Mirus新品上市 | RevIT™ AAV Enhancer, 提高AAV产量的又一利器!

腺相关病毒 (AAV) 是基因治疗中使用最广泛的传递机制。近年来,基于AAV病毒开发的基因疗法的研发及临床试验注册项目数量呈指数级增长,截至目前,美国FDA已批准五项AAV疗法,同时,用于基因治疗的AAV也是全球市场上最为昂贵的药物之一,其中售价最高的Hemgenix®,每剂价格约为350万美元。由于该疗法每剂量可能需要1011-1016载量的AAV病毒,如何实现高效的AAV生产,已成为工艺流程优化中的重要一环。

上海金畔生物科技有限公司代理的Mirus成立于1996年,在核酸递送领域深耕多年,TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂支持AAV及慢病毒(LV)从科研到GMP商业级别生产。不同于传统基于单组分的转染试剂(如阳离子聚合物聚乙烯亚胺,PEI),Mirus将专利的多聚物及脂质技术进行多重组合,针对不同细胞类型,不同应用场景,有着不同转染方案。

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Mirus专利递转平台Polymers + Lipids的多重、多功能组合

在病毒生产工艺方面,除了需要克服细胞递转过程中的多重阻碍,以实现更高效转染和更低细胞毒性;增强子的加入,还可大幅度提升多种血清型AAV病毒生产载量。但Mirus并没有止步于此,为了进一步提高下游生产中的AAV产量, 今年七月底上海金畔生物科技有限公司代理的Mirus发布用于AAV生产的RevIT™ AAV Enhancer,可搭配Mirus TransIT-VirusGEN® GMP 转染试剂或其他品牌转染试剂 (如PEI等)。基于HEK293悬浮细胞数据,相对于老版本AAV增强子,RevIT™ AAV Enhancer可将AAV基因组滴度提高1.2-4.9倍,并且使用更便捷,非常容易整合入现有的AAV生产工艺流程中。Mirus RevIT™ AAV Enhancer的推出,使得AAV上游生产成本进一步降低成为可能,进而降低基因治疗药物单剂量成本。

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RevIT™ AAV Enhancer

RevIT™ AAV Enhancer:可以将AAV基因组滴度提升1.2-4.9倍

实验结果显示,平行对比Mirus TransIT-VirusGEN®搭配老版本AAV增强子(VirusGen + Enh 1.0)和新版本RevIT™ AAV Enhancer (VirusGen + RevIT),针对AAV2、AAV8、AAV9不同血清型,基因组滴度分别有着1.6、4.9以及1.2倍提升。除此之外,在测试的所有血清型中,使用RevIT™ AAV Enhancer也在不同程度上收获了更高比例的实心率 (图1)。该结果表明,在搭配Mirus TransIT-VirusGEN®转染试剂时,新版本增强剂RevIT™ AAV Enhancer可显著提高AAV基因组滴度(GC/mL)及实心率(%Full Capsids)。

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图1 . 相比Mirus老版本增强子,加入RevIT™ AAV Enhancer后,可将AAV基因组拷贝数提升1.2-4.9倍,同时改善AAV病毒实心率。

RevIT™ AAV Enhancer具有广泛适配性,搭配其他品牌转染试剂(如PEI),AAV病毒基因组滴度有着显著提升

平行测试两个品牌转染试剂:Polyplus FectoVIR®转染试剂(“Polymer F”)以及Polyplus PEIpro®转染试剂(“Polymer P”),在加入Mirus RevIT™ AAV Enhancer,针对不同血清型AAV2、AAV8、AAV9,AAV基因组滴度分别有着1.7-2.0x、1.7-2.2x、2.2-2.3x提升(图2)。实验结果表明,在搭配其他品牌病毒转染试剂时,Mirus RevIT™ AAV Enhancer也可显著提高AAV病毒基因组滴度(GC/mL)。

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图2. “Polymer F”以及“Polymer P”病毒转染试剂搭配Mirus RevIT™ AAV Enhancer,针对不同血清型AAV,其病毒基因组滴度都有着显著提升。

 

RevIT™ AAV Enhancer具有广泛的适配性,可适用于不同培养基体系

Mirus TransIT-VirusGEN®转染试剂搭配RevIT™ AAV Enhancer,在不同品牌的病毒生产培养基中,具有很好的兼容性。测试使用293-VP 2.0细胞,搭配培养基类型包括VPM (Thermo Fisher) 及 BalanCD HEK 293 (Irvine Scientific)。实验结果表明,针对不同血清型AAV2、AAV5、AAV8、AAV9,RevIT™ AAV Enhancer在不同培养基实验条件下,AAV病毒基因组滴度提升方面并无显著差异(图3)。

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图3. 更换不同品牌病毒生产培养基,AAV病毒基因组滴度的增加无显著差异。

 

RevIT™ AAV Enhancer实验流程更灵活,在转染的不同时间窗口加入有着近似表现

为了进一步确认加入RevIT™ AAV Enhancer来提高AAV产量是否需要严格把控加入时间,平行测试了不同加入的时间点,包括转染前30min或60min、转染时及转染后。实验结果显示,相比于对照组,在不同时间点加入RevIT™ AAV Enhancer, AAV8病毒基因组滴度均有稳步的提升(2倍),并且病毒实心率也稳定保持在相同水平(图4)。该实验结果表明,RevIT™ AAV Enhancer加入时间点的灵活性,一定程度上简化了生产工作流。

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图4.  RevIT™ AAV Enhancer在转染的不同时间窗口加入有着近似表现

实验tips:如何进行病毒转染试剂评估?什么是病毒载量?如何检测?

更多详细信息,请查看Technical Resources中Virus Titer Reference Card ,更加详细地介绍了检测和计算病毒滴度的详细方法。

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相关产品信息及链接

产品名称

规格

货号

链接

RevIT™ AAV Enhancer

1.5 ml

MIR 8000

link

10 x 1.5 ml

MIR 8006

VirusGEN® AAV转染试剂及RevIT™ AAV Enhancer

For 1L of Culture

MIR 8007

For 10L of Culture

MIR 8008

TransIT-VirusGEN®转染试剂

0.3 ml

MIR 6703

link

0.75 ml

MIR 6704

1.5 ml

MIR 6700

5 x 1.5 ml

MIR 6705

10 x 1.5 ml

MIR 6706

30 ml

MIR 6720

TransIT-VirusGEN® GMP级别转染试剂

150 ml

MIR 6845-GMP

link

VirusGEN® AAV转染试剂(套装)

1 kit for 1 L of cell culture

MIR 6750

link

VirusGEN® GMP级别AAV转染试剂(套装)

1 Kit – for 50 L of cell culture

MIR 6815-GMP

link

VirusGEN® LV转染试剂(套装)

1 kit for 1 L of cell culture

MIR 6760

link

VirusGEN® GMP级别LV转染试剂(套装)

1 Kit – for 50 L of cell culture

MIR 6825-GMP

link

如何查找或选择适合的转染试剂?

请登录Mirus官网线上工具Reagent Agent®,支持超过1000种细胞类型、多种核酸类型转染试剂查询。

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Mirus产品年鉴

Mirus新品上市 | RevIT™ AAV Enhancer, 提高AAV产量的又一利器!

上海金畔生物科技有限公司代理的美国Mirus公司成立于1995年,是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司,同时也是该类试剂的主要供应商之一。其产品线涵盖化学转染试剂、电转染产品、病毒生产和转导产品,适用于基因功能研究、蛋白生产、病毒载体生产和动物模型构建等领域。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者,其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。

Mirus新品上市 | RevIT™ AAV Enhancer, 提高AAV产量的又一利器!

上海金畔生物科技有限公司是Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务,Mirus热销转染产品常备现货。如果您对上述产品感兴趣,欢迎致电上海金畔客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多产品信息。

高性价比电转仪Ingenio® EZporator® Electroporation System

重组基因表达、RNA干扰、基因编辑等研究应用都离不开核酸的转染,目前,能有效将核酸转染到哺乳动物或昆虫细胞的方法主要有三种,分别是化学转染、病毒转导和电穿孔,这三种方法各有特色(详见下表)。其中,电穿孔方法是满足既高效快速且适用各种难转细胞的转染方法,该方法既不受细胞类型的制约(如原代细胞研究),也没有对基因有效荷载大小的限制,缺点大概就是仪器成本普遍较高。那么问题来了,有没有既便宜又好用的电穿孔设备呢?答案是:当然有!

