PhaRNA公司合成 mRNA描述

PhaRNA公司合成 mRNA描述

PhaRNA, LLC 提供多种合成 mRNA,编码一些最常见的报告蛋白,包括绿色荧光蛋白 (GFP)、GFP-NLS(核 GFP 定位)、mCherry、萤火虫荧光素酶 (fLuc)、海肾荧光素酶 (rLuc)、gaussia 荧光素酶 ( gLuc) 和 β-半乳糖苷酶 (Gal)。编码报告蛋白的合成 mRNA 可以在翻译后轻松进行分析,因此可用作体外和体内 mRNA 包装和递送优化的对照标记。每个报告蛋白 mRNA 均在无错误序列验证的基于质粒 DNA(非 PCR 产物)的模板上合成,该模板具有内置恒定的 Poly-157A 尾部和酶法 Cap1 加帽,提供接近 100% 的加帽效率,因此具有 mRNA 稳定性和可翻译性。

PhaRNA, LLC 由在科学和医学研究领域拥有丰富经验的科学家创立,旨在满足科学和医学界对提供高质量长核糖核酸 (RNA) 生成服务日益增长的需求。

我们的专有技术保证了 RNA 种类的生产能够有效且高度稳定地翻译。编码信使 RNA (mRNA)、长非编码 RNA (lncRNA) 和其他 150 个核苷酸或更长的 RNA 种类的体外转录 (IVT)-RNA 构建体是该公司的主要重点领域。

我们保证高质量的 RNA 种类能够有效翻译并保持稳定性。我们高素质的科学团队可以帮助设计、优化和合成特定 mRNA。我们 RNA 研发实验室可以为 IND 和 IND 前的功效和毒性研究提供优质 RNA 产品。

mRNA 疫苗的未来

mRNA 疫苗的未来

亲和纯化(也称为亲和层析)被认为是纯化层析或从复杂混合物(例如粗制细胞裂解物、细胞培养上清液或其他样品)中富集感兴趣蛋白质强大方法。

信使 RNA (mRNA) 技术可用于发现其他传染病的新药和治疗方法。

COVID 19大流行出现之前,大多数公众甚至没有听说过信使RNA,更不用说它在疾病治疗和预防方面的巨大潜力了。尽管过去25年来对mRNA的可能应用进行了广泛的研究和实验室实验,但一些人认为COVID 19疫苗的开发过于仓促,因此缺乏可信度。有些人甚至认为它弊大于利。然而,针对致命的 COVID 19 大流行的 mRNA 疫苗的成功证明反对者是错误的。这种新颖的接种方法永远改变了疫苗行业的未来,并为对抗其他传染病和未来流行病开辟了一个充满机遇的全新世界。

与传统疫苗相比的优势

与传统疫苗相比,使用 mRNA 技术生产的疫苗具有多种优势。具体来说,它们更安全、更有效、更容易适应,并且需要更少的生产时间和成本。

安全。传统疫苗使用灭活病毒来引发免疫反应,而 mRNA 疫苗不包含完整的微生物(无论是死的还是活的),并且不会造成感染或 DNA 整合的风险。然而,在免疫接种后的几天内可能会出现轻微和暂时的副作用(例如肌肉疼痛、注射部位肿胀和流感样症状)。

功效。最近的进展是为了规避 mRNA 技术的局限性。具体来说,mRNA 分子被包装在脂质中,以提高稳定性、细胞递送效率和免疫反应。

适应性。 mRNA 可以根据需要进行开发和调整,使其能够轻松适应不同的病原体。由于只需要目标蛋白的遗传密码,因此实际上可以在几天内生成合成 mRNA 。值得注意的是,COVID 19 疫苗接种的主要延误与生产、测试和监管审批有关。

成本效益。与其他平台相比,mRNA疫苗更具成本效益,随着未来的进步,生产成本有望进一步降低。

未来该何去何从?

