蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110-AAT Bioquest荧光染料

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蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1159.16 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Ac-ANW)2R110是蛋白酶体20S-beta 5i的选择性荧光底物。非荧光底物产生亮绿色荧光罗丹明110产品,该产品具有可以通过FITC过滤器套件轻松检测到的发射光谱。罗丹明110底物比基于AMC,AFC或4-硝基苯胺的底物敏感得多。蛋白酶体的常见形式是26S蛋白酶体,它包含一个20S核心颗粒结构和两个19S调节帽。所有的20S粒子都由四个堆叠的七聚体环结构组成,它们本身由两种不同类型的亚基组成。α亚基本质上是结构性的,而β亚基主要是催化的。堆叠中的外两个环各由七个α亚基组成,用作调节颗粒对接结构域的分子和N-末端的α亚基形成了一个门,该门阻止了基底不受控制地进入内部空腔。内两个环各由七个β亚基组成,并包含进行蛋白水解反应的蛋白酶活性位点。在哺乳动物中,beta1,beta2和beta5亚基具有催化作用。尽管它们具有共同的机制,但它们具有三种不同的底物特异性,分别被视为胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和肽基-谷氨酰胺肽水解。响应于暴露于促炎信号如细胞因子,特别是干扰素γ,可以在造血细胞中表达表示为β1i,β2i和β5i的替代β形式。beta1,beta2和beta5亚基具有催化作用。尽管它们具有共同的机制,但它们具有三种不同的底物特异性,分别被视为胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和肽基-谷氨酰胺肽水解。响应于暴露于促炎信号如细胞因子,特别是干扰素γ,可以在造血细胞中表达表示为β1i,β2i和β5i的替代β形式。beta1,beta2和beta5亚基具有催化作用。尽管它们具有共同的机制,但它们具有三种不同的底物特异性,分别被视为胰凝乳蛋白酶样,胰蛋白酶样和肽基-谷氨酰胺肽水解。响应于暴露于促炎信号如细胞因子,特别是干扰素γ,可以在造血细胞中表达表示为β1i,β2i和β5i的替代β形式。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物(Ac-ANW)2R110。 

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实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.在DMSO中制备5至10 mM的储备溶液。

 

2.准备2X蛋白酶体底物(20至50μM)测定溶液,如下所示:

25至50 ul 底物储备液(10 mM)

100 ul DTT(1M)

400 ul EDTA(100 mM)

10mL Hepes Buffer(25mM),pH = 7.4

 

3.用2X荧光蛋白酶体底物测定溶液(来自步骤1)混合等体积的质体标准物或样品,并在室温下孵育溶液至少1小时。

 

4.监测荧光使用荧光酶标仪。

 

参考文献

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017): 400–406

Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
Journal: Molecular & Cellular Proteomics (2016): 1962–1981

Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 923–935

Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
Authors: Stefanie Grimm, Christiane Ott, Melanie Hörlacher, Daniela Weber, Annika Höhn, Tilman Grune
Journal: Biochemical Journal (2012): 127–139

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-KQL)2R110-AAT Bioquest荧光染料

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蛋白酶体20S荧光底物(Ac-KQL)2R110价格 1386
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1 mg

产品货号

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-KQL)2R110

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1153.33 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:蛋白酶体20S荧光底物(Ac-KQL)2R110

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1153.33

溶剂:DMSO

激发波长(nm):498

发射波长(nm):520

 

