上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Thiolite Blue, AM硫醇化合物蓝色荧光探针价格 1386
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 335 | Em (nm) | 460 |
| 分子量 | 331.28 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品基本信息
产品名称：Thiolite Blue, AM硫醇化合物蓝色荧光探针
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：24个月
产品物理化学光谱特性
分子量：331.28
溶剂：DMSO
激发波长(nm)：335
发射波长(nm)：460
Journal: Molecular biosystems (2013): 501–507
简要描述：四臂聚乙二醇胺，产品型号：PG4A-AM-20k。贮存： 储存在-20℃。纯度：>95%
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 一个月 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合 |
描述：
4臂PEG胺（4臂PEG NH2）是Nanocs多臂PEG衍生物之一，具有多个活性伯胺基团，可用于制备水凝胶或通过其官能团修饰蛋白质、多肽等材料。聚乙二醇化可以增加肽和蛋白质的溶解度和稳定性并降低免疫原性。它还可以抑制带电分子与改性表面的非特异性结合。
物理性质：
形式：固体
白颜色
溶解性：易溶于水
纯度：>95%
反应基团：伯胺（-NH2）
应用：水凝胶形成、表面改性
上海金畔生物科技有限公司
国内试剂耗材经销代理。
国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。
进出口货物代理服务。
公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。
公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
锌离子荧光探针Zinquin AM价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 355 | Em (nm) | 491 |
| 分子量 | 458.48 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
锌离子荧光探针Zinquin AM是美国AAT Bioquest生产的用于锌离子检测的荧光探针，Zinquin AM酯是一种亲脂的，锌敏感的，可透过细胞的荧光探针。它被保留在活细胞中，因为AM酯被细胞溶质酯酶切割，产生携带负电荷的Zinquin，防止其流过质膜。Zinquin荧光探针可以通过在含有5-40μMZinquin乙酯的PBS中与钙和镁（或在培养基中）的培养基中加载到细胞中。通常将细胞与Zinquin乙酯在37℃下孵育15-30分钟。确切的加载浓度，时间和温度取决于实验目的和细胞类型，因此需要通过实验优化。用PBS在培养基中洗涤细胞以除去细胞外剩余的染料。在显微镜下观察细胞或用于共聚焦显微镜，FACS或荧光分光光度法分析。锌是体内第二丰富的过渡金属，它作为催化，结构和调节离子必不可少。锌离子参与体内平衡，免疫反应，氧化应激，细胞凋亡和衰老。已经提出锌作为突触前神经元的常规神经递质和跨越突触后神经元的跨膜信号起作用。异常的锌代谢与许多神经系统疾病有关，包括阿尔茨海默病，帕金森病和癫痫。已证明适合体内监测锌的技术是荧光成像。免疫反应，氧化应激，细胞凋亡和衰老。已经提出锌作为突触前神经元的常规神经递质和跨越突触后神经元的跨膜信号起作用。异常的锌代谢与许多神经系统疾病有关，包括阿尔茨海默病，帕金森病和癫痫。已证明适合体内监测锌的技术是荧光成像。免疫反应，氧化应激，细胞凋亡和衰老。已经提出锌作为突触前神经元的常规神经递质和跨越突触后神经元的跨膜信号起作用。异常的锌代谢与许多神经系统疾病有关，包括阿尔茨海默病，帕金森病和癫痫。已证明适合体内监测锌的技术是荧光成像。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的锌离子荧光探针Zinquin AM。
点击查看实验方案
点击查看光谱
底读模式
操作步骤
1.准备HHBS缓冲液
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Zinquin AM * UltraPure级*原液。
2.1使用的Zinquin AM * UltraPure等级*的量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Zinquin AM * UltraPure级*与1090.56μL无水DMSO混合。
3.使用10μMZinquinAM * UltraPure等级* 2在HHBS中制备2X工作溶液
3.1Zinquin AM * UltraPure等级的终井内浓度*：5μM
3.2在合适的容器中混合16μL的Zinquin AM * UltraPure等级*。然后，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2毫升。
注意：对于大多数细胞系，我们建议Zinquin AM * UltraPure等级的终浓度为4至5μM。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至以下：5μMZinquinAM * UltraPure等级*
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液，直至体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 360/480 nm运行实验。
参考文献
Zinquin identifies subcellular compartmentalization of zinc in cortical neurons. Relation to the trafficking of zinc and the mitochondrial compartment
Authors: Colvin RA, Laskowski M, Fontaine CP.
Journal: Brain Res (2006): 1
S-Nitroso compounds interfere with zinc probing by Zinquin
Authors: Jansen S, Arning J, Dulcks T, Beyersmann D.
Journal: Anal Biochem (2004): 145
Coordination and fluorescence of the intracellular Zn2+ probe [2-methyl-8-(4-toluenesulfonamido)-6-quinolyloxy]acetic acid (Zinquin A) in ternary Zn2+ complexes
Authors: Hendrickson KM, Geue JP, Wyness O, Lincoln SF, Ward AD.
Journal: J Am Chem Soc (2003): 3889
Fluorescent detection of Zn(2+)-rich vesicles with Zinquin: mechanism of action in lipid environments
Authors: Snitsarev V, Budde T, Stricker TP, Cox JM, Krupa DJ, Geng L, Kay AR.
