AF 488炔烃 等同于Alexa Fluor 488-AAT Bioquest荧光染料

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AF 488炔烃 等同于Alexa Fluor 488价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

产品参数
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 773.92 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:Alpha Fluor 488 炔烃

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:773.92

外观:固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):499

发射波长(nm):520

 

产品介绍

荧光染料炔烃通过铜催化的点击反应(CuAAC)与叠氮化物反应。 这种点击化学越来越多地用于各种生物学应用。 Alpha Fluor 488炔烃具有与AlexaFluor®488炔烃相同的化学结构(AlexaFluor®是ThermoFisher Scientific的商标)。Alpha Fluor 488炔烃通过铜催化的点击反应与末端炔烃反应,作为生物正交或生物学上独特的半抗原,用于需要信号放大的应用。

点击查看光谱

 

参考文献

Development of new hCaM-Alexa Fluor(R) biosensors for a wide range of ligands
Authors: Velazquez-Lopez, I.; Leon-Cruz, E.; Pardo, J. P.; Sosa-Peinado, A.; Gonzalez-Andrade, M.
Journal: Anal Biochem (2017): 13-22

Synthetic Protocol for AFCS: A Biologically Active Fluorescent Castasterone Analog Conjugated to an Alexa Fluor 647 Dye
Authors: Winne, J. M.; Irani, N. G.; Van den Begin, J.; Madder, A.
Journal: Methods Mol Biol (2017): 21-Sep

Alteration of AMPA Receptor-Mediated Synaptic Transmission by Alexa Fluor 488 and 594 in Cerebellar Stellate Cells
Authors: Maroteaux, M.; Liu, S. J.
Journal: eNeuro (2016)

Alexa fluor-labeled fluorescent cellulose nanocrystals for bioimaging solid cellulose in spatially structured microenvironments
Authors: Grate, J. W.; Mo, K. F.; Shin, Y.; Vasdekis, A.; Warner, M. G.; Kelly, R. T.; Orr, G.; Hu, D.; Dehoff, K. J.; Brockman, F. J.; Wilkins, M. J.
Journal: Bioconjug Chem (2015): 593-601

A mouse monoclonal antibody against Alexa Fluor 647
Authors: Wuethrich, I.; Guillen, E.; Ploegh, H. L.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 109-20

In vivo visualization of GL261-luc2 mouse glioma cells by use of Alexa Fluor-labeled TRP-2 antibodies
Authors: Fenton, K. E.; Martirosyan, N. L.; Abdelwahab, M. G.; Coons, S. W.; Preul, M. C.; Scheck, A. C.
Journal: Neurosurg Focus (2014): E12

Green tea catechins quench the fluorescence of bacteria-conjugated Alexa fluor dyes
Authors: Zhao, L.; Li, W.; Zhu, S.; Tsai, S.; Li, J.; Tracey, K. J.; Wang, P.; Fan, S.; Sama, A. E.; Wang, H.
Journal: Inflamm Allergy Drug Targets (2013): 308-14

Volume labeling with Alexa Fluor dyes and surface functionalization of highly sensitive fluorescent silica (SiO2) nanoparticles
Authors: Wang, W.; Nallathamby, P. D.; Foster, C. M.; Morrell-Falvey, J. L.; Mortensen, N. P.; Doktycz, M. J.; Gu, B.; Retterer, S. T.
Journal: Nanoscale (2013): 10369-75

Fluorescence of Alexa fluor dye tracks protein folding
Authors: Lindhoud, S.; Westphal, A. H.; Visser, A. J.; Borst, J. W.; van Mierlo, C. P.
Journal: PLoS One (2012): e46838

a Luo-acupoint) in the rat: a double-labeling study of cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488 and 594]
Authors: Cui, J. J.; Zhu, X. L.; Ji, C. F.; Jing, X. H.; Bai, W. Z., [Neuroanatomical basis of clinical joint application of “Jinggu” (BL 64, a source-acupoint) and “Dazhong” (KI 4
Journal: Zhen Ci Yan Jiu (2011): 262-7

 

相关产品

产品名称 货号
AF 488叠氮化钠 等同于Alexa Fluor 488 Cat#1701
AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488 Cat#1705
荧光标记染料 Alpha Fluor 488酸 相当于Alexa Fluor 488酸 Cat#1790

AF 488叠氮化物 等同于Alexa Fluor 488-AAT Bioquest荧光染料

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AF 488叠氮化物 等同于Alexa Fluor 488价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

