同种型对照抗体选择和使用

同种型对照抗体选择和使用

什么是同种型对照抗体?

选择和使用正确的同种型对照抗体是所有体内实验的重要组成部分。这些抗体用作阴性对照——它们与主要靶向抗体的确切宿主物种、同种型和亚类相匹配,但对目标生物体或物种中存在的蛋白质没有特异性。同型对照抗体被设计为在体内动物模型中不结合,但保留实验中使用的一抗的所有非特异性特征。

为什么在体内实验中纳入同型对照治疗组很重要

需要纳入同种型对照治疗组才能生成可靠的数据,因为它使研究人员能够准确地区分从一抗以抗原特异性方式结合观察到的结果和从非抗原特异性结合或抗体注射的其他非特异性效应观察到的结果。

给予动物的一抗可以与细胞上的 Fc 受体发生非抗原特异性相互作用,包括 B 细胞、树突状细胞、NK 细胞、巨噬细胞等。有时 Fc 受体结合参与一抗的作用机制,例如抗体定向细胞毒性 (ADCC)。然而,非抗原特异性 Fc 受体结合可能导致可观察到的与抗原特异性结合无关的生物效应或表型。与一抗同种型和亚类相匹配的同种型对照抗体也将与 Fc 受体结合,从而使研究人员能够控制这些效应。

除了匹配同种型和亚类外,理想的同种型对照还必须与一抗的宿主物种匹配。许多用于小鼠模型体内研究的一抗单克隆抗体是利用杂交瘤技术在大鼠或仓鼠身上产生的。当异种大鼠或仓鼠 IgG 注射到小鼠体内时,可能会针对注射的抗体产生免疫反应。多次注射增加了这种可能性。与 Fc 受体结合一样,这也可能导致与抗原特异性结合无关的可观察表型。包括一组用与一抗宿主物种相匹配的同种型对照抗体治疗的小鼠,使研究人员能够控制这些非抗原特异性效应。

有关同型对照的常见问题

  1. 可以使用未治疗组或 PBS 治疗组代替同型对照治疗组吗?

  2. 不建议使用未经处理的组或 PBS 处理的组作为简化的阴性对照。必须使用同种型对照抗体来准确区分由于一抗以抗原特异性方式结合而观察到的结果和由于非抗原特异性结合或其他非特异性相互作用而观察到的结果。

  3. 如果用不同宿主物种、同种型或亚类的多种一抗治疗小鼠,对照组中的小鼠是否需要用多种同种型对照抗体治疗,还是单一同种型对照抗体就足够了?

由于抗体的宿主物种、同种型和亚类决定了其潜在的非特异性效应,因此同种型对照组必须与一抗处理组进行相同的处理。例如,如果第一组注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗体,则同种型对照组也必须注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗体。

为什么选择 Bio X Cell 同型对照抗体?

Bio X Cell 提供广泛的同种型对照抗体,适用于体内体外应用。我们的同型对照具有:

  • 纯度我们优化的专有抗体制造方法可确保获得超纯抗体解决方案,无需添加蛋白质或化学物质。使用 SDS-PAGE 对每批产品的纯度进行 QC 测试。

  • 超低内毒素水平每个批次的内毒素水平均经过 QC 测试。我们的InVivo MAb 产品≤ 2EU/mg,InVivo Plus 产品≤ 1EU/mg。如果需要内毒素水平低于 1EU/mg,请联系我们的技术支持了解详细信息。

  • 无病原体每批InVivo Plus 产品均经过全面的鼠类病原体筛查。结果详细记录在特定产品的数据表中,以帮助您遵守 IACUC 和动物设施的要求。

  • 低蛋白质聚集我们专有的抗体制造方法可确保抗体解决方案的蛋白质聚集水平非常低。此外,每批InVivo Plus 产品均经过聚合水平 QC 测试,并保证低于总蛋白的 5%。

如何选择合适的同型对照抗体?