毫不奇怪,鉴于 mRNA 疫苗在对抗 COVID 19 方面取得了惊人的成功,科学家们决心进一步开发该技术。一些公司正在研究在较高温度下更稳定的疫苗配方,而另一些公司正在试验单剂第二代疫苗。可有效对抗未来可能出现的病毒株的通用 COVID 19 疫苗也在研发中。

针对以下情况开发 mRNA 疫苗,仅举几例:

  • 流感

  • 艾滋病病毒

  • 寨卡病毒

  • 黄热病

  • 结核

  • 乙型肝炎

  • 囊性纤维化

  • 狂犬病

  • 癌症

BioNTech 和辉瑞正在合作开发一种针对季节性流感病毒的通用 mRNA 疫苗,而 Moderna 目前正在进行呼吸道合胞病毒 (RSV) mRNA 疫苗的一期临床试验。与此同时,该公司正在招募 CMV 疫苗的 3 期临床试验人员。

CureVac 的 mRNA 狂犬病疫苗正处于一期临床试验,而 mRNA HIV 疫苗目前正处于临床前试验的早期阶段。

BioNTEch 和 Moderna 还在测试几种 mRNA 癌症疗法和针对多种癌症的个性化治疗,包括黑色素瘤、结直肠癌和头颈癌。

鉴于 mRNA 疫苗只需要特定蛋白质的一段遗传密码即可刺激免疫反应,因此它可以用于针对任何现有的病原体。事实上,mRNA 技术的可能性和潜力几乎是无限的。

用 Acanthus Research 设计用于 mRNA 疫苗的脂质纳米颗粒载体

用 Acanthus Research 设计用于 mRNA 疫苗的脂质纳米颗粒载体

mRNA 疫苗的前景

信使核糖核酸 (mRNA) 疫苗有望比传统的减毒活病原体疫苗和亚单位疫苗更有效、更安全。它们也比 DNA 疫苗更容易开发并且可能更安全,DNA 疫苗掺入细胞遗传物质的风险非常低但确实存在。

为了使 mRNA 疫苗有效,必须将寡核苷酸输送到胞质溶胶中。长期以来,这一直是一个问题,因为裸露的 mRNA 会被无处不在的核糖核酸酶迅速降解。在多年来出现的众多解决方案中,尤其是非病毒载体和脂质纳米颗粒 (LNP) 似乎是最有前途的。 BioNTech/Pfizer 和 Moderna xin冠 疫苗是很早获准用于人类的 mRNA 疫苗,该疫苗利用了 LNP 载体技术。

用于 mRNA 疫苗的 LNP 设计

适当设计的 LNP 应结合并封装 mRNA,从而保护其免受核糖核酸酶的侵害。囊泡必须靶向带负电荷的细胞膜,进行内吞作用,然后将包埋的寡核苷酸从核内体卸载到胞质溶胶中,使 mRNA 可用于翻译(见图 1)。在  xin冠 疫苗中,LNP 包含四种不同的成分:可电离的阳离子脂质、中性磷脂、PEG 结合脂质和胆固醇。磷脂和胆固醇被纳入 LNPs 以帮助稳定囊泡结构。磷脂还可以通过磷酸基团的负电荷或通过使核内体从层状相转变为六方相来促进核内体的破坏。胆固醇对于细胞转染是需要的。添加 PEG 脂质以控制粒径并防止储存时聚集。

LNP 可能含有佐剂,或者它们本身可能具有佐剂作用。许多脂质激活免疫系统并诱导短暂的局部炎症,这是疫苗效力所必需的。囊泡的表面可以用增加 LNP 对某些细胞类型的亲和力的分子“装饰”:例如,碳水化合物促进通过特定受体与树突细胞结合。

当前 mRNA 疫苗的一个重要但尚未解决的问题是它们的储存稳定性。目前需要低温来保持 mRNA 的完整性。非常需要疫苗在 2–8 °C 下的稳定性。 mRNA 暴露于水似乎是 RNA 不稳定的主要原因。阳离子脂质与带负电荷的 mRNA 的相互作用可能通过保护寡核苷酸免受水和调节纳米颗粒内部的 pH 值而对寡核苷酸产生稳定作用。

