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鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酸酐) CAS 521-31-3-AAT Bioquest荧光染料

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鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酸酐) CAS 521-31-3价格 1095
产品规格

1 g

产品货号

鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酸酐) CAS 521-31-3

产品参数
Ex (nm) 351 Em (nm) 415
分子量 177.16 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称：鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酸酐)

CAS：521-31-3

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品介绍

鲁米诺(luminol)，又名发光氨。化学名称为3-氨基邻苯二甲酰肼。常温下是一种黄色晶体或者米黄色粉末，是一种比较稳定的人工合成的有机化合物。鲁米诺是通用的发光化学试剂，与适当的氧化剂混合时会发出引人注目的蓝色光。它是白色至淡黄色的晶体，可溶于水和大多数有机极性溶剂，是一种HRP过氧化酶发光性底物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酸酐)。 

点击查看光谱

 

参考文献

Luminol-hydrogen peroxide chemiluminescence produced by sweet potato peroxidase
Authors: Alpeeva IS, Yu Sakharov I.
Journal: Luminescence. (2006)

Ultrasensitive assay of azithromycin in medicine and bio-fluids based on its enhanced luminol-H(2)O(2) chemiluminescence reaction using flow injection technique
Authors: Song Z, Wang C.
Journal: Bioorg Med Chem (2003): 5375

Application of an enhanced luminol chemiluminescence reaction using 4-[4,5-di(2-pyridyl)-1H-imidazol-2-yl]phenylboronic acid to photographic detection of horseradish peroxidase on a membrane
Authors: Kuroda N, Murasaki N, Wada M, Nakashima K.
Journal: Luminescence (2001): 167

Comparative studies of the chemiluminescent horseradish peroxidase-catalysed peroxidation of acridan (GZ-11) and luminol reactions: effect of pH and scavengers of reactive oxygen species on the light intensity of these systems
Authors: Osman AM, Zomer G, Laane C, Hilhorst R.
Journal: Luminescence (2000): 189

New phenylboronic acid derivatives as enhancers of the luminol-H(2)O(2)-horseradish peroxidase chemiluminescence reaction
Authors: Kuroda N, Kawazoe K, Nakano H, Wada M, Nakashima K.
Journal: Luminescence (1999): 361

What do we measure with luminol-, lucigenin- and penicillin-amplified chemiluminescence? 1. Investigations with hydrogen peroxide and sodium hypochlorite
Authors: Rost M, Karge E, Klinger W.
Journal: J Biolumin Chemilumin (1998): 355

Enhancer effect of fluorescein on the luminol-H2O2-horseradish peroxidase chemiluminescence: energy transfer process
Authors: Navas Diaz A, Gonzalez Garcia JA, Lovillo J.
Journal: J Biolumin Chemilumin (1997): 199

Synthesis and characterization of 4-iodophenylboronic acid: a new enhancer for the horseradish peroxidase-catalyzed chemiluminescent oxidation of luminol
Authors: Kricka LJ, Cooper M, Ji X.
Journal: Anal Biochem (1996): 119

4-Phenylylboronic acid: a new type of enhancer for the horseradish peroxidase catalysed chemiluminescent oxidation of luminol
Authors: Kricka LJ, Ji X.
Journal: J Biolumin Chemilumin (1995): 49

Assay of cholinesterase using a pro-enhancer of the luminol-H2O2-horseradish peroxidase reaction
Authors: Navas Diaz A, Garcia Sanchez F, Gonzalez Garcia JA, Bracho Del Rio V.
Journal: J Biolumin Chemilumin (1995): 285

Azido-Cy5酪胺-AAT Bioquest荧光染料

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Azido-Cy5酪胺价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

Azido-Cy5酪胺

产品参数
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 1030.14 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Azido-Cy5酪酰胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品，对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明，酪胺信号放大（TSA）是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术，具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力，该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测，酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号，并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Azido-Cy5酪胺含有明亮的Cy5，可以使用标准的Cy5滤波片组轻松检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Azido-Cy5酪胺。 

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: Cy5滤波片组
Em： Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5滤波片组
实验方案

样品染色示例

概述

1.固定/透化/封闭细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液，在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟

 

操作步骤

        在没有额外说明的情况下，所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C，避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。

1.制备储存溶液

Tyramide原液（1000X）加入适量的DMSO，制成1-5mM的酪胺储备液。
注意：未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存

2.制备工作溶液

Tyramide工作溶液（1X）：
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003％H2O2的缓冲液中。
注意：Tris Buffer，pH = 7.4时可用于获得佳性能。
注意：Tyramide工作溶液应立即使用。

3.细胞固定和透化

3.1在室温下用PBS中的3.7％甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1％Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意：组织固定，脱蜡和再水化，根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。

4.过氧化物酶标记

4.1任选：通过在过氧化物酶猝灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，在室温下用PBS冲洗两次。 
4.2可选：如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白，建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液（例如含有1％BSA的PBS）在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液，加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次，每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液，在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次，每次5分钟。

5.酪酰胺标记

5.1为每个样品准备并应用100μL酪酰胺工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。
注意：如果您观察到非特异性信号，可以缩短酪酰胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪酰胺。
5.2用PBS冲洗三次。

6.荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂，如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪酰胺标签的信号。

表1.推荐用于核复染的产品

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 Nuclear Blue DCS1 350/461
17550 Nuclear Green DCS1 503/526
17551 Nuclear Orange DCS1 528/576
17552 Nuclear Red DCS1 642/660

 

试剂应用文献

Antibody-Driven Proximity Labeling in Fixed Tissues
Authors: Bar, Daniel Z and Collins, Francis S
Journal: (2019): 73–81

 

参考文献

Tyramide Signal Amplification for Immunofluorescent Enhancement
Authors: Faget L, Hnasko TS.
Journal: Methods Mol Biol (2015): 161
 
Enhanced detection of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus in fixed tissues by in situ hybridization following tyramide signal amplification
Authors: Trang NT, Hirai T, Ngan PH, Lan NT, Fuke N, Toyama K, Yamamoto T, Yamaguchi R.
Journal: J Vet Diagn Invest (2015): 326
 
Rapid and sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 in milk and ground beef using magnetic bead-based immunoassay coupled with tyramide signal amplification
Authors: Aydin M, Herzig GP, Jeong KC, Dunigan S, Shah P, Ahn S.
Journal: J Food Prot (2014): 100
 
Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis
Authors: Stack EC, Wang C, Roman KA, Hoyt CC.
Journal: Methods (2014): 46
 
KSHV cell attachment sites revealed by ultra sensitive tyramide signal amplification (TSA) localize to membrane microdomains that are up-regulated on mitotic cells
Authors: Garrigues HJ, Rubinchikova YE, Rose TM.
Journal: Virology (2014): 75
 
Sensitive whole-mount fluorescent in situ hybridization in zebrafish using enhanced tyramide signal amplification
Authors: Lauter G, Soll I, Hauptmann G.
Journal: Methods Mol Biol (2014): 175
 
Characterization of GABAergic neurons in the mouse lateral septum: a double fluorescence in situ hybridization and immunohistochemical study using tyramide signal amplification
Authors: Zhao C, Eisinger B, Gammie SC.
Journal: PLoS One (2013): e73750
 
Quantification of alpha-tubulin isotypes by sandwich ELISA with signal amplification through biotinyl-tyramide or immuno-PCR
Authors: Draberova E, Stegurova L, Sulimenko V, Hajkova Z, Draber P.
Journal: J Immunol Methods (2013): 63
 
Pitfalls using tyramide signal amplification (TSA) in the mouse gastrointestinal tract: endogenous streptavidin-binding sites lead to false positive staining
Authors: Horling L, Neuhuber WL, Raab M.
Journal: J Neurosci Methods (2012): 124
 
Integrated tyramide and polymerization-assisted signal amplification for a highly-sensitive immunoassay
Authors: Yuan L, Xu L, Liu S.
Journal: Anal Chem (2012): 10737

Cy3 酪胺-AAT Bioquest荧光染料

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Cy3 酪胺价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

Cy3 酪胺

产品参数
Ex (nm) 555 Em (nm) 569
分子量 863.96 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cy3酪胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品，对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明，酪胺信号放大（TSA）是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术，具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力，该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测，酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号，并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cy3酪胺。 