Journal: Biophys J (2001): 1538
The synthesis and fluorescent properties of analogues of the zinc(II) specific fluorophore zinquin ester
Authors: Kimber MC, Mahadevan IB, Lincoln SF, Ward AD, Tiekink ER.
Journal: J Org Chem (2000): 8204
Changes in distribution of labile zinc in mouse spermatozoa during maturation in the epididymis assessed by the fluorophore Zinquin
Authors: Zalewski PD, Jian X, Soon LL, Breed WG, Seamark RF, Lincoln SF, Ward AD, Sun FZ.
Journal: Reprod Fertil Dev (1996): 1097
Flux of intracellular labile zinc during apoptosis (gene-directed cell death) revealed by a specific chemical probe, Zinquin
Authors: Zalewski PD, Forbes IJ, Seamark RF, Borlinghaus R, Betts WH, Lincoln SF, Ward AD.
Journal: Chem Biol (1994): 153
Measurement of zinc in hepatocytes by using a fluorescent probe, zinquin: relationship to metallothionein and intracellular zinc
Authors: Coyle P, Zalewski PD, Philcox JC, Forbes IJ, Ward AD, Lincoln SF, Mahadevan I, Rofe AM.
Journal: Biochem J (1994): 781
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
锌离子探针Zn Metal Fluor 520, AM价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 493 | Em (nm) | 516 |
| 分子量 | 721.62 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Metal Fluor Zn-520是美国AAT Bioquest生产的 用于检测突触囊泡中存在的较高锌离子浓度的锌离子探针，并响应电刺激或兴奋毒性激动剂（0.05-50μM）释放，干扰钙敏感性小。 Metal Fluor Zn-520在结合锌离子（> 250倍）后显示出很强的荧光增强作用。 该细胞渗透性AM-酯可用于检测细胞内锌离子水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的锌离子探针Zn Metal Fluor 520, AM。
点击查看光谱
点击查看实验方案
底读模式
操作步骤
1.准备HHBS缓冲液
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Metal Fluor Zn-520，AM原液
2.1使用的金属Fluor Zn-520，AM的量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，混合1mg的Metal Fluor TM Zn-520，AM和692.89μL的无水DMSO。
3.使用10μM金属Fluor Zn-520，AM 2在HHBS中制备2X工作溶液
3.1终孔内浓度为Metal Fluor™Zn-520，AM：5μM
3.2在合适的容器中混合16μL的Metal Fluor Zn-520，AM。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，
注意：对于大多数细胞系，我们建议使用Metal Fluor Zn-520，AM的终浓度为4至5μM。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至以下：5μM的Metal Fluor Zn-520，AM
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液，直至体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 492/514 nm运行实验。
参考文献
Zinquin identifies subcellular compartmentalization of zinc in cortical neurons. Relation to the trafficking of zinc and the mitochondrial compartment
Authors: Colvin RA, Laskowski M, Fontaine CP.
Journal: Brain Res (2006): 1
S-Nitroso compounds interfere with zinc probing by Zinquin
Authors: Jansen S, Arning J, Dulcks T, Beyersmann D.
Journal: Anal Biochem (2004): 145
Coordination and fluorescence of the intracellular Zn2+ probe [2-methyl-8-(4-toluenesulfonamido)-6-quinolyloxy]acetic acid (Zinquin A) in ternary Zn2+ complexes
Authors: Hendrickson KM, Geue JP, Wyness O, Lincoln SF, Ward AD.
Journal: J Am Chem Soc (2003): 3889
Fluorescent detection of Zn(2+)-rich vesicles with Zinquin: mechanism of action in lipid environments
Authors: Snitsarev V, Budde T, Stricker TP, Cox JM, Krupa DJ, Geng L, Kay AR.
Journal: Biophys J (2001): 1538
The synthesis and fluorescent properties of analogues of the zinc(II) specific fluorophore zinquin ester
Authors: Kimber MC, Mahadevan IB, Lincoln SF, Ward AD, Tiekink ER.
Journal: J Org Chem (2000): 8204
Changes in distribution of labile zinc in mouse spermatozoa during maturation in the epididymis assessed by the fluorophore Zinquin
Authors: Zalewski PD, Jian X, Soon LL, Breed WG, Seamark RF, Lincoln SF, Ward AD, Sun FZ.
Journal: Reprod Fertil Dev (1996): 1097
Flux of intracellular labile zinc during apoptosis (gene-directed cell death) revealed by a specific chemical probe, Zinquin
Authors: Zalewski PD, Forbes IJ, Seamark RF, Borlinghaus R, Betts WH, Lincoln SF, Ward AD.
Journal: Chem Biol (1994): 153
Measurement of zinc in hepatocytes by using a fluorescent probe, zinquin: relationship to metallothionein and intracellular zinc
Authors: Coyle P, Zalewski PD, Philcox JC, Forbes IJ, Ward AD, Lincoln SF, Mahadevan I, Rofe AM.
