mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯

产品参数

Ex (nm)	412	Em (nm)	505
分子量	770.83	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的最佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺表现出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：当使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺如Tris和甘氨酸和硫醇化合物的缓冲液。在进行染料结合之前，还必须除去广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，对于特定的标记反应，可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯。

点击查看光谱

点击查看实验方案

实验方案

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

将100μL反应缓冲液（如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液，pH~9.0）与900μL目标蛋白溶液（如抗体，蛋白质浓度> 2 mg / ml）混合至100μL，以得到1 mL蛋白质标记原液。

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2：蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）。

注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得极佳标记结果。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

注意：在开始缀合前准备染料储备溶液（溶液B），及时使用。染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。溶液B可在冰箱中保存两周，避光保存。避免冻融循环。

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定最佳染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10：1摩尔比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）作为起始点：将5μl染料储备溶液（溶液B，假设染料储备溶液为10 mM）加入到样品瓶中。蛋白质溶液（95μl溶液A）有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD，蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

相关产品

产品名称	货号
荧光标记染料 mFluor Violet 510 酸	Cat#1141
mFluor Violet 450琥珀酰亚胺酯	Cat#1150
mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯	Cat#1152
mFluor Violet 500琥珀酰亚胺酯	Cat#1149

链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记

产品参数

Ex (nm)	553	Em (nm)	565
分子量	~52000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

产品基本信息

产品名称：链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：505

发射波长(nm)：564

产品介绍

链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该mFluor Blue 570-链霉亲和素偶联物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白）和共价连接的mFluor Blue 570（作为荧光标记）。当与生物素化的一抗结合使用时，通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。对于使用配备了488 nm激发的流式细胞仪（例如，Blue Laser）进行基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试，它是非常有价值的工具。多种互补的生物素化试剂可从许多商业供应商处获得。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记。

点击查看光谱

参考文献

Overexpression of MACC1 and the association with hepatocyte growth factor/c-Met in epithelial ovarian cancer
Authors: Hongyu Li, Hui Zhang, Shujun Zhao, Yun Shi, Junge Yao, Yanyan Zhang, Huanhuan Guo, Xingsuo Liu
Journal: Oncology letters (2015): 1989–1996

相关产品

产品名称	货号
链霉亲和素 HRP-标记	Cat#16920
链霉亲和素偶联物 iFluor 647-标记	Cat#16966
链霉亲和素偶联物 trFluor Eu-标记	Cat#16925

mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯

产品参数

Ex (nm)	402	Em (nm)	535
分子量	1535.88	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

点击查看光谱

点击查看实验方案

实验方案

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

参考文献

相关产品

产品名称	货号
mFluor Violet 540 酸	Cat#1142
mFluor Violet 450琥珀酰亚胺酯	Cat#1150
mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯	Cat#1151

链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记

产品参数

Ex (nm)	525	Em (nm)	623
分子量	~52000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

产品基本信息

产品名称：链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：552

发射波长(nm)：621

产品介绍

链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该mFluor Green 620-链霉亲和素偶联物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白）和共价连接的mFluor Green 620（作为荧光标记）。当与生物素化的一抗结合使用时，通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。对于使用配有532 nm激发光的流式细胞仪（例如Green Laser）进行基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试，它是非常有价值的工具。多种互补的生物素化试剂可从许多商业供应商处获得。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记。

点击查看光谱

参考文献

相关产品

产品名称	货号
链霉亲和素 HRP-标记	Cat#16920
链霉亲和素偶联物 iFluor 647-标记	Cat#16966
链霉亲和素偶联物 trFluor Eu-标记	Cat#16925

mFluor Blue 570琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
mFluor Blue 570琥珀酰亚胺酯价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

mFluor Blue 570琥珀酰亚胺酯

产品参数

Ex (nm)	553	Em (nm)	565
分子量	1834.25	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

mFluor Blue 570琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

点击查看光谱

点击查看实验方案

实验方案

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

参考文献

相关产品

产品名称	货号
mFluor Blue 570 酸	Cat#1143

链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记

产品参数

Ex (nm)	570	Em (nm)	632
分子量	~52000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