同种型对照抗体必须与一抗的宿主物种、同种型和亚类相匹配。为了方便客户,我们在每个产品页面上都包含了这些重要的产品信息以及所有一抗的推荐同型对照。下表是适用于体内体外研究的 Bio X Cell 同型对照抗体的完整列表。

Armenian Hamster IgG Isotype Control, Anti-Glutathione S-Transferase PIP Armenian Hamster IgG BE0260 N/A
Polyclonal Armenian Hamster IgG N/A Armenian Hamster IgG BE0091 BP0091*
Polyclonal Goat IgG N/A Goat IgG BE0130 N/A
Hamster IgG F(Ab')2 Fragments Hamster IgG F(Ab')2 Fragments Hamster Polyclonal BE0091-FAB N/A
Human IgG2 Isotype Control N/A Human IgG2, Λ BE0301 BP0301*
Human IgG1 Isotype Control N/A Human IgG1, Κ BE0297 BP0297*
Polyclonal Human IgG N/A Human IgG BE0092 N/A
Mouse IgG2c Isotype Control, Anti-Dengue Virus DV5-1 Mouse IgG2c, Κ BE0366 N/A
Mouse IgG1 Isotype Control, Unknown Specificity MOPC-21 Mouse IgG1, Κ BE0083 BP0083*
Mouse IgG2a Isotype Control, Unknown Specificity C1.18.4 Mouse IgG2a, Κ BE0085 BP0085*
Mouse IgG2b Isotype Control, Unknown Specificity MPC-11 Mouse IgG2b, Κ BE0086 BP0086*
Polyclonal Mouse IgG N/A Mouse IgG BE0093 N/A
Polyclonal Rabbit IgG N/A Rabbit IgG BE0095 N/A
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Trinitrophenol TNP6A7 Rat IgG1, Λ BE0290 BP0290*
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Horseradish Peroxidase HRPN Rat IgG1, Κ BE0088 BP0088*
Rat IgG2a Isotype Control, Anti-Trinitrophenol 2A3 Rat IgG2a, Κ BE0089 BP0089*
Rat IgG2b Isotype Control, Anti-Keyhole Limpet Hemocyanin LTF-2 Rat IgG2b, Κ BE0090 BP0090*
Polyclonal Rat IgG N/A Rat IgG BE0094 N/A
Polyclonal Syrian Hamster IgG N/A Syrian Hamster IgG BE0087 BP0087*

如何为您的研究选择抗 PD-1 抗体

如何为您的研究选择抗 PD-1 抗体

PD-1简介

程序性死亡-1(PD-1)是T细胞上表达的抑制性受体,可促进炎症T细胞凋亡并抑制抗炎调节T细胞凋亡,从而促进自我耐受并预防自身免疫性疾病。为了逃避免疫监视,肿瘤细胞经常通过过度表达 PD-L1(结合并激活 PD-1 的配体)来利用该系统。抗 PD-1 单克隆抗体用于阻断 PD-L1 与 PD-1 的结合,从而使免疫系统能够发现并杀死肿瘤细胞。

PD-1抗体克隆的比较

Bio X Cell 提供三种不同的抗小鼠 PD-1 抗体克隆RMP1-14、29F.1A12J43。所有三种抗体都通过相同的机制发挥作用——它们与 PD-1 结合,并在空间上阻断 PD-1 与 PD-1 配体的结合,从而阻断 PD-1 信号传导(如上图所示)。

所有三种抗体都非常适合在小鼠模型中体内阻断 PD-1 信号传导,并且拥有大量的多年出版记录支持该应用。这些抗体之间的差异在于出版物中额外报道的应用、同种型和起源,如下表所示。

在这些抗 PD-1 抗体中,RMP1-14克隆拥有广泛的体内阻断 PD-1 信号传导的发表记录。然而,重要的是,已报道的RMP1-14抗体的应用仅限于体内阻断 PD-1/PD-L 信号传导。

另外,29F.1A12克隆还拥有广泛的体内PD-1 阻断发表记录,但也可用于体外 PD-1中和、蛋白质印迹、免疫组织化学、免疫荧光和流式细胞术。J43克隆机也符合类似的描述。这对于希望体内实验并行进行体外或诊断实验的研究人员来说是有利的。

选择适合您的研究的抗体的下一步是搜索每个克隆的发表记录,并找到使用与您自己的实验方法类似的实验方法的已发表数据的示例。可能有一种克隆更常用于您的特定小鼠模型和实验设置。

