中血小板存活率降低有关 [报价单12,报价单15,报价单35,报价单42–45].

有趣的是，对于抗体Fc糖基化对巨噬细胞使用不同糖基化的抗HLA同种抗体调理作用时血小板清除的影响知之甚少。特别是鉴于最近关于抗体Fc糖基化对FcγR结合和补体沉积的影响的发现，重要的是要更深入地了解抗体Fc糖基化对同种异体免疫时PR中涉及的清除机制的影响。在目前的研究中，我们研究了已知影响补体沉积和FcγR亲和力的不同Fc糖基化模式对单核细胞来源的人巨噬细胞调理化血小板吞噬的影响。使用单核细胞来源的M1巨噬细胞，因为它们具有高表达水平的FcγR和CR3， 人脾巨噬细胞也高度表达。我们发现，通过改变Fc糖基化谱增加补体沉积和/或FcγRIIIa/b亲和力并不影响人单核细胞来源的巨噬细胞对IgG调理化血小板的吞噬作用。 体外 型。

材料和方法

人类血液样本

在书面知情同意后，从匿名Sanquin献血者获得的血沉棕黄层中分离出单核细胞。血小板是从匿名健康志愿者的柠檬全血中分离出来的，并得到知情的书面同意。单核细胞和血小板不是从同一个个体获得的。所有程序均由Sanquin道德咨询委员会批准，并符合赫尔辛基宣言和荷兰法规。

重组糖工程抗HLA单克隆抗体的生产

本研究中使用的抗HLA单克隆抗体的生产和糖工程技术已被详细描述[报价单46–52].简而言之，所有抗HLA mAb可变区域的蛋白质序列用于组装编码全人IgG1和PG LA LA Fc突变体（P329 G，L234A和L235A）的pcDNA3.1表达载体，这些突变体不能结合补体和FcγR[报价单53].表达载体用于我们内部HEK Freestyle系统中重组抗体的生产。为了获得具有某些所需聚糖谱的抗体，在转染之前/期间使用化学抑制剂2-脱氧-2-氟-L-岩藻糖（2FF，碳合成物）来减少fc岩藻糖基化和5 mM D-半乳糖（Sigma Aldrich），并编码酶β-1，4半乳糖基转移酶1（B4GALT1）和β-半乳糖苷α-2，6-唾液酸转移酶1（ST6GALT1）的构建体，以增加半乳糖基化和唾液酸化。转染后6天纯化单克隆抗体，并进行液相色谱-质谱的IgG Fc糖基化分析[报价单46,报价单47,报价单54].

表面等离子体共振 （SPR）

如前所述，通过IBIS M×96（IBIS技术）上的表面等离子体共振（SPR）评估抗体与人FcγR类别的结合[报价单55,报价单56].使用连续流动微量观察仪（Wasatch Microfluidics）将所有C端生物素化的hFcγR点到单个SensEye G-链霉亲和素传感器（Ssens）上，该传感器允许同时测量每种抗体与所有hFcγR的结合亲和力。生物素化的hFcγR以三倍稀释度点样，hFcγRIIa-H131，hFcγRIIIa-F158，hFcγRIIIb-NA1和hFcγRIIIb-NA2从30 nM到1 nM，hFcγRIIa-R131和hFcγRIIb的稀释范围为10 nM至0.3 nM，在补充有0.075%吐温-80（VWR，M126-100 ml），pH 7.4的PBS中，hFcγRIIIa-V158的范围为100 nM至3 nM。每个样品后用10nM Gly-HCl，pH 2.0进行再生。解离常数（KD）使用Rmax = 500的平衡拟合计算。 所有结合数据的分析和计算均使用洗涤器软件版本2（生物软件）和Excel完成。