Journal: Biochem J (1994): 781
简要描述：氨基聚乙二醇，mPEG-NH2，产品型号：PG1-AM-3k-1。贮存： 储存在-20℃。干燥。避光。避免频繁解冻和冷冻。
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 一个月 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合 |
描述：
氨基官能化甲氧基聚乙二醇，氨基 PEG (mPEG-NH2) 是一种单反应性 PEG 衍生物，可用于通过羧基 (-COOH) 或其他胺反应性化学基团修饰蛋白质、肽和其他材料。聚乙二醇化可以增加肽和蛋白质的溶解度和稳定性并降低免疫原性。它还可以抑制带电分子与改性表面的非特异性结合。
物理性质：
灰白色/白色固体或粘稠液体取决于分子量；
溶于普通水溶液和大多数有机溶剂；
上海金畔生物科技有限公司
国内试剂耗材经销代理。
国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。
进出口货物代理服务。
公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌
质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。
公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。
简要描述：Am 114 ,98，产品型号：A817591。CAS号856849-35-9
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 一个月 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合 |
Am 114 ,98，产品型号：A817591。
Am 114 ,98，CAS号856849-35-9
[856849-35-9 ]的产品详情
| CAS 号： | 856849-35-9 | MDL 编号： | MFCD09971093 |
| 公式 ： | C20H21乙2不5 | 沸点： | – |
| 线性结构公式： | – | 印记键： | – |
| 兆瓦： | 377.01克/摩尔 | Pubchem ID： | 57369225 |
| 同义词： |
上海金畔生物代理Ambeed中国的业务，Ambeed代理、Ambeed上海代理、Ambeed华南代理、Ambeed华东代理、Ambeed华西代理、Ambeed华北代理，上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品供应，欲购从速（敬请咨询。）
上海金畔生物科技有限公司，
国内试剂耗材经销代理。
国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。
进出口货物代理服务。
公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。
公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。
AM Systems 神经科学和电生理学仪器概述
AM Systems 提供全系列的高质量、低成本放大器，用于各种神经生理学和生理学实验方案。
我们的放大器具有低噪声性能、易于使用的界面和坚固的钢制外壳的特点。此外，我们通常可以自定义增益和滤波器设置来满足研究人员的需求。
AM Systems 仪器采用优质的组件制成，专为专业研究人员或生物学入门学生长期使用而设计。
细胞内放大器
细胞外放大器
膜片钳放大器
刺激仪器
专业仪器
数据采集和分析系统
简要描述：AM Systems噪音消除器 HUM BUG NOISE ELIMINATOR 易于使用的自适应电路可实现无噪音录音。消除干扰：不改变生物活性所需的输入信号消除噪音：来自电源线和电源、灯、接地回路、电拾音器无需调整
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 其他品牌 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合 |
|---|
AM Systems噪音消除器HUM BUG NOISE ELIMINATOR
AM Systems 是高品质呼吸护理产品和精密神经生理学仪器制造商。
肺科设计并开发了流行的 VBMax™ 系列肺功能测试过滤器、多功能 ViroMax™ 病毒细菌过滤器和 HydroMax™ HME 过滤器。
神经生理学部门设计、制造和分销各种科学仪器，包括刺激器、细胞内和细胞外放大器以及膜片钳。优秀的大学和研究机构使用我们的仪器和配件（包括电极、绝缘线和毛细管）对学习和记忆、阿尔茨海默病和帕金森病以及中风、耳聋和失明模型进行开创性的研究。
两个增材制造系统部门都对我们的客户有着共同的承诺，他们要求我们高效、经济地提供创新、高质量的产品和服务。
AM Systems噪音消除器HUM BUG NOISE ELIMINATOR
Quest Scientific 的 Hum Bug 线路噪声消除器可消除电生理信号中的线路频率噪声，无需过滤或需要用户持续关注。这意味着获得结果的时间更长，解决不断变化的噪声和接地环路问题的时间更少。
嗡嗡声不会引入频率损失、直流电压偏移、信号衰减或记录信号的相位误差。
Hum Bug 消除了 50/60 Hz 电干扰和更复杂的噪声信号，同时保持生理信号完好无损。
Hum Bug 能够适应不断变化的噪音特征。
尽管 Hum Bug 使用强大的信号处理器，但您的信号永远不会数字化。
法拉第笼降低了环境噪声源的强度，但这种保护通常是不完整的，并且在笼内工作可能很麻烦。
陷波滤波器或梳状滤波器有时用于抑制 50/60 Hz 噪声和谐波，但如果信号的频率分量与滤波频率重叠，这些滤波器将使输入波形失真。
Hum Bug 不是滤波器，不会产生相位延迟、幅度误差、直流偏移或波形失真。
无需设置或调整。
微电极，
皮肤电极（心电图、肌电图、脑电图）、
高增益放大器，
磁传感器
音频设备。
工作原理：当信号在输入和输出之间的直接模拟路径中传递时，所有功能并行发生。即使噪声特性不断变化并且噪声和输入信号的频率分量重叠，HumBug 也能有效地将噪声与输入信号隔离。
频率响应：生物信号通过 Hum Bug 时，直流至大于 500 kHz 范围内的频率分量保持不变。
复杂噪声：电气干扰通常会产生 50/60 Hz 倍数的谐波混合（例如 100 Hz、150 Hz、200 Hz）。 Hum Bug 可消除频率高达几 kHz 的所有谐波。因此，甚至消除了调光器和荧光灯产生的复杂尖峰。
应用： Hum Bug 可以消除几乎任何模拟信号中的 50/60 Hz 噪声。它在消除与接地不足、接地环路和电拾取相关的噪声方面同样有效。常见应用包括消除使用微电极、皮肤电极（心电图、肌电图、脑电图）、高增益放大器、磁传感器和音频设备记录的信号的噪声。
带铸铝底座的屏蔽钢仪表箱
W-6.5″ D-7.5″； H-1.3 英寸；（32.2 x 18.1 x 3.1 厘米）
重量 6 磅（2.75 千克）
输入电压
输入保护：50 伏峰峰值
最大输入信号：平均峰峰值 5 伏
最大噪声幅度：1 伏峰峰值
电源：120 V 和 240 V 可选
频率响应
噪音消除：50/60 Hz 和谐波高达 4 kHz
控制
BYPASS：停止噪音消除
HOLD：暂停适应不断变化的噪音
CLEAR：清除噪声副本
展示
LED 指示变化的噪音水平
绿色：噪声副本的幅度减小
红色：噪声副本的振幅增加
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Mag-Fura-2, AM CAS 132319-57-4价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 336 | Em (nm) | 505 |