Bio X Cell 提供了我们所有抗体的精选参考文献列表,可在每个产品页面上找到。可以使用 Google Scholar 和 PubMed 等搜索引擎找到其他参考文献。结合实验特定的搜索术语(例如“RMP1-14 MC38 BALB/c”)搜索抗体的克隆名称,是查找适用参考文献的最佳方法。这些参考文献将帮助您选择适合您的研究的抗体。

PD-1抗体克隆的详细比较

Clone RMP1-14 29F.1A12 J43
InVivoPlus™ Catalog no. BP0146 BP0273 BP0033-2
Isotype Rat IgG2a, κ Rat IgG2a Armenian Hamster IgG
First Citation In 2003 by Takanori Kanai et al In 2003 by Spencer C. Liang et al In 1996 by Yasutoshi Agata et al
Reported Applications in vivo blocking of PD-1/PD-L signaling

  • in vivo blocking of PD-1/PD-L signaling

  • in vitro PD-1 neutralization

  • Immunohistochemistry (frozen)

  • Immunofluorescence

  • Western blot

  • Flow cytometry

  • in vivo blocking of PD-1/PD-L signaling

  • in vitro PD-1 neutralization

  • Western blot

Immunogen Syrian Hamster BKH cells transfected with mouse PD-1 cDNA Recombinant PD-1-Ig fusion protein Syrian Hamster BKH cells transfected with mouse PD-1 cDNA
Purity >95%
Determined by SDS-PAGE
>95%
Determined by SDS-PAGE
>95%
Determined by SDS-PAGE
Stabilizers or Preservatives Free Free Free
Size 5, 25, 50, 100 mg and more 5, 25, 50, 100 mg and more 5, 25, 50, 100 mg and more
Availability In stock In stock In stock
Recommended Isotype Control InVivoPlus™ rat IgG2a isotype control, anti-trinitrophenol InVivoPlus™ rat IgG2a isotype control, anti-trinitrophenol InVivoPlus™ polyclonal Armenian hamster IgG
Recommended Dilution Buffer InVivoPure™ pH 7.0 Dilution Buffer InVivoPure™ pH 7.0 Dilution Buffer InVivoPure™ pH 6.5 Dilution Buffer


聚乙二醇化试剂选择指南

聚乙二醇化试剂选择指南

聚乙二醇化是在聚乙二醇聚合物和底物分子(包括分子、大分子、颗粒和表面)之间形成共价键的化学过程。由于不同底物活性位点的差异,不同官能团的聚乙二醇化需要不同的聚乙二醇试剂。下面列出了文献中报道的一些常用的聚乙二醇化示例

1. 胺的聚乙二醇化和N端PEG的接枝:与生物大分子的氨基反应的PEG试剂
 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
聚乙二醇NHS 聚乙二醇羧酸的N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯可以与赖氨酸的胺基反应。偶联反应仅需较短的反应时间,反应条件温和,pH 7-9,低温(5-25℃)。形成生理稳定的酰胺键。
聚乙二醇醛 在还原剂如氰基硼氢hua钠的存在下,通过还原胺化将伯胺转化为仲胺。 pH 对于还原胺化很重要。 PEG-醛是一种非常好的N端聚乙二醇化接枝试剂。
聚乙二醇环氧化物 亲核加成
聚乙二醇异硫氰酸酯 与胺反应生成稳定的硫脲。
聚乙二醇 通常酸需要被活化,例如 NHS 酯。
聚乙二醇NPC 在合适的条件下,胺可以与NPC官能化的PEG反应。
聚乙二醇丙烯酸酯 胺和丙烯酸酯的迈克尔加成反应是一个相对缓慢的反应。

 











2.羧基的聚


乙二醇化 PEG试剂在偶联剂如DCC(N,N'-二环己基碳二亚胺)和EDIC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺,盐酸盐)存在下与羧酸反应。
 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
聚乙二醇胺 在 DCC 或 EDC 偶联条件下形成酰胺。
聚乙二醇酰肼 在弱酸性下被 EDIC 激活后,蛋白质的羧基很容易与 PEG-酰肼反应,而在这种特定条件下,所有试剂的氨基均保持不活泼状态。
PEG-卤化物/磺酸盐 PEG-卤化物(氯化物、溴化物、碘化物、对甲苯磺酸盐和甲磺酸盐)与去质子化的羧基(即-COO-盐)反应。