由于 LNPs 在 mRNA 疫苗开发中的巨大前景,近年来对新型脂质和类脂质材料的研究大大加强。改进的脂质、衍生脂质和类脂已被开发并用于构建最能执行有效 mRNA 载体的许多功能的 NLP。通过结构修饰、非天然脂肪酸的引入、聚乙二醇化或使用各种脂肪酸的定制组合来定制脂质特性是将其适用于特定应用的重要工具。


Sox2 mRNA, Human05-0016


Sox2 mRNA, Human

简要描述:Sox2 mRNA, Human ,产品型号:05-0016。
通常用于细胞重编程系统以生成诱导多能干 (iPS) 细胞的 Sox2 蛋白。这种体外转录的 mRNA 结合了假尿苷和 5-甲基胞苷修饰的核苷酸,以最大限度地减少细胞干扰素对单链 RNA 的反应。

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Sox2 mRNA, Human ,产品型号:05-0016

Sox2 mRNA, Human ,描述:

公式

100 ng/ul 无 RNase TE 缓冲液,pH 7.0

储存和稳定性

储存在 -70 °C 或以下。按照指示储存,自收到之日起至少可稳定 3 个月。处理本产品时戴上手套。使用无 RNase 管和屏障移液器吸头。在冰上解冻。保持在冰上,直到样品被移除。避免多次冷冻和解冻循环 (<5)。等分到实验数量。

质量控制

免疫细胞化学证实了正确的蛋白质表达和定位。


上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

Agrisera MicroRNA相关研究植物蛋白抗体火热促销中!

MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成。miRNA在基因位置及序列上高度保守;每个miRNA可以有多个靶基因,而几个miRNA也可以调节同一个基因;miRNA可以通过破坏靶mRNA的稳定性,抑制靶mRNA的翻译来对靶mRNA发挥调控作用。miRNA通过调节基因表达,在植物生长发育、逆境响应等过程中发挥重要调控作用。研究miRNA的产生和功能机制,对于揭示基因表达调控规律、开发改良作物农艺性状的新资源具有重要意义。

Agrisera MicroRNA相关研究植物蛋白抗体火热促销中!

AGO蛋白质是一类庞大的蛋白质家族,是组成RISCs复合物的主要成员。AGO蛋白(argonaute proteins)由N末端、PAZ、MID和PIWI4个结构域组成。除了酿酒酵母,AGO蛋白在所有真核生物中均有存在,同时在细菌和古细菌中也有。AGO蛋白是RNA干扰通路中的关键因子,能够从转录、转录后及翻译水平参与基因表达的调控,并在基因组的完整性维持方面发挥着重要作用。

植物中miRNA主要在细胞核中被DCL1、HYL1和SE组成的切割小体(Dicing body)加工而成,随后成熟的miRNA进入细胞质中,再以AGO1为中心的RNA沉默复合体(RISC)对靶基因进行剪切或翻译抑制。有研究表明,HYL1在细胞核和细胞质均存在;在细胞核中,HYL1是DCL1重要的互作蛋白,主要参与miRNA加工过程;在细胞质中,HYL1能够与AGO1和AMP1互作,通过调控AGO1在多聚核糖体上的累积,进而调控miRNA介导的翻译抑制过程。

Agrisera MicroRNA相关研究植物蛋白抗体火热促销中!

HEN1蛋白是一类作用于RNA 3’末端的甲基转移酶,其同源物在植物、动物和细菌中均有存在。HEN1蛋白对miRNA和siRNA的甲基化有助于增强小RNA的稳定性。甲基化能够保护miRNA避免3’末端的尿苷化,从而避免3’-5’核酸外切酶介导的降解。HEN1蛋白最开始是作为一个植物花发育相关基因被发现,它在雄蕊和心皮发育过程中发挥着重要的作用。有研究表明HEN1突变株中miRNA的丰度明显减少,说明HEN1对miRNA积累十分重要。

为回馈广大客户,上海金畔现联合专业植物学抗体品牌Agrisera推出miRNA相关抗体促销活动,活动内容如下:

      活动时间:即日起至12月27日

      活动对象:终端客户可参与

      活动内容:促销产品限时“7折”特惠

      促销产品:促销产品见下表

品牌

货号

产品名称

Agrisera

AS06 136

HYL1 | Hyponastic leave phenotype ds-RNA binding protein

Agrisera

AS06 170

CSD2 | Chloroplastic Cu/Zn superoxide dismutase

Agrisera

AS07 219

CCS | Chloroplastic copper chaperone for SOD

Agrisera

AS09 527

AGO1 | Argonaute 1

Agrisera

AS09 530

CBP20 | nuclear cap-binding protein subunit 2

Agrisera

AS09 531

CBP80 | nuclear cap-binding protein subunit 1

Agrisera

AS09 532A

SE | Serrate RNA effector molecule (rabbit antibody)

Agrisera

AS09 617

AGO4 | Argonaute 4

Agrisera

AS10 671

AGO5 | Argonaute 5

Agrisera

AS10 672

AGO6 | Argonaute 6

Agrisera

AS10 673

AGO9 | Argonaute 9

Agrisera

AS12 2103

DCL3 | Dicer-like protein 3

Agrisera

AS13 2682

AGO2 | Argonaute 2

Agrisera

AS14 2776

AGO1 | Argonaute 1 (Chlamydomonas)

Agrisera

AS14 2797

AGO1-PAZ | Argonaute 1 PAZ domain (Chlamydomonas)

Agrisera

AS14 2799

AGO3-PAZ | Argonaute 3 PAZ domain (Chlamydomonas)

Agrisera

AS15 2836

SE | Serrate RNA effector molecule (chicken antibody)

Agrisera

AS15 2875

RPS1 | Ribosomal protein S1 (chloroplastic)

Agrisera

AS15 2876

RPL2 | Ribosomal protein L2 (chloroplastic)

Agrisera

AS15 2877

RPS7 | Ribosomal protein S7 (chloroplastic)

Agrisera

AS15 2879

KARI | Ketol-acid reductoisomerase

Agrisera

AS15 3071

AGO10 | Argonaute 10

Agrisera

AS15 3076

RPL4 |  ribosomal protein L4 (chloroplastic)

Agrisera

AS15 3095

HEN1 | HUA ENHANCER 1

Agrisera

AS16 3984

PELOTA | Protein pelota homolog

Agrisera

AS19 4307

DCL1 | Dicer-like protein 1

上海金畔生物科技有限公司代理的专业植物学抗体公司Agrisera成立于1980年,位于瑞典,有多年的研发和生产经验,致力于植物/环境科学研究中所需蛋白抗体的研发,主要集中于模式植物及其他植物的生理、病理等相关蛋白抗体,涵盖拟南芥、水稻、玉米、大豆、木本植物、藻类等30多个物种。Agrisera在2019年荣获CiteAb颁发的全球科研试剂行业中植物抗体优秀供应商奖项。

Agrisera MicroRNA相关研究植物蛋白抗体火热促销中!

上海金畔生物科技有限公司做为Agrisera中国区代理为客户提供优质的植物抗体,专业的前沿资讯,完备的产品及物流服务。此外上海金畔生物科技有限公司代理的PhytoTech和PCT品牌还能为您提供植物组培培养基、生长调节剂、植物凝胶、抗生素以及广谱性高效植物组培抗菌剂PPM,全方位助力植物学研究。

若对活动或者产品感兴趣欢迎致电上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765或者登陆官方网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

mRNA疫苗质量控制知多少

自新冠疫情爆发以来,疫苗研发一直是医药界最为关心的话题,其中mRNA疫苗因其研发和生产速度快更是被寄予厚望。mRNA疫苗是将外源目的基因序列通过转录、合成等工艺制备的mRNA通过特定的递送系统导入机体细胞并表达目的蛋白、刺激机体产生特异性免疫学反应,从而使机体获得免疫保护的一种核酸制剂。

mRNA疫苗进入体内如何发挥作用

通常情况下,mRNA疫苗通过胞吞作用以内含体的形式进入细胞质内,为了保证mRNA在翻译前保持完整,mRNA需要在内含体与溶酶体结合前打破内含体包膜并逃离,释放出来的mRNA分子在细胞质里游动,直至游到核糖体,并在此翻译成肽链,最终折叠成蛋白质,这个外源蛋白被称为抗原蛋白,它能刺激免疫系统,诱导针对该抗原的免疫反应,从而达到预防相关疾病的效果。