| 分子量 | 722.56 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品基本信息
产品名称：钙离子荧光探针Mag-Fura-2, AM
CAS：132319-57-4
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：12个月
化学和光谱特性
分子量：722.56
溶剂：DMSO
激发波长：336
发射波长：503
Journal: Mol Cell Biochem (1994): 11
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM价格 2111
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 495 | Em (nm) | 528 |
| 分子量 | 817.65 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
关键参数
仪器：荧光酶标仪
Ex:490
Em：525
Cutoff:515
推荐纯黑色孔板
仪器：荧光显微镜
通道：FITC
推荐黑色透明底孔板
钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，细胞渗透性Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM的类似物，Mg离子的Kd为4.7 mM，Ca离子的Kd为22μM，因此可用作细胞内Mg离子指示剂以及 低亲和力Ca离子指示剂。 这种低亲和力荧光Ca离子指示剂已被用于准确跟踪骨骼肌中空间平均游离Ca离子瞬态的动力学。 Mag-fluo-4产生关于骨骼肌中空间平均游离Ca离子瞬态的可靠动力学信息。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM。
点击查看光谱
钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM加载到活细胞中的方案（点击查看）
钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针
操作步骤
1.准备HHBS缓冲液
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Mag-Fluo-4 AM储备液
2.1使用的Mag-Fluo-4 AM量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Mag-Fluo-4AM与611.51μL无水DMSO混合。
3.使用10μMMag-Fluo-4 AM 2在HHBS中制备2X工作溶液
3.1终孔内浓度的Mag-Fluo-4 AM：5μM
3.2在合适的容器中混合16μL的Mag-Fluo-4AM。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议Mag-Fluo-4 AM的终浓度为4至5μM。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至5μM的Mag-Fluo-4 AM
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液，直至体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 494/516 nm运行实验。
参考文献
Real-time intra-store confocal Ca2+ imaging in isolated mouse cardiomyocytes
Authors: Fernandez-Tenorio M, Niggli E.
Journal: Cell Calcium. (2016)
Redistribution of subcellular calcium and its effect on apoptosis in primary cultures of rat proximal tubular cells exposed to lead
Authors: Wang H, Wang ZK, Jiao P, Zhou XP, Yang DB, Wang ZY, Wang L.
Journal: Toxicology (2015): 137
Role of Mitofusin-2 in mitochondrial localization and calcium uptake in skeletal muscle
Authors: Ainbinder A, Boncompagni S, Protasi F, Dirksen RT.
Journal: Cell Calcium (2015): 14
EGF stimulates Mg(2+) influx in mammary epithelial cells
Authors: Trapani V, Arduini D, Luongo F, Wolf FI.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (2014): 572
Tetanic Ca2+ transient differences between slow- and fast-twitch mouse skeletal muscle fibres: a comprehensive experimental approach
Authors: Calderon JC, Bolanos P, Caputo C.
Journal: J Muscle Res Cell Motil (2014): 279
TRPC1 is involved in Ca(2)(+) influx and cytotoxicity following Pb(2)(+) exposure in human embryonic kidney cells
Authors: Zhang H, Li W, Xue Y, Zou F.
Journal: Toxicol Lett (2014): 52
High-throughput functional assays of IP3-evoked Ca2+ release
Authors: Tovey SC, Taylor CW.
Journal: Cold Spring Harb Protoc (2013): 930
Measurement and simulation of myoplasmic calcium transients in mouse slow-twitch muscle fibres
Authors: Hollingworth S, Kim MM, Baylor SM.
Journal: J Physiol (2012): 575
Presence of store-operated Ca2+ entry in C57BL/6J mouse ventricular myocytes and its suppression by sevoflurane
Authors: Kojima A, Kitagawa H, Omatsu-Kanbe M, Matsuura H, Nosaka S.
Journal: Br J Anaesth (2012): 352
Sevoflurane protects ventricular myocytes from Ca2+ paradox-mediated Ca2+ overload by blocking the activation of transient receptor potential canonical channels
Authors: Kojima A, Kitagawa H, Omatsu-Kanbe M, Matsuura H, Nosaka S.