 







3. 硫醇基团的聚乙二醇化:基于硫醇的聚乙二醇化是生物分子的游离硫醇,例如半胱氨酸

 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
PEG-马来酰亚胺 硫醇和C=C双键在马来酰亚胺环存在下通过迈克尔加成形成生理学稳定的键。最佳反应条件为pH 8。
聚乙二醇OPSS 生成二硫SS键。该反应也可以通过还原剂如硫代乙醇胺来逆转。
PEG-乙烯基砜 硫醇和C=C双键在马来酰亚胺环存在下通过迈克尔加成形成生理稳定的化学键。
聚乙二醇硫醇 生成二硫SS键的氧化物。
聚乙二醇卤化物 PEG-卤化物(氯化物、溴化物、碘化物、对甲苯磺酸盐和甲磺酸盐)和游离硫醇。碘乙酸盐或碘乙酰胺对游离硫醇非常有效。

 











4. 羟基的聚乙二醇化 
 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
聚乙二醇异氰酸酯 羟基与PEG-NCO反应,但需要特殊的反应条件。
聚乙二醇NPC 羟基与NPC反应形成碳酸酯。
聚乙二醇硅烷 硅烷特别适合与羟基化表面反应。
聚乙二醇环氧化物 PEG-环氧化物与羟基反应的最佳条件是pH 8.5-9.5。

 





5.点击化学的聚乙二醇化
 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
PEG-叠氮化物
PEG-炔烃
叠氮化物和炔烃在铜催化剂存在下形成稳定的1,2,3-三唑环。它被称为Huisgen叠氮化物-炔环加成。
聚乙二醇BCN BCN 试剂(双环[6.1.0]壬炔)可以通过无铜点击化学与叠氮标记分子或生物分子发生反应。
聚乙二醇-DBCO DBCO(二苯并环辛炔)试剂是应变促进的叠氮化炔环加成 (SPAAC) 中反应性强的环炔之一,可实现无铜点击化学。
聚乙二醇TCO TCO 试剂(反式环辛烯试剂)可用于通过无铜点击化学标记抗体、蛋白质和其他大分子。
聚乙二醇四嗪 发现四嗪与反式环辛烯(TCO)作为亲二烯体的生物正交反应动力学最快。与甲基四嗪相比,四嗪的化学稳定性较低。

 












6. 表面聚乙二醇化
 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
聚乙二醇硫醇 PEG-硫醇可与大多数贵金属表面发生反应,例如金、银等。
聚乙二醇硅烷 PEG-硅烷可以与羟基化表面反应,例如硅胶、玻璃、羟基化或酸活化的贵金属表面(例如铂、钯等)。

 




7. 聚合的聚乙二醇化
 

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
聚乙二醇硫醇 多臂PEG-硫醇可以自交联形成二硫键,在适当的还原条件下可以逆转。
聚乙二醇丙烯酸酯 2臂或4臂PEG-丙烯酸酯、PEG-甲基丙烯酸酯或PEG-丙烯酰胺可以交联形成稳定的CC键

 





8. 可逆聚乙二醇化

聚乙二醇试剂 聚乙二醇化接枝
聚乙二醇酰肼 PEG-酰肼可以与羰基(酮或醛)反应形成酰肼,在酸性条件下很容易水解。
聚乙二醇硫醇 PEG-SS-PEG二硫键可以通过合适的还原剂裂解。

 




免责声明:以上信息仅作为聚乙二醇化试剂选择的一般指导。具体的PEG化接枝工艺请参考文献并自行判断。

ALZET 泵的选择

ALZET 泵的选择

ALZET 泵有各种尺寸、持续时间和流速可供选择,以满足广泛的研究需求。

虽然每个型号的泵送速率在制造时是固定的,但可以通过改变每个泵填充的药剂浓度来调整输送的药剂剂量。如果动物足够大,可以同时植入多个泵,以实现比单个泵更高的输送率。对于更长时间的输送,可以连续植入泵而没有不良影响。