产品参数
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 861.04 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

荧光染料叠氮化物通过铜催化的点击反应(CuAAC)与炔烃反应。 这种点击化学越来越多地用于各种生物学应用。 Alpha Fluor 488叠氮化物具有与AlexaFluor®488叠氮化物相同的化学结构(AlexaFluor®ThermoFisher Scientific的商标)。 Alpha Fluor 488叠氮化物通过铜催化的点击反应与末端炔烃反应,作为生物正交或生物学上独特的半抗原,用于需要信号放大的应用。

点击查看光谱

实验方案

操作方案

标记寡核苷酸

1.准备以下试剂:

200mMTHPTA [tris(3-羟丙基三唑基甲基)胺]水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰的低聚水溶液(尽可能浓缩,例如> 10 mg / mL)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)

2.在反应前将CuSO4与THPTA以1:2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为2-5当量)。

4.加入5当量的THPTA / CuSO4工作溶液(来自步骤1)。

5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.乙醇通过所需方法(例如HPLC)沉淀或纯化寡聚物。

 

标记肽

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液(取决于您的肽溶解度,如果可能,> 10 mg / mL)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。

4.加入5-10当量的THPTA / CuSO4。

5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过HPLC纯化您想要的肽。

 

标记炔烃有机小分子

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃化合物水溶液或DMF溶液(取决于您的化合物溶解度,如果可能,> 10mg / mL,)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。当冷冻时,该溶液可稳定数周。

3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。

4.加入25当量的THPTA / CuSO4。

5.加入50当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。

7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。

 

标记生物聚合物

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃改性的水中生物聚合物(尽可能浓缩,例如> 5毫克/毫升)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物(负载比:5-20染料叠氮化物/炔烃)。

4.加入5摩尔当量(参考染料叠氮化物)的THPTA / CuSO 4。

5.加入10当量的抗坏血酸钠(参见染料叠氮化物)。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。

 

标记细胞,细胞裂解物或生物样品

1.准备以下试剂:

水性缓冲液或100mM THPTA配体水溶液

20mM CuSO4水溶液

300mM抗坏血酸钠水溶液

2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液

2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品,将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中,然后短暂涡旋混合。

50μL细胞或细胞裂解液样品

50μLPBS缓冲液

50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(或染料炔烃)检测试剂

3.加入10μL100mM THPTA溶液,短暂涡旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO4溶液,短暂涡旋振荡。

5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应,短暂涡旋混合。

6.保护点击反应不受光照,使其在室温下孵育30分钟。

7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和/或分析。

 

参考文献

Development of new hCaM-Alexa Fluor(R) biosensors for a wide range of ligands
Authors: Velazquez-Lopez, I.; Leon-Cruz, E.; Pardo, J. P.; Sosa-Peinado, A.; Gonzalez-Andrade, M.
Journal: Anal Biochem (2017): 13-22

Synthetic Protocol for AFCS: A Biologically Active Fluorescent Castasterone Analog Conjugated to an Alexa Fluor 647 Dye
Authors: Winne, J. M.; Irani, N. G.; Van den Begin, J.; Madder, A.
Journal: Methods Mol Biol (2017): 21-Sep

Alteration of AMPA Receptor-Mediated Synaptic Transmission by Alexa Fluor 488 and 594 in Cerebellar Stellate Cells
Authors: Maroteaux, M.; Liu, S. J.
Journal: eNeuro (2016)

Alexa fluor-labeled fluorescent cellulose nanocrystals for bioimaging solid cellulose in spatially structured microenvironments
Authors: Grate, J. W.; Mo, K. F.; Shin, Y.; Vasdekis, A.; Warner, M. G.; Kelly, R. T.; Orr, G.; Hu, D.; Dehoff, K. J.; Brockman, F. J.; Wilkins, M. J.
Journal: Bioconjug Chem (2015): 593-601

A mouse monoclonal antibody against Alexa Fluor 647
Authors: Wuethrich, I.; Guillen, E.; Ploegh, H. L.
Journal: Monoclon Antib Immunodiagn Immunother (2014): 109-20

In vivo visualization of GL261-luc2 mouse glioma cells by use of Alexa Fluor-labeled TRP-2 antibodies
Authors: Fenton, K. E.; Martirosyan, N. L.; Abdelwahab, M. G.; Coons, S. W.; Preul, M. C.; Scheck, A. C.
Journal: Neurosurg Focus (2014): E12

