Amplite 比色法超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 比色法超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的谷氨酸检测的试剂盒,XO(黄嘌呤氧化酶)是一种能催化次黄嘌呤到黄嘌呤或者更进一步催化黄嘌呤到尿酸的酶。在嘌呤的分解代谢扮演着重要角色。XO通常能在肝脏或者空肠检测到。在重度肝损伤,XO释放到血液中,因此血液中XO检测试验可以用来确定肝脏损伤的发生。黄嘌呤尿是一种少见遗传病,缺少XO导致血中高浓度黄嘌呤引起肾衰竭等健康疾病。Amplite XO检测试剂盒提供了一种快速超敏感的方法,来检测XO的活性。本试剂盒可以用于96或384微孔板分析,并且无需任何分步骤,就可以轻易地实现自动化。在实验分析种,XO氧化嘌呤碱基,次黄嘌呤、黄嘌呤转变成尿酸或者超氧化物,后者又自发的降解为双氧水。该试剂盒使用我们的Amplite Red底物使其成为双记录模式。红色的荧光信号很容易的通过荧光酶标仪(540/590nm)检测到或者被酶标仪(576nm)检测。Amplite黄嘌呤氧化酶检测试剂盒在100 ul检测体积中能检测到0.15mU/ml的XO。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法黄嘌呤氧化酶检测试剂盒。 

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适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 560nm
推荐孔板: 透明孔板
实验方案

96孔板测定示例

概述

SOD标准品或测试样品(50μL)

添加SOD测定混合物(25μL)

添加酶反应混合物(25μL)

在室温下孵育10-30分钟读取560 nm处的吸光度

注意:在开始实验之前,将所有试剂盒组分解冻至室温。

 

操作方法

1.Parepare系列SOD(0至100 U / mL)标准溶液:

1.1将50μL测定缓冲液(组分E)加入到SOD标准品(组分D)的小瓶中以制备10kU / mL SOD储备溶液。

注意:未使用的SOD溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20°C。

1.2在990μL分析缓冲液(组分E)中加入10μL10kU / mL SOD溶液,得到100 U / mL SOD溶液。取100μL的100 U / mL SOD溶液进行1:10连续稀释,然后进行1:3稀释,得到10,3,1,0.3,0.1,0.03 U / mL SOD标准溶液。

1.3如说明书中表1和2所述,将SOD标准品和含SOD的测试样品添加到96孔白壁/透明底或透明微孔板中。

 

2.Parepare SOD测定混合物1:

2.1将2.5 mL测定缓冲液(组分E)加入ReadiView SOD560(组分A)瓶中,充分混合。

2.2将50μL50X黄嘌呤(组分B)加入组分A(来自步骤2.1)的瓶中以制备SOD测定混合物。

注意:SOD测定混合物应在实验前准备好,避光。 测定混合物不稳定,应丢弃未使用的部分。

 

3.Parepare SOD测定混合物2:

3.1将50μL测定缓冲液加入到黄嘌呤氧化酶(组分C)的小瓶中,并将50μL黄嘌呤氧化酶原液转移到2.5mL测定缓冲液(组分E)中以制备SOD测定混合物2,充分混合。

3.1将25μLSOD测定混合物1(来自步骤2.2)添加到SOD标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤1,说明书表1和2)。

3.2将25μLSOD测定混合物2(来自步骤3)加入SOD标准品,空白对照和测试样品(来自步骤4.1)的每个孔中。

注意:对于384孔板,将25μL样品,12.5μLSOD测定混合物1和12.5μLSOD测定混合物2加入每个孔中。

3.3在室温下孵育30-60分钟。

3.4监测550至560nm的吸光度强度。

 

参考文献

Intercomparative investigation of the total phenols, total flavonoids, In vitro and In vivo antioxidant activities of capparis Cartilaginea (Decne.) maire and weiller and Capparis Ovata Desf. from Jordan
Authors: Mahmoud A Al-Qudah, Safwan M Obeidat, Riyadh Muhaidat, Bahaa Al-Trad, Hala I Al-Jaber, Jamil N Lahham
Journal: Pharmacognosy Magazine (2018): 154

 

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产品名称 货号
Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 增强灵敏度 Cat#11308

Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 增强灵敏度-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 增强灵敏度 价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 增强灵敏度

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测超氧化物歧化酶的试剂盒,超氧化物歧化酶(SOD)是一类催化超氧化物歧化成氧和过氧化氢的酶。超氧化物是细胞中主要的活性氧物质之一。它与神经退行性疾病,缺血再灌注损伤,动脉粥样硬化和衰老相关。 SOD是几乎所有暴露于超氧自由基的细胞的重要抗氧化防御剂。事实上,缺乏SOD1的小鼠会发展出多种病理,包括肝细胞癌,加速年龄相关的肌肉质量减少,早期白内障发病率和寿命缩短。 SOD的过表达保护小鼠纤维肉瘤细胞免于凋亡并促进细胞分化。 Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒为测量SOD活性提供了一种快速而灵敏的方法。众所周知,NADH和SOD酶系统产生超氧自由基,将WST-1还原成蓝色甲dye染料,其在440nm附近具有最大吸收。 SOD通过催化超氧阴离子歧化成过氧化氢和分子氧来抑制WST-1的还原,从而降低了甲product产物的440nm吸收。 440nm吸收的减少与SOD活性成比例。该试剂盒可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 440nm
推荐孔板: 透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备并添加SOD标准品或测试样品(50μL)
2.添加SOD工作溶液1(25μL)
3.添加SOD工作溶液2(25μL)
4.在室温下孵育30-60分钟
5.监测440nm处的吸光度