选择泵型号时,请考虑以下因素:

  • 动物大小:请参考我们根据动物大小进行泵植入的指南

  • 所需靶组织的化合物给药途径和反应

  • 期望的交付率

  • 优选的给药持续时间

  • 化合物特性*(溶解度、成本)

  • 剂量

  • 环境温度和渗透压(仅与异温或体外使用相关)

*注意:化合物的分子量与 ALZET 泵的使用或选择无关,因为它对泵的释放速率或功能没有影响。

动物注意事项

ALZET 泵可按照以下动物尺寸指南植入皮下或腹膜内。 ALZET 泵还可以连接到导管,将泵中的内容物直接输送到静脉或动脉系统、大脑或任何器官或组织中。我们建议使用允许试剂溶解度和实验持续时间的最小尺寸的泵。

ALZET 泵的选择

这些泵已用于各个年龄段的动物和许多不同的物种。以下是在一些特定动物模型中使用 ALZET 泵的具体提示:

  • 新生儿

  • 裸鼠

  • 异温 动物的物种或应用

  • 哺乳动物以外的渗透压下的物种或应用

ALZET 渗透泵在小鼠和大鼠中的应用最为广泛。但是,可参考以下动物使用 ALZET 泵的情况:

  • 龙猫

  • 花栗鼠

  • 鹿

  • 雪貂

  • 青蛙

  • 沙鼠

  • 山羊

  • 豚鼠

  • 仓鼠

  • 鬣蜥

  • 袋鼠

  • 乳腺瘤

  • 水貂

  • 灵长类动物

  • 臭鼬

  • 松鼠

  • 蟾蜍

  • 苍蝇

给药途径

ALZET泵可以皮下或腹膜腔内植入,这些是最常见的输液部位。它们之间的选择通常是基于先前对测试化合物的工作、化合物的吸收和清除以及动物大小做出的。如果腹膜内施用化合物,则进入门静脉循环的摄取可能更为显着,因此对于肝脏快速清除的化合物,避免这种途径可能是谨慎的。

此外,所有泵型号都很容易连接到导管上,因此使用皮下或腹膜内植入的泵输注到血管、器官或组织中。以下是文献中报道的通过ALZET泵的主要给药途径:

  • 皮下的

  • 腹腔

  • 腔内

    • 关节腔

    • 膀胱

    • 脑室

  • 子宫

  • 静脉

  • 动脉内

  • 腔内

  • 局部组织微灌注

    • 动脉壁

    • 耳朵

    • 眼睛

    • 肌肉

    • 神经

    • 卵巢

    • 脊髓

    • 测试


给药时间

ALZET 泵的标称持续时间从 1 天到 6 周不等,具体取决于泵型号。(泵持续时间列表)所有泵的输送时间都将超过标称持续时间,以确保它们持续整个标称持续时间并允许启动。(什么是启动?特定批次的实际持续时间可以根据每个盒子中包含的说明表上提供的平均泵送速率和填充量以及统计参数来估计。(见示例)将平均储液罐填充量 (μl) 的 95% 除以平均泵送速率 (μl/hr),以允许 5% 的残留物无法从泵中排出。平均泵送速率和平均填充量由 DUPRECT 进行的体外测试确定。

事实上,一些泵的使用寿命更长,具体取决于给定制造批次的实际规格。如果您的研究要求的特定持续时间未在我们的网站上列出,请与ALZET技术支持联系以了解可用性。

通过串行植入可以实现更长的持续时间。例如,通过植入一个 4 周泵、一个月后将其取出并换上一个新的 4 周泵来实现 2 个月的输液。您还可以植入 6 周泵模型,然后植入 2 周泵模型。提供有关使用 ALZET 泵进行长期给药的参考列表(单击此处)。该参考列表包括已发表的研究,其中已经完成长达 18 个月的输注,并且在单个动物身上进行了多达 36 次连续植入。

交货率

选择具有最佳流速的泵对于某些应用可能很重要,例如在注入实体组织时。例如,较低的流速(例如,< 5 µl/hr)通常是将化合物给药到脑实质中的选择。访问 ALZET 参考书目或联系 ALZET 技术支持以获取指示实体组织微灌注选择泵型号的参考资料。