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC滤波片
Em： Cy3/TRITC滤波片
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy3/TRITC滤波片
实验方案

样品染色示例

概述

1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液，在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟

操作步骤

        在没有额外说明的情况下，所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C，避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。

1.制备储存溶液

Tyramide原液（1000X）加入适量的DMSO，制成1-5mM的酪胺储备液。
注意：未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存

2.制备工作溶液

Tyramide工作溶液（1X）：
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003％H2O2的缓冲液中。
注意：Tris Buffer，pH = 7.4时可用于获得佳性能。
注意：Tyramide工作溶液应立即使用。

3.细胞固定和透化

3.1在室温下用PBS中的3.7％甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1％Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意：组织固定，脱蜡和再水化，根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。

4.过氧化物酶标记

4.1任选：通过在过氧化物酶猝灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，在室温下用PBS冲洗两次。 
4.2可选：如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白，建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液（例如含有1％BSA的PBS）在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液，加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次，每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液，在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次，每次5分钟。

5.酪胺标记

5.1为每个样品准备并应用100μL酪胺工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。
注意：如果您观察到非特异性信号，可以缩短酪胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪胺。
5.2用PBS冲洗三次。

6.荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂，如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪胺标签的信号。

表1.推荐用于核复染的产品

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 Nuclear Blue DCS1 350/461
17550 Nuclear Green DCS1 503/526
17551 Nuclear Orange DCS1 528/576
17552 Nuclear Red DCS1 642/660

 

参考文献

Tyramide Signal-Amplified Immunofluorescence of MYCN and MYC in Human Tissue Specimens and Cell Line Cultures.
Authors: Schafer, Johanna M and Pietenpol, Jennifer A
Journal: Bio-protocol (2020): e3677
 
Cascade signal amplification for sensitive detection of exosomes by integrating tyramide and surface-initiated enzymatic polymerization.
Authors: Huang, Zhipeng and Lin, Qiuyuan and Yang, Bin and Ye, Xin and Chen, Hui and Weng, Wenhao and Kong, Jilie
Journal: Chemical communications (Cambridge, England) (2020): 12793-12796
 
Detection of Cytokine Receptors Using Tyramide Signal Amplification for Immunofluorescence.
Authors: Wang, Herui and Pangilinan, Ryan L and Zhu, Yan
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2020): 89-97
 
Characterizing the Tumor Immune Microenvironment with Tyramide-Based Multiplex Immunofluorescence.
Authors: Mori, Hidetoshi and Bolen, Jennifer and Schuetter, Louis and Massion, Pierre and Hoyt, Clifford C and VandenBerg, Scott and Esserman, Laura and Borowsky, Alexander D and Campbell, Michael J
Journal: Journal of mammary gland biology and neoplasia (2020): 417-432
 
Procedural Requirements and Recommendations for Multiplex Immunofluorescence Tyramide Signal Amplification Assays to Support Translational Oncology Studies.
Authors: Parra, Edwin Roger and Jiang, Mei and Solis, Luisa and Mino, Barbara and Laberiano, Caddie and Hernandez, Sharia and Gite, Swati and Verma, Anuj and Tetzlaff, Michael and Haymaker, Cara and Tamegnon, Auriole and Rodriguez-Canales, Jaime and Hoyd, Clifford and Bernachez, Chantale and Wistuba, Ignacio
Journal: Cancers (2020)
 
Sensitive Multiplexed Fluorescent In Situ Hybridization Using Enhanced Tyramide Signal Amplification and Its Combination with Immunofluorescent Protein Visualization in Zebrafish.
Authors: Lauter, Gilbert and Söll, Iris and Hauptmann, Giselbert
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2020): 397-409
 
Tyramide signal amplification mass spectrometry (TSA-MS) ratio identifies nuclear speckle proteins.
Authors: Dopie, Joseph and Sweredoski, Michael J and Moradian, Annie and Belmont, Andrew S
Journal: The Journal of cell biology (2020)
 
Highly Sensitive Detection of PCV2 Based on Tyramide Signals and GNPL Amplification.
Authors: Zhang, Shouping and Hu, Bin and Xia, Xiaojing and Xu, Yanzhao and Hang, Bolin and Jiang, Jinqing and Hu, Jianhe
Journal: Molecules (Basel, Switzerland) (2019)
 
An ultrasensitive electrochemical immunosensor for procalcitonin detection based on the gold nanoparticles-enhanced tyramide signal amplification strategy.
Authors: Liu, Pei and Li, Chao and Zhang, Ruixuan and Tang, Qing and Wei, Jia and Lu, Yan and Shen, Pingping
Journal: Biosensors & bioelectronics (2019): 543-550
 
A amperometric immunosensor for sensitive detection of circulating tumor cells using a tyramide signal amplification-based signal enhancement system.
Authors: Zhou, Xiaoyan and Li, Yujian and Wu, Haiping and Huang, Wei and Ju, Huangxian and Ding, Shijia
Journal: Biosensors & bioelectronics (2019): 88-94

Cy5 酪胺-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cy5 酪胺价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

Cy5 酪胺

产品参数
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 890.00 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cy5酪酰胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品，对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明，酪胺信号放大（TSA）是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术，具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力，该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测，酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号，并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Cy5酪胺含有明亮的Cy5，可以使用标准的Cy5滤波片组轻松检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cy5酪酰胺。 

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: Cy5滤波片组
Em： Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5滤波片组
实验方案

样品染色示例

概述

1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液，在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟

操作步骤

        在没有额外说明的情况下，所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C，避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。

1.制备储存溶液

Tyramide原液（1000X）加入适量的DMSO，制成1-5mM的酪酰胺储备液。
注意：未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存

2.制备工作溶液

Tyramide工作溶液（1X）：
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003％H2O2的缓冲液中。
注意：Tris Buffer，pH = 7.4时可用于获得佳性能。
注意：Tyramide工作溶液应立即使用。

3.细胞固定和透化

3.1在室温下用PBS中的3.7％甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1％Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意：组织固定，脱蜡和再水化，根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。

4.过氧化物酶标记

4.1任选：通过在过氧化物酶猝灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，在室温下用PBS冲洗两次。 
4.2可选：如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白，建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液（例如含有1％BSA的PBS）在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液，加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次，每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液，在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次，每次5分钟。

5.酪酰胺标记

5.1为每个样品准备并应用100μL酪酰胺工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。
注意：如果您观察到非特异性信号，可以缩短酪酰胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪酰胺。
5.2用PBS冲洗三次。

6.荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂，如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪酰胺标签的信号。

表1.推荐用于核复染的产品

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 Nuclear Blue DCS1 350/461
17550 Nuclear Green DCS1 503/526
17551 Nuclear Orange DCS1 528/576
17552 Nuclear Red DCS1 642/660

AF488 酪胺-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
AF488 酪胺价格 2823
产品规格

200 slides

产品货号

产品参数
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 856.02 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

AF488酪胺是美国AAT Bioquest生产的荧光探针，对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明，酪胺信号放大（TSA）是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术，具有更高的检测灵敏度。TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力，该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测，酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号，并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。AF488酪胺含有明亮的AlexaFluor®488，可以使用标准FITC滤波片组轻松检测（AlexaFluor®是ThermoFisher的商标）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的AF488酪胺。 注1：200slides：一管试剂足够200个玻片使用； 注2：200slides大约为100ug。

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: FITC滤波片组
Em： FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: FITC滤波片组
实验方案

染色样品示例

概述

1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液，室温下在细胞或组织中5-10分钟

 

操作步骤

        在没有额外说明的情况下，所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。


1.Tyramide原液（200X）：
将100μLDMSO加入小瓶中并充分混合。
注意：未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存。

2.Tyramide工作溶液（1X）：
将100μLTyramide原液加入20 mL含有0.003％H2O2的缓冲液中。
注意：Tris Buffer，pH = 7.4可用于获得佳性能。
注意：Tyramide工作溶液应立即使用。
注意：20 mL溶液适用于200次测试。

3.细胞固定和透化
3.1在室温下用PBS中的3.7％甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1％Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。

4.过氧化物酶标记
4.1任选：通过在过氧化物酶猝灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性。 在室温下用PBS冲洗两次。
4.2可选：如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白，建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液（例如含有1％BSA的PBS）在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液，加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次，每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液，在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次，每次5分钟。