单核细胞分离和分化为单核细胞来源的巨噬细胞

使用CD14+磁性微珠分离（Miltenyi Biotec）从血沉棕黄层衍生的PBMC中分离单核细胞，随后冷冻直至如前所述进一步使用[报价单44,报价单57].采用流式细胞术测定单核细胞纯度，为>90%。单核细胞分化为单核细胞来源的巨噬细胞，如所述[报价单58].简而言之，单核细胞在第0天解冻并在24孔培养板（0.25×106 每孔单核细胞）在 IMDM 1640（龙沙）中存在 10 ng/mL 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF、CellGenix），含有 10% 胎牛血清 （Bodinco） 100 U/mL 青霉素和 100 U/mL 链霉素（均为 Gibco），CO 为 5% CO2 37°C. 细胞共培养9天，培养第3天加入新鲜培养基和GM-CSF。

血小板分离、标记和调理

通过离心枸橼酸全血，从富血小板血浆（PRP）中分离出具有已知HLA分型的健康志愿者的血小板 g 20分钟，使用前面描述的方法进行优化以避免血小板活化[报价单12,报价单16].此后，10 体积% ACD（酸性柠檬酸盐葡萄糖，85 mM Na3-柠檬酸盐·2 H2O， 71 mM柠檬酸·H2O和111mM D-葡萄糖）加入。PRP离心（850 g 8分钟），并用洗涤缓冲液（WB;36mM柠檬酸·H2O，103 mM NaCl，5 mM KCl，5 mM EDTA，5.6 mM D-葡萄糖，pH 6.5）。将血小板浓度设置为6×108 PBS中的细胞/ mL，并在室温下与3.75μM PKH26（西格玛奥尔德里奇）在辊组上孵育20分钟。加入10体积%FCS终止标记过程，用WB洗涤标记的血小板并重悬于PBS + 0.5%BSA中。5 × 106 将血小板与等体积的重组抗HLA抗体一起孵育，并在室温下混合补体足够的人血清30分钟。对于某些条件，将血清在56°C下预孵育30分钟以灭活补体。用PBS + 0.5%BSA + 5 mM EDTA洗涤血小板3次，并重悬于巨噬细胞培养基中。补体沉积（C3b）通过用抗补体C3b/iC3b-APC抗体克隆染色一小部分血小板来评估补体沉积（C3b）：3E7/C3b（1/250，生物传奇）

巨噬细胞对调理血小板的吞噬作用

对于吞噬作用测定，将调理的血小板在37°C下与同种异体巨噬细胞以1：40巨噬细胞：血小板比例孵育30分钟。对于某些条件，将巨噬细胞在室温下与10μg/ mL FcγR封闭抗体（抗CD16，抗CD32和/或抗CD64）和同种型对照预孵育30分钟。抗CD64（克隆10.1，阻断FcγRI）作为f（ab’）2片段从Ancell公司订购，而抗CD32（克隆AT10，阻断FcγRIIa/b/c），抗CD16（克隆3G8，阻断FcγRIIIa/b）和同种型（抗生物素）被克隆并生产为hIgG1 N297A P329 G，L234A和L235A，使它们无法结合C1q和FcγRs [报价单53].此后，用PBS洗涤细胞并使用130mMli多卡因（Sigma Aldrich）和10mM EDTA（默克）收获。收获后，将巨噬细胞保持在冰上，并用冰冷的PBS + 0.5%牛血清白蛋白（BSA，Sigma Aldrich）+ 2 mM EDTA（默克）洗涤，随后用冰冷的PBS洗涤。收获后，将细胞用3.7%多聚甲醛（Sigma Aldrich）在PBS中固定在室温下15分钟。接下来，用PBS + 0.5%BSA洗涤细胞，并使用APC标记的抗HLA-DR（克隆L243，BD Biosciences）和BV421标记的抗CD42a（克隆ALMA.16，BD Biosciences）染色20分钟在PBS + 0.5%BSA的室温下。用PBS + 0.5%BSA洗涤细胞，并使用BD LSR II流式细胞仪和成像流式细胞术（ImageStreamX Mark II成像流式细胞术，默克密理博）进行分析。使用Flowjo v 10.8.1分析流式细胞术数据; 基于FSC / SSC，单细胞和HLA-DR+对细胞进行门控，之后对PKH26标记的血小板和抗CD42a-BV421（PKH26+ CD42a-：吞噬;PKH+ CD42a+：结合的血小板;补充图S3A）。使用IDEAS v6软件分析成像流式细胞术数据，涉及对门细胞的纵横比强度/面积Ch01进行门控，随后对焦点细胞（梯度RMS Ch01）和HLA-DR+细胞进行门控巨噬细胞，之后对PKH26标记的血小板和抗CD42a-BV421阳性细胞进行门控（补充图S3B）。 使用IDEAS v6软件分析成像流式细胞术数据，涉及对门细胞的纵横比强度/面积Ch01进行门控，随后对焦点细胞（梯度RMS Ch01）和HLA-DR+细胞进行门控巨噬细胞，之后对PKH26标记的血小板和抗CD42a-BV421阳性细胞进行门控（补充图S3B）。 使用IDEAS v6软件分析成像流式细胞术数据，涉及对门细胞的纵横比强度/面积Ch01进行门控，随后对焦点细胞（梯度RMS Ch01）和HLA-DR+细胞进行门控巨噬细胞，之后对PKH26标记的血小板和抗CD42a-BV421阳性细胞进行门控（补充图S3B）。