抗原蛋白在蛋白酶体中分解成较小的抗原片段,片段通过主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子在细胞表面展示给细胞毒性T细胞(就是CD8+T细胞)。活化的细胞毒性T细胞通过分泌细胞分子,如穿孔素、颗粒酶等杀死感染细胞。此外,分泌的抗原可被细胞摄取,并通过MHC II类蛋白在细胞表面呈递给辅助性T细胞(就是CD4+T细胞),辅助性T细胞通过刺激B细胞产生抗体,并通过炎性细胞因子激活吞噬细胞,如巨噬细胞,实现病原体的清除,详见下图。

mRNA疫苗质量控制知多少

(图片来源于网络)

mRNA疫苗工业生产流程

生产阶段

细节描述

相关杂质

DNA原液的制备

构建含目的基因的载体、质粒扩增以及DNA的线性化;也可通过PCR扩增工艺获取

宿主菌DNA、宿主菌RNA、宿主蛋白残留、质粒DNA、DNA聚合酶和内切酶等

mRNA原液的制备

以线性DNA为模板,利用体外转录技术(IVT)制备mRNA,

此阶段制备的mRNA,包含5′端加帽结构(Cap)和3′polyA加尾结构

(1)产品相关杂质:mRNA功能的截短序列(可能来源于转录不完全或mRNA的降解/断裂)、可能导致非特异性免疫反应的双链mRNA序列、加帽不完全的mRNA、去磷酸不完全的mRNA、修饰过度的mRNA、双链RNA、长链RNA、残留模板DNA等;

(2)工艺相关杂质:如帽子相关杂质、残留蛋白酶、RNA聚合酶、有机溶剂、金属离子残留、残留酶底物和内毒素等。

mRNA制剂生产

采用不同技术将mRNA与纳米递送材料通过自组装形成纳米粒子,经浓缩、纯化以及无菌过滤后进行灌装。LNP是mRNA疫苗递送的最佳选择之一

(1)正电荷材料相关杂质,包括材料合成产生的杂质以及mRNA复合过程中可能产生的杂质;

(2)不饱和脂质的氧化及相关降解产物;

(3)纳米颗粒聚集产生的颗粒物;

(4)未组装的脂质分子、阳离子物质;未包封的mRNA;在制剂及贮存过程中可能降解或失活的mRNA等。

mRNA疫苗质量保证体系

对mRNA序列进行设计和优化,是为了提高mRNA翻译效率、降低先天免疫原性和增加稳定性,包括ORF区密码子、GC含量优化、修饰和序列改构;帽子结构、转录启动子、5’UTR和3’UTR、加Poly(A)加尾长度设计、对所用核苷三磷酸(NTP)类型(如将尿嘧啶修饰改成1-甲基-假尿苷(1mΨ))及其修饰信息等进行设计。这些工艺环节不可避免的会产生残留或引入杂质。mRNA疫苗产品的杂质类型大致可分为mRNA相关杂质、DNA残留、蛋白质残留、递送物质相关杂质、颗粒相关杂质及生产工艺相关杂质等。对主要杂质进行监测与分析,是至关重要的。

mRNA疫苗质量控制知多少

(图片来源于网络)

鉴于目前mRNA疫苗技术还不够成熟,新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则(试行)中,建议考虑的质控项目有:mRNA鉴别、mRNA序列长度、序列完整性及准确性、mRNA理化特性(如pH、外观等)、mRNA含量、加帽率、纯度、产品相关杂质(如不完整mRNA、双链RNA等)、工艺相关杂质(如残留蛋白酶、DNA模板残留、有机溶剂、金属离子残留等)、无菌、内毒素等。