产品介绍

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-KQL)2R110是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,非荧光性R110底物产生明亮的绿色荧光R110产物(Ex/Em = 494/521 nm),很容易被带有FITC滤光器所检测。一般来说,R110底物比AMC-, AFC- or 4-硝基苯胺的底物更敏感。R110底物用来检测蛋白酶体中蛋白酶的活性。蛋白酶体通用的形式就是26s蛋白酶体,它包含一个20S的核心结构颗粒和两个19S调节调节基团。所有20S的核心结构颗粒包含四对七聚物环状结构组成两种不同的亚基,alpha亚基是结构亚基,beta亚基主要是催化亚基。在两个环状结构外每个含有七个alpha亚基主要是为了调整颗粒的停靠。Alpha亚基N端结构是可以阻挡未调节底物进入内腔的门户。内腔两个环分别包含七个beta亚基包含酶位点来执行蛋白水解反应。AAT Bioquest提供一系列R110底物用于检测蛋白酶体中不同底物的蛋白酶活性,i.e., (i) sub-sites: _1c, Z-LLE-R110; _2c, Ac-KQL-R110; _5c, Ac-WLA-R110; _1i, Ac-PAL-R110; _2i, Ac-KQL-R110; _5c, Ac-WLA-R110和Suc-LLVY-R110;和_5i, Ac-ANW-R110。蛋白酶的活性能通过R110释放而测定(Ex/Em = 490/520 nm)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物(Ac-KQL)2R110。 

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参考文献

Cytotoxic unsaturated electrophilic compounds commonly target the ubiquitin proteasome system
Authors: Karthik Selvaraju, Arjan Mofers, Paola Pellegrini, Johannes Salomonsson, Alexandra Ahlner, Vivian Morad, Ellin-Kristina Hillert, Belen Espinosa, Elias SJ Arnér, Lasse Jensen
Journal: Scientific Reports (2019): 9841

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017): 400–406

Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
Journal: Molecular & Cellular Proteomics (2016): 1962–1981

Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 923–935

Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
Authors: Stefanie Grimm, Christiane Ott, Melanie Hörlacher, Daniela Weber, Annika Höhn, Tilman Grune
Journal: Biochemical Journal (2012): 127–139

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-PAL)2R110-AAT Bioquest荧光染料

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蛋白酶体20S荧光底物(Ac-PAL)2R110价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-PAL)2R110

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 977.11 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:蛋白酶体20S荧光底物(Ac-PAL)2R110

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:977.11

溶剂:DMSO

激发波长(nm):498

发射波长(nm):520

 

产品介绍

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-PAL)2R110是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,非荧光性R110底物产生明亮的绿色荧光R110产物(Ex/Em = 494/521 nm),很容易被带有FITC滤光器所检测。一般来说,R110底物比AMC-, AFC- or 4-硝基苯胺的底物更敏感。R110底物用来检测蛋白酶体中蛋白酶的活性。蛋白酶体通用的形式就是26s蛋白酶体,它包含一个20S的核心结构颗粒和两个19S调节调节基团。所有20S的核心结构颗粒包含四对七聚物环状结构组成两种不同的亚基,alpha亚基是结构亚基,beta亚基主要是催化亚基。在两个环状结构外每个含有七个alpha亚基主要是为了调整颗粒的停靠。Alpha亚基N端结构是可以阻挡未调节底物进入内腔的门户。内腔两个环分别包含七个beta亚基包含酶位点来执行蛋白水解反应。AAT Bioquest提供一系列R110底物用于检测蛋白酶体中不同底物的蛋白酶活性,i.e., (i) sub-sites: _1c, Z-LLE-R110; _2c, Ac-KQL-R110; _5c, Ac-WLA-R110; _1i, Ac-PAL-R110; _2i, Ac-KQL-R110; _5c, Ac-WLA-R110和Suc-LLVY-R110;和_5i, Ac-ANW-R110。蛋白酶的活性能通过R110释放而测定(Ex/Em = 490/520 nm)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物(Ac-PAL)2R110。 

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参考文献

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017): 400–406

Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
Journal: Molecular & Cellular Proteomics (2016): 1962–1981

Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 923–935

Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
Authors: Stefanie Grimm, Christiane Ott, Melanie Hörlacher, Daniela Weber, Annika Höhn, Tilman Grune
Journal: Biochemical Journal (2012): 127–139

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-WLA)2R110-AAT Bioquest荧光染料

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蛋白酶体20S荧光底物(Ac-WLA)2R110价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-WLA)2R110

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1155.30 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:蛋白酶体20S荧光底物(Ac-WLA)2R110