产品基本信息

产品名称：链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：609

发射波长(nm)：626

产品介绍

链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该mFluor Yellow 630-链霉亲和素偶联物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白），共价连接了mFluor Yellow 610（作为荧光标记）。当与生物素化的一抗结合使用时，通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。对于使用配有561 nm激发光的流式细胞仪（例如，紫激光）进行基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试，它是非常有价值的工具。多种互补的生物素化试剂可从许多商业供应商处获得。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记。

点击查看光谱

参考文献

相关产品

产品名称	货号
链霉亲和素 HRP-标记	Cat#16920
链霉亲和素偶联物 iFluor 647-标记	Cat#16966
链霉亲和素偶联物 trFluor Eu-标记	Cat#16925

mFluor Green 620琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
mFluor Green 620琥珀酰亚胺酯价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

mFluor Green 620琥珀酰亚胺酯

产品参数

Ex (nm)	525	Em (nm)	623
分子量	883.98	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

mFluor Green 620琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

点击查看光谱

点击查看实验方案

实验方案

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

参考文献

相关产品

产品名称	货号
mFluor Green 620 酸	Cat#1144

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记

产品参数

Ex (nm)	680	Em (nm)	695
分子量	~52000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

产品基本信息

产品名称：链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：685

发射波长(nm)：701

产品介绍

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该mFluor Red 700-链霉亲和素偶联物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白），并共价连接了mFluor Red 700（作为荧光标记）。当与生物素化的一抗结合使用时，通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。对于使用配备有633 nm激发光的流式细胞仪（例如Red Laser）进行基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试，它是非常有价值的工具。多种互补的生物素化试剂可从许多商业供应商处获得。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记。

点击查看光谱

参考文献

相关产品

产品名称	货号
链霉亲和素 HRP-标记	Cat#16920
链霉亲和素偶联物 iFluor 647-标记	Cat#16966
链霉亲和素偶联物 trFluor Eu-标记	Cat#16925

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯

产品参数

Ex (nm)	629	Em (nm)	767
分子量	1328.65	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor 染料是一系列优秀的荧光标记染料，可以覆盖整个可见光谱。所有mFluor 染料都具有出色的水溶性和大的斯托克斯移位。它们的亲水性使有机溶剂的使用最小化。mFluor 染料主要用于标记多色流式细胞仪应用的抗体。

琥珀酰亚胺基（NHS）酯被证明是用于胺修饰的最佳试剂，因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时，需要考虑的因素很少：1）溶剂：在大多数情况下，活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）中。 2）反应pH：胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应，包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此，胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3）反应缓冲液：当使用胺反应试剂时，必须避免使用含有游离胺如Tris和甘氨酸和硫醇化合物的缓冲液。在进行染料结合之前，还必须除去广泛用于蛋白质沉淀的铵盐（例如硫酸铵和乙酸铵）（例如通过透析）。 4）反应温度：大多数缀合在室温下进行。然而，对于特定的标记反应，可能需要升高或降低的温度。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供最优质的mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯。

点击查看光谱

点击查看实验方案

实验方案

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得极佳标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

3.确定最佳染料/蛋白质比例（可选）：

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定最佳的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的最佳摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

参考文献

相关产品

产品名称	货号
mFluor Red 700琥珀酰亚胺酯	Cat#1190
mFluor Red 780 胺	Cat#1210
mFluor Red 780 酸	Cat#1147

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记

产品参数

Ex (nm)	629	Em (nm)	767
分子量	~52000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