5.Tyramide标记
5.1为每个样品准备并应用100μLTyramide工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。
注意：如果您观察到非特异性信号，可以缩短Tyramide的孵育时间。 您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。 或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Tyramide。
5.2用PBS冲洗三次。

6.荧光成像
6.1根据需要对细胞或组织样本进行计数。 AAT提供了一系列细胞核复染试剂，如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
6.2使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
6.3使用适当的过滤器组可视化来自Tyramide标签的信号。

 

表1.推荐用于核复染的产品

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 Nuclear Blue DCS1 350/461
17550 Nuclear Green DCS1 503/526
17551 Nuclear Orange DCS1 528/576
17552 Nuclear Red DCS1 642/660

 

参考文献

A amperometric immunosensor for sensitive detection of circulating tumor cells using a tyramide signal amplification-based signal enhancement system
Authors: X. Zhou
Journal: Biosens Bioelectron (2019): 88-94

An ultrasensitive electrochemical immunosensor for procalcitonin detection based on the gold nanoparticles-enhanced tyramide signal amplification strategy
Authors: P. Liu
Journal: Biosens Bioelectron (2019): 543-550

Gold nanoparticle labeling with tyramide signal amplification for highly sensitive detection of alpha fetoprotein in human serum by ICP-MS
Authors: X. Li
Journal: Talanta (2018): 40-46

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification
Authors: A. Jandura
Journal: J Vis Exp (2017): se name=”11070.enl” path=”C:WebsiteReferencesEN Files11070.enl”>11070.enlEndNote3317Jandura, A.Hu, J.Wilk, R.Krause, H. M.The Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research, University of Toronto; Department of Molecular Genetics, Uni

Selective Proteomic Proximity Labeling Assay Using Tyramide (SPPLAT): A Quantitative Method for the Proteomic Analysis of Localized Membrane-Bound Protein Clusters
Authors: J. S. Rees
Journal: Curr Protoc Protein Sci (2017): 19 27 1-19 27 18

Droplet-Free Digital Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Based on a Tyramide Signal Amplification System
Authors: K. Akama
Journal: Anal Chem (2016): 7123-9

Selective Proteomic Proximity Labeling Assay Using Tyramide (SPPLAT): A Quantitative Method for the Proteomic Analysis of Localized Membrane-Bound Protein Clusters
Authors: J. S. Rees
Journal: Curr Protoc Protein Sci (2015): 19 27 1-18

Quantum dot-based FRET for sensitive determination of hydrogen peroxide and glucose using tyramide reaction
Authors: X. Huang
Journal: Talanta (2013): 79-84

Gold nanoparticle-enzyme conjugates based FRET for highly sensitive determination of hydrogen peroxide, glucose and uric acid using tyramide reaction
Authors: X. Huang
Journal: Analyst (2012): 3659-66

Filtration-based tyramide amplification technique–a new simple approach for rapid detection of aflatoxin B1
Authors: D. Saha
Journal: Anal Bioanal Chem (2007): 1121-30

AF546 酪胺-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
AF546 酪胺价格 2823
产品规格

200 slides

产品货号

产品参数
Ex (nm) 561 Em (nm) 572
分子量 1282.88 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

AF532酪胺是美国AAT Bioquest生产的荧光探针，对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明，酪胺信号放大（TSA）是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术，具有更高的检测灵敏度。TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力，该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测，酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号，并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。AF532酪胺含有明亮的AlexaFluor®532，可以使用标准FITC滤波片组轻松检测（AlexaFluor®是ThermoFisher的商标）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的AF532酪胺。 注：200slides：一管试剂足够200个玻片使用；注2：200slides大约为100ug。

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC滤波片组
Em： Cy3/TRITC滤波片组
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化/阻断细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 添加结合HRP的二抗
  4. 准备酪酰胺工作溶液，并在室温下在细胞或组织中涂抹5-10分钟

 

溶液配制

储备溶液配制

酪胺储备溶液（200X）：向小瓶中加入100 µL DMSO，并充分混合。 注意：未使用的酪胺储备溶液可在2-8℃下储存。

 

工作溶液配制

酪胺工作溶液（1倍）：将100 µL的酪胺储备溶液添加到包含0.003％H2O2的20 mL缓冲液中。注意：可以使用pH = 7.4的Tris Buffer以获得佳性能。注意：应立即使用酪胺工作溶液。 注意：20 mL溶液适合200次测试。

 

实验步骤

（该步骤适用于细胞或组织染色）

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7％甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1％Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定，脱石蜡和补液

（根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。）

 

过氧化物酶标记

1.可选：通过在过氧化物酶淬灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选：如果使用结合HRP的链霉亲和素，建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液（例如含1％BSA的PBS）封闭30分钟。

4.除去封闭溶液，并添加稀释好的一抗，在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中，并在室温下孵育60分钟。注意：孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。 注意：如果您观察到非特异性信号，则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的佳孵育时间，或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂，如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

  

参考文献

Enhanced detection of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus in fixed tissues by in situ hybridization following tyramide signal amplification
Authors: Trang NT, Hirai T, Ngan PH, Lan NT, Fuke N, Toyama K, Yamamoto T, Yamaguchi R.
Journal: J Vet Diagn Invest (2015): 326

Tyramide Signal Amplification for Immunofluorescent Enhancement
Authors: Faget L, Hnasko TS.
Journal: Methods Mol Biol (2015): 161

KSHV cell attachment sites revealed by ultra sensitive tyramide signal amplification (TSA) localize to membrane microdomains that are up-regulated on mitotic cells
Authors: Garrigues HJ, Rubinchikova YE, Rose TM.
Journal: Virology (2014): 75

Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis
Authors: Stack EC, Wang C, Roman KA, Hoyt CC.
Journal: Methods (2014): 46

Rapid and sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 in milk and ground beef using magnetic bead-based immunoassay coupled with tyramide signal amplification
Authors: Aydin M, Herzig GP, Jeong KC, Dunigan S, Shah P, Ahn S.
Journal: J Food Prot (2014): 100

Sensitive whole-mount fluorescent in situ hybridization in zebrafish using enhanced tyramide signal amplification
Authors: Lauter G, Soll I, Hauptmann G.
Journal: Methods Mol Biol (2014): 175

Characterization of GABAergic neurons in the mouse lateral septum: a double fluorescence in situ hybridization and immunohistochemical study using tyramide signal amplification
Authors: Zhao C, Eisinger B, Gammie SC.
Journal: PLoS One (2013): e73750

Quantification of alpha-tubulin isotypes by sandwich ELISA with signal amplification through biotinyl-tyramide or immuno-PCR
Authors: Draberova E, Stegurova L, Sulimenko V, Hajkova Z, Draber P.
Journal: J Immunol Methods (2013): 63

Development of a near-infrared fluorescence ELISA method using tyramide signal amplification
Authors: Gong H, Cradduck M, Cheung L, Olive DM.
Journal: Anal Biochem (2012): 27

Integrated tyramide and polymerization-assisted signal amplification for a highly-sensitive immunoassay
Authors: Yuan L, Xu L, Liu S.
Journal: Anal Chem (2012): 10737

AF594 酪胺-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
AF594 酪胺价格 2823
产品规格

200 slides

产品货号

产品参数
Ex (nm) 590 Em (nm) 618
分子量 841.95 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

AF594 酪胺是美国AAT Bioquest生产的荧光探针，对于许多免疫组织化学（IHC）应用，传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是，有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明，酪胺信号放大（TSA）是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术，具有更高的检测灵敏度。TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力，该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测，酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中，源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号，并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。AF594酪胺含有明亮的AlexaFluor®594，可以使用标准FITC滤波片组轻松检测（AlexaFluor®是ThermoFisher的商标）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的AF594 酪胺。注：200slides：一管试剂足够200个玻片使用；注2：200slides大约为100ug。

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC滤波片组
Em： Cy3/TRITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy3/TRITC滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液，并在室温下添加到细胞或组织中（5-10分钟）

 

溶液配制

储备溶液配制

酪胺储备溶液（200X）：向小瓶中加入100 µL DMSO，并充分混合。 注意：未使用的酪胺储备溶液可在2-8℃下储存。

 