Journal: Anesthesiology (2011): 509
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Cal500 AM价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 388 | Em (nm) | 482 |
| 分子量 | 1019.92 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Cal-520 ，Cal-590 和Cal-630 提供强大的均匀荧光测定工具，用于检测细胞内钙动员。它们是荧光钙敏感染料，与现有的钙指示剂（如Fluo-3 AM，Fluo-4 AM和Rhod-2 AM）相比，具有显着的信噪比和细胞内保留。表达通过钙发出信号的GPCR或钙通道的细胞可以预装载可以穿过细胞膜的Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM。一旦进入细胞内，Cal 520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM的亲脂性阻断基团被细胞内酯酶切割，产生带负电荷的荧光染料，留在细胞内。它们与钙结合后的荧光大大增强。当用激动剂刺激细胞时，该受体表示细胞内钙的释放，这显着增加了Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 的荧光。高灵敏度和> 100倍荧光增强的特性使Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM成为测量细胞钙的理想指标。高信噪比和更好的细胞内保留使Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 钙测定成为评估GPCR和钙通道靶标以及筛选其激动剂和拮抗剂的有力工具。
除了方便的激发波长和钙的大荧光增强外，Cal-520 ，Cal-590 和Cal-630 主要定位于细胞溶胶中，不像Rhod-2主要位于线粒体中。 此外，Cal-590 和Cal-630 的长Ex / Em波长使这些染料成为钙指示剂，与绿色荧光蛋白（GFP）细胞系的多色检测兼容。 此外，Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 钙测定经过优化，可与大多数现有荧光仪器兼容。 Cal-520在488 nm处可以很好地激发，并与FITC滤光片组一起使用。 Cal-590经过优化，可在555 nm激发，并与TRITC / Cy3滤光片组配合使用。 Cal-590经过优化，可在594 nm激发，并与TexasRed®滤光片组配合使用。光谱和钙结合特性总结如下（参见说明书中的表1）。
点击查看光谱
点击查看实验方案
钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | DAPI 滤波片组 |
| Em： | DAPI 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 400 nm |
| Em： | 500 nm |
| Cutoff： | 470 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
使用Cal-520 AM，Cal-570 AM或Cal-630 AM酯类
1.使用Cal-520 ，Cal-590 或Cal-630 AM酯：
AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。
b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。
注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。
c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。
d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。
e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。
注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。
f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。
g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。
2.测量细胞内钙响应：
为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：
[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]
其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。
解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。
参考文献
Spatio-temporal modulation of light for stimulation and recording of neuronal activity
Authors: He Ma, Michael Lawrence Castanares, Vincent Daria
Journal: (2018): 1072306
A Critical Period for the Rapid Modification of Synaptic Properties at the VPm Relay Synapse
Authors: Libiao Pan, Junhua Yang, Qian Yang, Xiaomeng Wang, Liya Zhu, Yali Liu, Huifang Lou, Chou Xu, Ying Shen, Hao Wang
Journal: Frontiers in molecular neuroscience (2017)
Advances in Two-Photon Scanning and Scanless Microscopy Technologies for Functional Neural Circuit Imaging
Authors: Simon R Schultz, Caroline S Copeland, Amanda J Foust, Peter Quicke, Renaud Schuck
Journal: Proceedings of the IEEE (2017): 139–157
Bidirectional communication between sensory neurons and osteoblasts in an in vitro co-culture system
Authors: Daisuke Kodama, Takao Hirai, Hisataka Kondo, Kazunori Hamamura, Akifumi Togari
Journal: FEBS Letters (2017)
Ca 2+ signals initiate at immobile IP 3 receptors adjacent to ER-plasma membrane junctions
Authors: Nagendra Babu Thillaiappan, Alap P Chavda, Stephen C Tovey, David L Prole, Colin W Taylor
Journal: Nature Communications (2017): 1505
Calcium Imaging Across Large Areas of Intact Vascular Endothelium Reveals Stimulus-Specific Sensory Cells
Authors: Matthew D Lee, Calum Wilson, John G McCarron
Journal: The FASEB Journal (2017): 1005–8
Calcium transient assays for compound screening with human iPSC-derived cardiomyocytes: Evaluating new tools
Authors: Neil J Daily, Radleigh Santos, Joseph Vecchi, Pinar Kemanli, Tetsuro Wakatsuki
Journal: Journal of evolving stem cell research (2017): 1
Characterization of postsynaptic calcium signals in the pyramidal neurons of anterior cingulate cortex
Authors: Xu-Hui Li, Qian Song, Tao Chen, Min Zhuo
Journal: Molecular Pain (2017): 1744806917719847
Direct measurement of TRPV4 and PIEZO1 activity reveals multiple mechanotransduction pathways in chondrocytes
Authors: M Rocio Servin-Vences, Mirko Moroni, Gary R Lewin, Kate Poole
Journal: eLife (2017): e21074
