Amplite 荧光法L-乳酸检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法L-乳酸检测试剂盒价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 荧光法L-乳酸检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法L-乳酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测乳酸的试剂盒,乳酸具有两种光学异构体: L-乳酸和D-乳酸。乳酸是不断从丙酮酸通过酶乳酸脱氢酶(LDH )的代谢和运动的过程产生的。研究细胞和动物生理学的时候是非常有用的。 D-乳酸是不被哺乳动物代谢,其从体内主要依赖于肾排泄。 D-和L -乳酸被发现在许多发酵乳产品,如酸奶和奶酪,以及在泡菜和腌制肉类和鱼类。D-和L -乳酸(由产生的)是食品,如鸡蛋,牛奶,果汁和酒的品质指标。异常高浓度的D-乳酸在血液中通常是过度生长在胃肠道中的反映。 AAT Bioquest的Amplite 乳酸检测试剂盒(目录号13814和13815对L -乳酸检测,和Cat # 13810和13811的D-乳酸检测),用于检测L-乳酸或D -乳酸同时提供荧光和吸光度为基础的方法生物样品如血清,血浆,以及细胞培养物的样品。该信号可通过荧光酶标仪在EX/ EM = 540 nm/590 nm处读取。我们能够检测1.4uM的L-乳酸在100微升反应体积中。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法L-乳酸检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

96孔板测定示例

概述

制备D-乳酸测定混合物(50μL)

加入D-乳酸标准品或测试样品(50μL)

在室温下孵育30分钟~2小时

监测吸光度比率在A575nm / A605nm处增加

注意:在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分的一个小瓶。

 

操作方法

1.准备NAD储备溶液(100X):

向NAD小瓶(组分C)中加入100μLH2O,制成100X NAD储备溶液。

 

2.准备D-乳酸储备液:

将200μLH2 O或1×PBS缓冲液加入到D-乳酸盐标准品(组分D)的小瓶中以制备100mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:未使用的D-lacate标准储备溶液应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

3.准备D-乳酸标准品(0至1 mM)的连续稀释液:

3.1将10μLD-乳酸储备溶液(来自步骤2)加入990L 1x PBS缓冲液中以产生1mM D-乳酸盐标准溶液。

注意:稀释的D-乳酸标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

3.2取200μL的1mM D-乳酸标准溶液进行1:3连续稀释,得到300,100,30,10,3,1和0μM的D-乳酸标准品系列稀释液。

3.3如说明书中的表1和2中所述,将含有D-乳酸盐标准品和含D-乳酸盐的测试样品的系列稀释液加入白色透明底96孔微量培养板中。

 

4.准备D-乳酸测定混合物:

4.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分A)中。

4.2将50μLNAD储备液(100X,来自步骤1)加入组分A(来自步骤4.1)的瓶中,并且混合均匀。

注意:这种D-乳酸测定混合物足以用于一个96孔板。 未使用的D-乳酸测定混合物应分成单次使用的等分试样并储存在-20℃。

 

5.运行D-乳酸测定:

5.1将50μLD-乳酸测定混合物(来自步骤4.2)添加到D-乳酸标准品,空白对照和测试样品(参见步骤3.3)的每个孔中,以使总D-乳酸测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLD-乳酸测定混合物。

5.2在室温下孵育反应30分钟至2小时,避光。

5.3用A575nm / A605nm的吸光度读板仪检测吸光度比率的增加。

 

参考文献

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