Green tea catechins quench the fluorescence of bacteria-conjugated Alexa fluor dyes
Authors: Zhao, L.; Li, W.; Zhu, S.; Tsai, S.; Li, J.; Tracey, K. J.; Wang, P.; Fan, S.; Sama, A. E.; Wang, H.
Journal: Inflamm Allergy Drug Targets (2013): 308-14

Volume labeling with Alexa Fluor dyes and surface functionalization of highly sensitive fluorescent silica (SiO2) nanoparticles
Authors: Wang, W.; Nallathamby, P. D.; Foster, C. M.; Morrell-Falvey, J. L.; Mortensen, N. P.; Doktycz, M. J.; Gu, B.; Retterer, S. T.
Journal: Nanoscale (2013): 10369-75

Fluorescence of Alexa fluor dye tracks protein folding
Authors: Lindhoud, S.; Westphal, A. H.; Visser, A. J.; Borst, J. W.; van Mierlo, C. P.
Journal: PLoS One (2012): e46838

a Luo-acupoint) in the rat: a double-labeling study of cholera toxin subunit B conjugated with Alexa Fluor 488 and 594]
Authors: Cui, J. J.; Zhu, X. L.; Ji, C. F.; Jing, X. H.; Bai, W. Z., [Neuroanatomical basis of clinical joint application of “Jinggu” (BL 64, a source-acupoint) and “Dazhong” (KI 4
Journal: Zhen Ci Yan Jiu (2011): 262-7

 

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产品名称 货号
AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488 Cat#1705
AF 488炔烃 等同于Alexa Fluor 488 Cat#1700
荧光标记染料 Alpha Fluor 488酸 相当于Alexa Fluor 488酸 Cat#1790

iFluor 350 Styramide * Alexa Fluor 350酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 350 Styramide * Alexa Fluor 350酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 350 Styramide * Alexa Fluor 350酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 345 Em (nm) 450
分子量 931.13 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 350 Styramide是Alexa Fluor 350酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 350 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: DAPI滤波片组
Em: DAPI 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: DAPI 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 350 Styramide * Alexa Fluor 350酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 350 Styramide * Alexa Fluor 350酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 1037.99 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 488 Styramide是Alexa Fluor 488酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 488 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC滤波片组
Em: FITC滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: FITC滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

参考文献 

Immunofluorescent Staining of Adult Murine Paraffin-Embedded Skeletal Tissue.
Authors: Felsenthal, Neta and Zelzer, Elazar
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2021): 337-344
 
Highly Sensitive and Multiplexed In Situ RNA Profiling with Cleavable Fluorescent Tyramide.
Authors: Xiao, Lu and Labaer, Joshua and Guo, Jia
Journal: Cells (2021)
 
Single-cell RNA sequencing of human liver reveals hepatic stellate cell heterogeneity.
Authors: Payen, Valéry L and Lavergne, Arnaud and Alevra Sarika, Niki and Colonval, Megan and Karim, Latifa and Deckers, Manon and Najimi, Mustapha and Coppieters, Wouter and Charloteaux, Benoît and Sokal, Etienne M and El Taghdouini, Adil
Journal: JHEP reports : innovation in hepatology (2021): 100278
 
Multiplexed In Situ Protein Profiling with High-Performance Cleavable Fluorescent Tyramide.
Authors: Pham, Thai and Liao, Renjie and Labaer, Joshua and Guo, Jia
Journal: Molecules (Basel, Switzerland) (2021)
 
Accessibility-dependent topology studies of membrane proteins using a SpyTag/SpyCatcher protein-ligation system.
Authors: Bae, Yoonji and Lee, Sang Kwon and Chae, Young Chan and Park, Chan Young and Kang, Sebyung
Journal: International journal of biological macromolecules (2021): 171-178
 
Immunohistochemical Detection of 5-Hydroxymethylcytosine and 5-Carboxylcytosine in Sections of Zebrafish Embryos.
Authors: Jessop, Peter and Gering, Martin
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2021): 193-208
 
Phenoxy Radical Reactivity of Nucleic Acids: Practical Implications for Biotinylation.
Authors: Wilbanks, Brandon and Garcia, Brian and Byrne, Shane and Dedon, Peter and Maher, L James
Journal: Chembiochem : a European journal of chemical biology (2021): 1400-1404
 