 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1SOD标准溶液(10 kU / mL):
将50μL测定缓冲液(组分E)加入到SOD标准品(组分D)的小瓶中以制备10kU / mL标准溶液。

 

2.标准溶液配制
将10μL10kU / mL SOD标准溶液加入990μL分析缓冲液(组分E)中,得到100 U / mL SOD标准溶液(SD1)。 取100 U / mL SOD标准溶液(SD1),在分析缓冲液(组分E)中进行1:10,得到10U / mL SOD标准溶液(SD2)。 取10 U / mL标准溶液(SD2)并进行1:3连续稀释,以获得使用分析缓冲液(组分E)的连续稀释的SOD标准品(SD3-SD7)。

 

3.工作溶液配制

3.1 SOD工作溶液方案1:
将2.5mL测定缓冲液(组分E)加入WST-1瓶(组分A)中并充分混合。 然后将50μL50XSOD酶溶液(组分B)加入该瓶中以制备SOD工作溶液1.注意:该SOD工作溶液1应在实验前制备,并避光。 SOD工作溶液1不稳定,应丢弃未使用的部分。

3.2 SOD工作溶液方案2:
将50μL测定缓冲液(组分E)加入到NADH小瓶(组分C)中并充分混合。 然后,将50μL的NADH储备溶液转移到2.5mL测定缓冲液(组分E)中以制备SOD工作溶液2。

 

操作步骤

表1.透明底96孔微孔板中SOD标准品和测试样品的布局。

SD = SOD标准品(SD1  –  SD7,100至0.041 U / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

 

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释(100至0.041 U / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分E)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备SOD标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向SOD标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入25μLSOD工作溶液1,使总测定体积为75μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入12.5μLSOD工作溶液1,总体积为37.5μL/孔。

3.向SOD标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入25μLSOD工作溶液2,使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入12.5μLSOD工作溶液2,总体积为50μL/孔。

4.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

5.用吸光度板读数器在440nm处监测吸光度。

 

数据分析

        将从空白标准孔获得的读数(抑制%)用作阴性对照。 从其他标准的读数中减去该值,以获得基线校正值。 然后,绘制标准读数以获得标准曲线和方程。 该等式可用于计算SOD样本。 

Amplite 比色超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒 增强灵敏度

图1.使用Amplite 比色超氧化物歧化酶测定试剂盒在96孔白壁/透明底板中用Spectrum Max酶标仪(Molecular Devices)测量OD剂量响应。

 

参考文献

Accelerated sarcopenia in Cu/Zn superoxide dismutase knockout mice
Authors: S. S. Deepa
Journal: Free Radic Biol Med (2019): 19-23

Carcinogenesis and Reactive Oxygen Species Signaling: Interaction of the NADPH Oxidase NOX1-5 and Superoxide Dismutase 1-3 Signal Transduction Pathways
Authors: A. Parascandolo
Journal: Antioxid Redox Signal (2019): 443-486

Evaluation and Monitoring of Superoxide Dismutase (SOD) Activity and its Clinical Significance in Gastric Cancer: A Systematic Review and Meta-Analysis
Authors: J. Li
Journal: Med Sci Monit (2019): 2032-2042

The copper-zinc superoxide dismutase activity in selected diseases
Authors: L. Lewandowski
Journal: Eur J Clin Invest (2019): e13036

Utilizing Superoxide Dismutase Mimetics to Enhance Radiation Therapy Response While Protecting Normal Tissues
Authors: K. A. Mapuskar
Journal: Semin Radiat Oncol (2019): 72-80

A Review of the Catalytic Mechanism of Human Manganese Superoxide Dismutase
Authors: J. Azadmanesh
Journal: Antioxidants (Basel) (2018): se name=”11308.enl” path=”C:UsersaatbiDropbox (AAT Bioquest)Website Working FilesProduct References11308.enl”>11308.enlEndNote101017Azadmanesh, J.Borgstahl, G. E. O.Department of Biochemistry and Molecular Biology, 985870 Nebraska Medical Center, Om

Chemical Warfare at the Microorganismal Level: A Closer Look at the Superoxide Dismutase Enzymes of Pathogens
Authors: S. S. Schatzman
Journal: ACS Infect Dis (2018): 893-903

Human Mn-superoxide dismutase inactivation by peroxynitrite: a paradigm of metal-catalyzed tyrosine nitration in vitro and in vivo
Authors: V. Demicheli
Journal: Metallomics (2018): 679-695

Inhibition of copper-zinc superoxide dismutase activity by selected environmental xenobiotics
Authors: L. Lewandowski
Journal: Environ Toxicol Pharmacol (2018): 105-113

Superoxide dismutase: a review and a modified protocol for activities measurements in rat livers
Authors: L. B. Campos-Shimada
Journal: Arch Physiol Biochem (2018): 1-8

 

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