产品基本信息

产品名称：链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

产品物理化学光谱特性

分子量：N/A

溶剂：水

激发波长(nm)：N/A

发射波长(nm)：N/A

产品介绍

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记是美国AAT Bioquest生产的链霉亲和素，链霉亲和素缀合物与生物素缀合物一起广泛用于特异性检测多种蛋白质，蛋白质基序，核酸和其他分子，因为链霉亲和素对生物素具有非常高的结合亲和力。该mFluor Red 780-链霉亲和素偶联物包含链霉亲和素（作为生物素结合蛋白），共价连接了mFluor Red 780（作为荧光标记）。当与生物素化的一抗结合使用时，通常用作间接免疫荧光染色的第二步试剂。对于使用配备有633 nm激发光的流式细胞仪（例如Red Laser）进行基于生物素-链霉亲和素的生物学测定和测试，它是非常有价值的工具。多种互补的生物素化试剂可从许多商业供应商处获得。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记。

参考文献

相关产品

产品名称	货号
链霉亲和素 HRP-标记	Cat#16920
链霉亲和素偶联物 iFluor 647-标记	Cat#16966
链霉亲和素偶联物 trFluor Eu-标记	Cat#16925

mFluor Red 780 胺-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月7日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
mFluor Red 780 胺价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

mFluor Red 780 胺

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	1167.23	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

mFluor Red 780 胺是美国AAT Bioquest生产的荧光标记染料，mFluor Red 780染料是APC-AlexaFluor®750双色膜的替代品，因为它们的光谱特性与APC-AlexaFluor®750缀合物相同。 mFluor Red 780染料是水溶性的，用mFluor Red 780染料制备的蛋白质缀合物在633 nm处被激发，产生红色荧光（与Cy7®滤光片兼容）。 mFluor Red 780染料和缀合物是用于流式细胞术研究的优秀红色荧光试剂。相较于APC-AlexaFluor®750 tandems，mFluor Red 780染料具有更高的光稳定性，使其易于用于荧光成像应用，mFluor Red 780胺具有羰基反应性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的mFluor Red 780 胺。

实验方案

操作方法

注意：该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与mFluor 450 SE的缀合物开发的。您需根据您的实际情况而定。

1.准备蛋白质储备溶液（溶液A）：

注1：蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0，则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注3：不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白（BSA）抗体或明胶不会被很好的标记，叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞，以获得标记结果。

注4：如果蛋白质浓度低于2 mg / mL，则结合效率会显著降低。为获得标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液（溶液B）：

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

3.确定染料/蛋白质比例（可选）：

注意：每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例，这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能影响其结合亲和力，而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常，对于大多数染料 – 蛋白质缀合物，推荐使用4-6种染料/蛋白质。

注意：蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10％。

3.2运行缀合反应（参见下面的步骤4）。

3.3重复＃3.2，溶液B /溶液A的摩尔比为5：1;分别为15：1和20：1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比（DOS）。

3.6检测上述4种结合物，确定的染料/蛋白质比例，以扩大标记反应。

4.运行结合反应：

4.1有效加入适量的染料储备溶液（溶液B）到蛋白质溶液（溶液A）的小瓶中晃动。

注意：溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3，我们建议使用10：1溶液B（染料）/溶液A（蛋白质）的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照说明书准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物（直接从步骤4）加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS（pH 7.2-7.4）。

5.4向所需样品中加入更多PBS（pH 7.2-7.4）以完成色谱柱纯化。

注1：立即使用时，染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释，并等分多次使用。

注2：对于长期储存，染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

参考文献

相关产品

产品名称	货号
mFluor Red 780 酸	Cat#1147
mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯	Cat#1191

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月29日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK价格 1386
产品规格

25 Tests

产品货号

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK

产品参数

Ex (nm)	406	Em (nm)	445
分子量	555.94	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂，FAM- VAD具有蓝色荧光细胞渗透性抑制靶向胱天蛋白酶1 ，2，3 ，6，8 ，9或10 。一旦进入细胞，所述抑制剂共价结合胱天蛋白酶，产生绿色荧光。当加入到细胞群体中， FAM- VAD -FMK探针进入每个细胞与共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的VAD-FMK，从而抑制酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内，而任何未结合的试剂将扩散出细胞，并冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 – 孔板的基于荧光，荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。该探头具有光谱性质类似于Pacific Blue®和BD Horizon V450 ，Pacific Blue这样的过滤器®和BD Horizon V450可以方便的用流式细胞仪或显微镜使用。该探头是特别设计用于多色检测半胱氨酸蛋白酶与紫激光装备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK。