化学转染

病毒转导

电穿孔

使用材料

化学试剂,如TransIT系列转染试剂,磷酸钙、脂质体、聚合物等

病毒载体生产或包装细胞系

电穿孔仪、电转杯和电转缓冲液

作用机理

化学转染试剂与核酸形成复合物,然后与细胞表面电荷相互作用,经内吞进入细胞

利用病毒载体,通过病毒感染将核酸导入细胞内

通过外加电场增加细胞膜的通透性

操作流程

在细胞中加入转染试剂与核酸的复合物

先转染细胞生产病毒载体,收获和纯化载体后再感染靶细胞

将细胞悬浮在缓冲液中并施加电脉冲

操作时间

很短

数天

很短

主要成本

化学试剂

时间,化学试剂

电穿孔设备

主要优势

方便

转染效率高,同时满足体外和体内转导,包括休眠细胞

适用于难转染的细胞

上海金畔生物科技有限公司代理的Mirus品牌推出的Ingenio® EZporator® Electroporation System就是这么一款专为研究人员开发的简单高效且性价比超高的电穿孔系统,适用于多种哺乳动物细胞和昆虫细胞的转染,满足基因表达、RNA干扰、稳定细胞系构建以及CRISPR/Cas基因编辑等应用,为研究者提供了一种成本低且收益高的电转染解决方案。

高性价比电转仪Ingenio® EZporator® Electroporation System

Ingenio® EZporator® Electroporation System

Ingenio® EZporator®转仪配套专属电转染试剂Ingenio® Electroporation Kits,同样是超高性价比之选该试剂盒内含电转缓冲液与电转杯等耗材,能在充分发挥Ingenio® EZporator®电转仪效率的基础上更好的保护细胞活性,此外,Ingenio®电转试剂盒还是一套开源系统,不仅适配Mirus的Ingenio® EZporator®电转仪,还适用于市面上常见的Lonza-Amaxa®,Bio-Rad®以及Harvard BTX®等品牌的电转仪,给已经拥有电转仪的客户提供了另一种高性价比选择。

高性价比电转仪Ingenio® EZporator® Electroporation System

Ingenio® Electroporation Kits

与市面上充斥的各种繁琐复杂的仪器相比,Ingenio® EZporator®电转仪简直是一股清流,不仅外观设计简洁,就连操作也延续了一贯的极简风格。不仅如此,Mirus的研发团队还针对不同的细胞系进行了电转条件优化,提供了一套非常详细的电转染条件参考使用者可以直接抄作业,不需要进行复杂的电转染条件摸索,非常贴心!

Ingenio® EZporator®电转仪操作步骤

1. 将机器各部件连接好,在电转杯中加入适当细胞与电转缓冲液(参照操作手册)。
2. 开机确认面板在“READY”状态,用电压调节旋钮调节到适当电压和模式(哺乳动物细胞用低压LV模式,设置电压条件参照操作手册),将电转杯放入电转槽内并盖好安全盖。
3. 按下Pulse按钮,机器开始充电并发出电转脉冲,此时会听到电脉冲发出的声音。
4. 记录峰值电压(Vp)和时间常数(t)。
5. 取出细胞进行正常培养和后续实验。
6. 电转程序结束后,按Pulse按钮或者旋转电压调节钮即可返回“READY”状态,然后重复上述步骤进行其他样品的电转操作。

不同细胞电转染参数推荐

高性价比电转仪Ingenio® EZporator® Electroporation System

Ingenio® EZporator®电转仪实验数据

高性价比电转仪Ingenio® EZporator® Electroporation System

Jurkat E6-1 (A)、K562 (B)、Raji (C)和Raw 264.7 (D)细胞在不同电压条件下使用Ingenio®电转缓冲液和Ingenio®EZporator®电转仪,分别用0.2cm和0.4cm电转杯和EGFP报告基因观察电转效率。电穿孔后48h,用流式细胞术测定GFP阳性细胞百分比(柱状图)和细胞活率(点线图)。

Ingenio®优势特点

  • 功能:能将任何核酸分子转染到各种类型的细胞中,包括难转染细胞系、干细胞、原代细胞等。
  • 简单:仪器操作流程简单,仅需一款缓冲液即可通用所有类型细胞的电转染。
  • 灵活:提供不同类型的细胞电穿孔参数参考,让电转染条件优化更加简单。

产品详情

品名

货号

规格

Ingenio® EZporator®电转仪

Ingenio® EZporator® Electroporation System

MIR 51000

包含主机1个,电转杯槽1个,电源线3根

Ingenio®电转染试剂耗材

Ingenio® Electroporation Kits (0.4 cm cuvettes and cell droppers)

电转染试剂盒(含0.4cm电转杯与缓冲液)热销款

MIR 50113

25 reactions

MIR 50116

50 reactions

MIR 50119

100 reactions

Ingenio® Electroporation Kits (0.2 cm cuvettes and cell droppers)

电转染试剂盒(含0.2cm电转杯与缓冲液)

MIR 50112

25 reactions

MIR 50115

50 reactions

MIR 50118

100 reactions

Ingenio® Electroporation Solution

电转染缓冲液(多平台通用)

MIR 50111

25 reactions

MIR 50114

50 reactions

MIR 50117

100 reactions

Ingenio® Cuvettes(0.4cm电转杯)

MIR 50123

50 pk, 0.4 cm cuvettes

Ingenio® Cuvettes(0.2cm电转杯)

MIR 50121

50 pk, 0.2 cm cuvettes

如果您正在考虑配置一台高性价比的电转染系统,不妨选择Ingenio® EZporator®电转仪试试吧!关注上海金畔生物科技有限公司微信公众号(微信号jinpanbio),回复关键词“电转仪”,填写表单即可申请样机测试样机随8次规格电转染试剂耗材,方便快速开启电转染测试

 

高性价比电转仪Ingenio® EZporator® Electroporation System

美国Mirus公司成立于1995年,是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司,同时也是该类试剂的主要供应商之一。其产品线涵盖化学转染试剂、电转染产品、病毒生产和转导产品,适用于基因功能研究、蛋白生产、病毒载体生产和动物模型构建等领域。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者,其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。上海金畔生物科技有限公司是Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务,Mirus热销转染产品常备现货。如果您对上述产品感兴趣,欢迎致电上海金畔客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多产品信息。

全能型转染试剂TransIT-X2®,一支解决所有转染难题

转染试剂品类繁多,有转DNA的,有转RNA的,还有转不同细胞系专用的,一时间让做转染的小伙伴们都犯了选择困难症。有没有一种转染试剂可以同时解决这些问题呢?当然有!上海金畔生物科技有限公司代理的Mirus王牌转染试剂TransIT-X2®就是这样的全能型转染选手!