工作溶液配制

酪胺工作溶液（1X）：将100µL的酪胺储备溶液添加到包含0.003％H2O2的20 mL缓冲液中。注意：可以使用pH = 7.4的Tris Buffer以获得佳性能。 注意：应立即使用酪胺工作溶液。 注意：20 mL溶液适合200次测试。

 

实验步骤

（该步骤适用于细胞或组织染色）

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7％甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1％Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定，脱石蜡和补液

（根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。）

 

过氧化物酶标记

1.可选：通过在过氧化物酶淬灭溶液（例如3％过氧化氢）中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性，然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选：如果使用结合HRP的链霉亲和素，建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液（例如含1％BSA的PBS）封闭30分钟。

4.除去封闭溶液，并添加稀释好的一抗，在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中，并在室温下孵育60分钟。注意：孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次，每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液，并在室温下孵育5-10分钟。 注意：如果您观察到非特异性信号，则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的佳孵育时间，或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂，如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

  

参考文献

Enhanced detection of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus in fixed tissues by in situ hybridization following tyramide signal amplification
Authors: Trang NT, Hirai T, Ngan PH, Lan NT, Fuke N, Toyama K, Yamamoto T, Yamaguchi R.
Journal: J Vet Diagn Invest (2015): 326

Tyramide Signal Amplification for Immunofluorescent Enhancement
Authors: Faget L, Hnasko TS.
Journal: Methods Mol Biol (2015): 161

KSHV cell attachment sites revealed by ultra sensitive tyramide signal amplification (TSA) localize to membrane microdomains that are up-regulated on mitotic cells
Authors: Garrigues HJ, Rubinchikova YE, Rose TM.
Journal: Virology (2014): 75

Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis
Authors: Stack EC, Wang C, Roman KA, Hoyt CC.
Journal: Methods (2014): 46

Rapid and sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 in milk and ground beef using magnetic bead-based immunoassay coupled with tyramide signal amplification
Authors: Aydin M, Herzig GP, Jeong KC, Dunigan S, Shah P, Ahn S.
Journal: J Food Prot (2014): 100

Sensitive whole-mount fluorescent in situ hybridization in zebrafish using enhanced tyramide signal amplification
Authors: Lauter G, Soll I, Hauptmann G.
Journal: Methods Mol Biol (2014): 175

Characterization of GABAergic neurons in the mouse lateral septum: a double fluorescence in situ hybridization and immunohistochemical study using tyramide signal amplification
Authors: Zhao C, Eisinger B, Gammie SC.
Journal: PLoS One (2013): e73750

Quantification of alpha-tubulin isotypes by sandwich ELISA with signal amplification through biotinyl-tyramide or immuno-PCR
Authors: Draberova E, Stegurova L, Sulimenko V, Hajkova Z, Draber P.
Journal: J Immunol Methods (2013): 63

Development of a near-infrared fluorescence ELISA method using tyramide signal amplification
Authors: Gong H, Cradduck M, Cheung L, Olive DM.
Journal: Anal Biochem (2012): 27

Integrated tyramide and polymerization-assisted signal amplification for a highly-sensitive immunoassay
Authors: Yuan L, Xu L, Liu S.
Journal: Anal Chem (2012): 10737

Amplite 比色法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 比色法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光 价格 4245
产品规格

500 Tests

产品货号

Amplite 比色法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 比色法葡萄糖氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于定量蛋白的试剂盒，葡萄糖氧化酶是二聚体蛋白质，其催化β-D-葡萄糖氧化成过氧化氢和D-葡糖酸-1,5-内酯，其被水解成葡糖酸。 它广泛用于测定体液中的葡萄糖以及从饮料，食品和其他农产品中去除残留的葡萄糖和氧气。 此外，葡萄糖氧化酶通常用于生物传感器中以检测葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶检测试剂盒为溶液中葡萄糖氧化酶的测量提供了一种快速而灵敏的方法。 它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且很容易适应自动化而无需分离步骤。 该试剂盒使用我们的Amplite Red底物，可使用570 nm的吸光度酶标仪进行监测。 使用Amplite 比色葡萄糖氧化酶检测试剂盒，我们检测到低至12.5 mU / mL的葡萄糖氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法葡萄糖氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收: 570nm
推荐孔板: 透明孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备工作溶液（50μL）
2.添加葡萄糖氧化酶标准品或测试样品（50μL）
3.在37°C孵育10-30分钟
4.监测OD = 570nm处的吸光度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将100μLDMSO（组分E）加入到Amplite Red（组分A）的小瓶中。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。推荐提供的测定缓冲液（pH 7.4）。

1.2 HRP库存解决方案（50X）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

1.3 葡萄糖氧化酶原液（100 U / mL）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入葡萄糖氧化酶（组分D）的小瓶中。

1.4 葡萄糖原液（10X）：
将5mL测定缓冲液（组分B）加入葡萄糖小瓶（组分F）中。

 

2.标准溶液

葡萄糖氧化酶标准
通过将2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶储备溶液稀释到200μL测定缓冲液（组分B）中来制备葡萄糖氧化酶标准品，以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶标准溶液。 然后进行1：100连续稀释，然后进行1：2连续稀释，得到连续稀释的葡萄糖氧化酶标准品，从10 mU / mL至0.156 mU / mL（GOS1 – GOS7）。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液（250X），100μLHRP储备液（50X）和500μL葡萄糖储备液（10X）加入4.3 mL分析缓冲液（组分B）中，制成5 mL工作溶液。

 

样品分析

表1.透明底96孔微孔板中葡萄糖氧化酶标准品和测试样品的布局。 GOS =葡萄糖氧化酶标准品（GOS1-GOS7,0.156至10mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
GOS1 GOS1 … …
GOS2 GOS2 … …
GOS3 GOS3    
GOS4 GOS4    
GOS5 GOS5    
GOS6 GOS6    
GOS7 GOS7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
GOS1-GOS7 50ul 连续稀释（0.156至10 mU / mL）
BL 50ul 分析缓冲液（组分B）
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备葡萄糖氧化酶标准品（GOS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向葡萄糖氧化酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLGO工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应在37°C孵育10至30分钟，避光。

4.用OD = 570nm的吸光度板读数器监测吸光度的增加。

 

参考文献

A reassessment of the carnivorous status of salmonids: Hepatic glucokinase is expressed in wild fish in Kerguelen Islands
Authors: Lucie Marandel, Philippe Gaudin, Frančois Guéraud, Stéphane Glise, Alexandre Herman, Elisabeth Plagnes-Juan, Vincent Véron, Stéphane Panserat, Jacques Labonne
Journal: Science of The Total Environment (2018): 276–285

Overcoming 5-Fu resistance in human non-small cell lung cancer cells by the combination of 5-Fu and cisplatin through the inhibition of glucose metabolism
Authors: Jun-gang Zhao, Kai-ming Ren, Jun Tang
Journal: Tumor Biology (2014): 12305–12315

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 Cat#11307
Amplite 荧光法葡萄糖氧化酶检测试剂盒 Cat#11300
Amplite NADPH检测试剂盒(比色法) Cat#15272

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光 价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的葡萄糖检测的试剂盒，髓过氧化物酶(MPO)是一类具有过氧化物酶活性的绿色血红素蛋白，大量存在于中性粒细胞和单核细胞中。它可以催化来自细胞毒素酸或者其他中间产物的双氧水或者卤化物反应，在氧依赖性杀死肿瘤细胞和微生物过程扮演着重要的角色。MPO的缺乏症是一种遗传性的酶缺乏，诱发免疫缺陷。因此治疗MPO的抑制剂具有很大的发展前景。Amplite髓过氧化物酶检测试剂盒能提供一种快速灵敏的检测方法来测定溶解状态或者细胞裂解液中的MPO。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。这个试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪（540／590nm）检测到或者被吸收酶标仪（576nm）检测到。通过Amplite 荧光髓过氧化物酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到5ng／ml的髓过氧化物酶。本试剂盒可以自动的高通量筛选MPO的抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法髓过氧化物酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.MPO标准品或测试样品（50μL）
2.添加MPO工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540/590 nm处读取荧光强度（截止570 nm）

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分E）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液，pH7.4。