统计学

统计分析在Windows版GraphPad Prism 8.02（263）中执行。使用普通单因素方差分析和邓尼特多重比较检验分析条形图。重要性水平设定为 p ≤ .05.*、**、*** 和 **** 表示统计显著性 p 分别为<.05、≤.01、≤.001和≤.0001。

结果

为了确定抗HLA同种抗体的Fc糖基化对补体和/或FcγR介导的血小板吞噬作用的影响，建立了监测人单核细胞来源巨噬细胞吞噬血小板吞噬作用的系统。糖基化谱改变的抗HLA单克隆抗体（mAb）（补充图S1A-C）如下所述[报价单46,报价单47]并进行基于液相色谱-质谱的IgG Fc糖基化分析，以确认预期的糖基化曲线（补充图S1D）。

将血小板与未修饰和糖工程化的抗HLA hIgG1 mAb（SN230G6、SN607D8和W6/32）在补体充足血清存在下孵育，从而实现抗体和补体调理。只有SN230G6和SN607D8抗体的组合导致强烈的C3b沉积，尽管泛HLA I类识别W6/32（补充图S1B）自行引起补体沉积（补充图S1E），与我们之前的观察结果一致[报价单47].半乳糖基化和唾液酸化升高的抗体显著增强了补体沉积。mAb的岩藻糖基化对补体沉积没有影响（补充图S1E）。PG LALA Fc突变体，不能结合C1q和FcγR[报价单53]，也没有热灭活血清（HI血清）导致C3b沉积（补充图S1F）。通过SPR阵列评估了这些糖工程抗体与人FcγR的结合，证实了FcγRIIIa/b的亲和力增加，而FcγRIIa/b的亲和力差异没有观察到（补充图S2）。

调理的PKH26标记的血小板与单核细胞来源的M1样巨噬细胞（图 1A).这些分化的巨噬细胞表达所有类别的FcγR（FcγRI（CD64），FcγRII（CD32），FcγRIII（CD16））以及CR3（CD11b / CD18）（图1B），所有参与吞噬作用的关键受体[报价单8,报价单11,报价单36,报价单37,报价单59].使用成像和常规流式细胞术测定血小板的内化（门控策略分别在补充图S3A和3B中描述）。血小板特异性标志物CD42a用于检测巨噬细胞外部的血小板（图1C).大多数血小板阳性（PKH+）巨噬细胞是CD42a-。此外，使用成像流式细胞术显示，大多数PKH+ CD42a +事件由同时具有吞噬作用（PKH + CD42a-）和结合（PKH+ CD42a +）血小板的巨噬细胞组成，表明总PKH+区室与血小板吞噬的定量相关（图 1D-E 和补充图S3A，下面板）。因此，通过常规流式细胞术分析PKH+巨噬细胞的总区室以评估血小板吞噬作用，因为排除PKH + CD42a +事件会导致吞噬效率的低估。