Expression of the GluA2 subunit of glutamate receptors is required for the normal dendritic differentiation of cerebellar Purkinje cells
Authors: Masahiko Tanaka, Tomomi Senda, Naohide Hirashima
Journal: Neuroscience Letters (2017)
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Fluo2 AM 价格 2111
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | – | Em (nm) | – |
| 分子量 | 1060.96 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
钙测量对于许多生物学研究至关重要。钙光谱响应的荧光探针使研究人员能够通过使用荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离钙浓度的变化。 Fluo-2 是 Fluo-3 和 Fluo-4 的母体化合物。这些荧光钙指示剂具有钙依赖性荧光。
适用仪器
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488nm |
| Em： | 530/30 nm |
| 通道: | FITC |
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC |
| Em： | FITC |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
实验方案
储备溶液配制
在高质量无水DMSO制备2至5 mM 的Fluo-2 AM中储备溶液。
工作溶液配制
Fluo-2 AM工作溶液
1.在实验当天，将Fluo-2AM溶解在DMSO中，或将指示剂储备溶液的等分试样解冻至室温。
2.在含有0.04%Pluronic®F-127的缓冲液（例如Hanks和Hepes缓冲液）中制备2至20µM Fluo-2 AM工作溶液。对于大多数细胞系，建议使用最终浓度为4-5μM的Fluo-2 AM。细胞负载所需指示剂的确切浓度请根据经验确定。
注：非离子洗涤剂Pluronic F-127用于提高Fluo-2 AM的水溶性。可从金畔购买各种Pluronic F-127溶液。
注：如果你的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以将丙磺舒（1-2mM）添加到染料工作溶液中（最终井内浓度为0.5-1mM），以减少酯化指示剂的泄漏。多种形式的丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，可从金畔购买。
操作步骤
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。本方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在生长培养基中培养细胞过夜。
2.第二天，将1X Fluo-2 AM工作溶液添加到孔板中。
注意：如果你的化合物干扰血清，在染色前用新鲜的HHBS缓冲液代替生长培养基。
3.将加入染料的孔板在37°C的细胞培养箱中培养30至60分钟。
注：将染料培养2小时以上可以提高某些细胞系的信号强度。
4.用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒）代替染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
5.根据需要添加刺激物，并同时使用配备有FITC滤波片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（如FDSS、FLIPR或FlexStation）的荧光酶标仪在490/525nm，Cutoff=515nm处检测荧光强度。
试剂应用文献
AMPA receptors in the synapse turnover by monomer diffusion
Authors: Morise, Jyoji and Suzuki, Kenichi GN and Kitagawa, Ayaka and Wakazono, Yoshihiko and Takamiya, Kogo and Tsunoyama, Taka A and Nemoto, Yuri L and Takematsu, Hiromu and Kusumi, Akihiro and Oka, Shogo
Journal: Nature communications (2019): 1–18
Cryo-EM Studies of TMEM16F Calcium-Activated Ion Channel Suggest Features Important for Lipid Scrambling
Authors: Feng, Shengjie and Dang, Shangyu and Han, Tina Wei and Ye, Wenlei and Jin, Peng and Cheng, Tong and Li, Junrui and Jan, Yuh Nung and Jan, Lily Yeh and Cheng, Yifan
Journal: Cell Reports (2019): 567–579
Discrimination of Dormant and Active Hematopoietic Stem Cells by G0 Marker Reveals Dormancy Regulation by Cytoplasmic Calcium
Authors: Fukushima, Tsuyoshi and Tanaka, Yosuke and Hamey, Fiona K and Chang, Chih-Hsiang and Oki, Toshihiko and Asada, Shuhei and Hayashi, Yasutaka and Fujino, Takeshi and Yonezawa, Taishi and Takeda, Reina and others
Journal: Cell Reports (2019): 4144–4158
Ketamine Increases Proliferation of Human iPSC-Derived Neuronal Progenitor Cells via Insulin-Like Growth Factor 2 and Independent of the NMDA Receptor
Authors: Grossert, Aless and ra and Mehrjardi, Narges Zare and Bailey, Sarah J and Lindsay, Mark A and Hescheler, Jürgen and Saric, Tomo and Teusch, Nicole
Journal: Cells (2019): 1139
MRGPRX4 is a bile acid receptor for human cholestatic itch
Authors: Yu, Huasheng and Zhao, Tianjun and Liu, Simin and Wu, Qinxue and Johnson, Omar and Wu, Zhaofa and Zhuang, Zihao and Shi, Yaocheng and Peng, Luxin and He, Renxi and others
Journal: eLife (2019): e48431
P2Y6 signaling in alveolar macrophages prevents leukotriene-dependent type 2 allergic lung inflammation
Authors: Nagai, Jun and Balestrieri, Barbara and Fanning, Laura B and Kyin, Timothy and Cirka, Haley and Lin, Junrui and Idzko, Marco and Zech, Andreas and Kim, Edy Y and Brennan, Patrick J and others
Journal: The Journal of clinical investigation (2019)
Hyperglycaemia disrupts conducted vasodilation in the resistance vasculature of db/db mice
Authors: Lemmey, Hamish AL and Ye, Xi and Ding, Hong C and Triggle, Christopher R and Garland, Christopher J and Dora, Kim A
Journal: Vascular pharmacology (2018): 29–35
Methionine and valine activate the mammalian target of rapamycin complex 1 pathway through heterodimeric amino acid taste receptor (TAS1R1/TAS1R3) and intracellular Ca2+ in bovine mammary epithelial cells
Authors: Zhou, Y and Zhou, Z and Peng, J and Loor, Juan J
Journal: Journal of dairy science (2018): 11354–11363