Adoptive cell therapy of triple negative breast cancer with redirected cytokine-induced killer cells.
Authors: Sommaggio, Roberta and Cappuzzello, Elisa and Dalla Pietà, Anna and Tosi, Anna and Palmerini, Pierangela and Carpanese, Debora and Nicolè, Lorenzo and Rosato, Antonio
Journal: Oncoimmunology (2020): 1777046
 
A simple, real-time assay of horseradish peroxidase using biolayer interferometry.
Authors: Kojima, Takaaki and Nakane, Ayako and Zhu, Bo and Alfi, Almasul and Nakano, Hideo
Journal: Bioscience, biotechnology, and biochemistry (2019): 1822-1828
 
The EMARS Reaction for Proximity Labeling.
Authors: Honke, Koichi and Miyagawa-Yamaguchi, Arisa and Kotani, Norihiro
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2019): 1-12

iFluor 546 Styramide * Alexa Fluor 546酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 546 Styramide * Alexa Fluor 546酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 546 Styramide * Alexa Fluor 546酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 541 Em (nm) 557
分子量 1326.69 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 546 Styramide是Alexa Fluor 546酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 546 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC 滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy3/TRITC 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 546 Styramide * Alexa Fluor 546酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 546 Styramide * Alexa Fluor 546酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 557 Em (nm) 570
分子量 1023.15 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 555 Styramide是Alexa Fluor 555酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 555 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC 滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: Cy3/TRITC 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 568 Em (nm) 587
分子量 1243.60 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 568 Styramide是Alexa Fluor 568酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 568 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC 滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: Cy3/TRITC 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 594 Styramide * Alexa Fluor 594酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 594 Styramide * Alexa Fluor 594酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 594 Styramide * Alexa Fluor 594酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 587 Em (nm) 603
分子量 1341.71 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 594 Styramide是Alexa Fluor 594酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 594 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC 滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: Cy3/TRITC 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波片观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 594 Styramide * Alexa Fluor 594酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 594 Styramide * Alexa Fluor 594酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 656 Em (nm) 670
分子量 1231.63 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 647 Styramide是Alexa Fluor 647酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 647 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy5滤波片组
Em: Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 647 Styramide * Alexa Fluor 647酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

 

参考文献

Site-specific labeling and functional efficiencies of human fibroblast growth Factor-1 with a range of fluorescent Dyes in the flexible N-Terminal region and a rigid $beta$-turn region
Authors: Mohale, Mamello and Gundampati, Ravi Kumar and Kumar, Thallapuranam Krishnaswamy Suresh and Heyes, Colin D
Journal: Analytical biochemistry (2022): 114524
 
SP/NK-1R Axis Promotes Perineural Invasion of Pancreatic Cancer and is Affected by lncRNA LOC389641
Authors: Ji, Tengfei and Ma, Keqiang and Wu, Hongsheng and Cao, Tiansheng
Journal: (2021)
 
Efferocytosis induces macrophage proliferation to help resolve tissue injury
Authors: Gerlach, Brennan D and Ampomah, Patrick B and Yurdagul Jr, Arif and Liu, Chuang and Lauring, Max C and Wang, Xiaobo and Kasikara, Canan and Kong, Na and Shi, Jinjun and Tao, Wei and others,
Journal: Cell metabolism (2021): 2445–2463
 
Enrichment of NPC1-deficient cells with the lipid LBPA stimulates autophagy, improves lysosomal function, and reduces cholesterol storage
Authors: Ilnytska, Olga and Lai, Kimberly and Gorshkov, Kirill and Schultz, Mark L and Tran, Bruce Nguyen and Jeziorek, Maciej and Kunkel, Thaddeus J and Azaria, Ruth D and McLoughlin, Hayley S and Waghalter, Miriam and others,
Journal: Journal of Biological Chemistry (2021)
 
Pharmacological targeting of Sam68 functions in colorectal cancer stem cells
Authors: Masibag, Angelique N and Bergin, Christopher J and Haebe, Joshua R and Zouggar, A{“i}cha and Shah, Muhammad S and Sandouka, Tamara and da Silva, Amanda Mendes and Desrochers, Fran{c{c}}ois M and Fournier-Morin, Aube and Benoit, Yannick D
Journal: Iscience (2021): 103442
 