上海金畔生物科技有限公司作为专业服务中国生命科学领域16年的供应商,以专业和优质的服务赢得了众多客户的支持和信赖!目前已成为多家世界知名跨国企业中国区研发和生产基地、制药企业与诊断企业以及各大高校与科研院所官方采购平台的指定供应商。其中上海金畔生物科技有限公司代理的SCICONS品牌生产的双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒备受mRNA疫苗生产企业青睐,广泛应用于mRNA疫苗产品的质量控制环节,与此同时,SCICONS品牌产品还可应用于植物学研究、病毒及微生物学研究等细分领域,为了方便查找,小编汇总了SCICONS品牌的产品列表,更多产品信息欢迎致电上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765或登录官网www.jinpanbio.cn查询和了解。

SCICONS产品信息

品牌

货号

英文品名

中文品名

规格

SCICONS

10010200

Mouse anti double-stranded RNA (J2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J2)

200g

SCICONS

10010500

Mouse anti double-stranded RNA (J2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J2)

500g

SCICONS

10040200

Mouse anti double-stranded RNA (J5)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J5)

200g

SCICONS

10040500

Mouse anti double-stranded RNA (J5)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (J5)

500g

SCICONS

10020200

Mouse anti double-stranded RNA (K1)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K1)

200g

SCICONS

10020500

Mouse anti double-stranded RNA (K1)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K1)

500g

SCICONS

10050100

Mouse anti double-stranded RNA (J2, J5 and K1) Comparison Kit

小鼠抗双链RNA单克隆抗体(J2,J5 and K1)组合试剂

3 x 100 µg

SCICONS

10613002

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (J2 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(J2)

Kit

SCICONS

10623002

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (K1 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(K1)

Kit

SCICONS

10623005

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (K1 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(K1)

Kit

SCICONS

10613005

Double-stranded RNA (dsRNA) ELISA kit (J2 based)

双链RNA (dsRNA) ELISA试剂盒(J2)

Kit

SCICONS

10030010

Mouse anti double-stranded RNA (K2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K2)(干冰运输)

10ml

SCICONS

10030005

Mouse anti double-stranded RNA (K2)

小鼠抗双链RNA单克隆抗体 (K2)(干冰运输)

5ml

 

mRNA疫苗质量控制知多少

SCICONS总部位于匈牙利的锡兹拉库(Szirák),是一家提供与双链RNA分子杂交的小鼠单克隆抗体的厂家,SCICONS在1990年就开始利用杂交瘤细胞系生产抗双链RNA(anti-dsRNA)的单克隆抗体,客户遍布世界很多国家和地区,在美国有超过一半的州都在使用SCICONS的单克隆抗体,客户包括众多研究机构的学者,发表的文章超过200多篇。SCICONS于2021年4月13日被Nordic-MUbio BV收购。

参考文献:

  1. 新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则(试行)
  2. Schönborn, J., Oberstrass, J., Breyel, E., Tittgen, J., Schumacher, J. and Lukacs, N. (1991) Monoclonal antibodies to double-stranded RNA as probes of RNA structure in crude nucleic acid extracts. Nucleic Acids Res.19, 2993-3000
  3. K. Karikó, H. Muramatsu, J. Ludwig, D. Weissman, Generating the optimal mRNA for therapy: HPLC purification eliminates immune activation and improves translation of nucleoside-modified, protein-encoding mRNA, Nucleic Acids Research (2011) 39(21); e142, https://doi.org/10.1093/nar/gkr695.
  4. Lukacs, N. (1997) Detection of sense:antisense duplexes by structurespecific anti-RNA antibodies. In: Antisense Technology. A Practical Approach, C. Lichtenstein and W. Nellen (eds), pp. 281-295. IRL Press, Oxford.