点击查看光谱

实验方案

样品操作及分析

以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

参考文献

Suppression of human T cell proliferation by the caspase inhibitors, z-VAD-FMK and z-IETD-FMK is independent of their caspase inhibition properties
Authors: Lawrence CP, Chow SC.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol. (2012)

[Inhibition of elicitation of allergic contact dermatitis by topical use of Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment in mice]
Authors: Li YY, Yan CL.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2012): 1992

Intracochlear perfusion of leupeptin and z-VAD-FMK: influence of antiapoptotic agents on gunshot-induced hearing loss
Authors: Abaamrane L, Raffin F, Schmerber S, Sendowski I.
Journal: Eur Arch Otorhinolaryngol (2011): 987

Plasmodium falciparum metacaspase PfMCA-1 triggers a z-VAD-fmk inhibitable protease to promote cell death
Authors: Meslin B, Beavogui AH, Fasel N, Picot S.
Journal: PLoS One (2011): e23867

Structure of human caspase-6 in complex with Z-VAD-FMK: New peptide binding mode observed for the non-canonical caspase conformation
Authors: Muller I, Lamers MB, Ritchie AJ, Dominguez C, Munoz-Sanjuan I, Kiselyov A.
Journal: Bioorg Med Chem Lett (2011): 5244

Pretreatment with pancaspase inhibitor (Z-VAD-FMK) delays but does not prevent intraperitoneal heat-killed group B Streptococcus-induced preterm delivery in a pregnant mouse model
Authors: Equils O, Moffatt-Blue C, Ishikawa TO, Simmons CF, Ilievski V, Hirsch E.
Journal: Infect Dis Obstet Gynecol (2009): 749432

[Attenuation of allergic contact dermatitis by Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment with mice]
Authors: Li YY, Yan CL, Xu W.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2008): 3153

Bodipy-VAD-Fmk, a useful tool to study yeast peptide N-glycanase activity
Authors: Witte MD, Descals CV, de Lavoir SV, Florea BI, van der Marel GA, Overkleeft HS.
Journal: Org Biomol Chem (2007): 3690

Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
Authors: Heng BC, Clement MV, Cao T.
Journal: Biosci Rep (2007): 257

Effects of caspase inhibitors (z-VAD-fmk, z-VDVAD-fmk) on Nile Red fluorescence pattern in 7-ketocholesterol-treated cells: investigation by flow cytometry and spectral imaging microscopy
Authors: Vejux A, Lizard G, Tourneur Y, Riedinger JM, Frouin F, Kahn E.
Journal: Cytometry A (2007): 550

相关产品

产品名称	货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿	Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK	Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿	Cat#13430

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月29日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK价格 1386
产品规格

25 Tests

产品货号

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK

产品参数

Ex (nm)	412	Em (nm)	505
分子量	708.19	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK是美国AAT Bioquest生产的用于Caspase的试剂，FAM- VAD具有绿色荧光细胞渗透性抑制靶向胱天蛋白酶1 ，2，3 ，6，8 ，9或10 。一旦进入细胞，所述抑制剂共价结合胱天蛋白酶，产生绿色荧光。当加入到细胞群体中， FAM- VAD -FMK探针进入每个细胞与共价结合到驻留在胱天蛋白酶活性的异二聚体的VAD-FMK，从而抑制酶活性的反应性半胱氨酸残基。结合的标记试剂被保留在细胞内，而任何未结合的试剂将扩散出细胞，并冲走。绿色荧光信号的直接测量活性胱天蛋白酶的存在于细胞中的试剂加入的时间量。含有结合的标记试剂细胞可以通过96 – 孔板的基于荧光，荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。该探头具有光谱性质类似于Pacific Blue®和BD Horizon V450 ，Pacific Blue这样的过滤器®和BD Horizon V450可以方便的用流式细胞仪或显微镜使用。该探头是特别设计用于多色检测半胱氨酸蛋白酶与紫激光装备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK。