TRPA1-dependent reversible opening of tight junction by natural compounds with an $alpha$, $beta$-unsaturated moiety and capsaicin
Authors: Kanda, Yusuke and Yamasaki, Youhei and Sasaki-Yamaguchi, Yoshie and Ida-Koga, Noriko and Kamisuki, Shinji and Sugawara, Fumio and Nagumo, Yoko and Usui, Takeo
Journal: Scientific reports (2018): 1–13
A new electro-optical approach for conductance measurement: an assay for the study of drugs acting on ligand-gated ion channels
Authors: Menegon, A and Pitassi, S and Mazzocchi, N and Redaelli, L and Rizzetto, R and Roll and JF and Poli, C and Imberti, M and Lanati, A and Grohovaz, F
Journal: Scientific Reports (2017)
Altered spontaneous calcium signaling of in situ chondrocytes in human osteoarthritic cartilage
Authors: Gong, Xiaoyuan and Xie, Wenbin and Wang, Bin and Gu, Lingchuan and Wang, Fuyou and Ren, Xiang and Chen, Cheng and Yang, Liu
Journal: Scientific reports (2017): 17093
Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Ishii, Masaaki and Rohrer, Bärbel
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071
Bystander effects elicited by single-cell photo-oxidative blue-light stimulation in retinal pigment epithelium cell networks
Authors: Ishii, Masaaki and Rohrer, Bärbel
Journal: Cell Death Discovery (2017): 16071
High-throughput screen detects calcium signaling dysfunction in typical sporadic autism spectrum disorder
Authors: Schmunk, Galina and Nguyen, Rachel L and Ferguson, David L and Kumar, Kenny and Parker, Ian and Gargus, J Jay
Journal: Scientific Reports (2017): 40740
参考文献
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| 钙离子荧光探针Cal-520 , AM | Cat#21130 |
| 新型钙离子荧光探针Calbryte 520, AM *细胞渗透性* | Cat#20650 |
| 新型钙离子荧光探针Calbryte 590, AM *细胞渗透性* | Cat#20700 |
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，AM价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 493 | Em (nm) | 522 |
| 分子量 | 1258.07 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
OG488 BAPTA -1 AM 与 Oregon Green 488 BAPTA-1 AM 酯分子相同。它是一种细胞渗透性、可见光激发的钙指示剂，通常与 FITC 滤光片组一起使用。通过将溶解的指示剂直接添加到含有培养细胞的培养皿中，可以向细胞装载 OG488 BAPTA -1 AM。来自这些细胞的荧光信号通常使用荧光显微镜、荧光微孔板测定或流式细胞术来测量。
点击查看光谱
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | FITC 滤波片组 |
| Em： | FITC 滤波片组 |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 流式细胞仪 | |
| Ex: | 488 |
| Em： | 530/30nm |
| 通道: | FITC |
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 底读模式/可分液处理 |
溶解方案(溶剂以说明书为准)
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 79.487 µL | 397.434 µL | 794.868 µL | 3.974 mL | 7.949 mL |
| 5 mM | 15.897 µL | 79.487 µL | 158.974 µL | 794.868 µL | 1.59 mL |
| 10 mM | 7.949 µL | 39.743 µL | 79.487 µL | 397.434 µL | 794.868 µL |
样品实验方案
储备溶液配制:
除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分成一次性等份，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
OG488 BAPTA-1 AM
在高质量无水 DMSO 中制备 2 至 5 mM OG488 BAPTA-1 AM 储备溶液。
工作溶液配制:
OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液
1.实验当天，将 OG488 BAPTA-1 AM 溶解在 DMSO 中，或将等份指示剂储备溶液解冻至室温。
2.在您选择的缓冲液（例如 Hanks 和 Hepes 缓冲液）中用 0.04% Pluronic® F-127 制备 2 至 20 µM OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液。对于大多数细胞系，建议终浓度为 4-5 μM 的 Cal Green 1 AM。细胞加载所需染料的准确浓度必须根据经验确定。
注意：非离子洗涤剂 Pluronic® F-127 有时用于增加 Cal Green™ 1 AM 的水溶性。可以从金畔购买各种 Pluronic® F-127
注意：如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中（孔中的最终浓度为 0.5-1 mM），以减少脱酯后染料的外漏。各种 ReadiUse 丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从金畔购买。
操作步骤
以下是我们推荐的将 AM 酯加载到活细胞中的方案。该方案仅提供指导，实际应根据您的具体需求进行修改。
1.在生长培养基中将细胞孵育过夜。
2.第二天，将 1X OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液添加到您的细胞培养板中。
3.将载有染料的板在细胞培养箱中于 37°C 下孵育 30 至 60 分钟。
注意：孵育染料超过 1 小时可以提高某些细胞系的信号强度。
4.用 HHBS 或您选择的缓冲液（包含阴离子转运蛋白抑制剂，例如 1 mM 丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
5.根据需要添加刺激剂，同时使用配备 FITC 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（例如 FDSS、FLIPR 或 FlexStation）的荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm 处测量荧光。
试剂应用文献
参考文献
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Fluo5F AM价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 494 | Em (nm) | 516 |
| 分子量 | 1100.91 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
产品基本信息
产品名称：钙离子荧光探针Fluo-5F, AM
储存条件：-15℃避光防潮
保质期：24个月
产品物理化学光谱特性
分子量：1100.91
溶剂：DMSO
激发波长(nm)：494
发射波长(nm)：516
Cat#21104
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Fluo5N,AM价格 2823
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | 494 | Em (nm) | 516 |