1.2 H2O2储备溶液（500X，10 mM）：
将10μL的3％H2O2（0.88M，组分C）加入870μL的测定缓冲液（组分B）中。注意：稀释的H2O2溶液不稳定。应丢弃未使用的部分。

1.3 髓过氧化物酶（MPO）标准溶液（200 mU / mL）：
将50μL测定缓冲液（组分B）加入到髓过氧化物酶标准品（组分D）的小瓶中。注意：一个小瓶含有约5 – 10 mU的髓过氧化物酶。

2. HRP库存解决方案（50X）：
将1mL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

3.葡萄糖氧化酶标准溶液（100 U / mL）：
将1mL测定缓冲液加入葡萄糖氧化酶小瓶（组分D）中。

4.葡萄糖原液（10X）：
将5mL测定缓冲液加入葡萄糖小瓶（组分F）中。

 

2.标准溶液

MPO标准
将20μL200mU / mL MPO标准溶液加入380μL测定缓冲液（组分B）中，得到10 mU / mL MPO标准溶液（MPO7）。 取10 mU / mL MPO标准溶液进行1：3连续稀释，得到剩余的系列稀释MPO标准品（MPO6 – MPO1）。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite 红色储备液（250X）和10μLH2O2（500X）加入5mL测定缓冲液（组分B）中，使总体积为5.03mL MPO工作溶液。 避光。

 

样品分析

表1. 96孔固体黑色微孔板中MPO标准品和测试样品的布局。 MPO =髓过氧化物酶标准品（MPO1-MPO7,0.01至10mU / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
MPO1 MPO1 … …
MPO2 MPO2 … …
MPO3 MPO3    
MPO4 MPO4    
MPO5 MPO5    
MPO6 MPO6    
MPO7 MPO7    

表2.每个孔的试剂组成。 注意，由于Amplite Red底物（非荧光产物）的过度氧化，高浓度的MPO可能导致荧光信号降低。

孔 容积 试剂
MPO1-MPO7 50ul 连续稀释（0.01至10 mU / mL）
BL 50ul 分析缓冲液（组分B）
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备髓过氧化物酶标准品（MPO），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向髓过氧化物酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLMPO工作溶液，使总MPO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLMPO工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm，发射= 590-600nm（佳Ex / Em = 540 / 590nm，截止= 570nm）监测荧光强度。 注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有更低的灵敏度。

 

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Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光 价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 N/A 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒，谷氨酸氧化酶属于氧化还原酶的一类，特别能对带有CH-NH2基团供氧受体起反应。它是一种能特异催化水中或者氧气中的L-谷氨酸的酶，可以通过氧化脱氨形成酮戊二酸，氨和过氧化氢。Amplite谷氨酸氧化酶荧光检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法，来检测溶解状态下或者细胞裂解液中的谷氨酸氧化酶。在分析中，L-谷氨酸可以通过谷氨酸氧化酶被氧化成酮戊二酸、氨或者过氧化氢。L-丙氨酸和L-谷氨酸-丙酮酸也参与了这个转氨酶反应，导致多次循环反应，因此显著的增加双氧水的产出。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪（540／590nm）检测，或者使用酶标仪（576nm）检测。Amplite荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到40U/ml的谷氨酸氧化酶。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析，并且无需任何分步骤，就可以轻易地实现自动化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法谷氨酸氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光收酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.谷氨酸氧化酶标准品或测试样品（50μL）
2.添加谷氨酸氧化酶工作液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 540 / 590nm处读取荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH7-8下进行。推荐使用所提供的测定缓冲液，pH7.4。

1.2 HRP库存解决方案（400X）：
将200μL测定缓冲液（组分B）加入到辣根过氧化物酶（组分C）的小瓶中。

1.3 谷氨酸储备溶液（400X）：
将1.0mL ddH 2 O加入到谷氨酸小瓶（组分D）中以制备400X谷氨酸储备溶液。

1.4 谷氨酸氧化酶（GO）标准溶液（150 mU / mL）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入到谷氨酸氧化酶标准品（冻干，组分E）的小瓶中以制备150mU / mL谷氨酸氧化酶（GO）标准溶液。

 

2.标准溶液

谷氨酸氧化酶标准
将30μL150mU/ mL GO标准溶液加入420μL测定缓冲液（组分B）中，得到10mU / mL GO标准溶液（GO7）。 取10 mU / mL GO标准溶液进行1：3连续稀释，得到剩余的连续稀释的GO标准品（GO6-GO1）。

 

3.工作溶液

将20μLDelterite Red储备液（250X），12.5μLHRP储备溶液（400X）和12.5μL谷氨酸储备溶液（400X）加入5 mL分析缓冲液（组分B）中，使总体积为5.07 mL谷氨酸氧化酶工作溶液（GO工作溶液），避光。

 

样品分析

表1.固体黑色96孔微孔板中GO标准品和测试样品的布局。 GO =谷氨酸氧化酶标准品（GO1-GO7,0.01至10mU / mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
GO1 GO1 … …
GO2 GO2 … …
GO3 GO3    
GO4 GO4    
GO5 GO5    
GO6 GO6    
GO7 GO7    

表2.每个孔的试剂组成。 较高浓度的GO可能由于Amplite Red（对非荧光产物）的过度氧化而导致荧光信号降低

孔 容积 试剂
GO1-GO7 50ul 连续稀释（0.01至10 mU / mL）
BL 50ul 分析缓冲液（组分B）
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备GO标准品（GO），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向GO标准品，空白对照品和测试样品的每个孔中加入50μLGO工作溶液，使总GO测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLGO工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用荧光板读数器在激发= 530-570nm，发射= 590-600nm（佳Ex / Em = 540 / 590nm），截止= 570nm监测荧光强度。 注意：也可以将板的内容物转移到白色透明底板上，并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Extracellular polymeric substrates of Chlorella vulgaris F1068 weaken stress of cetyltrimethyl ammonium chloride on ammonium uptake
Authors: Feng Li, Yangduo Kuang, Na Liu, Fei Ge
Journal: Science of The Total Environment (2019)

 

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Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒 红色荧光是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化氢酶的试剂盒过氧化氢酶是一种常见的抗氧化血红素氧化还原酶，几乎在暴露于氧气的所有生物体中存在。酶在过氧化物酶体亚细胞器中浓缩。 过氧化氢是一种ROS，是正常有氧代谢和致病性ROS产生的毒性产物，涉及氧化酶和超氧化物歧化酶反应。 通过防止过量的H2O2积累，过氧化氢酶允许重要的细胞过程产生作为副产物的H2O2安全地发生。

Amplite 荧光过氧化氢酶分析试剂盒为过氧化氢酶活性的测量提供了一种快速而灵敏的方法。它可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。过氧化氢酶与H2O2反应生成水和氧（O2）。Amplite Red还与H2O2反应生成红色荧光产物。因此，荧光强度的降低与过氧化氢酶活性成比例。用于测定的Amplite Red底物实现双重可记录模式。荧光信号可以通过Ex / Em = 540 / 590nm的荧光酶标仪或~576nm的吸光度酶标仪容易地读取。使用Amplite 荧光过氧化氢酶分析试剂盒，我们在100μL反应体积中检测到低至30 mU / mL的过氧化氢酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的Amplite 荧光法过氧化氢酶检测试剂盒。 

 

适用仪器

荧光酶标仪  
激发： 540nm
发射： 590nm
cutoff： 570nm
推荐孔板： 黑色孔板
实验方案

96孔板测定示例

概述

准备过氧化氢酶标准品和/或测试样品（50μL）

加入H2O2分析缓冲液（50μL）

在室温下孵育10-30分钟加入过氧化氢酶分析混合物（50μL）

在室温下孵育10-30分钟监测荧光增加 Ex / Em = 540 / 590nm

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.准备库存解决方案：

1.1Amplite Red底物储备溶液（200X）：将65μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red小瓶（组分A）中。 应立即使用原液，任何剩余的溶液需要等分并在-20°C冷冻。

注意：避免反复冻融循环，避免光照。

1.2100U / mL HRP储备溶液：将200μL测定缓冲液（组分C）加入到辣根过氧化物酶（组分D）的小瓶中。

注意：未使用的HRP原液应分成一次性等分试样并储存在-20°C。

1.310mM H2O2储备溶液：将10L 3％H2O2（0.88M，组分B）加入870L测定缓冲液（组分C）中。

注意：稀释的H2O2储备溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

 