 

 




 

数字 1 的 2

图1. A) 监测调理化血小板吞噬作用的实验装置的示意图概述：用GM-CSF将CD14 +单核细胞培养9天，以分化为单核细胞来源的巨噬细胞（MQ M1）。此后，巨噬细胞在有和没有FcγR阻断剂的情况下预先孵育。来自HLA-A2+供体的新鲜分离的血小板用PKH26标记，并在补体充足或热灭活（HI）血清存在下与未修饰和糖工程化的抗HLA单克隆抗体预孵育，用于抗体和补体调理。将巨噬细胞和血小板洗涤并在37°C下共孵育30分钟，并通过流式细胞术和Imagestream进行分析 B) 通过流式细胞术分析的单核细胞来源巨噬细胞表面补体受体3（Cd11b / cd18）和FcγR（FcγRI，FcγRII，FcγRIII）的表达水平。 C-E） 血小板的内化是用 C) 常规和 D-E） 成像流式细胞术。抗CD42a-BV421染色与PKH26联合用于鉴定附着在细胞外部的血小板。显示了通过成像流式细胞术获得的指示象限的代表性图像。

Ancell抗CD64（FcRI）F（ab'）2的作用

与未调理的血小板（图 2A，B).以抗体浓度依赖性方式观察吞噬作用，吞噬细胞MQ的最大百分比为1μg/mL。尽管半乳糖基化和唾液酸化水平升高的糖工程mAb显著增强了血小板上的补体沉积（补充图S1E），但这些并没有导致更高水平的后续吞噬作用（图2C).此外，用非糖基化IgG调理，这增加了对FcγRIII的亲和力（[报价单21]和补充图S2），与未修饰的抗体（图2C).此外，将血小板与单独的未修饰抗HLA单克隆抗体SN230G6或SN607D8孵育可增强吞噬作用（补充图S4A-B），并且不受抗体Fc聚糖修饰的影响（补充图S4C-D）。与SN230G6 + SN607D8组合类似，与未调理的血小板相比，将血小板与泛HLA I类抗体W6/32孵育导致吞噬作用显着增加（图 2D，E).以抗体浓度依赖性方式观察吞噬作用，不受任何抗体聚糖修饰（图 2E，F).这些结果表明，观察到的吞噬作用主要不是通过补体受体或FcγRIIIa/b介导的。

图2. 单核细胞来源的巨噬细胞吞噬补体和抗体调理血小板 A） 绝对和 B) 在补体充足血清存在下，与不同浓度的未修饰的hIgg1抗HLA单克隆抗体（mAb）SN230G6 + SN607D8一起孵育的血小板吞噬相对水平 C) 在补体充足血清存在下，用未修饰和糖工程的hIgg1 SN230G6 + SN607D8 mAb预孵育的血小板之间的吞噬作用差异。 D) 绝对和 E) 在补体充足血清存在下，与不同浓度的未修饰的泛抗 HLA I 类 hIgg1 mAb W6/32 预孵育的血小板吞噬相对水平 F) 在补体充足血清存在下，用未修饰和糖工程hIgg1 W6 / 32 mAb预孵育的血小板之间的吞噬作用差异。 G-H） 在补体充足或热灭活 （HI） 血清存在下，用 1 μg/ml 未修饰或 PG LA LA Fc 突变抗 HLA mAb（SN230G6+SN607D8 或 W6/32）预孵育的血小板的相对吞噬水平 A-H） 吞噬作用水平（%）定义为PKH26+巨噬细胞部分（Q1 + Q2）的百分比。数据表示在2-4个独立实验中使用的2-5个不同单核细胞供体的2个技术重复的平均值和SD，对于每个独立实验，还使用了不同的血小板供体。数据点的颜色表示不同的单核细胞供体。对于标准化，如图所示，用1μg/ ml未修饰的抗HLAmAb孵育的血小板的吞噬作用水平设置为1。采用Dunnet多重比较检验的普通单因素方差分析进行统计分析。*p ≤ .05， ****p ≤ .0001 和 ns = 不显著 .