| 分子量 | 1127.92 | 溶剂 | DMSO |
| 存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
关键参数
仪器：荧光酶标仪
Ex:490
Em:525
Cutoff:515
推荐孔板：纯黑色
仪器：荧光显微镜
通道：FITC
推荐孔板：黑壁透明底
仪器：流式细胞仪
通道：FITC
产品介绍
钙离子荧光探针Fluo-5N,AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，Fluo-5N是Fluo-4的类似物，具有较低的钙结合亲和力（Kd = ~90 uM），使其适用于检测1μM至1 mM范围内的细胞内钙水平，这将使Fluo-4的反应饱和。。 通过将溶解的指示剂直接加入含有培养细胞的培养皿中，可以将Fluo-5N AM酯直接加载到活细胞中。 它与氩离子激光源在488 nm激发相容，使Fluo-5N可用于共聚焦显微镜，流式细胞仪和微孔板筛选应用。 它的激发和发射波长分别为494和516 nm。 钙结合后，其荧光强度增加> 100倍。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针。
点击查看光谱
点击查看实验方案
钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针
操作步骤
1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。
2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Fluo-5N，AM *细胞渗透物*储备溶液。
2.1使用的Fluo-5N，AM *细胞渗透物*的量：1mg
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg Fluo-5N，AM *细胞渗透物*与443.29μL无水DMSO混合。
3.使用10μMFluo-5N，AM *细胞渗透物* 4在HHBS中制备2X工作溶液，0.08％Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1终井内浓度的Fluo-5N，AM *细胞渗透物*：5μM
3.2Pluronic®F-127的终井内浓度：0.04％
3.3终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLFluo-5N，AM *细胞渗透物*，25.6μL10％Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议终浓度为Fluo-5N，AM *细胞渗透物*为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至：5μMFluo-5N，AM *细胞渗透物*，0.04％Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。 接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL。
7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 494/516 nm运行实验
参考文献
Calreticulin regulates TGF-β1-induced epithelial mesenchymal transition through modulating Smad signaling and calcium signaling
Authors: Yanjiao Wu, Xiaoli Xu, Lunkun Ma, Qian Yi, Weichao Sun, Liling Tang
Journal: The International Journal of Biochemistry & Cell Biology (2017)
Dexmedetomidine reduces hypoxia/reoxygenation injury by regulating mitochondrial fission in rat hippocampal neurons
Authors: Jia Liu, Qing Du, He Zhu, Yu Li, Maodong Liu, Shoushui Yu, Shilei Wang
Journal: Int J Clin Exp Med (2017): 6861–6868
Monosialoganglioside 1 may alleviate neurotoxicity induced by propofol combined with remifentanil in neural stem cells
Authors: Jiang Lu, Xue-qin Yao, Xin Luo, Yu Wang, Sookja Kim Chung, He-xin Tang, Chi Wai Cheung, Xian-yu Wang, Chen Meng, Qing Li
Journal: Neural Regeneration Research (2017): 945
Obtaining spontaneously beating cardiomyocyte-like cells from adipose-derived stromal vascular fractions cultured on enzyme-crosslinked gelatin hydrogels
Authors: Gang Yang, Zhenghua Xiao, Xiaomei Ren, Haiyan Long, Kunlong Ma, Hong Qian, Yingqiang Guo
Journal: Scientific Reports (2017): 41781
Di (2-ethylhexyl) phthalate-induced apoptosis in rat INS-1 cells is dependent on activation of endoplasmic reticulum stress and suppression of antioxidant protection
Authors: Xia Sun, Yi Lin, Qiansheng Huang, Junpeng Shi, Ling Qiu, Mei Kang, Yajie Chen, Chao Fang, Ting Ye, Sijun Dong
Journal: Journal of cellular and molecular medicine (2015): 581–594
The effect of mitochondrial calcium uniporter on mitochondrial fission in hippocampus cells ischemia/reperfusion injury
Authors: Lantao Zhao, Shuhong Li, Shilei Wang, Ning Yu, Jia Liu
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 537–542
Fungus induces the release of IL-8 in human corneal epithelial cells, via Dectin-1-mediated protein kinase C pathways.
Authors: Xu-Dong Peng, Gui-Qiu Zhao, Jing Lin, Nan Jiang, Qiang Xu, Cheng-Cheng Zhu, Jain-Qiu Qu, Lin Cong, Hui Li
Journal: International journal of ophthalmology (2014): 441–447
Propofol and remifentanil at moderate and high concentrations affect proliferation and differentiation of neural stem/progenitor cells
Authors: Qing Li, Jiang Lu, Xianyu Wang
Journal: Neural regeneration research (2014): 2002
Role of mitochondrial calcium uniporter in regulating mitochondrial fission in the cerebral cortexes of living rats
Authors: Nan Liang, Peng Wang, Shilei Wang, Shuhong Li, Yu Li, Jinying Wang, Min Wang
Journal: Journal of Neural Transmission (2014): 593–600
Increased expression of cell adhesion molecule 1 by mast cells as a cause of enhanced nerve–mast cell interaction in a hapten-induced mouse model of atopic dermatitis
Authors: M Hagiyama, T Inoue, T Furuno, T Iino, S Itami, M Nakanishi, H Asada, Y Hosokawa, A Ito
Journal: British Journal of Dermatology (2013): 771–778
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| 钙离子荧光探针Cal-520N, AM | Cat#21146 |