全能型转染试剂TransIT-X2®,一支解决所有转染难题

TransIT-X2® Dynamic Delivery System

TransIT-X2®转染试剂采用了一种先进的非脂质体配方,其主要成分为Mirus专利的全新聚合物,可高效的与核酸分子形成复合物,进而被细胞摄取并在胞内释放,以实现高效的核酸递送。TransIT-X2®不仅适用于质粒DNA、小RNA(siRNA/miRNA/pri-miRNA)、RNP等的转染,还能在不影响转染效率的情况下实现DNA与RNA的共转染。

全能型转染试剂TransIT-X2®,一支解决所有转染难题

用TransIT-X2®分别在293T/17、U2OS和NHDF细胞中共转Cas9质粒DNA与gRNA实现了高效的基因编辑

除了转染核酸类型广泛,TransIT-X2®还能够高效转染多种类型细胞,如贴壁细胞(如A549、MDCK、CHO-K1、Hep G2等)、悬浮细胞(如293-F等)、原代细胞(如原代HUVECs、原代HMEC等)和神经细胞(如SH-SY5Y、PC-12等)等。既能满足瞬时转染需求,也可用于稳定转染。

全能型转染试剂TransIT-X2®,一支解决所有转染难题

用TransIT-X2®将EGFP质粒转染到多种细胞系和原代细胞中都实现了高效表达。

此外,TransIT-X2®转染试剂采用非脂质体的配方,因此细胞毒性非常低,加之血清兼容性好,转染后的细胞即使不换液也能保持高活率生长,从此转染后再也不用等着换液了,大大减轻了转染实验的工作量。

TransIT-X2®产品特点:

  • 高效率:拥有卓越的广谱转染效率,适用于多种细胞系,包括部分难转染细胞。
  • 多功能:支持质粒DNA、siRNA/miRNA以及CRISPR/Cas9元件等的转染。
  • 新技术:Mirus专利技术全新型聚合物配方,非脂质体低毒更高效。

TransIT-X2®产品信息:

品名

货号

规格

TransIT-X2® Dynamic Delivery System

MIR 6000

1.5 ml

MIR 6004

0.75 ml

MIR 6005

5×1.5 ml

MIR 6006

10×1.5 ml

如果您正在被转染难题困扰,不妨找上海金畔生物科技有限公司免费申请TransIT-X2®试用装测试一下吧!关注上海金畔生物科技有限公司微信公众号“jinpanbio”,回复关键词“X2试用”,填写信息即有机会免费获取100μl TransIT-X2®转染试剂试用装。试用成功后还可享优惠折扣购买TransIT-X2®正装哦,快来试用抢购吧!

全能型转染试剂TransIT-X2®,一支解决所有转染难题

美国Mirus公司成立于1995年,是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司,同时也是目前该类试剂主要的供应商之一。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者,其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。

上海金畔生物科技有限公司是Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务。如果您对上述产品感兴趣,欢迎致电上海金畔客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多产品信息。

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

病毒载体技术的进步提高了基因和细胞治疗的安全性和有效性,全球已有多种基因和细胞治疗药物被监管机构批准上市。目前大多数基因/细胞治疗方法都是利用病毒载体来实现的,其中最常用的两种病毒载体——腺相关病毒(AAV)载体常被用于基因治疗,而慢病毒(LV)载体则常被用于基因修饰的细胞治疗。病毒载体通常是将2-4个质粒共转入HEK293细胞生产出的,而转染试剂是病毒载体生产的关键要素之一,对转染效率和功能效价有显著影响。第一代非病毒转染方法依靠简单的线性聚合物,如聚乙烯亚胺(PEI)或脂质体将DNA转入到细胞内,但其性能并不能完全满足病毒载体的大规模生产需求。虽然人工合成转染试剂在过去30年里取得了巨大的进步,但仍然难以逾越大自然在数十亿年进化出的依靠病毒传递基因的效率。因此,优化非病毒转染性能的最佳方法是尽可能模仿出病毒转运DNA的自然机制的试剂。

上海金畔生物科技有限公司代理的Mirus转染试剂就是利用自然基因传递机制作为其化合物库的设计灵感,从中筛选出适合病毒生产的混合配方,将转染试剂与核酸的静电相互作用、细胞吸附与内吞、胞内释放、基因表达效率和降低细胞毒性等几乎所有影响转染成功率的因素全部考虑在内。通过不懈的努力,Mirus开发出了一种全新的仿生转染技术——TransIT-VirusGEN系列转染试剂,它不仅仅是基于PEI或脂质体,而是采用多组分脂质聚合物纳米复合物(LPNC),能够高效地结合和包裹DNA,将其带入悬浮或贴壁的HEK293细胞中,然后将其从细胞核内释放,以便同时满足2-4个不同的质粒的表达,这种全新的转染试剂比单独使用PEI及其衍生聚合物或脂质体的转染效率和完整病毒生产效率都有显著提高。同时,Mirus还研发出了一种完全合成的(无动物源)转染增强剂(Enhancer),与TransIT-VirusGEN转染试剂搭配使用时,可以进一步提高病毒滴度。另外,为了满足病毒载体从研发到大规模生产不同阶段的需求,Mirus分别推出了R&D、SELECT和GMP三种级别的TransIT-VirusGEN转染系列产品,以适应不同阶段病毒载体的生产规模、效率以及法规要求。

实验表明,Mirus基于LPNC的转染试剂可以在不同的细胞培养平台(贴壁和悬浮)、生物反应器和培养基类型中提高病毒产量和功能性病毒滴度。与业内其他金标准相比,在不使用增强剂的情况下,病毒滴度至少可提高2-4倍。而在加入增强剂之后,在合适的培养条件下,病毒产量甚至能够提高10倍以上!(结果见下图1-5)

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

图1. 基于脂质聚合物纳米复合物(LPNC)和聚乙烯亚胺(PEI)配方的转染试剂用于腺相关病毒(AAV)和慢病毒(LV)载体生产的性能对比。分别用基于LNPC的TransIT-VirusGEN试剂(不含增强剂与含增强剂)、25kda PEI和基于PEI技术的竞争品牌A3转染试剂产生AAV(左)和LV(右)。以LPNC为基础的TransIT-VirusGEN转染试剂比以PEI为基础的转染试剂的病毒颗粒表达量高3-5倍。当TransIT-VirusGEN和增强剂同时使用时,比单独使用TransIT-VirusGEN大约提升了一倍。转染试剂 : DNA的比值为体积 : 质量。

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

图2. TransIT-VirusGEN转染试剂在不同细胞培养基中的表现。使用Thermo Fisher Scientific公司的病毒生产细胞进行转染,该细胞适应四种不同的培养基配方,分别来自Thermo Fisher公司的LV-MAX培养基、Expi293表达培养基、FreeStyle F17表达培养基和来自Irvine Scientific公司的BalanCD HEK293培养基。后一种培养基的AAV总效价较高,但在所有使用的培养基中,无论是否添加增强剂,TransIT-VirusGEN转染试剂均表现优异。DNA与转染试剂配比为2μg DNA :3μl转染试剂,转染细胞密度为2.0×106个/ml。生产LV也获得了类似的结果(数据未显示)。

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

图3. 分别在四种不同的转染条件和两个不同的收获时间,测定TransIT-VirusGEN转染试剂和PEI为基础的转染试剂A3的物理滴度和功能滴度。利用Expi293F细胞生产AAV2-GFP。转染48小时和72小时后收获的病毒分别测定功能滴度TU/mL(左)和物理滴度GC/mL(右)。结果显示用TransIT-VirusGEN转染试剂和增强剂转染收获的病毒效价最高。此外,TransIT-VirusGEN转染试剂比PEI为基础的转染试剂的表达更快。这些结果表明,对于病毒滴度的评估,功能滴度可能是一个更可靠的指标。因此,建议测试几个不同的收获时间点来确定最佳方案。

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

图4. 每种培养体系都应优化转染时的细胞融合度和接种密度。用DMSO+10%胎牛血清培养贴壁的HEK293t/17细胞生产慢病毒(1μg DNA/mL)。试剂盒包括TransIT-VirusGEN转染试剂、VirusGEN LV复合物形成溶液和VirusGEN LV增强剂。

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

图5. 在Expi293表达培养基中培养Expi293F细胞,使用VirusGEN AAV转染试剂盒,内含TransIT-VirusGEN转染试剂、VirusGEN AAV复合物形成溶液和VirusGEN AAV增强剂,在悬浮细胞培养中生产AAV。分别用2:1(左)和3:1(右)两种比例来确定理想的转染试剂和DNA配比(体积:质量)。每种转染体系都应对转染试剂: DNA配比及每毫升细胞所需的总DNA量进行优化。

TransIT-VirusGEN转染系列产品信息

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

 

高效率低成本的GMP转染方案,解决细胞和基因治疗生产中的关键问题!

美国Mirus公司成立于1995年,是世界上很早开发高效、低毒转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂主要的供应商之一。Mirus被公认为转染试剂开发的领跑者,其许多杰出成果获得世界公认与广大用户的好评。

上海金畔生物科技有限公司是Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供优质的产品与服务。如果您对上述产品感兴趣,欢迎致电上海金畔客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多产品信息或申请试用。

引用文献:

Addressing Critical Issues in Cell & Gene Therapy, Snow, J.