化合物特性

由于其操作机制,ALZET 泵非常适用于给药范围广泛的化合物,无论其分子量如何。分子量对泵的输送或功能没有影响。泵是如何工作的?大量化合物的成功输送已在文献中有所报道(单击此处查看使用 ALZET 泵输送的所有药物的列表)。

溶解度

对于难溶性化合物,可能需要更大的泵和更快的流速(允许较低的药物浓度)来管理所需的剂量。 (泵型号和油箱容量列表)(选择车辆的提示)

成本

当使用价格昂贵或供应有限的化合物时,选择泵的驱动因素可能是储液罐容量小。小于单个泵储液器容量的体积可以通过导管成功给药。 (方法)

剂量

根据化合物的溶解度,快速给予较大剂量将需要具有相对较高流速的泵。一些研究以每日剂量为目标。使用以下公式或我们的交互式计算器来确定特定泵输送的每日剂量:

K = C x Q

K = 每小时输送的化合物,单位为 µg
C = 溶液浓度,单位为 µg/µl
Q = 泵的释放速率,单位为 µl/hr

根据动物的大小(例如,成年大鼠或更大),可以同时植入多个泵以输送比单个泵可能更大的剂量。

环境温度和渗透压

除非另有说明,否则列出的 ALZET 泵的速率和持续时间基于在哺乳动物体内使用。在替代设置中,例如体外或其他物种,泵送速率和持续时间可能会有所不同,因为它们会受到温度和渗透压的影响。温度和重量克分子渗透压浓度都会影响水穿过半透膜并进入渗透套管的速率。

ALZET 渗透泵的泵送速率与温度成正比变化。左图显示了两种泵型号在 0.9% 盐水中从 4 度到 40 多度的代表性泵送速率。

使用以下方程式或交互式计算器来预测异温动物或体液相对于哺乳动物高渗的动物的泵送率。

型号 2001、2002、2004、2006、2001D、1004、1003D、1007D、1002 和 1004
Q T  = Q 0 [0.135 e (0.054T) – 0.004π + 0.03]

型号 2ML1、2ML2 和 2ML4
Q T  = Q 0 [0.141 e (0.051T) – 0.007π + 0.12]

Q T  = 温度 T 时的泵送速率
Q 0  = 37°C 时的一定泵送速率,单位为 µl/hr
T = 温度,单位为摄氏度
π = 泵外溶液的渗透压 (atm)

这些公式在 π = 0 到 25 atm 和 T = 4°C 到 42°C 的范围内很有用。该方程式的预测误差在 +/- 10% 以内。在 310 毫渗摩尔/升的正常哺乳动物渗透压下,渗透压为 7.5 个大气压。已发现高于 42°C 的环境温度会导致输送率波动,因此不推荐使用。

ALZET 泵的选择

合成纳米盘介绍及纳米盘的选择

合成纳米盘介绍及纳米盘的选择

合成纳米盘是纳米盘领域的第二大选择。它们在某些关键方面与海洋空间规划对应物不同,但也具有某些相似之处。

合成纳米盘的制造
与MSP纳米盘的三种制造方式(图4)相比,合成纳米盘只能直接从完整的细胞中产生。在此过程中,所使用的合成聚合物具有双重功能。首先,它溶解细胞膜,类似于洗涤剂。然后它使用天然细胞磷脂在膜蛋白周围形成纳米盘结构。这个过程的一个很好的类比是饼干切割机,它将饼干从面团中压出。

合成纳米盘介绍及纳米盘的选择

大小
合成纳米盘的大小各不相同。决定其直径的主要因素是它们包围和稳定的膜蛋白复合物的大小。因此,不能给出合成纳米盘的确定尺寸。但它们的尺寸范围都在MSP纳米盘中也可以找到的尺寸范围内(表2)。这适用于迄今为止所有已建立的聚合物。如果合成纳米盘复合物需要均匀的纳米盘尺寸,则必须在目标的稳定膜蛋白纯化后进行尺寸排阻色谱(SEC)。 与Rho1D4标签的亲和色谱。
哪种聚合物?
用于合成纳米盘的不同聚合物的选择正在不断增加。每个都有自己的优点和缺点。 迪布马 例如,在280nm波长处具有蛋白质样吸收。同时 阿斯蒂 与其他聚合物相比,具有相当固定的纳米盘直径。

然而,这只是不同聚合物的一长串优缺点中的一小部分。我们将这个主题专用于自己的网页。 看看它!