Influence of particle geometry on gastrointestinal transit and absorption following oral administration
Authors: Li, Dong and Zhuang, Jie and He, Haisheng and Jiang, Sifan and Banerjee, Amrita and Lu, Yi and Wu, Wei and Mitragotri, Samir and Gan, Li and Qi, Jianping
Journal: ACS applied materials & interfaces (2017): 42492–42502

 

iFluor 680 Styramide * Alexa Fluor 680酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 680 Styramide * Alexa Fluor 680酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 680 Styramide * Alexa Fluor 680酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 684 Em (nm) 701
分子量 1151.28 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 680 Styramide是Alexa Fluor 680酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 680 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy5滤波片组
Em: Cy5滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy5 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 680 Styramide * Alexa Fluor 680酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 680 Styramide * Alexa Fluor 680酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 700 Styramide * Alexa Fluor 700酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 700 Styramide * Alexa Fluor 700酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 700 Styramide * Alexa Fluor 700酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 690 Em (nm) 713
分子量 1158.44 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 700 Styramide是Alexa Fluor 700酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 700 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy7滤波片组
Em: Cy7 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy7 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 700 Styramide * Alexa Fluor 700酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 700 Styramide * Alexa Fluor 700酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 750 Styramide * Alexa Fluor 750酪胺的优异替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 750 Styramide * Alexa Fluor 750酪胺的优异替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 750 Styramide * Alexa Fluor 750酪胺的优异替代品*

产品参数
Ex (nm) 757 Em (nm) 779
分子量 1257.67 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 750 Styramide是Alexa Fluor 750酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 750 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy7滤波片组
Em: Cy7 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy7 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 750 Styramide * Alexa Fluor 750酪胺的优异替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 750 Styramide * Alexa Fluor 750酪胺的优异替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

iFluor 790 Styramide * Alexa Fluor 790酪胺的卓越替代品*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
iFluor 790 Styramide * Alexa Fluor 790酪胺的卓越替代品*价格 4245
产品规格

100 Slides

产品货号

iFluor 790 Styramide * Alexa Fluor 790酪胺的卓越替代品*

产品参数
Ex (nm) 787 Em (nm) 812
分子量 1949.59 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度靶标灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。当与iFluor 染料结合使用时,iFluor 染料标记的Styramide 缀合物可以产生比标准ICC 更高精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)来催化活性原位共价沉积荧光团,PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。与酪酰胺试剂相比,Styramide 缀合物具有标记靶标的能力,因此产生更高的荧光信号。与标准直接偶联法或酪酰胺扩增相比、与相同水平的敏感性相比,Styramide 偶联物还可以明显减少一级抗体的消耗。iFluor 790 Styramide是Alexa Fluor 790酪酰胺或其他光谱相似的荧光酪酰胺缀合物或TSA试剂的优良替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的iFluor 790 Styramide。注:100slides:一管试剂足够100个玻片使用

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy7滤波片组
Em: Cy7滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片: Cy7滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

  1. 修复/透化细胞或组织
  2. 在封闭缓冲液中添加一抗
  3. 加入结合HRP的二抗
  4. 准备Styramide工作溶液,并在室温下添加到细胞或组织中(5-10分钟)

 

溶液配制

储备溶液配制

1.Styramide 储备溶液(100X):将100 µL DMSO加入iFluor 染料标记的含有Styramide 缀合物的小瓶中,制成100X Styramide 储备溶液。注意:一次性使用等分试样,并将未使用的100X储备溶液在2-8 的冰箱避光保存,并避免重复冻融循环。

2.H2O2储备溶液:将90 µL的ddH2O加入10 µL 3%过氧化氢中(未提供)。注意:在使用当天准备新鲜的100X H2O2溶液,做到现用现配。

 

工作溶液配制

1.Styramide 工作溶液(1X):每1 mL反应缓冲液需要10 µL Styramide 储备溶液和10 µL H2O2储备溶液。注意:盖玻片或96孔板中每孔所需100 µL Styramide 工作溶液,(提供的Styramide 足以进行100次测试。)注意:必须在制备后2小时内使用Styramide 工作溶液,并避免直接暴露在光线下。

2.二级抗体-HRP工作溶液:根据所使用的二抗说明书中的建议配制适当浓度的二级抗体-HRP工作溶液。

 

实验步骤

(该步骤适用于细胞或组织染色)

细胞固定和透化

1.在室温下用3.7%甲醛或低聚甲醛的PBS固定细胞或组织20分钟。

2.用PBS冲洗细胞或组织两次。

3.在室温下用0.1%Triton X-100溶液透化细胞1-5分钟。

4.用PBS冲洗细胞或组织两次。

 