2.准备H2O2测定缓冲液：

将5μL10mMH2O2储备溶液（来自步骤1.3）加入5mL测定缓冲液（组分C）中。

 

3.准备连续稀释的过氧化氢酶标准品（0至2 U / mL）：

注意：在硫醇如DTT和β-巯基乙醇存在下，组分A是不稳定的。 硫醇的最终浓度高于10μM将显着降低测定动态范围。 NADH和谷胱甘肽（还原形式：GSH）可能干扰测定。

3.1将2μL1000U / mL过氧化氢酶标准品（组分E）加入1000μL测定缓冲液（组分C）中，得到2U / mL过氧化氢酶标准溶液。

3.2取500μL的2 U / mL过氧化氢酶标准溶液（来自步骤3.1）进行1：2连续稀释，得到1,0.5,0.25,0.125,0.062,0.031和0 U / mL连续稀释的过氧化氢酶标准品。

3.3如表2和3中所述，将连续稀释的过氧化氢酶标准品和含过氧化氢酶的测试样品加入到固体黑色96孔微量培养板中。

 

4.运行过氧化氢酶测定：

4.1将50μLH2O2测定缓冲液（来自步骤2）添加到过氧化氢酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3）以使总过氧化氢酶测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μLH2O2测定缓冲液。

4.2在室温下孵育反应15至30分钟，避光。

4.3根据下表制备测定混合物并避光：

4.4将50μL测定混合物（来自步骤4.3）加入过氧化氢酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（参见步骤3.3），使总测定体积为150μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL测定混合物。

4.5在室温下孵育反应15至30分钟，避光。

4.6使用荧光板读数器监测Ex / Em = 540±10/590±10nm处的荧光增加（最佳Ex / Em = 540/590）。

注意：也可将板的内容物转移到白色透明底板中，并用吸光度酶标仪在5765nm波长下读数。 与荧光读数相比，吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

In-Vitro and In-Vivo Antioxidant Activity of the Butanolic Extract from the Stem of Ephedra Alte
Authors: Bahaa Al-Trad, Mahmoud A Al-Qudah, Mazhar Al-Zoubi, Riyadh Muhaidat, Janti Qar
Journal: Biomedical and Pharmacology Journal (2018)

 

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Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于黄嘌呤的试剂盒,黄嘌呤氧化酶（XO）是一种催化次黄嘌呤氧化成黄嘌呤的酶，可以进一步催化黄嘌呤氧化成尿酸。它在嘌呤的分解代谢中起重要作用。黄嘌呤氧化酶通常存在于肝脏和空肠中。在严重肝损伤期间，黄嘌呤氧化酶被释放到血液中，因此XO的血液测定是确定肝脏损伤是否已经发生的一种方法。Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒为黄嘌呤氧化酶活性的测量提供了一种快速，超灵敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。在该测定中，黄嘌呤氧化酶催化嘌呤碱基，次黄嘌呤或黄嘌呤氧化成尿酸和超氧化物，其自发降解为过氧化氢（H2O2）。该试剂盒使用我们的Amplite Red基板，使用吸光度酶标仪可以在~570 nm处轻松读取颜色信号。使用Amplite 比色黄嘌呤氧化酶检测试剂盒，我们在100μL反应体积中检测到低至0.3 mU / mL的黄嘌呤氧化酶。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收: 570/610nm
推荐孔板: 透明孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加XO标准品和/或测试样品（50μL）
2.准备并添加XO Assay工作溶液（50μL）
3.在室温下孵育30-60分钟
4.在OD比为570 / 610nm时读取吸光度增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（250X）：
将40μLDMSO（组分F）加入到Amplite Red底物（组分A）的小瓶中。应立即使用原液。任何剩余的溶液应等分并在-20℃重新冷冻。注意：避免反复冻融循环。注意：在硫醇如二硫苏糖醇（DTT）和2-巯基乙醇存在下，Amplite Red底物不稳定。反应中DTT或2-巯基乙醇的终浓度应不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不稳定。因此，反应应在pH 7-8下进行。建议使用提供的分析缓冲液（pH 7.4）。

1.2 HRP库存解决方案（500X）：
将100μL测定缓冲液（组分B）加入HRP小瓶（组分C）中。注意：未使用的HRP储备溶液（500X）应分成一次性使用的等分试样并储存在-20 oC。

1.3 黄嘌呤氧化酶（XO）原液：
将200μL测定缓冲液（组分B）加入黄嘌呤氧化酶标准品（组分E）的小瓶中。注意：未使用的XO储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

 

2.标准溶液

黄嘌呤氧化酶标准
将10μL1U/ mL XO储备液加入990μL分析缓冲液（组分B）中，制成10 mU / mL XO标准溶液。进行1：3连续稀释，得到约10,3,1,0.3,0.1， 0.03,0.01和0mU / mL连续稀释的XO标准品。

 

3.工作溶液

表1.一个透明底96孔微孔板的XO分析工作溶液（2X）

成分 规格
Amplite 红色储备液（250x） 20ul
HRP（500X） 10ul
黄嘌呤（100X） 50ul
分析缓冲液 5ml
总容积 5.08ml

 

样品分析

表2.在透明底96孔微孔板中的黄嘌呤氧化酶标准品和测试样品的布局。 XOS =黄嘌呤氧化酶标准品（XOS1-XOS7）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
XOS1 XOS1 … …
XOS2 XOS2 … …
XOS3 XOS3    
XOS4 XOS4    
XOS5 XOS5    
XOS6 XOS6    
XOS7 XOS7    

表3.每个孔的试剂组成

XO标准 空白 测试样本
连续稀释：50μL 测定缓冲液（化合物B）：50μL 50 µL

注意：黄嘌呤氧化酶标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。

1.如表2和3中所述，将XO标准品和含有XO的测试样品加入白色透明底部微孔板中。

2.将50μLXOAssay工作溶液加入XO标准品，空白对照和测试样品的每个孔中（表2），使总XO测定体积为100μL/孔。 注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL测定反应混合物。

3.在室温下孵育反应30至60分钟，避光。

4.用吸光度读数器监测信号强度，OD比为570 / 610nm。

 

参考文献

Xanthine oxidoreductase regulates macrophage IL1β secretion upon NLRP3 inflammasome activation
Authors: Annette Ives, Johji Nomura, Fabio Martinon, Thierry Roger, Didier LeRoy, Jeffrey N Miner, Gregoire Simon, Nathalie Busso, Alexander So
Journal: Nature communications (2015)

 

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Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于乙酰胆碱酯酶检测试剂盒，乙酰胆碱酯酶（AChE）是神经反应和功能重要的酶之一。AChE将神经递质乙酰胆碱（ACh）降解为胆碱和乙酸。它主要见于神经系统的神经肌肉接头和胆碱能神经突触，其活动用于终止突触传递。AChE抑制剂是批准用于阿尔茨海默病（AD）和重症肌无力的关键之一。

我们的Amplite 比色乙酰胆碱酯酶检测试剂盒为检测AChE活性提供了便利的方法。它使用DTNB来量化由血液，细胞提取物和其他溶液中的AChE水解乙酰硫代胆碱产生的硫代胆碱。DTNB加合物的吸收强度用于测量形成的硫代胆碱的量，其与AChE活性成比例。该试剂盒提供比色一步法检测，在100μL检测体积（1 mU / mL）内检测低至0.1 mU AChE，如图1所示。其信号可通过吸光度酶标仪在~410 nm处轻松读取。该试剂盒，可用于持续监控AChE活动。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法乙酰胆碱酯酶检测试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收: 410 ± 5nm
推荐孔板: 透明孔板
实验方案