(https://www.mirusbio.com/assets/technical-documents/addressing-critical-issues-in-cell-gene-therapy.pdf)

六月新品上市,先睹为快

Mirus新品电转仪及配套产品上市

电转仪 Ingenio® EZporator® Electroporation System (货号MIR 51000)

六月新品上市,先睹为快

一款操作简单,性价比高,可以高效转染哺乳动物细胞和昆虫细胞的开放型电转染平台。

产品特点:

  • 适用于任意细胞系的转染,尤其是常规方法难以转染的细胞,如原代细胞、干细胞、神经细胞等;

  • 仅需一款电转液就可以用于各种细胞,方便高效且经济实惠;

  • 程序可灵活调节,便于针对不同细胞优化最佳电转条件;

  • 仪器附赠电转液和电转杯,可以做8次电转染实验。

电转染试剂(盒)及耗材

六月新品上市,先睹为快 六月新品上市,先睹为快

适用仪器:Ingenio® EZporator®,Lonza Amaxa®,BioRad,Nucleofector® II/2b,Harvard-BTX® 等,基本覆盖常用电转仪品牌。

产品特点:

  • 相比仪器原装配套试剂盒,价格便宜货期稳定;

  • 转染效率不错;

  • 对细胞有保护作用;

  • 适用范围:用常规方法难转染的细胞系,如神经细胞、原代细胞或干细胞等,转染效果显著。



Phyrtotech新品培养基上市

X6 Medium(货号:X8458)

葡萄维持培养基,根据2001年V.vinifera L. cv.Thompson Seedless发表文章而制定。

BDS Basal Medium(货号:B1459)

B5改良培养基,包含Dustan和Short在1977年发表文章中提到的大量和微量元素,可用于洋葱组织培养。

BABI Basal Medium(货号:B1471)

B5改良培养基,包含Greenway在2012年发表文章中提到的大量元素、微量元素和维生素。可用于玉米、水稻、棉花、烟草、洋葱和覆盆子等多种植物组织培养。

Mirus与Mirus Bio中国一级代理|

上海金畔生物科技有限公司是Mirus中国代理,Mirus代理,Mirus北京代理,Mirus上海代理,Mirus成都代理,Mirus广州代理,Mirus一级代理,Mirus全国代理

Mirus Bio公司是世界上早期开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂主要的供应商之一。Mirus Bio的大部分转染试剂可以在含有血清的培养基中进行转染,省去了更换培养基的麻烦。

TransIT-L1是Mirus产品的王牌,自1995年开发出来就申请了美国专利(US 5,744,335)。该项专利技术后来License给了Roche公司,以Fugene 6的品牌对外销售。

TransIT-TKO & siQUEST转染试剂是常规siRNA转染试剂的王牌,与脂质体介导的转染试剂相比,该转染试剂可以高效转染siRNA,并且极大地降低了细胞的损伤程度。该试剂与siRNA混合转染细胞时,可以特异性剔除某些基因的表达,用于siRNA介导的基因沉默现象的研究。

TransIT-Oligo转染试剂是即用型试剂,可以高效地将各种类型的寡聚核苷酸和寡聚脱氧核苷酸转染至受体细胞中。

此外,Mirus Bio还开发了专门针对特殊细胞的体外转染试剂,例如分别针对Jurkat,COS,3T3等细胞的转染试剂。

Mirus Bio的科学家们新近开发了一种新的DNA转染试剂:TransIT TM-2020 Transfection Reagent。TransIT TM可在多种类型的细胞(包括难转染细胞)中实现高表达。

上海金畔生物科技有限公司是Mirus中国代理,Mirus代理,Mirus北京代理,Mirus上海代理,Mirus成都代理,Mirus广州代理,Mirus经销商

Mirus新品重磅出击

转染江湖风起云涌,群雄纷争不断。近年来,病毒载体在基因/细胞治疗领域的广泛应用,让市场对病毒包装的质量和效率要求日益提升。Mirus经历两年闭关修炼,专攻AAV与Lentivirus病毒载体包装制备的新产品TransIT?-VirusGEN? Transfection Reagent终于问世,与各路转染高手过招,精彩纷呈。欲知详情,且看下文分解。

1.TransIT?-VirusGEN?招式解析
TransIT?-VirusGEN? 依然采用Mirus专利多聚物转染方法,无动物源成分,主要针对腺相关病毒(AAV)包装而研发,对部分慢病毒(Lentivirus)包装系统也有很强优势,这两种病毒都需要HEK 293细胞系生产,所以该转染试剂适用于包括悬浮和贴壁的各种类型HEK 293细胞系,能大幅提高转染效率和病毒产量,从而在有限的时间和资源里实现较大收获。

2.AAV包装实战分析
Mirus新品重磅出击
在相同培养条件下,用不同转染试剂分别在悬浮的293-F和贴壁的293T/17两种细胞系共转pAAV-hrGFP, pAAV-RC, and pAAV-Helper三种质粒包装AAV重组病毒,然后利用GFP标签在HT1080细胞上检测AAV滴度。结果显示,不论是悬浮还是贴壁293细胞系,采用TransIT?-VirusGEN?转染产出的AAV滴度远远高于其他几款转染试剂。

3.慢病毒包装实战分析
Mirus新品重磅出击
在相同培养条件下,用不同转染试剂分别在悬浮的293-F和贴壁的293T/17两种细胞系转染pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP? 穿梭质粒 和慢病毒包装质粒Mix powered(MISSION?)包装Lentivirus重组病毒,然后利用GFP标签在293T/17细胞上检测Lentivirus滴度。结果显示,不论是悬浮还是贴壁293细胞系,采用TransIT?-VirusGEN?转染产出的重组慢病毒滴度都远远高于其他几款转染试剂。

4.转染体系放大可提高AAV产量
Mirus新品重磅出击
采用TransIT?-VirusGEN?在6孔板和250mL培养瓶中转染293-F悬浮细胞系包装AAV,在6孔板和10cm平皿中转染293T/17贴壁细胞系包装AAV,两组实验在不同大小培养体系产出的重组病毒滴度比较结果显示,当体系从6孔板→250mL培养瓶(或6孔板→10cm平皿)放大后,病毒产量也会相应提升20%左右,表明该转染试剂适用于包装重组病毒的工艺放大。

产品规格
Mirus新品重磅出击
上海金畔生物科技有限公司作为Mirus中国区代理,始终秉承着专业、严谨的态度为客户提供最好的产品与最优质的服务,Mirus热销产品常备现货,全国客服热线021-50837765,欢迎随时咨询订购!

“星”品推荐|十二月优选


Mirus品牌

Mirus全能型转染试剂TransIT-X2® Dynamic Delivery System

“星”品推荐|十二月优选

美国Mirus王牌转染试剂TransIT-X2® Dynamic Delivery System不仅延续了TransIT系列转染试剂一贯的低细胞毒性特点,还拥有更强大转染功能。其采用了Mirus创新的聚合物系统,能高效地将DNA和RNA转染到细胞内,专门克服转染过程中遇到的各种疑难杂症,是一款全能型转染试剂。

产品特点:

      高效率:TransIT-X2®拥有卓越的广谱转染效率,适用于多种细胞系,包括许多难转染细胞。

      多功能:支持质粒DNA、siRNA/miRNA以及CRISPR/Cas9元件等转染。

      新技术:Mirus专利技术全新型聚合物配方,非脂质体更加低毒高效。

产品信息:

品名

货号

规格

TransIT-X2® Dynamic Delivery System

MIR 6000

1.5 ml

MIR 6004

0.75 ml

MIR 6005

5×1.5 ml

MIR 6006

10×1.5 ml


Pfanstiehl品牌

M-109-7, D-Mannitol, High Purity, Low Endotoxin – Low Metals,USP/EP/JP/ChP

产品特点:

  • 高纯度,低内毒素,注射级
  • 低金属元素含量,远低于ICHQ3D标准
  • 符合美国、欧洲、日本及中国药典
  • USFDADMF号:32464;中国CDE登记号:20190000351