安全高效方便的RNase清除试剂RNase-ExitusPlus™

新冠肆虐两年,一波还未平息,一波又来侵袭,唯有预防和治疗齐头并进,才能适当抑制疫情的发展。相较于传统疫苗,mRNA疫苗有诸多优势。mRNA疫苗是一种新型的、预防传染病和慢性病的疫苗, mRNA疫苗可以让我们的细胞制造一种蛋白质,甚至只是蛋白质的一小部分,来触发免疫反应,它潜力无限。

如下图所示,mRNA疫苗是将外源靶抗原的基因序列通过转录、合成等工艺制备的mRNA通过特定的递送系统导入机体细胞,通过在体内表达目的蛋白,刺激机体产生特异性免疫学反应,从而使机体获得免疫保护的一种核酸制剂。然而所有与RNA相关的生物试验都会涉及到RNase的污染及RNA降解的预防问题,并且少量的RNase污染就会严重影响后面的实验结果。

安全高效方便的RNase清除试剂RNase-ExitusPlus™

mRNA疫苗质量控制

在mRNA疫苗的生产过程中以及任何生物制剂产品中,质量控制都是非常严格的!以mRNA制备为例,在转录模板中的杂质就有很多,如质粒DNA抽提过程中残留的RNaseA、宿主菌DNA、宿主菌RNA和宿主蛋白等,它们都会显著影响体外转录反应和转录mRNA的质量,需对模板的纯度进行严格的把关。在体外转录的过程中杂质的污染也会极大地影响mRNA疫苗的安全性和效力,例如被引入人体细胞的双链RNA和DNA-RNA杂交分子等能被细胞模式识别受体识别触发先天免疫反应,诱导I型干扰素的表达,降低蛋白质的翻译。研究证明,去除mRNA制备物中的污染物会降低先天免疫反应,并导致体外报告蛋白表达水平显著提高。

RNase-ExitusPlus

在mRNA疫苗的生产以及其他与mRNA相关的生物制品中,RNase污染的清除尤为重要,德国Applichem研发的RNase-ExitusPlus™是一种非碱性、无腐蚀性且无致癌性的新型RNase清除液,它对RNase污染物具有很好的清除性能,是适用于任何表面的即用型RNase污染清除液,可用于实验室表面的清洁,如实验操作台、电泳设备、移液器和反应管等。

清除剂的独特优势

  1. 简便性:使用后便开始去污,在清除剂完全干燥之前(10~15分钟后)将其擦掉即可,之后无需再用无菌水清洗;
  2. 高效性:试剂中的有效成分,通过催化和协同作用,使蛋白质和RNase分子迅速失活,实现RNase的高效非酶降解;
  3. 安全性:不含腐蚀性无机酸或碱性物质,不会损坏或腐蚀设备和材料,仅含有低浓度的酒精,不会对仪器、设备、器材、人体造成影响和伤害;
  4. 无污染:所有组分可生物降解、不会造成环境污染和破坏。

使用方法

  1. 喷(适用于实验操作台表面/手套等)

直接将RNase-ExitusPlus™喷到操作台表面作用10~15分钟,无菌湿布擦拭后即可,无需用水冲洗;

  1. 擦(适用于仪器表面,剪刀,镊子等工具)用布或纸巾蘸取适量 RNase-ExitusPlus™擦拭表面,充分作用后再用干净湿布擦一遍即可;
  2. 泡(适用于移液器等其他拆卸的细小部件)置于RNase-ExitusPlus™中浸泡1min,然后用清水冲洗干净晾干后安装即可;

小贴士

  1. 升温至50度可提高反应速度;
  2. RNase-ExitusPlus™为德国Applichem注册商标

处理效果

安全高效方便的RNase清除试剂RNase-ExitusPlus™

将干燥的RNase A放入反应管的样品1、3和4。然后,RNase A 样品用1ml的 H2O(3,4) 或RNase-ExitusPlus™ (1)处理,室温下放置5分钟。紧接着用1ml的无菌水清洗两次。然后在每个管子里放入从大肠杆菌得到的RNA 5ug。将10ug的新鲜分装RNase A添加到管4中,所有管在37° c孵育30分钟。5ug未处理的从大肠杆菌得到的RNA作为对照(C)。最后,加入缓冲液和将样本加入 1%琼脂糖凝胶电泳检测。