Ancell抗CD64（FcRI）F（ab'）2的作用

与此一致，用HI血清调理的血小板不会导致巨噬细胞吞噬作用减弱（图2G).然而，用PG LA LA Fc突变体进行血小板调理作用显着消除了吞噬作用（图2G），提示吞噬作用依赖于 FcγR，但与补体无关。在W6/32中观察到相同的趋势，其吞噬作用似乎不受HI血清（图2H).然而，必须注意的是，在补体充足血清存在的情况下，将血小板与未修饰的W6/32抗体孵育仅会导致低C3b沉积（补充图S1E）。

为了初步评估哪种FcγR可能参与抗HLA调理血小板的吞噬作用，使用了FcγR阻断抗体。虽然阻断FcγRII或FcγRIII导致吞噬作用的减少可以忽略不计，但单独阻断FcγRI或与FcγRII和FcγRIII联合阻断，导致单核细胞衍生巨噬细胞对调理血小板的吞噬作用降低（补充图S4E-F）。我们假设在阻断FcγRI时，对于用低岩藻糖化抗体调理的血小板，对FcγRIII的亲和力增加可能会变得明显。引人注目的是，FcγRI阻断抗体的存在似乎不会影响低岩藻糖基化W6/32抗体的吞噬作用（补充图S4G）。

 



Ancell抗人Fc受体抗体，Fab，F（ab’）2，偶联物



抗CD16 （FcgRIII）

抗CD32 （FcgRII）

抗CD64 （FcgRI）


Ancell 著名的专注做人种属的流试抗体提供商。


 

上海金畔生物科技有限公司

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  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。

 


 

 

 

Absolute Antibody抗体Ab02217-10.0-BT

发表于由

Absolute Antibody抗体

简要描述：Absolute Antibody抗体 Anti-Monkeypox Virus VACV-5C7，产品型号：Ab02217-10.0-BT。

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药

Absolute Antibody抗体  

Anti-Monkeypox Virus [VACV-5C7]，产品型号：Ab02217-10.0-BT。

Anti-Monkeypox Virus [VACV-5C7]，成立于2012年，其愿景是使所有人都能使用重组抗体技术。我们提供抗体测序，工程和重组生产等定制服务，以及*的重组抗体和Fc融合蛋白目录，这些目录被工程化为新的有用格式。我们不是创造全新的抗体（或抗体样分子），而是通过采用现有抗体（通常来自杂交瘤）建立目录，然后以优越的方式制造它们并通过工程改进其有用性。

上海金畔生物代理Absolute Antibody中国的业务，Absolute Antibody代理、Absolute Antibody上海代理、Absolute Antibody华南代理、Absolute Antibody华东代理、Absolute Antibody华西代理、Absolute Antibody华北代理，上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品供应，欲购从速（敬请咨询。）

上海金畔生物科技有限公司

1、国内试剂耗材经销代理。

2、国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

3、提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

4、进出口货物代理服务。

5、公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6、质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

7、公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。

Absolute Antibody抗体

F(ab) SHEEP/DIGOXIGENIN, ULTRA SMALL25411

发表于由

F(ab) SHEEP/DIGOXIGENIN, ULTRA SMALL

简要描述：F(ab) SHEEP/DIGOXIGENIN, ULTRA SMALL，产品型号：25411。
产品规格：
保质期：18个月
仅限隔夜送货：仅限隔夜送货 – 需要额外的运费。