甘露醇作为辅料应用包括但不限于:

  • 增加蛋白药物稳定性;
  • 增加疫苗产品稳定性;
  • 冻干和喷雾干燥制剂配方等。


Jena Bioscience品牌

cGAMPs: 一个重要的第二信使
cGAMPs是环状的二核苷酸,由ATP和GTP环化而成,迄今而至,在自然界中已经发现了两种cGAMPs:-2′,3′-cGAMP和-3′,3′-cGAMP
用途:

  • 一种新型的疫苗佐剂
  • 可用于核酸第二信使调节生理过程的研究
  • 用于环二核苷酸信号干扰的研究
  • 用于天然免疫研究,如:DNA诱导I型干扰素生产机制

2′,3′-cGAMP(货号:NU-249S)

“星”品推荐|十二月优选

  • 由ATP和GTP经过GMP-AMP 合成酶环化而成
  • 被认为是多细胞动物的第二信使
  • 能触发哺乳动物细胞的先天免疫反应

3′,3′-cGAMP(货号:NU-986S)

“星”品推荐|十二月优选

  • 由ATP和GTP经二核苷酸环化酶合成
  • 是调节细菌毒性的重要信号分子
  • 能触发哺乳动物细胞的先天免疫反应


Phytotech品牌

1、N6培养基(货号:C167)

N6培养基是1974年中科院植物所朱至清等为水稻等禾谷类植物花药培养而设计的。其特点是成分相对比较简单,但KNO3和(NH4)2SO4含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药、细胞以及原生质体培养。增加2,4-D等植物生长素类似物之后还可以用于愈伤组织的诱导。

2、吲哚丁酸IBA(货号:I538)

吲哚丁酸IBA溶于丙酮、乙醚和乙醇等有机溶剂,难溶于水。主要用于插条生根,可诱导根原体的形成,促进细胞分化和分裂,有利于新根生成和维管束系统的分化。促进植物主根生长,提高发芽率和成活率。是植物主根生长促进剂;常用于木本和草本植物的浸根移栽,硬枝杆插,能加速根的生长,提高植物生根的百分率;也可用于植物种子的浸种和拌种,可提高发芽率和成活率。

CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理

NEW! CHOgro® Expression System- – 高效方便优质无忧的悬浮 O CHO  细胞瞬时转染表达系统
关键词: 细胞培养; 转染; 瞬时转染; 蛋白研究; 大量蛋白; 大量抗体; 高滴度; 新蛋白; 新基因; FreeStyle
™ MAX CHO Expression System;PEI;Mirus;TransIT-PRO Transfection Reagent;转染试剂;表达系统;
CHO 细胞系;悬浮细胞;CHO 悬浮细胞,细胞成团;细胞活性;高密度;成本效率;新药研发;药物筛选;
靶标发现;生物制药
CHOgro® Expression System 是一款针对 CHO 悬浮细胞进行瞬时转染并获得到高滴度蛋白的理想工具。是
Mirus 公司最新为 CHO 悬浮细胞特定研制,通过对转染中各重要参数,包括细胞密度,转染试剂,培养基配
方和培养温度等,进行不断优化所开发,最后研发的整套系统简化了瞬时蛋白表达的过程,实现了 CHO 细
胞的稳健生长和高效转染,尤其适用于生物制药 CHO 表达系统蛋白表达优化。CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理
CHOgro® Expression System m  主要特点
  高效–简单的工作流程就可获得高滴度的蛋白
  方便–快速适应 CHO 细胞系
  优质–转染后细胞保持高密度生长且细胞成团现象极少
  无忧–无动物源成分
CHOgro® Expression System m  与市场中其他产品比较的优势
CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理
图 1. CHOgro®
Expression System 更高的细胞密度导致更高的蛋白滴度。
CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理
图 2. CHOgro® Expression System 使每个细胞分泌更多蛋白。
CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理
图 3. CHO 悬浮细胞在 CHOgro® Expression Media 中保持高密度生长。
图 4. 替换成 CHOgro®培养基可获得更高的蛋白产量。
CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理
图 5. CHOgro® Expression System 转染后出现极少的细胞成团现象。
CHO表达系统高效表达工具来自Mirus——中国一级代理
图 6. CHOgro® Expression System 同样优于线性 PEI 转染方法且成本效率高。以生产 150mg IgG 蛋白为例,
PEI 方法需要 CHOgro 方法 4 倍的材料及 1.5 倍的人力成本。由于 PEI 方法需要更多培养瓶,所以就需要更
多的空间设置恒温培养箱。
CHOgro® Expression System m  组分明细及订购信息
品名  货号  规格
CHOgro Expression System  MIR 6260  1 Kit(下面为具体组分)
CHOgro 表达系统组分(单品可单独购买)
CHOgro Expression Medium  MIR 6200  2 x 1L (单品为 1 x1 L )
ComplexIT-PRO Medium  MIR 6210  1 x 100 ml
Poloxamer 188 Solution  MIR 6230  1 x 100 ml
L-Glutamine MIR 6240  1 x 100 ml
TransIT-PRO Transfection Reagent MIR 5740  1 x 1 ml
相关实验对照产品
Human IgG1 Expression Control  MIR 6250  100 ug
备注:试剂盒不仅可以整套购买,而且其中各组分也可单独购买。单独购买 CHOgro Expression Media 规格为 1L。
另 Human IgG1 Expression Control 可以做为转染实验中的阳性对照购买。
Mirus 公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应
商之一。Mirus 的生物学家利用他们在核酸化学、细胞及分子生物学领域的专长,建立了创新的技术和产品
开发,这些技术和产品被广泛应用于生命科学研究。Mirus 被公认为是核酸研究试剂开发的领跑者,其杰出
成就受到世界公认。
Mirus 系列广谱转染试剂
LT1  2020  siQEST  TKO  mRNA  X2  Ingenio
转染物  DNA  DNA  siRNA/miRNA  siRNA/miRNA  RNA  DNA,RNA  DNA,siRNA
低毒性  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES
血清兼容  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES
即用型  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES
广谱型  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES
无动物源成分  NO  YES  YES  YES  YES  YES  YES
敲除  N/A  N/A  YES  YES  N/A  N/A  YES
共转染  N/A  N/A  N/A  YES  N/A  YES  YES
还有更多特定细胞系专用转染试剂,可致电全国客服热线  400- – 050- – 4006
上海金畔生物科技有限公司是 Mirus 中国一级代理,我们将 Mirus 的最新技术与服务传递给广大客户,产
品详情与最新市场活动欢迎致电上海金畔全国客服热线  4000504006