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1155.30

溶剂:DMSO

激发波长(nm):498

发射波长(nm):520

 

产品介绍

蛋白酶体20S荧光底物(Ac-WLA)2R110是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,非荧光性R110底物产生明亮的绿色荧光R110产物(Ex/Em = 494/521 nm),很容易被带有FITC滤光器所检测。一般来说,R110底物比AMC-, AFC- or 4-硝基苯胺的底物更敏感。R110底物用来检测蛋白酶体中蛋白酶的活性。蛋白酶体通用的形式就是26s蛋白酶体,它包含一个20S的核心结构颗粒和两个19S调节调节基团。所有20S的核心结构颗粒包含四对七聚物环状结构组成两种不同的亚基,alpha亚基是结构亚基,beta亚基主要是催化亚基。在两个环状结构外每个含有七个alpha亚基主要是为了调整颗粒的停靠。Alpha亚基N端结构是可以阻挡未调节底物进入内腔的门户。内腔两个环分别包含七个beta亚基包含酶位点来执行蛋白水解反应。AAT Bioquest提供一系列R110底物用于检测蛋白酶体中不同底物的蛋白酶活性,i.e., (i) sub-sites: _1c, Z-LLE-R110; _2c, Ac-KQL-R110; _5c, Ac-WLA-R110; _1i, Ac-PAL-R110; _2i, Ac-KQL-R110; _5c, Ac-WLA-R110和Suc-LLVY-R110;和_5i, Ac-ANW-R110。蛋白酶的活性能通过R110释放而测定(Ex/Em = 490/520 nm)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶体20S荧光底物(Ac-WLA)2R110。 

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参考文献

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017): 400–406

Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
Journal: Molecular & Cellular Proteomics (2016): 1962–1981

Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 923–935

Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
Authors: Stefanie Grimm, Christiane Ott, Melanie Hörlacher, Daniela Weber, Annika Höhn, Tilman Grune
Journal: Biochemical Journal (2012): 127–139

蛋白酶荧光底物Ac-Pro-Ala-Leu-AMC-AAT Bioquest荧光染料

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蛋白酶荧光底物Ac-Pro-Ala-Leu-AMC价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

蛋白酶荧光底物Ac-Pro-Ala-Leu-AMC

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 498.57 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:蛋白酶荧光底物Ac-Pro-Ala-Leu-AMC

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:498.57

溶剂:DMSO

激发波长(nm):351

发射波长(nm):430

 

产品介绍

蛋白酶荧光底物Ac-Pro-Ala-Leu-AMC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,弱荧光AMC基板产生亮蓝色荧光AMC产品,其具有Ex / Em = 351 / 430nm,并且可以使用DAPI滤光器组容易地检测。该AMC底物用于监测蛋白酶体的蛋白酶活性。常见的蛋白酶体形式称为26S蛋白酶体,其含有一个20S核心颗粒结构和两个19S调节帽。所有20S颗粒由四个堆叠的七聚环结构组成,它们本身由两种不同类型的亚基组成; α亚基本质上是结构性的,而β亚基主要是催化性的。堆叠中的外部两个环由每个七个α亚基组成,其用作调节颗粒的对接域,并且α亚基N末端形成阻止底物未受调节进入内腔的门。内部两个环各自由7个β亚基组成,并含有进行蛋白水解反应的蛋白酶活性位点。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的蛋白酶荧光底物Ac-Pro-Ala-Leu-AMC。 

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参考文献

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
Authors: Wenjuan Zhou, Lingling Wei, Ting Xiao, Chunyou Lai, Min Peng, Lingli Xu, Xiangwei Luo, Shaoping Deng, Fengxue Zhang
Journal: Biochemical and Biophysical Research Communications (2017): 400–406

Delineation of molecular pathways involved in cardiomyopathies caused by troponin T mutations
Authors: Jennifer E Gilda, Xianyin Lai, Frank A Witzmann, Aldrin V Gomes
Journal: Molecular & Cellular Proteomics (2016): 1962–1981