产品信息

产品名称

货号

规格

RNase-ExitusPlus™

A7153.0500

500ml

A7153.1000RF

1L

A7153.2500RF

2.5L

安全高效方便的RNase清除试剂RNase-ExitusPlus™

安全高效方便的RNase清除试剂RNase-ExitusPlus™

PanReac Applichem是欧洲生物化学试剂与制药原辅料生产商,ITW成员公司,已成为全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业的重要供应商。全面提供细胞培养级、符合各国药典等生物制药上下游系列生物化学试剂,cGMP生产的原辅料。Applichem公司产品种类众多,覆盖领域广泛,产品级别丰富,性价比超高,包括实验室污染防治系列、实验室常用生化试剂、生物制药行业药典级与细胞培养级试剂,以及诊断研发工业中天然蛋白、酶、辅酶和底物等。

上海金畔生物科技有限公司致力于为广大客户提供专业高品质实验室公用产品,欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客户服务热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

mRNA体外合成试剂盒

mRNA(Messenger RNA或信使RNA)在人类生物学中起着基本作用,它转移存储在DNA中的指令来制造细胞所需的蛋白质。mRNA疫苗是将RNA在体外进行相关的修饰后传递至机体细胞内表达并产生蛋白抗原,从而导机体产生针对该抗原的免疫应答,进而扩大机体的免疫能力。

新冠疫情的突然爆发,加速了 mRNA 疫苗的研发和产业化,mRNA疫苗作为新一代技术,因其颠覆传统免疫激活路径,提供稳定高保护率和不错的安全性,深受市场关注。另外,体外 mRNA 的合成、加工、递送等技术不断的成熟,成本不断的降低,看得见的效用等使得mRNA 疫苗药物商业化生产的步伐不断加快。其在治疗肿瘤、免疫疾病等领域有着令人期待的发展空间。mRNA必将引领人类疫苗及药物的改革浪潮。

mRNA疫苗开发流程包括病原体识别、测序、mRNA体外合成和修饰、纯化等操作。

mRNA体外合成试剂盒

mRNA疫苗生产流程示意图

上海金畔生物科技有限公司代理的Jena Bioscience经过匠心研发开发出的HighYield T7 ARCA mRNA Synthesis Kit mRNA体外合成试剂盒包含一整套的RNA合成所需试剂,并配有详细的教程。HighYield T7 ARCA mRNA Synthesis Kit通过T7 RNA聚合酶体外转录产生大量ARCA mRNA。与传统的m7GpppG-capped mRNA相比,Anti-reverse cap analog (ARCA, m7,3′-OGpppG) capped (m)RNA具有更高的翻译效率。由此产生的5 ‘ -capped (m)RNA随后可用于微注射、转染或体外翻译等实验。

产品特点

  • 使用方便,包含整套mRNA合成所需试剂
  • 产量高,在20 μl反应条件下,可得到30~50 μg RNA
  • 快速便捷,孵育时间仅需30min
  • ARCA mRNA翻译效率更高

竞品比较

mRNA体外合成试剂盒

相关产品信息

品牌

产品名称

货号

规格

应用

Jena Bioscienc

HighYield T7 ARCA mRNA Synthesis Kit

RNT-102-S

15 reactions x 20 μl

合成ARCA-capped mRNA

Jena Bioscienc

HighYield T7 ARCA mRNA Synthesis Kit

RNT-102-L

50 reactions x 20 μl

合成ARCA-capped mRNA

Jena Bioscienc

HighYield T7 RNA Synthesis Kit S

RNT-101

50 reactions x 20 μl

合成未修饰RNA

Jena Bioscienc

HighYield T7 ARCA mRNA Synthesis Kit (m5CTP/Ψ-UTP)

RNT-103

15 reactions x 20 μl

合成5-mC & Ψ-U修饰ARCA-capped mRNA

Jena Bioscienc

HighYield T7 mRNA Synthesis Kit (m5CTP/Ψ-UTP)

RNT-104

15 reactions x 20 μl

合成5-mC & Ψ-U修饰mRNA

除上述mRNA体外合成试剂盒外,Jena Bioscienc还提供一系列相关高质量原料。包括:修饰核苷酸、T7 RNA聚合酶、加帽酶、加尾酶等。