NEW! CHOgro® Expression System- – 高效方便优质无忧的悬浮 O CHO  细胞瞬时转染表达系统关键词: 细胞培养; 转染; 瞬时转染; 蛋白研究; 大量蛋白; 大量抗体; 高滴度; 新蛋白; 新基因; FreeStyle™ MAX CHO Expression System;PEI;Mirus;TransIT-PRO Transfection Reagent;转染试剂;表达系统;CHO 细胞系;悬浮细胞;CHO 悬浮细胞,细胞成团;细胞活性;高密度;成本效率;新药研发;药物筛选;靶标发现;生物制药CHOgro® Expression System 是一款针对 CHO 悬浮细胞进行瞬时转染并获得到高滴度蛋白的理想工具。是Mirus 公司最新为 CHO 悬浮细胞特定研制,通过对转染中各重要参数,包括细胞密度,转染试剂,培养基配方和培养温度等,进行不断优化所开发,最后研发的整套系统简化了瞬时蛋白表达的过程,实现了 CHO 细胞的稳健生长和高效转染,尤其适用于生物制药 CHO 表达系统蛋白表达优化。CHOgro® Expression System m  主要特点  高效–简单的工作流程就可获得高滴度的蛋白  方便–快速适应 CHO 细胞系  优质–转染后细胞保持高密度生长且细胞成团现象极少  无忧–无动物源成分CHOgro® Expression System m  与市场中其他产品比较的优势图 1. CHOgro®Expression System 更高的细胞密度导致更高的蛋白滴度。图 2. CHOgro® Expression System 使每个细胞分泌更多蛋白。图 3. CHO 悬浮细胞在 CHOgro® Expression Media 中保持高密度生长。图 4. 替换成 CHOgro®培养基可获得更高的蛋白产量。图 5. CHOgro® Expression System 转染后出现极少的细胞成团现象。图 6. CHOgro® Expression System 同样优于线性 PEI 转染方法且成本效率高。以生产 150mg IgG 蛋白为例,PEI 方法需要 CHOgro 方法 4 倍的材料及 1.5 倍的人力成本。由于 PEI 方法需要更多培养瓶,所以就需要更多的空间设置恒温培养箱。CHOgro® Expression System m  组分明细及订购信息品名  货号  规格CHOgro Expression System  MIR 6260  1 Kit(下面为具体组分)CHOgro 表达系统组分(单品可单独购买)CHOgro Expression Medium  MIR 6200  2 x 1L (单品为 1 x1 L )ComplexIT-PRO Medium  MIR 6210  1 x 100 mlPoloxamer 188 Solution  MIR 6230  1 x 100 mlL-Glutamine MIR 6240  1 x 100 mlTransIT-PRO Transfection Reagent MIR 5740  1 x 1 ml相关实验对照产品Human IgG1 Expression Control  MIR 6250  100 ug备注:试剂盒不仅可以整套购买,而且其中各组分也可单独购买。单独购买 CHOgro Expression Media 规格为 1L。另 Human IgG1 Expression Control 可以做为转染实验中的阳性对照购买。Mirus 公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。Mirus 的生物学家利用他们在核酸化学、细胞及分子生物学领域的专长,建立了创新的技术和产品开发,这些技术和产品被广泛应用于生命科学研究。Mirus 被公认为是核酸研究试剂开发的领跑者,其杰出成就受到世界公认。Mirus 系列广谱转染试剂LT1  2020  siQEST  TKO  mRNA  X2  Ingenio转染物  DNA  DNA  siRNA/miRNA  siRNA/miRNA  RNA  DNA,RNA  DNA,siRNA低毒性  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES血清兼容  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES即用型  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES广谱型  YES  YES  YES  YES  YES  YES  YES无动物源成分  NO  YES  YES  YES  YES  YES  YES敲除  N/A  N/A  YES  YES  N/A  N/A  YES共转染  N/A  N/A  N/A  YES  N/A  YES  YES还有更多特定细胞系专用转染试剂,可致电全国客服热线  400- – 050- – 4006上海金畔生物科技有限公司是 Mirus 中国一级代理,我们将 Mirus 的最新技术与服务传递给广大客户,产品详情与最新市场活动欢迎致电上海金畔全国客服热线  400- – 050- –

“星”品推荐|十一月优选

Mirus品牌


昆虫转染试剂TransIT®-Insect Transfection Reagent

一款能够高效瞬转昆虫细胞并获得高滴度杆状病毒的转染试剂。

昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)属于真核细胞表达系统,不仅能满足蛋白简单的翻译后修饰,而且具有蛋白产量高,操作简单等独特的生物学特性,日益受到广泛应用。TransIT®-Insect Transfection Reagent是Mirus开发的一款专用于各种昆虫细胞系的转染试剂,它能将质粒DNA高效转染到多种昆虫细胞内,是做杆状病毒表达的一种理想的转染方法。

产品特点:

      适用于多种昆虫细胞转染,包括常用的Sf9、High FiveTM和S2等;

      能收获更高滴度的杆状病毒,从而减少转染工作量,提高实验效率;

      血清兼容,转染后的昆虫细胞能在有血清条件下培养;

      无动物源成分和非脂质体配方,较大程度降低转染的细胞毒性;

      超高性价比。

产品信息:

品名

货号

规格

TransIT®-Insect Transfection Reagent

MIR 6100

1 ml

MIR 6104

0.4 ml

MIR 6105

5×1 ml

MIR 6106

10×1 ml



Cell Biolabs品牌

QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit(Lentivirus-Associated HIV p24ELISA Kit,货号VPK-107,96 tests)

ELISA检测慢病毒相关p24蛋白,排除游离p24蛋白干扰,让病毒滴度检测更精准!

基于人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的慢病毒载体,不仅能感染分裂和非分裂细胞,还能将其携带的外源基因整合到宿主细胞基因组内稳定表达,已成为广泛应用于基因生物治疗领域的重要病毒载体之一。用ELISA方法检测HIV结构蛋白p24是最常用的慢病毒物理滴度检测方法。然而通常情况下,从细胞中收获的慢病毒上清液中含有大量游离的p24蛋白(free p24),它们的存在对ELISA检测结果造成很大误差。为了让ELISA的检测结果更加准确,Cell Biolabs推出了慢病毒相关p24检测试剂盒即Lentivirus-Associated HIV p24 ELISA Kit(货号VPK-107),该产品先采用专利的pull-down技术将收获上清中完整的慢病毒粒子分离出来,去除游离p24干扰,然后再用ELISA方法精确定量慢病毒相关的p24蛋白,避免了传统方法因游离p24的存在而导致的误差,让物理检测滴度更能反映慢病毒的生物滴度,提高ELISA检测结果的可参考性。

产品特点:

      专利技术分离病毒相关p24蛋白,去除游离p24干扰;

      较大程度降低传统方法导致的慢病毒滴度检测误差,结果更可靠;

      未纯化的慢病毒上清或者纯化后的慢病毒样品都适用。


Phytotech品牌

1、B5培养基(货号:G398)

B5培养基是1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵,这可能对不少培养物的生长有抑制作用。但从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜,例如双子叶植物特别是木本植物。

2、吲哚乙酸IAA(货号:I885、I364)

吲哚乙酸易溶于无水乙醇、醋酸乙酯、二氯乙烷,可溶于乙醚和丙酮。不溶于苯、甲苯、汽油及氯仿;不溶于水,其水溶液能被紫外光分解。使用纯品结晶配制时先溶于少量95%酒精,再加水溶解至适宜量。对植物生长具有两重性,植物不同部位对其敏感度不同,一般根大于芽大于茎;不同植物对其敏感度也不同。吲哚乙酸对植物抽枝或芽、苗等的顶部芽端形成有促进作用。吲哚乙酸处理还可改变细胞壁的弹性,使细胞的生长得以进行。


CygnusTechnologies宿主蛋白残留检测
Cygnus20多年宿主蛋白检测试剂盒以及方法学验证开发经验,HCP检测试剂盒受到全球客户和监管机构广泛认可。HCP试剂盒种类十分丰富,覆盖了重组蛋白药物、单克隆抗体、疫苗、细胞及基因治疗工艺中十多种常用表达系统。如CHO、E.Coli、毕赤酵母、Vero、HEK 293等。

Cygnus宿主蛋白残留检测试剂盒优势:

Ÿ   超过20年的宿主蛋白相关检测产品研发经验;

Ÿ   收到全球生物制药相关企业和监管部门认可;

Ÿ   具有专业技术的抗体制备生产流程,包括抗原的筛选和处理,免疫及亲和纯化等;

Ÿ   不同HCP检测试剂盒经过内部方法学验证;

Ÿ   生产的通用型试剂盒,在完整验证数据的支持下可用于药品申报整个流程;

Ÿ   操作简便,使用即用型标准品,只需一次洗板步骤。

New!代理转染试剂专家Mirus新品发布——昆虫细胞系专用转染试剂

常见体外重组表达系统分为原核表达系统和真核表达系统,原核表达系统主要为大肠杆菌表达,操作简便、周期短收益大及表达产物稳定,但是表达基因的相对分子质量有限,不宜过大,且缺乏翻译后加工、修饰等元件。真核细胞系统包括 CHO等哺乳动物细胞、酵母细胞和昆虫细胞等。昆虫细胞表达系统(即杆状病毒表达系统)具有高效表达,完善的转译后加工修饰,较易从无血清培养上清中纯化的蛋白,无内毒素污染等特点,日益受到人们的重视,逐渐应用到更多的领域中。