点击查看光谱

实验方案

样品操作及分析

以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

参考文献

Plasmodium falciparum metacaspase PfMCA-1 triggers a z-VAD-fmk inhibitable protease to promote cell death
Authors: Meslin B, Beavogui AH, Fasel N, Picot S.
Journal: PLoS One (2011): e23867

[Attenuation of allergic contact dermatitis by Z-VAD-FMK, a broad caspase inhibitor: experiment with mice]
Authors: Li YY, Yan CL, Xu W.
Journal: Zhonghua Yi Xue Za Zhi (2008): 3153

Caspase inhibitor Z-VAD-FMK enhances the freeze-thaw survival rate of human embryonic stem cells
Authors: Heng BC, Clement MV, Cao T.
Journal: Biosci Rep (2007): 257

相关产品

产品名称	货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿	Cat#13406
胱天蛋白酶Caspase抑制剂 FAM-VAD-FMK	Cat#13470
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物(Z-DEVD)2-R110 绿	Cat#13430

Annexin V-mFluor Violet 450标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月27日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Annexin V-mFluor Violet 450标记价格 2823
产品规格

100 tests

产品货号

Annexin V-mFluor Violet 450标记

产品参数

Ex (nm)	406	Em (nm)	445
分子量	~36000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

Annexin V-mFluor Violet 450标记探针是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。

膜联蛋白V结合物在Ca²⁺存在下与凋亡细胞表面上的PS结合，它也可以通过坏死细胞膜或死细胞并与细胞内部的PS结合。因此，我们建议将细胞不可渗透的核染色与膜联蛋白V结合物结合使用，以区分死细胞和凋亡细胞。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Annexin V-mFluor Violet 450标记探针。

点击查看光谱

实验方案

分析方案

概述

用测试化合物（200μL/样品）制备细胞

添加Annexin V结合物测定溶液

室温孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：

1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl₂，pH 7.4。

1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

1.3离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。

1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。

可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。

1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。

1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。

1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。

2.使用流式细胞仪分析：

通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。

注意：粘附细胞上的膜联蛋白V结合流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。和van Engelend等人（见参考文献1和2）。

3.使用荧光显微镜分析：

3.1移取步骤1.6的细胞悬液，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，然后用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）重悬细胞。将细胞添加到盖有玻璃盖玻片的载玻片上。

注意：对于粘附细胞，建议直接在盖玻片上生长细胞。与膜联蛋白V缀合物孵育（步骤1.6）后，用膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）冲洗1-2次，并将膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）加回到盖玻片中。在玻璃载玻片上翻转盖玻片并观察细胞。在与膜联蛋白V缀合物孵育后，细胞也可以在2％甲醛中固定，并在显微镜下观察。

3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞

参考文献

White light-induced cell apoptosis by a conjugated polyelectrolyte through singlet oxygen generation
Authors: Jiamei Liang, Pan Wu, Chunyan Tan, Yuyang Jiang
Journal: RSC advances (2018): 9218–9222

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)

Targeted Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia produces lysosomal reactive oxygen species and causes Caspase-1 dependent cell death
Authors: Pascal Clerc, Pauline Jeanjean, Nicolas Halalli, Michel Gougeon, Bernard Pipy, Julian Carrey, Daniel Fourmy, Véronique Gigoux
Journal: Journal of Controlled Release (2017)

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Jack Coleman, Rui Liu, Kathy Wang, Arun Kumar
Journal: (2016): 77–92

相关产品

产品名称	货号
Annexin V-mFluor Violet 540标记	Cat#20082
Annexin V-mFluor Violet 510标记	Cat#20081
Annexin V-Cy7标记	Cat#20068

Annexin V-mFluor Violet 510标记-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月27日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Annexin V-mFluor Violet 510标记价格 2823
产品规格