组织固定,脱石蜡和补液

(根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水处理。根据实验方案使用特定溶液进行抗原修复。)

 

过氧化物酶标记

1.可选:通过在过氧化物酶淬灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性,然后在室温下用PBS冲洗两次。

2.可选:如果使用结合HRP的链霉亲和素,建议通过生物素封闭缓冲液封闭内源性生物素。

3.在4°C下用封闭溶液(例如含1%BSA的PBS)封闭30分钟。

4.除去封闭溶液,并添加稀释好的一抗,在室温下放置60分钟或在4°C下放置过夜。

5.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

6.将100 µL二级抗体-HRP工作溶液添加到每个样品中,并在室温下孵育60分钟。注意:孵育时间和浓度可以根据信号强度而变化。

7.用PBS洗涤3次,每次5分钟。

 

Styramide标记

1.向每个样品中添加100 µL Styramide 工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。 注意:如果您观察到非特异性信号,则可以缩短Styramide的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照确定样品的孵育时间,或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Styramide。

2.用PBS冲洗3次。

 

复染和荧光成像

1.根据需要对细胞或组织样本进行复染。AAT提供了一系列核复染色试剂,如表1所示。请按照试剂附带的说明进行操作。

2.加上盖玻片。

3.使用适当的滤波器观察Styramide的荧光信号。

表1.建议用于核复染色的产品。 

货号 产品名称 Ex/Em(nm)
17548 核蓝 DCS1 350/461
17550 核绿 DCS1 503/526
17551 核橙 DCS1 528/576
17552 核红 DCS1 642/660

 

图示

iFluor 790 Styramide * Alexa Fluor 790酪胺的卓越替代品*

图1.Power Styramide 信号放大(PSA)系统是可以检测细胞和组织中极低丰度的靶标最灵敏的方法之一,其荧光信号强度比广泛使用的tyramide(TSA)试剂高10-50倍。与iFluor染料结合使用后具有更高荧光强度、更高的光稳定性和增强的水溶性,iFluor染料标记的Styramide缀合物可以产生比标准ICC /明显更高的精度和灵敏度(超过100倍)的荧光信号。PSA利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性原位共价沉积荧光团。PSA自由基的反应性比酪酰胺自由基高得多,这使PSA系统比传统的TSA试剂更快,更耐用,更灵敏。

iFluor 790 Styramide * Alexa Fluor 790酪胺的卓越替代品*

图2.用兔抗Tubulin一抗标记的HeLa细胞的荧光图像。然后将细胞分别用HRP标记的山羊抗兔IgG二抗和iFluor Styramide(左)或AlexaFluor 350酪酰胺(中和右)染色。使用DAPI滤光片组拍摄荧光图像,并相应地标记曝光时间。在相同的曝光时间(25毫秒)下,iFluor 350 Styramide 显示出比AlexaFluor 350酪酰胺明显更高的荧光强度。AlexaFluor 350酪酰胺需要更长的曝光时间(125毫秒)才能使染色可视化。

 

 

相关产品

名称

 
激发(nm)

 
发射(nm)

 
消光系数(cm -1 M -1

 
量子产率

 
iFluor 488 Styramide * Alexa Fluor 488酪酰胺的优异替代品* 491 516 75000  0.9 
iFluor 555 Styramide * Alexa Fluor 555酪酰胺的优异替代品* 557 570 100000  0.64 
iFluor 568 Styramide * Alexa Fluor 568酪酰胺的优异替代品* 568 587 100000  0.57 

nanocs Alexa fluor 647 PEG BiotinPG2-AF647BN-3


nanocs Alexa fluor 647 PEG Biotin

简要描述:nanocs Alexa fluor 647 PEG Biotin近红外荧光PE生物素 产品型号:PG2-AF647BN-3k。
贮存: 储存在-20℃。干燥。避光。避免频繁解冻和冷冻。

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

nanocs  Alexa fluor 647 PEG Biotin近红外荧光PE生物素

Alexa Fluor 647 标记的 PEG 生物素 (AF647 聚乙二醇生物素 是一种近红外荧光PE生物素衍生物,激发/发射波长约为651 nm/672 nm。Alexa fluor 647是一种近红外荧光染料,具有高荧光强度和出色的光稳定性。Nanocs提供的Alexa Fluor 647 PEG生物素是一种水溶性荧光生物素PEG,可直接用于水性缓冲液中,无需添加有毒有机溶剂。