虽然昆虫表达系统具有高效表达的特性,但是在转染过程中转染效率也是一个重要影响因素,目前市场上大部分的转染试剂对于昆虫细胞系而言,转染效率均不太理想,转染效率低下,细胞毒性大是普遍存在的问题。美国转染试剂专家Mirus的研发团队经过精心研制,推出昆虫细胞系专用转染试剂TransIT®-Insect,该转染试剂适用于绝大多数昆虫细胞系的高效转染。

产品特点:

1. 适用广泛:Sf9, High Five™ and S2等多种表达系;
2. 高效:有利于提高杆状病毒在昆虫细胞内的产量;
3. 血清兼容型:TransIT®-Insect是一款非脂质体,无动物源性,无需更换培养基的转染试剂;
4. 性价比高:用量相对更少,一般推荐使用比例为1:2 (DNA质粒ug/转染试剂ul)

产品订购信息:

品名

货号

规格

TransIT®-Insect Transfection Reagent

MIR 6104

0.4 ml

TransIT®-Insect Transfection Reagent

MIR 6100

1 ml

TransIT®-Insect Transfection Reagent

MIR 6105

5 X 1 ml

TransIT®-Insect Transfection Reagent

MIR 6106

10 X 1 ml

更多信息可以点击:https://www.mirusbio.com/products/transfection/transit-insect-transfection-reagent

美国专业转染试剂研发公司Mirus成立于1995年,是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。Mirus的生物学家利用他们在核酸化学、细胞及分子生物学领域的专长,建立了创新的技术和产品开发,这些技术和产品被广泛应用于生命科学研究。Mirus被公认为是核酸研究试剂开发的领跑者,其杰出成就受到世界公认。其中王牌转染试剂TransIT-LT1以其高效、低度及高性价比的优点深受广大科研工作者的青睐,目前TransIT®系列转染试剂以用于检测了492种细胞系及原代细胞,超过1600篇SCI文章使用。

上海金畔生物科技有限公司作为美国Mirus中国一级代理,双方携手为国内科研工作者提供专业的转染试剂,同时,上海金畔生物科技有限公司也为广大客户提供免费试用装,欢迎您来电咨询和申请。

更有Mirus王牌高效低毒广谱转染试剂LT-1,2020,X2,TKO,siQUEST,特定细胞系专用转染试剂优惠热销,详情请咨询Mirus中国一级代理——上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765,欢迎广大客户来电咨询或者订购。

来自全球使用者的反馈信息:

“Our lab successfully tested TransIT®-Insect Transfection Reagent for generating recombinant baculovirus in insect cells. Using TransIT®-Insect with multiple BEVS we were able to generate high-titer baculovirus that resulted in consistently higher protein expression in High Five™ and Sf9 cells compared to Cellfectin® II (Life Technologies).”

-Dr. Linda Lua (Director), The University of Queenland – Protein Expression Facility

“Our lab tested TransIT®-Insect for virus production in Sf9 cells. It performed better than Cellfectin® II that we currently use for transfecting these cells. Cytopathic effects (CPE) of the baculovirus were observed after 5 days with as little as 0.5 µg DNA per well of a 6-well plate. When using Cellfectin® and other reagents, we haven’t seen any results using the same amount of input DNA.”

-Eric Carlin, Florida Gulf Coast University

NEW!——TransIT-X2™最新高效低毒广谱转染试剂来自转染试剂专家Mirus

还在为转染试剂对细胞毒性太大导致转染效率低下而发愁吗?
还在为寻找能同时转染DNA跟siRNA/miRNA的转染试剂而发愁吗?

美国转染试剂专家Mirus现发布最新转染试剂——TransIT-X2 Dynamic Delivery system,能同时帮您解决以上难题,提高转染效率的同时,大大节省了成本。

美国专业转染试剂研发公司Mirus成立于1995年,研发了TransIT®系列转染试剂,其中王牌转染试剂TransIT-LT1以其高效、低度及高性价比的优点深受广大科研工作者的青睐,目前TransIT®系列转染试剂以用于检测了492种细胞系及原代细胞,超过1600篇SCI文章使用。目前最新研发产品TransIT-X2 Dynamic Delivery system,拥有传统转染试剂更高更好的特性与优点:

高效性:对多种细胞系均具有更高的转染效率;

通用性:能同时转染DNA跟siRNA/miRNA;

低毒性:创新型配方,非脂质体、多聚合物转染试剂,对细胞毒性极低;

NEW!——TransIT-X2™最新高效低毒广谱转染试剂来自转染试剂专家Mirus

TransIT-X2 Dynamic Delivery system与Lipofectamine™2000对于不同细胞系的转染效果对比(3种转染试剂:DNA量比例梯度,常规荧光素酶检测转染效率)。通过对比,有20种细胞系使用TransIT-X2的效果要优于Lipofectamine™2000,其中有11种细胞系的转染效率是Lipofectamine™2000的2倍(‡标注)。

更多实验数据可以点击Mirus官网查看或咨询Mirus在中国一级代理——上海金畔生物科技有限公司。

New!全球第一款乳腺癌细胞专用转染试剂TransIT®-BrCa来自转染试剂专家Mirus

最新数据显示,全球约1/8的女性会被检出患有乳腺癌,在美国,女性罹患乳腺癌,占女性新发恶性肿瘤的30%。如此高的发病率引起了社会、医学工作者及科学家广泛重视,乳腺癌的科学研究也越来越深入和广泛。美国转染试剂专家Mirus为乳腺癌研究工作者特制研发了一款专门适合于乳腺癌细胞转染的高效低毒的转染试剂TransIT®-BrCa。
TransIT®-BrCa是全球第一款乳腺癌细胞专用转染试剂,在大多数乳腺癌细胞中均能达到非常高的转染效率,同时也延续了Mirus转染试剂的最传统特性—–对细胞产生的毒性极低。
具体优势特点如下:
1. 广谱型:在乳腺癌细胞MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453, MDA-MB-468 和 T47D中都能达到非常高的转染效率(见Fig.1);
2.高效性:相对于Lipofectamine® 2000和Fugene系列产品在乳腺癌细胞系中的转染效率更高(见Fig.2);
3. 低毒性:对细胞产生的毒性非常低;
4. 同样适合于乳腺癌细胞系的shRNA的转染;
另外,Mirus将TransIT®-BrCa的部分销售收入捐给乳腺癌研究基金会(The Breast Cancer Research Foundation),为全球乳腺癌的科学研究做贡献。

产品订购信息

品牌 品名 货号 规格
Mirus TransIT®-BrCa Transfection Reagent MIR 5504 0.4 ml
MIR 5500 1.0 ml
MIR 5505 5 X 1.0 ml
MIR 5506 10 X 1.0 ml

New!全球第一款乳腺癌细胞专用转染试剂TransIT®-BrCa来自转染试剂专家Mirus

Figure 1. TransIT-BrCa Transfection Reagent Yields High Efficiency Plasmid DNA Transfection
New!全球第一款乳腺癌细胞专用转染试剂TransIT®-BrCa来自转染试剂专家Mirus

Figure 2. TransIT-BrCa Transfection Reagent Exhibits Higher Luciferase Expression in Breast Cancer Cells Compared to Other Transfection Reagents
Mirus作为全世界最早研发高效低毒转染试剂的公司之一,在1995年创新研发了全球第一款高效低毒血清兼容型转染试剂—TransIT LT1,经过不断研究和完善,转染试剂不断更新发展,主要的转染试剂特性如下:

 

TransIT-LT1

TransIT-2020

TransIT-siQEST

TransIT-TKO

TransIT-mRNA

Ingenio

介绍

第一款高效低毒的转染试剂

LT1升级版,优于FuGENE HD,Lipofectamine 2000/LTX/Plus/CD

高效转染siRNA和miRNA

高效转染siRNA和miRNA的转染试剂,并适用于共转染siRNA与DNA

第一款适用于转染大分子mRNA试剂

高效电转液,适用于Amaxa,Bio-Rad和Harvared BTX等

转染物

DNA

DNA

siRNA和miRNA

siRNA和miRNA

RNA

DNA,siRNA

低毒性

YES

YES

YES

YES

YES

YES

血清兼容

YES

YES

YES

YES

YES

YES

即用型

YES

YES

YES

YES

YES

YES

广谱型

YES

YES

YES

YES

YES

YES

无动物源成分

NO

YES

YES

YES

YES

YES

敲除

N/A

N/A

YES

YES

N/A

YES

共转染DNA和siRNA

N/A

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YES

N/A

YES

更多转染试剂资料和数据可登陆www.mirusbio.com或者致电上海金畔进行查询。

 