96孔板测定示例

概述

准备AChE反应混合物（50μL）

加入AChE标准品或AChE测试样品（50μL）

在室温下孵育10-30分钟监测410±5 nm的吸光度

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.准备库存解决方案：

1.120X DTNB储备溶液：将0.6mL测定缓冲液（组分B）加入到DTNB（组分A）的小瓶中以制备20X DTNB储备溶液。

注意：未使用的DTNB储备溶液应分为单次使用的等分试样。 储存在-20℃并避光。

1.220X乙酰硫代胆碱储备溶液：将0.6mL ddH 2 O加入乙酰硫代胆碱的小瓶中（组分C）。

注意：未使用的20X乙酰硫代胆碱原液应分成一次性等分试样，并在20℃下保存。

1.3乙酰胆碱酯酶储备液：将100μLDdH2O与0.1％BSA加入乙酰胆碱酯酶标准品（组分D）中，制成50单位/ mL乙酰胆碱酯酶储备液。

注意：未使用的乙酰胆碱酯酶原液应分成一次性等分试样并储存在-20℃。

 

2.制备乙酰硫代胆碱反应混合物：

根据说明书中表1制备乙酰硫代胆碱反应混合物并避光。

Components

Volume

Assay Buffer (Component B)

4.5 mL

20X DTNB Stock Solution (from Step 1.1)

250 mL

20X Acetylthiocholine Stock solution (from Step 1.2)

250 mL

Total volume

5 mL

 

3.准备连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品（0至1000 mU / mL）：

3.1将20μL的50单位/ mL乙酰胆碱酯酶储备液（来自步骤1.3）加入到980L的测定缓冲液（组分B）中以产生1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准溶液。

注意：稀释的乙酰胆碱酯酶标准溶液不稳定，应在4小时内使用。

3.2取200μL1000mU / mL乙酰胆碱酯酶标准品进行1：3连续稀释，得到300,100,30,10,3,1和0 mU / mL连续稀释的乙酰胆碱酯酶标准品。

3.3如说明书中表2和3中所述，将含有乙酰胆碱酯酶标准品和含乙酰胆碱酯酶的测试样品的系列稀释液加入白色/透明底96孔微量培养板中。

注意：根据需要处理细胞或组织样本。

 

4.运行乙酰胆碱酯酶测定：

4.1将50μL乙酰硫代胆碱反应混合物（来自步骤2.1）加入乙酰胆碱酯酶标准品，空白对照和测试样品（见步骤3.3）的每个孔中，使总乙酰胆碱酯酶测定体积为100μL/孔。

注意：对于384孔板，每孔加入25μL样品和25μL乙酰硫代胆碱反应混合物。

4.2在室温下孵育反应10至30分钟，避光。

4.3使用吸光度酶标仪在410±5 nm处检测吸光度的增加。

 

参考文献

Insects in anthelminthics research: Lady beetle-derived harmonine affects survival, reproduction and stem cell proliferation of Schistosoma mansoni
Authors: Josina Kellershohn, Laura Thomas, Arnold Grünweller, Roland K Hartmann, Martin Hardt, Andreas Vilcinskas, Christoph G Grevelding, Simone Haeberlein
Journal: PLoS neglected tropical diseases (2019): e0007240

Environmentally relevant concentrations of di (2-ethylhexyl) phthalate exposure alter larval growth and locomotion in medaka fish via multiple pathways
Authors: Wen-Kai Yang, Li-Fen Chiang, Shi-Wei Tan, Pei-Jen Chen
Journal: Science of The Total Environment (2018): 512–522

Hepatic vagus nerve regulates Kupffer cell activation via α7 nicotinic acetylcholine receptor in nonalcoholic steatohepatitis
Authors: Takahiro Nishio, Kojiro Taura, Keiko Iwaisako, Yukinori Koyama, Kazutaka Tanabe, Gen Yamamoto, Yukihiro Okuda, Yoshinobu Ikeno, Kenji Yoshino, Yosuke Kasai
Journal: Journal of Gastroenterology (2017): 1–12

Protective Effect of α-Lipoic Acid against α-Cypermethrin-Induced Changes in Rat Cerebellum
Authors: H Elsawy, MA Al-Omair, A Sedky, L Al-Otaibi
Journal: Journal of Chemical Neuroanatomy (2017)

Spirulina maxima Extract Ameliorates Learning and Memory Impairments via Inhibiting GSK-3β Phosphorylation Induced by Intracerebroventricular Injection of Amyloid-β 1–42 in Mice
Authors: Eun-Jeong Koh, Kui-Jin Kim, Ji-Hyeon Song, Jia Choi, Hyeon Yong Lee, Do-Hyung Kang, Ho Jin Heo, Boo-Yong Lee
Journal: International Journal of Molecular Sciences (2017): 2401

Anethole restores delayed gastric emptying and impaired gastric accommodation in rodents
Authors: Teita Asano, Shuji Aida, Shintaro Suemasu, Tohru Mizushima
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 125–130

Dietary and donepezil modulation of mTOR signaling and neuroinflammation in the brain
Authors: Kalavathi Dasuri, Le Zhang, Sun OK Fernandez Kim, Annadora J Bruce-Keller, Jeffrey N Keller
Journal: Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease (2016): 274–283

Dissolved organic matter or salts change the bioavailability processes and toxicity of the nanoscale tetravalent lead corrosion product PbO2 to medaka fish
Authors: Chun-Wei Chiang, Ding-Quan Ng, Yi-Pin Lin, Pei-Jen Chen
Journal: Environmental Science & Technology (2016): 11292–11301

Functionalised dihydroazo pyrimidine derivatives from Morita–Baylis–Hillman acetates: synthesis and studies against acetylcholinesterase as its inhibitors
Authors: Eeda Koti Reddy, C Remya, Ayyiliath M Sajith, KV Dileep, C Sadasivan, Shaik Anwar
Journal: RSC Advances (2016): 77431–77439

Gongjin-Dan Enhances Hippocampal Memory in a Mouse Model of Scopolamine-Induced Amnesia
Authors: Jin-Seok Lee, Sung-Shin Hong, Hyeong-Geug Kim, Hye-Won Lee, Won-Yong Kim, Sam-Keun Lee, Chang-Gue Son
Journal: PloS one (2016): e0159823

 

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产品名称 货号
Amplite 比色法丙酮酸检测试剂盒 Cat#13821
Amplite 比色法丙三醇检测试剂盒 Cat#13832
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SunRed 醋酸 细胞活性检测-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

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SunRed 醋酸 细胞活性检测 价格 1386
产品规格

25 mg

产品货号

SunRed 醋酸 细胞活性检测

产品参数
Ex (nm) 653 Em (nm) 661
分子量 ~350 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

SunRed 醋酸 细胞活性检测是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活性检测的试剂盒，酯酶可催化水解SunRed 乙酸盐(SRA)产生Sun Red荧光基团，该荧光基团在633nm处可以被激发，发射光波长在~660nm处。Sun Red荧光基团可以用Cy5滤光片检测，大多数商业荧光仪器中都装有Cy5滤光片。尽管Sun Red在633nm处被激发，~660nm发出红光；但是SRA在633nm处的光吸收很小，在没有红光发射的条件下，这使SRA成为灵敏的NIR（近红外）酯酶底物之一。在流行的荧光色彩应用于其它细胞功能分析时，SRA提供另一种颜色用于可行性细胞的分析。SRA是一个非荧光性的疏水性化合物，它可以通过细胞膜，在细胞内酯酶水解乙酸盐基团作用下，产生高强度荧光的产物Sun Red。Sun Red分子在完整细胞膜结构的细胞内积累至产生足够深的红色荧光，因此可以用作细胞的标签。细胞膜结构不完整或者代谢活性弱的细胞，不能够积累荧光产物，因此不显现深色的红色荧光。SRA可以与绿色荧光染料试剂（例如FITC或者Alexa Fluor 488标记的抗体）结合使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的SunRed 醋酸 细胞活性检测。

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适用仪器

荧光显微镜  
Ex: 620nm
Em: 660nm
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5滤波片组
   
荧光酶标仪  
Ex: 620nm
Em: 660nm
Cutoff: 640nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.用测试化合物制备细胞
2.去除培养基
3.添加SunRed 醋酸酯工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
4.在37°C，5％CO2培养箱中孵育1小时
5.用HHBS清洗并更换工作溶液
6.读取Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度（截止640 nm）

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 醋酸盐原液（2至10 mM）
准备2至10 mM的SunRed 醋酸盐在DMSO中的储备溶液。 应立即使用原液。

  