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

F(ab) SHEEP/DIGOXIGENIN, ULTRA SMALL，产品型号：25411。

F(ab) SHEEP/DIGOXIGENIN, ULTRA SMALL，描述：

Aurion 超小型 Immunogold 试剂采用亚纳米金颗粒制备。这些粒子对吸附的抗体或检测分子的影响要小得多，因此缀合物表现得好像它们是未偶联的。结合高效且易于使用的 R-Gent SE-LM 和 SE-EM 银增强试剂，超小型 Immunogold 试剂是任何应用的。

与围绕较大颗粒构建的结合物相比，金颗粒尺寸的减小使超小免疫金试剂具有根本不同的特性。常规 Immunogold 试剂可以被认为是涂有蛋白质的颗粒，而超小型 Immunogold 试剂是涂有一个或多个金颗粒的蛋白质。有了这种结构，缀合物的整体尺寸以及空间位阻都降低了。

Aurion 提供平均金粒径为 0.8 nm 或更小的超小型免疫金试剂。这些超小的金颗粒可以在高角度环形暗场扫描 TEM 中直接观察到。然而，金信号通常在通过银增强增加粒径后可视化。这些试剂可用于电子和光学显微镜以及印迹实验。普遍适用性使得比较不同程序获得的结果变得容易。

AURION Ultra Small Immunogold Reagents 含有 60-80 µg 特定蛋白质/ml 的 IgG 偶联物。F(ab')2、Fab 和生物素化白蛋白偶联物含有等摩尔量的偶联蛋白。平均金簇直径小于 0.8 nm。

AURION Ultra Small Immunogold Reagents 与 AURION R-Gent SE-EM 或 SE-LM 银增强试剂结合使用，分别为电子显微镜和光学显微镜/免疫印迹开发。

试剂在含有 1% 牛血清白蛋白和 15 mM NaN 3的 PBS 中提供。如 Moeremans 等人，J. Immunol. 所述，使用点点测试系统确定每批次的活性。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

F(ab) GOAT/MOUSE, ULTRA SMALL25414

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F(ab) GOAT/MOUSE, ULTRA SMALL

简要描述：F(ab) GOAT/MOUSE, ULTRA SMALL，产品型号：25414。
产品规格：
保质期18个月
仅限隔夜送货 – 需要额外的运费。

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

F(ab) GOAT/MOUSE, ULTRA SMALL，产品型号：25414。

F(ab) GOAT/MOUSE, ULTRA SMALL，描述：

超小型 ImmunoGold 试剂

Aurion 超小型 Immunogold 试剂采用亚纳米金颗粒制备。这些粒子对吸附的抗体或检测分子的影响要小得多，因此缀合物表现得好像它们是未偶联的。结合高效且易于使用的 R-Gent SE-LM 和 SE-EM 银增强试剂，超小型 Immunogold 试剂是任何应用的。

与围绕较大颗粒构建的结合物相比，金颗粒尺寸的减小使超小免疫金试剂具有根本不同的特性。常规 Immunogold 试剂可以被认为是涂有蛋白质的颗粒，而超小型 Immunogold 试剂是涂有一个或多个金颗粒的蛋白质。有了这种结构，缀合物的整体尺寸以及空间位阻都降低了。

Aurion 提供平均金粒径为 0.8 nm 或更小的超小型免疫金试剂。这些超小的金颗粒可以在高角度环形暗场扫描 TEM 中直接观察到。然而，金信号通常在通过银增强增加粒径后可视化。这些试剂可用于电子和光学显微镜以及印迹实验。普遍适用性使得比较不同程序获得的结果变得容易。

AURION Ultra Small Immunogold Reagents 含有 60-80 µg 特定蛋白质/ml 的 IgG 偶联物。F(ab')2、Fab 和生物素化白蛋白偶联物含有等摩尔量的偶联蛋白。平均金簇直径小于 0.8 nm。

AURION Ultra Small Immunogold Reagents 与 AURION R-Gent SE-EM 或 SE-LM 银增强试剂结合使用，分别为电子显微镜和光学显微镜/免疫印迹开发。