代理最专业转染试剂专家Mirus——高效广谱低毒转染试剂TransIT®2020

       考虑到最高的效率并一定能得到最好的实验结果,许多商品化的转染试剂均称它们的产品具有高效率,但也具有一定的细胞毒性。因此,在分析特定的细胞信号转导通路时,可能由于诱导细胞凋亡或细胞应激反应,而使得出错误的结论。越来越多的文献报道表明,脂质体类型的转染试剂会参与细胞生理活动,如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节;如抑制ATP酶的活性;如与线粒体膜发生作用;转染siRNA造成脱靶效应等等,所以这类转染试剂会不同程度上引起基因表达的上调或下调。

具体可以参考文献更多请参考:
1. Inhibition of protein kinase C by cationic amphiphiles. Biochemistry.1992, 22; 31(37): 9025-30.
2. Inhibition of the ATPase activity of the catalytic portion of ATP synthases by cationic amphiphiles. Biochim Biophys Acta.2008, 1777(4):362-8.

       Mirus在成立之初就以其高效低毒的王牌转染试剂Trans LT1深受广大客户的亲睐,作为全球第一款高效低毒血清兼容型转染试剂,是一款非脂质体转染试剂,相比传统转染试剂更高效,对细胞的毒性更低,而且不需要更换培养基,操作简单,自1995年开发出来就申请了美国专利(US 5,744,335)。

      同时,Mirus的研究者们一直都在不断追求进取,研发更高质量的转染试剂,2009年,Trans LT1的升级版Trans 2020上市,它相对LT1来讲,除了具有LT1所拥有的低毒优点之外,对于大多数的细胞系的转染效率会更高,对于许多原代细胞和干细胞,也具有更高的转染效率,更重要的是该试剂所有组分是不含动物来源成分的,大大降低了细胞污染的可能性,尤其符合制药生产的需求。另外TransIT-2020也同样适用于昆虫细胞的转染。

主要优点如下:
1. 广谱型:适用大多数细胞系,有效节省实验时间和成本;
2. 高效性:对于大多数细胞系而言,转染DNA质粒效果非常好,尤其在某些细胞系中转染效果要高于Lipofectamine™2000和Fugene HD;
3. 低细胞毒性:试剂本身对细胞的毒性极小,降低了实验中的变异因素;
4. 血清兼容型:TransIT LT1适用于在含血清培养基的转染实验,不需要更换培养基,操作方便;
5. 细胞密度需求低:对于大多数细胞系,在使用TransIT LT1转染时,细胞密度仅需要50-70%,节约了我们培养细胞的时间和实验材料;
6. 不含动物来源成份,大大降低了细胞污染的可能性,尤其符合制药生产的需求;
7. 对于一些昆虫细胞,也有非常高的转染效率;

代理最专业转染试剂专家Mirus——高效广谱低毒转染试剂TransIT®2020

Fig1. TransIT®-2020 Reagent Exhibits Higher Expression and Lower Cellular Toxicity Compared to Other Transfection Reagents.

代理最专业转染试剂专家Mirus——高效广谱低毒转染试剂TransIT®2020

Figure 2. Superior Gene Expression in a Broad Spectrum of Cell Types.

产品信息:

品牌

货号

品名

规格

Mirus

MIR 5404

TransIT-2020 Transfection Reagent

0.4 ml

Mirus

MIR 5400

TransIT-2020 Transfection Reagent

1 ml

Mirus

MIR 5405

TransIT-2020 Transfection Reagent

5 X 1 ml

      Mirus公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。Mirus的生物学家利用他们在核酸化学、细胞及分子生物学领域的专长,建立了创新的技术和产品开发,这些技术和产品被广泛应用于生命科学研究。Mirus被公认为是核酸研究试剂开发的领跑者,其杰出成就受到世界公认。

      更多产品可点击Mirus查询具体信息。上海金畔生物科技有限公司成为美国Mirus中国地区一级代理,双方携手为国内科研工作者提供专业的转染试剂,同时,上海金畔生物科技有限公司也为广大客户提供免费试用装,欢迎您来电咨询和申请。

TransIT-LT1—全球第一款广谱型高效低毒血清兼容型转染试剂

关键词:转染试剂;血清兼容;广谱型;Mirus;Lipofectamine™2000; Fugene HD;

在转染实验中,转染效率低、细胞毒性大是2大重要的难题,Mirus作为全世界最早研发高效转染试剂的公司之一,在1995年创新研发了全球第一款高效低毒血清兼容型转染试剂—TransIT LT1,它是一款非脂质体转染试剂,相对传统脂质体或其他类型的转染试剂来说具有以下优势:

1. 广谱型:适用大多数细胞系,有效节省实验时间和成本;

2. 高效性:对于大多数细胞系而言,转染DNA质粒效果非常好,尤其在某些细胞系中转染效果要高于Lipofectamine™2000和Fugene HD;

3. 低细胞毒性:试剂本身对细胞的毒性极小,降低了实验中的变异因素;

4. 血清兼容型:TransIT LT1适用于在含血清培养基的转染实验,不需要更换培养基,操作方便;

5. 细胞密度需求低:对于大多数细胞系,在使用TransIT LT1转染时,细胞密度仅需要50-70%,节约了我们培养细胞的时间和实验材料;

另外,TransIT-L1是Mirus产品的王牌,自1995年开发出来就申请了美国专利(US 5,744,335)。

订购信息:

货号

品名

规格

MIR 2304

TransIT-LT1 Transfection Reagent

0.4 ml

MIR 2300

TransIT-LT1 Transfection Reagent

1 ml

MIR 2305

TransIT-LT1 Transfection Reagent

5 X 1 ml

MIR 2306

TransIT-LT1 Transfection Reagent

10 X 1 ml

TransIT-LT1—全球第一款广谱型高效低毒血清兼容型转染试剂
Figure. The TransIT®-LT1 Reagent Exhibits Higher Expression and Lower Cellular Toxicity Compared to Other Transfection Reagents.

Mirus公司是世界上最早开发高效、低细胞毒性转染试剂的公司之一,同时也是目前该类试剂最主要的供应商之一。Mirus的生物学家利用他们在核酸化学、细胞及分子生物学领域的专长,建立了创新的技术和产品开发,这些技术和产品被广泛应用于生命科学研究。Mirus被公认为是核酸研究试剂开发的领跑者,其杰出成就受到世界公认。
其他转染试剂:

TransIT-2020

TransIT-siQEST

TransIT-TKO

TransIT-mRNA

Ingenio

介绍

LT1升级版,优于FuGENE HD
Lipofectamine 2000/LTX/Plus/CD

高效转染siRNA
和miRNA

高效转染siRNA和miRNA的转染试剂,并适用于共转染siRNA与DNA

第一款适用于转染大分子mRNA试剂

高效电转液,适用于Amaxa,Bio-Rad和Harvared BTX等

转染物

DNA

siRNA和miRNA

siRNA和miRNA

RNA

DNA,siRNA

低毒性

YES

YES

YES

YES

YES

血清兼容

YES

YES

YES

YES

YES

即用型

YES

YES

YES

YES

YES

广谱型

YES

YES

YES

YES

YES

无动物源成分

YES

YES

YES

YES

YES

敲除

N/A

YES

YES

N/A

YES

共转染DNA
和siRNA

N/A

N/A

YES

N/A

YES

更多产品可点击Mirus查询具体信息。

上海金畔生物科技有限公司成为美国Mirus中国地区一级代理,双方携手为国内科研工作者提供专业的转染试剂,同时,上海金畔生物科技有限公司也为广大客户提供免费试用装,欢迎您来电咨询和申请。