如何收集唾液：动物的唾液收集方法和装置

唾液中的生物标志物越来越多地被用来监测动物的健康和福祉（例如，唾液皮质醇和狗的压力），这项技术不断为研究人员提供在许多生物行为研究中获得有效、一致和可重复结论的机会。第一批技术，如棉绳、棉签、垫、唾液腺、水解纤维素海绵和其他装置，已用于收集鹿、豚鼠、狗、马、灵长类动物和其他动物物种的唾液 (29-36)。然而，最新的唾液收集设备技术和收集方案显着减轻了与以前的收集方法相关的负担。

Salimetrics 推荐 SalivaBio 的婴儿和儿童拭子设备作为从口腔直径 8 毫米及以上的动物采集唾液的有效方法，以提供舒适、安全的唾液采集。

SalivaBio 拭子用于动物唾液采集的优点：

• 舒适、无毒的收藏

• 抗撕裂

• 快速、毛细管作用收集

• 1-2mL容量（取决于设备）

• 无窒息危险（由技术人员安全握住时）

成功采集动物唾液的技巧：

• 用棉签“轻拍”唾液聚集的区域，而不是试图擦拭唾液

• 缓慢引入拭子，在采集前训练动物

• 对于某些研究，拭子已用简单的溶液调味以协助样本收集（建议进行试点研究）

• 使用“延伸范围”设备（杆、棍等）通常用于收集非驯养动物的唾液

小动物：科学文献包含对小鼠和大鼠唾液采集技术的各种描述，例如毛细管、滤纸条、塑料移液器和更复杂的抽吸装置。然而，Salimetrics & SalivaBio 没有此类方法的直接经验，因此无法就其使用提供建议。

动物源性研究试剂有哪些

据英国某动物协会称，每年有超过 1 亿只活体动物被用于科学研究程序，其中大部分是老鼠、鱼类和鸟类。尽管与全球为获取食物而宰杀的大量动物（包括 500 亿只鸡和 14 亿头猪）相比，这一数字微乎其微，但减少用于研究的动物数量的动力依然强劲。除了在活体动物上进行实验外，动物源性材料 (ADM) 还用于维持体外培养的细胞。

ADM 提供细胞生长和维持以及在某些情况下进行检测所需的重要因子。广泛使用的 ADM 包括：

明胶——由动物骨骼、软骨和皮肤中的胶原蛋白部分水解而产生。所使用的明胶几乎一半是猪源明胶。明胶广泛用于食品和研究。明胶在培养皿表面提供涂层，用于细胞的 2D 培养。它还可以提供 3D 支持。

胶原蛋白 – 这是细胞外基质的主要成分，占人体所有蛋白质的 25-35%。胶原蛋白有五种类型，可以从多种来源中提取，包括用于研究的鼠尾和牛皮。胶原蛋白也可以从培养细胞中纯化，但这往往更昂贵。胶原蛋白用于 2D 培养皿的涂层，也用于生成 3D 培养的 3D 矩阵。

血清——血清是从各种动物中采集的，包括马，更常见的是牛。血清很有用，因为它含有多种激素、生长因子和其他蛋白质，这些蛋白质对于许多（但不是全部）细胞类型的培养至关重要。需要血清进行培养的细胞被称为血清依赖性细胞。常用的血清是胎牛血清（FBS），有时也称为胎牛血清（FCS）。胎牛血清是通过穿刺从屠宰场的奶牛身上提取的未出生胎儿的跳动心脏来收集的。据估计，每年从超过 2 亿个犊牛胎儿中采集血清。产品变异和病原体污染仍然是使用胎牛血清的一个危险。新西兰产的胎牛血清特别昂贵，因为该国在 20 世纪 90 年代阻止了 BSE（疯牛病）。与其他原产地的胎牛血清相比，新西兰原产的胎牛血清价值较高，这导致了包括伪造原产地认证在内的欺诈行为。