Diclofenac induces proteasome and mitochondrial dysfunction in murine cardiomyocytes and hearts
Authors: Rajeshwary Ghosh, Sumanta K Goswami, Luis Felipe BB Feitoza, Bruce Hammock, Aldrin V Gomes
Journal: International Journal of Cardiology (2016): 923–935

Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
Authors: Stefanie Grimm, Christiane Ott, Melanie Hörlacher, Daniela Weber, Annika Höhn, Tilman Grune
Journal: Biochemical Journal (2012): 127–139

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿 CAS 201608-14-2-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿 CAS 201608-14-2价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿  CAS 201608-14-2

产品参数
Ex (nm) 376 Em (nm) 482
分子量 729.61 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿。 

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实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 uL基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Regulation of glioblastoma cell proliferation in dependence of cell density and growth factors in vitro
Authors: Yun Liu
Journal: (2019)

SOX9 in the development and chemotherapy of cholangiocarcinoma (CCA)
Authors: Xiaodong Yuan
Journal: (2018)

Structure-dependent induction of apoptosis by hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids in the human hepatoma cell line HepaRG: Single versus repeated exposure
Authors: Julia Waizenegger, Albert Braeuning, Markus Templin, Alfonso Lampen, Stefanie Hessel-Pras
Journal: Food and Chemical Toxicology (2018)

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

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胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AMC 蓝 CAS 169332-61-0-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AMC 蓝 CAS 169332-61-0价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AMC 蓝 CAS 169332-61-0

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 675.64 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物Ac-DEVD-AFC 绿。 

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实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 uL基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO CAS 169332-60-9-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO CAS 169332-60-9价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO  CAS 169332-60-9

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 502.47 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Caspase 3/7抑制剂 Ac-DEVD-CHO。 

实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Ferrous-Supply-Regeneration Nanoengineering for Cancer Cell Specific Ferroptosis in Combination with Imaging-Guided Photodynamic Therapy
Authors: Tao Liu, Wenlong Liu, Mingkang Zhang, Wuyang Yu, Fan Gao, Chuxin Li, Shi-Bo Wang, Jun Feng, Xian-Zheng Zhang
Journal: ACS nano (2018)

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA CAS 189950-66-1-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA CAS 189950-66-1价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA  CAS 189950-66-1

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 638.58 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Caspase 3/7显色底物 Ac-DEVD-pNA。 

实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Human high temperature requirement serine protease A1 (HTRA1) degrades tau protein aggregates
Authors: Annette Tennstaedt, Simon Pöpsel, Linda Truebestein, Patrick Hauske, Anke Brockmann, Nina Schmidt, Inga Irle, Barbara Sacca, Christof M Niemeyer, Roland Brandt
Journal: Journal of Biological Chemistry (2012): 20931–20941

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿 CAS 211990-57-7-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿 CAS 211990-57-7价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿  CAS 211990-57-7

产品参数
Ex (nm) 376 Em (nm) 482
分子量 729.65 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,Ac-IETD-AFC是含有乙酰基(Ac)部分的荧光半胱天冬酶-8 /颗粒酶B底物。 该底物被半胱天冬酶8水解,产生高度荧光的7-酰氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AFC 绿。

点击查看光谱

实验方案

操作方法

以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AMC 蓝-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AMC 蓝价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AMC 蓝

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 675.68 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AMC 蓝是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Caspase 8荧光底物Ac-IETD-AMC。

点击查看光谱 

实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase 8抑制剂Ac-IETD-CHO CAS 191338-86-0-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
胱天蛋白酶Caspase 8抑制剂Ac-IETD-CHO CAS 191338-86-0价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 8抑制剂Ac-IETD-CHO CAS 191338-86-0

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 502.52 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