2.工作溶液

SunRed 醋酸盐工作溶液：
在实验前，在含有20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液的1X Hank盐溶液中，以5至10μM制备SunRed 醋酸盐工作溶液。

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样品分析

1.从细胞中取出培养基。

2.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的SunRed 乙酸盐工作溶液。

3.将SunRed 醋酸盐工作溶液板在室温或37°C下孵育1小时，避光。 适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。 优化每个实验的孵育时间。 对于非粘附细胞，建议在孵育后以800rpm离心细胞板2分钟。

4.监测Ex / Em = 620 / 660nm处的荧光强度（截止640nm）。

 

参考文献

Neuropathy target esterase is required for adult vertebrate axon maintenance
Authors: Read DJ, Li Y, Chao MV, Cavanagh JB, Glynn P.
Journal: J Neurosci (2009): 11594

The secreted esterase of group a streptococcus is important for invasive skin infection and dissemination in mice
Authors: Zhu H, Liu M, Sumby P, Lei B.
Journal: Infect Immun (2009): 5225

Application of glutaraldehyde for the staining of esterase-active cells with carboxyfluorescein diacetate
Authors: Morono Y, Takano S, Miyanaga K, Tanji Y, Unno H, Hori K.
Journal: Biotechnol Lett (2004): 379

Evaluation of fitness components in strains of Drosophila mulleri carrying different genotypes for an esterase
Authors: Lourenco MF, Ceron CR, Carareto CM.
Journal: Cytobios (2001): 125

Comparison of two in vitro activation systems for protoxicant organophosphorous esterase inhibitors
Authors: Barber D, Correll L, Ehrich M.
Journal: Toxicol Sci (1999): 16

Determination of growth and lysis kinetics in plant cell suspension cultures from the measurement of esterase release
Authors: Steward N, Martin R, Engasser JM, Goergen JL.
Journal: Biotechnol Bioeng (1999): 114

Purification and properties of an esterase from the yeast Saccharomyces cerevisiae and identification of the encoding gene
Authors: Degrassi G, Uotila L, Klima R, Venturi V.
Journal: Appl Environ Microbiol (1999): 3470

Organophosphorus neuropathy target esterase inhibitors selectively block outgrowth of neurite-like and cell processes in cultured cells
Authors: Li W, Casida JE.
Journal: Toxicol Lett (1998): 139

Causes and consequences of esterase 6 enzyme activity variation in pre-adult Drosophila melanogaster
Authors: Oakeshott JG, Saad M, Game AY, Healy MJ.
Journal: Heredity (1994): 160

[Esterase-6 gene-enzyme system and resistance of Drosophila to increased temperature]
Authors: Totskii VN, Eserkepova EV, Dzhan ZU.
Journal: Genetika (1994): 342

Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒价格 5670
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于酶活性的试剂盒，肠激酶（也称为肠肽酶）是由十二指肠壁中的细胞产生的丝氨酸蛋白酶，并且是人和动物消化系统中的关键酶。 肠激酶将胰蛋白酶原转化为其活性形式的胰蛋白酶，导致随后的胰腺消化酶的活化。 肠激酶的缺乏导致肠道消化障碍。 肠激酶的抑制可能通过抑制参与癌变和转移的蛋白酶而具有抗肿瘤作用。 因此，高度选择性和灵敏的肠激酶检测在生物化学应用中起着关键作用。 Amplite 比色肠激酶活性检测试剂盒为定量肠激酶活性提供了一种灵敏的检测方法。 在肠激酶切割后，肠激酶底物可以通过EK Yellow 在吸光度酶标仪中在405nm处检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法肠激酶活性检测试剂盒。

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收: 405nm
推荐孔板: 透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.用稀释的肠激酶标准品（50μL）制备测试样品
2.加入等体积的肠激酶工作液（50μL）
3.在37°C孵育30-60分钟
4.监测OD增加到405nm

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. EK Yellow 原液（100X）：
将50μLDMSO（组分E）加入EK Yellow （组分A）中以制备100X储备溶液。

2.肠激酶底物储备液（100X）：
将50μLDMSO（组分E）加入肠激酶底物（组分B）中以制备100X储备溶液。

3.肠激酶标准溶液（10ug / mL）：
将50uL ddH2O + 0.1％BSA加入肠激酶标准小瓶（组分D）中以制备10μg/ mL肠激酶原液。

 

2.标准溶液

肠激酶标准
将10μL10μg/ mL肠激酶标准溶液加入990μL分析缓冲液（组分C）中，得到100ng / mL肠激酶溶液（EK7）。 然后在测定缓冲液中进行1：2连续稀释，以获得连续稀释的肠激酶标准品（EK6-EK1）。 注意：EK标准仅用于阳性对照，不应作为酶活性的定量标准。

 

3.工作溶液

将50μLEKYellow 储备液和50μL肠激酶底物储备液加入5 mL分析缓冲液（组分C）中; 混合均匀，制成肠激酶（EK）工作溶液（组分A + B + C）。 注意：对于一个96孔板，测定混合物就足够了。 配制的工作溶液不稳定，需快速使用。

 

样品分析

表1.在96孔透明底微孔板中肠激酶标准品和测试样品的布局。 EK =肠激酶标准品（EK1-EK7,1.56至100ng / mL）; BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
EK1 EK1 … …
EK2 EK2 … …
EK3 EK3    
EK4 EK4    
EK5 EK5    
EK6 EK6    
EK7 EK7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
EK1-EK7 50ul 连续稀释（1.56至100 ng / mL）
BL 50ul 分析缓冲液（组分C）
TS 50ul 样品

1.根据表1和表2中提供的布局，将肠激酶标准品（EK），空白对照（BL）和测试样品（TS）制备到96孔透明底微孔板中。对于384孔板，使用25μL 每孔试剂代替50μL。

2.在肠激酶标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLEK工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLEK工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应混合物在37℃孵育30-60分钟。

4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，在OD为405nm时进行路径检查。

 

参考文献

Optimization of the fermentation and downstream processes for human enterokinase production in Pichia pastoris
Authors: Melicherova K, Krahulec J, Safranek M, Liskova V, Hopkova D, Szeliova D, Turna J.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol. (2016)

A strategy for fusion expression and preparation of functional glucagon-like peptide-1 (GLP-1) analogue by introducing an enterokinase cleavage site
Authors: Liu Y, Ren L, Ge L, Cui Q, Cao X, Hou Y, Bai F, Bai G.
Journal: Biotechnol Lett (2014): 1675

Characterization of a gene family encoding SEA (sea-urchin sperm protein, enterokinase and agrin)-domain proteins with lectin-like and heme-binding properties from Schistosoma japonicum
Authors: Mbanefo EC, Kikuchi M, Huy NT, Shuaibu MN, Cherif MS, Yu C, Wakao M, Suda Y, Hirayama K.
Journal: PLoS Negl Trop Dis (2014): e2644

Do-it-yourself histidine-tagged bovine enterokinase: a handy member of the protein engineer’s toolbox
Authors: Skala W, Goettig P, Brandstetter H.
Journal: J Biotechnol (2013): 421

Fusion expression and purification of four disulfide-rich peptides reveals enterokinase secondary cleavage sites in animal toxins
Authors: Chen Z, Han S, Cao Z, Wu Y, Zhuo R, Li W.
Journal: Peptides (2013): 145

New strategy for specific activation of recombinant microbial pro-transglutaminase by introducing an enterokinase cleavage site
Authors: Wang K, Wang B, Yang HL, Pan L.
Journal: Biotechnol Lett (2013): 383

Immobilization of enterokinase on magnetic supports for the cleavage of fusion proteins
Authors: Santana SD, Pina AS, Roque AC.
Journal: J Biotechnol (2012): 378

Design and efficient production of bovine enterokinase light chain with higher specificity in E. coli
Authors: Chun H, Joo K, Lee J, Shin HC.
Journal: Biotechnol Lett (2011): 1227

The trail of my studies on glycoproteins from enterokinase to tumor markers
Authors: Yamashina I.
Journal: Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci (2010): 578

Application of immobilized bovine enterokinase in repetitive fusion protein cleavage for the production of mucin 1
Authors: Kubitzki T, Minor D, Mackfeld U, Oldiges M, Noll T, Lutz S.
Journal: Biotechnol J (2009): 1610