物理性质:

  • Bule/深蓝色固体或粘稠液体取决于分子量;

  • 溶于常规非QEOUS溶液以及大多数有机溶剂;

储存条件:

  • 储存在 -20 0C,干燥。避光。避免频繁解冻和冷冻。


上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

nanocs  Alexa fluor 647 PEG Biotin近红外荧光PE生物素

AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
AF 488胺 等同于Alexa Fluor 488价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

产品参数
Ex (nm) 499 Em (nm) 520
分子量 719.83 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Alpha Fluor 488胺与AlexaFluor®488C5胺的分子相同。荧光染料胺是可用于向含有羰基的生物分子添加荧光标记的反应性分子。Alpha Fluor 488胺与羧酸,醛和酮反应。它是开发Alpha Fluor 488探针的非常有用的构建模块。

点击查看光谱

实验方案

操作方案

标记寡核苷酸

1.准备以下试剂:

200mMTHPTA [tris(3-羟丙基三唑基甲基)胺]水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰的低聚水溶液(尽可能浓缩,例如> 10 mg / mL)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)

2.在反应前将CuSO4与THPTA以1:2的比例混合并充分涡旋几分钟。该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的低聚物溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为2-5当量)。

4.加入5当量的THPTA / CuSO4工作溶液(来自步骤1)。

5.加入10-30当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.乙醇通过所需方法(例如HPLC)沉淀或纯化寡聚物。

 

标记肽

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃修饰肽水溶液或DMF溶液(取决于您的肽溶解度,如果可能,> 10 mg / mL)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃修饰的肽溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。

4.加入5-10当量的THPTA / CuSO4。

5.加入10-20当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过HPLC纯化您想要的肽。

 

标记炔烃有机小分子

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃化合物水溶液或DMF溶液(取决于您的化合物溶解度,如果可能,> 10mg / mL,)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。当冷冻时,该溶液可稳定数周。

3.向炔烃溶液中加入过量的染料叠氮化物(摩尔比为5-10当量)。

4.加入25当量的THPTA / CuSO4。

5.加入50当量的抗坏血酸钠。

6.在室温下搅拌反应混合物30-60分钟。

7.通过色谱或其他方法纯化您想要的分子。

 

标记生物聚合物

1.准备以下试剂:

200 mM THPTA配体水溶液

100mM CuSO4水溶液

炔烃改性的水中生物聚合物(尽可能浓缩,例如> 5毫克/毫升)

100 mM抗坏血酸钠水溶液

10 mM染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(有关推荐的溶剂,请参阅我们的网站)。

2.在反应前几分钟以1:2的比例孵育CuSO4与THPTA配体。 该溶液在冷冻时可稳定数周。

3.向炔烃改性的生物聚合物溶液中加入过量的染料叠氮化物(负载比:5-20染料叠氮化物/炔烃)。

4.加入5摩尔当量(参考染料叠氮化物)的THPTA / CuSO 4。

5.加入10当量的抗坏血酸钠(参见染料叠氮化物)。

6.在室温下搅拌,涡旋或摇动反应混合物30-60分钟。

7.通过凝胶过滤或透析纯化您想要的分子。

 

标记细胞,细胞裂解物或生物样品

1.准备以下试剂:

水性缓冲液或100mM THPTA配体水溶液

20mM CuSO4水溶液

300mM抗坏血酸钠水溶液

2.5mM炔烃或叠氮化物标记试剂水溶液或DMSO溶液

2.对于每个叠氮化物或炔烃修饰的细胞或细胞裂解物样品,将以下试剂加入1.5 mL微量离心管中,然后短暂涡旋混合。

50μL细胞或细胞裂解液样品

50μLPBS缓冲液

50μL5mM相应的染料叠氮化物水溶液或DMSO溶液(或染料炔烃)检测试剂

3.加入10μL100mM THPTA溶液,短暂涡旋混合。

4.加入10μL20mM CuSO4溶液,短暂涡旋振荡。

5.加入10μL300mM抗坏血酸钠溶液以引发点击反应,短暂涡旋混合。

6.保护点击反应不受光照,使其在室温下孵育30分钟。

7.点击标记细胞或细胞裂解物并准备用于下游处理和/或分析。

 

参考文献

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