100 tests

产品货号

Annexin V-mFluor Violet 510标记

产品参数

Ex (nm)	412	Em (nm)	505
分子量	~36000	溶剂	Water
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

Annexin V-mFluor Violet 510标记探针是美国AAT Bioquest研发的用于检测细胞功能的探针，膜联蛋白是钙依赖性磷脂结合蛋白家族。它们富含真核生物，属于参与信号转导的普遍存在的细胞质蛋白家族。膜联蛋白V的优先结合配偶体是磷脂酰丝氨酸（PS），其通常保持在细胞膜的内叶（细胞质侧）。在细胞凋亡中，PS被转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面上的出现是细胞凋亡的初始/中间阶段的通用指示，并且可以在观察到形态变化之前检测到。我们的膜联蛋白V结合物是一组监测细胞功能的工具，旨在通过测量磷脂酰丝氨酸的易位来监测细胞凋亡。

点击查看光谱

实验方案

分析方案

概述

用测试化合物（200μL/样品）制备细胞

添加Annexin V结合物测定溶液

室温孵育30-60分钟

用流式细胞仪或荧光显微镜分析

1.用膜联蛋白V缀合物制备和孵育细胞：

1.1制备膜联蛋白V结合测定缓冲液：10mM HEPES，140mM NaCl和2.5mM CaCl₂，pH 7.4。

1.2用测试化合物处理细胞一段所需的时间（用星形孢菌素处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。

1.3离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

1.4将细胞重悬于200μL膜联蛋白V结合测定缓冲液中（来自步骤1.1）。

1.5在细胞中加入2μL膜联蛋白V结合物。

可选：在细胞内加入死细胞染色剂如碘化丙锭，用于坏死细胞。

1.6在室温下孵育30至60分钟，避光。

1.7在用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞之前，加入300μL膜联蛋白V结合测定缓冲液（来自步骤1.1）以增加体积（参见下面的步骤1.8）。

1.8使用流式细胞仪或荧光显微镜监测荧光强度（参见下面的步骤2或3）。

2.使用流式细胞仪分析：

通过使用具有适当过滤器的流式细胞仪来量化膜联蛋白V缀合物。

3.使用荧光显微镜分析：

3.2在荧光显微镜下用适当的滤光片分析膜联蛋白V缀合物的凋亡细胞

参考文献

Detecting Apoptosis, Autophagy, and Necrosis
Authors: Jack Coleman, Rui Liu, Kathy Wang, Arun Kumar
Journal: (2016): 77–92

相关产品

产品名称	货号
Annexin V-mFluor Violet 540标记	Cat#20082
Annexin V-mFluor Violet 450标记	Cat#20080
Annexin V-Cy7标记	Cat#20068

Thermo赛默飞官网

Thermo Fisher中国官方代理商

标签归档：mfluor

mFluor Violet 510琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

链霉亲和素偶联物 mFluor Blue 570-标记-AAT Bioquest荧光染料

mFluor Violet 540琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

链霉亲和素偶联物 mFluor Green 620-标记-AAT Bioquest荧光染料

mFluor Blue 570琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

链霉亲和素偶联物 mFluor Yellow 630-标记-AAT Bioquest荧光染料

mFluor Green 620琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 700-标记-AAT Bioquest荧光染料

mFluor Red 780琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

链霉亲和素偶联物 mFluor Red 780-标记-AAT Bioquest荧光染料

mFluor Red 780 胺-AAT Bioquest荧光染料

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 450-VAD-FMK-AAT Bioquest荧光染料

胱天蛋白酶Caspase抑制剂mFluor 510-VAD-FMK-AAT Bioquest荧光染料

Annexin V-mFluor Violet 450标记-AAT Bioquest荧光染料

Annexin V-mFluor Violet 510标记-AAT Bioquest荧光染料

2024年 5月
一	二	三	四	五	六	日
		1	2	3	4	5
6	7	8	9	10	11	12
13	14	15	16	17	18	19
20	21	22	23	24	25	26
27	28	29	30	31