同种型对照抗体选择和使用

同种型对照抗体选择和使用

什么是同种型对照抗体?

选择和使用正确的同种型对照抗体是所有体内实验的重要组成部分。这些抗体用作阴性对照——它们与主要靶向抗体的确切宿主物种、同种型和亚类相匹配,但对目标生物体或物种中存在的蛋白质没有特异性。同型对照抗体被设计为在体内动物模型中不结合,但保留实验中使用的一抗的所有非特异性特征。

为什么在体内实验中纳入同型对照治疗组很重要

需要纳入同种型对照治疗组才能生成可靠的数据,因为它使研究人员能够准确地区分从一抗以抗原特异性方式结合观察到的结果和从非抗原特异性结合或抗体注射的其他非特异性效应观察到的结果。

给予动物的一抗可以与细胞上的 Fc 受体发生非抗原特异性相互作用,包括 B 细胞、树突状细胞、NK 细胞、巨噬细胞等。有时 Fc 受体结合参与一抗的作用机制,例如抗体定向细胞毒性 (ADCC)。然而,非抗原特异性 Fc 受体结合可能导致可观察到的与抗原特异性结合无关的生物效应或表型。与一抗同种型和亚类相匹配的同种型对照抗体也将与 Fc 受体结合,从而使研究人员能够控制这些效应。

除了匹配同种型和亚类外,理想的同种型对照还必须与一抗的宿主物种匹配。许多用于小鼠模型体内研究的一抗单克隆抗体是利用杂交瘤技术在大鼠或仓鼠身上产生的。当异种大鼠或仓鼠 IgG 注射到小鼠体内时,可能会针对注射的抗体产生免疫反应。多次注射增加了这种可能性。与 Fc 受体结合一样,这也可能导致与抗原特异性结合无关的可观察表型。包括一组用与一抗宿主物种相匹配的同种型对照抗体治疗的小鼠,使研究人员能够控制这些非抗原特异性效应。

有关同型对照的常见问题

  1. 可以使用未治疗组或 PBS 治疗组代替同型对照治疗组吗?

  2. 不建议使用未经处理的组或 PBS 处理的组作为简化的阴性对照。必须使用同种型对照抗体来准确区分由于一抗以抗原特异性方式结合而观察到的结果和由于非抗原特异性结合或其他非特异性相互作用而观察到的结果。

  3. 如果用不同宿主物种、同种型或亚类的多种一抗治疗小鼠,对照组中的小鼠是否需要用多种同种型对照抗体治疗,还是单一同种型对照抗体就足够了?

由于抗体的宿主物种、同种型和亚类决定了其潜在的非特异性效应,因此同种型对照组必须与一抗处理组进行相同的处理。例如,如果第一组注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗体,则同种型对照组也必须注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗体。

为什么选择 Bio X Cell 同型对照抗体?

Bio X Cell 提供广泛的同种型对照抗体,适用于体内体外应用。我们的同型对照具有:

  • 纯度我们优化的专有抗体制造方法可确保获得超纯抗体解决方案,无需添加蛋白质或化学物质。使用 SDS-PAGE 对每批产品的纯度进行 QC 测试。

  • 超低内毒素水平每个批次的内毒素水平均经过 QC 测试。我们的InVivo MAb 产品≤ 2EU/mg,InVivo Plus 产品≤ 1EU/mg。如果需要内毒素水平低于 1EU/mg,请联系我们的技术支持了解详细信息。

  • 无病原体每批InVivo Plus 产品均经过全面的鼠类病原体筛查。结果详细记录在特定产品的数据表中,以帮助您遵守 IACUC 和动物设施的要求。

  • 低蛋白质聚集我们专有的抗体制造方法可确保抗体解决方案的蛋白质聚集水平非常低。此外,每批InVivo Plus 产品均经过聚合水平 QC 测试,并保证低于总蛋白的 5%。

如何选择合适的同型对照抗体?

同种型对照抗体必须与一抗的宿主物种、同种型和亚类相匹配。为了方便客户,我们在每个产品页面上都包含了这些重要的产品信息以及所有一抗的推荐同型对照。下表是适用于体内体外研究的 Bio X Cell 同型对照抗体的完整列表。

Armenian Hamster IgG Isotype Control, Anti-Glutathione S-Transferase PIP Armenian Hamster IgG BE0260 N/A
Polyclonal Armenian Hamster IgG N/A Armenian Hamster IgG BE0091 BP0091*
Polyclonal Goat IgG N/A Goat IgG BE0130 N/A
Hamster IgG F(Ab')2 Fragments Hamster IgG F(Ab')2 Fragments Hamster Polyclonal BE0091-FAB N/A
Human IgG2 Isotype Control N/A Human IgG2, Λ BE0301 BP0301*
Human IgG1 Isotype Control N/A Human IgG1, Κ BE0297 BP0297*
Polyclonal Human IgG N/A Human IgG BE0092 N/A
Mouse IgG2c Isotype Control, Anti-Dengue Virus DV5-1 Mouse IgG2c, Κ BE0366 N/A
Mouse IgG1 Isotype Control, Unknown Specificity MOPC-21 Mouse IgG1, Κ BE0083 BP0083*
Mouse IgG2a Isotype Control, Unknown Specificity C1.18.4 Mouse IgG2a, Κ BE0085 BP0085*
Mouse IgG2b Isotype Control, Unknown Specificity MPC-11 Mouse IgG2b, Κ BE0086 BP0086*
Polyclonal Mouse IgG N/A Mouse IgG BE0093 N/A
Polyclonal Rabbit IgG N/A Rabbit IgG BE0095 N/A
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Trinitrophenol TNP6A7 Rat IgG1, Λ BE0290 BP0290*
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Horseradish Peroxidase HRPN Rat IgG1, Κ BE0088 BP0088*
Rat IgG2a Isotype Control, Anti-Trinitrophenol 2A3 Rat IgG2a, Κ BE0089 BP0089*
Rat IgG2b Isotype Control, Anti-Keyhole Limpet Hemocyanin LTF-2 Rat IgG2b, Κ BE0090 BP0090*
Polyclonal Rat IgG N/A Rat IgG BE0094 N/A
Polyclonal Syrian Hamster IgG N/A Syrian Hamster IgG BE0087 BP0087*