Matrigel™ – 这是通过在小鼠体内产生 Engelbreth-Holm-Swarm 肉瘤，然后处理这些肉瘤以生成富含细胞外基质成分的透明水凝胶来制造的。与研究中使用的许多动物源成分不同，Matrigel（也以 Geltrex™ 名义销售）可能被视为特别有问题，因为它不是食品生产的副产品。尽管基质胶广泛用于培养，但其批次间和批次内的差异显着，这会影响性能并使实验解释复杂化。  

酶 – 细胞培养中使用的许多酶都是从动物中纯化的。例如，超氧化物歧化酶（SOD）是一组 催化超氧自由基歧化的酶，经济地从牛红细胞中生产。

石蕊阿米巴细胞裂解物 (LAL) – 从鲎采集的血液成分。当存在内毒素（细菌的有毒产物）时，鲎试剂会凝结。因此，鲎试剂提供了一种简单的检测方法来筛查受内毒素污染的产品。据估计，每年对各种药用产品进行 7000 万次内毒素检测，市场价值 10 亿美元。

小动物的机械通气策略

许多临床前或基础研究需要对小型实验动物进行长期机械通气，如果没有合适的呼吸机，这可能具有挑战性。 CWE有一个解决方案，我们的SAR-1000高级小动物呼吸机。

虽然正压通气的原理很简单，但通常证明很难在不引起呼吸机引起的肺损伤（VILI）和伴随的生理状态退化的情况下维持小动物（尤其是小鼠）超过几个小时。此处的评论提供了一些指南，以在长时间使用呼吸机期间成功保持动物健康。这些建议主要针对小鼠，但适用于所有小型实验室哺乳动物。

CWE的SAR-1000小动物呼吸机专门设计用于在长期和短期手术中安全有效地支持小鼠和其他小动物，使用最近研究中指出的两个关键策略1.

1. 低潮气量（VT）定期呼吸或肺复张动作（RM）的通气。
2. 呼气末正压 （PEEP）。

下面详细介绍了这两种重要技术。

低电压T 通气涉及使用 VT 在8毫升/千克左右，而不是常用的10-12毫升/千克。这本身会导致通气不足导致的最终呼吸衰竭，但当辅以周期性叹息或 RM 时，可以避免肺不张并发生肺泡复张。该方案保持良好的气体交换，不会促进伤害。来自文献1,2，最佳RM频率约为12小时-1，或每五分钟一次，在 P爪子 （气道峰值压力）为 30cmH2O.

第二个关键是使用PEEP。结合上述策略，PEEP 约为 6cmH2O证明是维持下叶通畅和避免局部肺不张的选择1,3. 下面链接了如何将 PEEP 与 SAR-1000 呼吸机配合使用的图表。

评论：30厘米高2O RM 压力不是一个任意值，对于鼠标来说可能看起来很高。这已被实验确定可以增加肺顺应性，并且被认为可以重新打开塌陷的肺泡，或者可能招募具有临界开放经呼吸压的二次肺泡群体。 无论如何，较低的P爪子 压力在保持良好的血气同时避免VILI方面几乎不那么有效。

综上所述，低V的策略T 通气、定期大容量 RM 呼吸和 PEEP 应有助于在通气期间保持小动物的健康。应适当设置呼吸频率 （RR） 以提供正常的分钟通气量 （MV），同时考虑到降低的 VT 加上周期性高 VT RM呼吸。这个故事还有很多，包括炎症或病理变化对肺力学的作用等。虽然正压通气本质上是一种不自然的操作，但通过研究自主呼吸动物的模式可以学到很多东西。例如，上面讨论的五分钟RM间隔可以随机化，以更好地模仿自然模式并产生更好的结果。2.

CWE Inc. 的 SAR-1000 呼吸机通过其内置的自动 SIGH 功能和简单的 PEEP 连接，以及 SAR-Comm 软件中包含的远程控制和其他功能，支持上述通气策略。 SAR-1000可让您安全轻松地延长手术时间，以产生更好的结果和更健康的结果。