5-FAM-YVAD-FMK-AAT Bioquest荧光染料

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5-FAM-YVAD-FMK价格 1386
产品规格

25 Tests

产品货号

5-FAM-YVAD-FMK

产品参数
Ex (nm) 493 Em (nm) 517
分子量 854.84 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

5-FAM-YVAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂,FAM-YVAD-FMK,即5-羧基荧光素-Tyr-Val-Ala-Asp-氟甲基酮,在刺激的细胞中不可逆地结合到活性胱天蛋白酶1。 FAM-YVAD-FMK信号的荧光强度与活性半胱天冬酶1的量成正比,可以通过荧光显微镜,流式细胞仪或荧光酶标仪轻松检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的5-FAM-YVAD-FMK。 

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实验方案

样品操作及分析

以下说明书仅提供指导,实际实验请根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规胱天蛋白酶测定方案

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪检测荧光或使用酶标仪检测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪检测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪检测荧光强度。

 

参考文献

The Dietary Flavonoid Fisetin Causes Cell Cycle Arrest, Caspase-Dependent Apoptosis, and Enhanced Cytotoxicity of Chemotherapeutic Drugs in Triple-Negative Breast Cancer Cells
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Contribution of membrane progesterone receptor alpha to the induction of progesterone-mediated apoptosis associated with mitochondrial membrane disruption and caspase cascade activation in Jurkat cell lines
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Inhibition of Caspase-Like Activities Prevents the Appearance of Reactive Oxygen Species and Dark-Induced Apoptosis in the Unicellular Chlorophyte Dunaliella Tertiolecta(1)
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Pan-caspase inhibition suppresses polyethylene particle-induced osteolysis
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Selective caspase activation may contribute to neurological dysfunction after experimental spinal cord trauma
Authors: S. M. Knoblach
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