合成纳米盘介绍及纳米盘的选择

MSP还是合成纳米盘?

合成纳米盘介绍及纳米盘的选择

合成纳米盘介绍及纳米盘的选择

如何选择适合自己的细胞培养板

如何选择适合自己的细胞培养板

  细胞培养板因为能给细胞实验节约时间,节约试剂材料费用,可以同时设立多个动态变量方便观察检测等,是细胞培养实验中常用和重要的耗材。但是,你能根据自身需求选择正确的培养板么?
  细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型),培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等。
  1、平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择
  不同形状的培养板有不同用途。培养细胞,通常是选用平底的,这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。因此做MTT等实验时,无论是贴壁和悬浮细胞,一般选用平底板。测吸光值一定要使用平底的培养板。
  U型或V型板,一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面,当做两种不同淋巴细胞混合培养时,需要二者相互接触刺激,这时一般会选用U型板,因为细胞会由于重力的作用而聚集在很小的范围内内。圆底培养板还会用于同位素掺入的实验,需要用细胞收集仪收集细胞的培养,如“混合淋巴细胞培养”等。V型板常用做细胞杀伤、免疫学血凝集实验。细胞杀伤这种实验也可用U型板替代(加入细胞后,低速离心)。
  2、细胞培养板与酶标板的区别
  酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,需要更高的要求和特定的酶标工作液。
  3、常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量
  不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。

Caprico Biotechnologies流式细胞抗体该如何选择?

Caprico Biotechnologies流式细胞抗体该如何选择?

  Caprico Biotechnologies流式细胞抗体本身也是抗体,所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件:目标蛋白特异性,反应种属以及应用实验。在流式实验过程中,尽量减少实验工序和过程,以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内,建议尽量用直接标记的抗体进行实验而不去做间接标记。
 
  由于在流式细胞实验过程中,荧光抗体对单细胞悬液的标记效果直接影响实验的数据质量。因此,需要考虑各种影响流式抗体品质及检测效果的因素,例如抗体特异性、荧光素信号强弱、荧光素标记方式、同型对照等。
 
  流式抗体的选择: 
  1、流式抗体本身也是抗体,所以选择流式抗体一定要满足抗体选择最基本的条件:目标蛋白特异性,反应种属以及应用实验。
 
  2、流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。在流式实验过程中,尽量减少实验工序和过程,以保证实验的真实和准确性。因此在条件允许的范围内,建议尽量用直接标记的抗体进行实验而不去做间接标记。
 
  3、流式抗体荧光标记的选择:如果实验中检测单一指标:不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。FACS Calibur仪器为例:PE >APC >PE-Cy5 >PerCP >FITC >PerCP-Cy5.5,通常来说,PE强,适用于弱表达抗原。FITC强度较弱,适用于强表达抗原,使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。
 
  如果同时检测多个指标:确认流式细胞仪能检测多少个通道:流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如:实验者同时检测三个指标,可以在图1中绿色、黄色和红色三个通道中各选一个适当的荧光素标记,FITC、PE和PE-cy5。切忌所有指标选择同一个通道的荧光标记,以防止荧光的重叠和相互干扰,影响最后结果。因此,流式细胞仪的通道越多,同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多。常用荧光标记包括FITC, PE, PEcy5, PEcy5.5, APC等。
 
  同型对照的选择: 
  流式细胞实验和其他抗体相关实验有点不同的就是需要选择同型对照。同型对照,是用于消除由于抗体非特异性结合到细胞表面而产生的背景染色,相当于实验的阴性对照。同型对照选择与标记抗体同种属来源,同亚型,同荧光标记的抗体。比如:抗人的CD3的PE标记的抗体,小鼠的IgG2a。同型对照选择PE标记的小鼠的IgG2a。