试剂在含有 1% 牛血清白蛋白和 15 mM NaN 3的 PBS 中提供。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

Phenomenex耗材 7AB-G000-00-GZ0

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产品货号: 7AB-G000-00-GZ0 产品名称: Phenomenex耗材 7AB-G000-00-GZ0 产品品牌: Phenomenex（美国飞诺美）

Phenomenex耗材 7AB-G000-00-GZ0 Guard Column Deactivated Tubing 5m x 0.10mm Ea

详细介绍 美国Phenomenex公司提供多种色谱耗材产品，核-壳技术Kinetex超高效液相色谱柱、 Lux**固定相手性柱、传统C957柱如Gemini（双子星)色谱柱，Luna(月神)色谱柱，还有Synergi、Jupiter、Zebron等知名液相气相色谱柱；以及拥有**技术的SecurityGuard保护柱和Strata固相萃取柱，专业应用的Axia制备级色谱柱等 Guard Column Deactivated Tubing 5m x 0.10mm Ea

Human Serum Type AB Sterile Off-Clot Single Donor34007-0

发表于由

Human Serum Type AB Sterile Off-Clot Single Donor

简要描述：Human Serum Type AB Sterile Off-Clot Single Donor，产品型号： 34007-0。
捐赠者类型：单身的
物理状态：冷冻液体
贮存：在或 -20°C
应用：检测开发与验证、体外诊断、疫苗开发

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Human Serum Type AB Sterile Off-Clot Single Donor，产品型号： 34007-0。

Human Serum Type AB Sterile Off-Clot Single Donor，描述：

运输条件： 干冰
物种： 人类
应用说明： 适用于细胞培养。AB 型血缺乏可与培养细胞发生反应的 A 型和 B 型血型抗体。
保证： 只要产品按照提示的储存条件储存，产品质量保证在客户收到之日起 1 年内符合 Pel-Freez Biologicals 的规格。
测试： 提供给您设施的每个供体单位都已根据 FDA 检测乙型肝炎表面抗原、HIV 和 HCV 抗体、HIV-1 RNA、HBV DNA、HCV RNA 和梅毒的指南进行了测试。对于执行的每个测试，所有单位都产生了非反应性/阴性结果。所有血液均在美国 FDA 许可的中心从人类捐献者那里采集，并使用 FDA 批准的检测试剂盒进行检测。
产品属性： 场外交易 (OTC)
包装： 冻存管、塑料瓶
捐赠者性别： 任何一个
产品类型： 血清

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

Human Serum Type AB Sterile Male Off-Clot Pooled34006-0

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Human Serum Type AB Sterile Male Off-Clot Pooled

简要描述：Human Serum Type AB Sterile Male Off-Clot Pooled，产品型号：34006-0。
捐赠者类型：多种的
物理状态：冷冻液体
贮存：在或 -20°C
应用：分析开发和验证

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应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Human Serum Type AB Sterile Male Off-Clot Pooled，产品型号：34006-0。

Human Serum Type AB Sterile Male Off-Clot Pooled，描述：

运输条件： 干冰
物种： 人类
应用说明： 适用于细胞培养。AB 型血缺乏可与培养细胞发生反应的 A 型和 B 型血型抗体。
保证： 只要产品按照提示的储存条件储存，产品质量保证在客户收到之日起 1 年内符合 Pel-Freez Biologicals 的规格。
测试： 每个供体单位都根据 FDA 检测乙型肝炎表面抗原、HIV 和 HVC 抗体、HIV-1 RNA、HBovine DNA、HCV RNA 和梅毒的指南进行了测试。对于执行的每个测试，所有单位都产生了非反应性/阴性结果。所有血液均在美国 FDA 许可的中心从人类捐献者那里采集，并使用 FDA 批准的检测试剂盒进行检测。
产品属性： 场外交易 (OTC)
包装： 冻存管、塑料瓶
捐赠者性别： 男性
产品类型： 血清



上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。