半胱氨酸蛋白酶在细胞凋亡或程序性细胞死亡中是必需的,在发育和成年生活的大多数其他阶段,并且因其在细胞中的作用而被称为“刽子手”蛋白质。免疫系统中也需要一些半胱天冬酶用于淋巴细胞的成熟。细胞凋亡失败是肿瘤发展和自身免疫疾病的主要原因之一。半胱天冬酶也参与缺血和阿尔茨海默病。凋亡caspase有两种类型:引发剂和效应剂。 启动子半胱天冬酶(例如,CASP2,CASP8,CASP9和CASP10)切割效应半胱天冬酶的无活性前体形式,从而它们。效应子半胱天冬酶(例如,CASP3,CASP6,CASP7)依次切割细胞内的其他蛋白质底物,以触发细胞凋亡过程。该级联反应的起始受半胱天冬酶抑制剂的调节。

AAT Bioquest提供一组蓝色,绿色和红色荧光底物,用于监测caspase活性。AMC-,AFC-,R110-和ProRed – 衍生的蛋白酶底物是无色和非荧光的。通过半胱天冬酶切割阻断蛋白酶可切割的肽残基分别产生强烈的蓝色,绿色或红色荧光,其可以通过荧光仪器监测。我们专有的ProRed 衍生的半胱氨酸蛋白酶底物是用于荧光检测各种半胱天冬酶活性的敏感的红色指示剂。通常,R110和ProRed 底物比基于AMC-,AFC-或4-硝基苯胺的底物灵敏得多。

实验方案

操作方法

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

相关产品

产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿 Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝 CAS 292633-16-0-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝 CAS 292633-16-0价格 2111
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝  CAS 292633-16-0

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 711.72 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,Caspase 9是半胱氨酸蛋白酶家族中CED-3亚家族成员,在凋亡起始阶段占有必要地位。这些酶主要具有特异的保守性区域,并特异的切开识别位点后面的天冬氨酸残基。起始凋亡蛋白酶(例如caspases-8)效应蛋白酶,例如caspase-3或者-7。这些效应蛋白酶然后酶切细胞底物导致凋亡的形态学改变。AC-LHED-AMC是caspase-9选择性荧光底物。Caspase-9酶切水解特异性底物AC-LHED-AMC,导致释放AMC荧光集团,其激发波长是365nm,发射光波长为450nm。这个实验的准备试验缓冲液包含50nM MES,pH6.5,10%PEG8000, 0.1% CHAPS, 5 mM DTT, and 1 mM EDTA.。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝。

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实验方案

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 uL基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Structure-dependent induction of apoptosis by hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids in the human hepatoma cell line HepaRG: Single versus repeated exposure
Authors: Julia Waizenegger, Albert Braeuning, Markus Templin, Alfonso Lampen, Stefanie Hessel-Pras
Journal: Food and Chemical Toxicology (2018)

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1403.41 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Ac-LEHD)2-R110是Caspase 9的荧光底物。因为高纯的罗丹明110(R110)衍生底物被置于内酯的构型内,因此是无色的,也不发出荧光。在Caspase蛋白酶(天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶)的作用下,切割R110上的多肽而获得具有强烈荧光的R110产物,该产物可在480nm(常见的荧光检测仪上都具有这种激发光源)处被激发后,在510nm-530 nm处用荧光法检测。R110衍生的Caspase底物可能是被广泛用于检测多种Caspase酶活性的底物中灵敏的荧光底物。我们的R110衍生底物是高纯度的,并保证经HPLC检测不出R110,因这些残留的R11可能会产生显著的本底干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿。

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实验方案

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1331.34 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Z-DEVD)2-R110是Caspase 9的荧光底物。因为高纯的罗丹明110(R110)衍生底物被置于内酯的构型内,因此是无色的,也不发出荧光。在Caspase蛋白酶(天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶)的作用下,切割R110上的多肽而获得具有强烈荧光的R110产物,该产物可在480nm(常见的荧光检测仪上都具有这种激发光源)处被激发后,在510nm-530 nm处用荧光法检测。R110衍生的Caspase底物可能是被广泛用于检测多种Caspase酶活性的底物中灵敏的荧光底物。我们的R110衍生底物是高纯度的,并保证经HPLC检测不出R110,因这些残留的R11可能会产生显著的本底干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 8荧光底物(Ac-IETD)2-R110 绿。

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实验方案

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
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