WAKO(和光纯药)维生素实验研究用系列试剂

WAKO(和光纯药)维生素实验研究用系列试剂
维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类微量有机物质,在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。维生素既不参与构成人体细胞,也不为人体提供能量。
维生素是个庞大的家族,现阶段所知的维生素就有几十种,大致可分为脂溶性和水溶性两大类。有些物质在化学结构上类似于某种维生素,经过简单的代谢反应即可转变成维生素,此类物质称为维生素原,例如 β-胡萝卜素能转变为维生素A;7-脱氢胆固醇可转变为维生素D3;但要经许多复杂代谢反应才能形成。尼克酸的色氨酸则不能称为维生素原。
上海金畔生物提供Wako(和光纯药)维生素系列产品,为您的实验研究提供有力的支持!
产品信息:

货号 英文品名 中文品名 CAS No. 含量 规格
011-16641 L(+)-Ascorbic Acid Standard L(+)-抗坏血酸标准品品 50-81-7 99.0+%(volumetric analysis)99.0+%(HPLC) 200mg
032-17991 beta-Carotene Standard β-胡萝卜素标准品 7235-40-7 95.0+% (HPLC) 10mg
035-17981 α-Carotene Standard α-胡萝卜素标准品品 7488-99-5 95.0+% (HPLC) 10mg
046-18992 Dibenzoyl Thiamin 二苯甲酰硫胺素 299-88-7 98.0+% (Titration) 25g
98.0+% (Absorptiometry)
048-18991 Dibenzoyl Thiamin 二苯甲酰硫胺素 299-88-7 98.0+% (Titration) 5g
98.0+% (Absorptiometry)
085-07111 Hydroxyethylthiamine Hydrochloride Standard 羟乙基盐酸硫胺素标准品 14707-32-5 99.0+% (HPLC) 200mg
99.0+% (Titration)
162-20051 Pyridoxamine Dihydrochloride Standard 盐酸吡哆胺标准品 524-36-7 98.0+%(Calculated on dried basis)(Titration) 200mg
98.0+% (HPLC)
164-17083 Pyrroloquinoline Quinone Disodium Salt 吡咯喹啉醌二钠 122628-50-6 99.0+% (HPLC) 50mg
165-20041 Pyridoxal Hydrochloride Standard 盐酸吡哆醛标准品 65-22-5 98.0+% (Titration) 200mg
98.0+% (HPLC)
167-19011 Phylloquinone Standard (mixture of isomers) 叶绿醌标准品(异构体混合物) 84-80-0 98.0-102.0% (Absorptiometry)99.0+% (E-+Z-)(HPLC) 200mg
168-17081 Pyrroloquinoline Quinone Disodium Salt 吡咯喹啉醌二钠 122628-50-6 99.0+% (HPLC) 10mg
168-20031 Pyridoxine Hydrochloride Standard 盐酸吡哆醇标准品 58-56-0 98.0+% (volumetric analysis)98.0+% (HPLC) 200mg
182-01611 Riboflavin Standard 核黄素标准品 83-88-5 98.0+% (Absorptiometry) 200mg
98.0+% (HPLC)
188-01331 Retinol Palmitate Standard Solution 维生素A棕榈酸酯标准品溶液 79-81-2 190,000 – 240.000 IU/g (as vitamin A) 20Capsules
198-12241 Sucralose Standard 三氯蔗糖标准品 56038-13-2 98.0+% (qNMR) 1g
201-00852 Thiamin Hydrochloride 盐酸硫胺素 1967-3-8 98.0+% (HPLC)(Calculated on dried basis) 25g
201-18483 (+/-)-α-Tocopherol Acetate (+/ – )-α-生育酚醋酸酯 7695-91-2 96.0+% (HPLC) 5g
203-00851 Thiamin Hydrochloride 盐酸硫胺素 1967-3-8 98.0+% (HPLC)(Calculated on dried basis) 1g
203-18482 (+/-)-α-Tocopherol Acetate (+/ – )-α-生育酚醋酸酯 7695-91-2 96.0+% (HPLC) 25g
205-00855 Thiamin Hydrochloride 盐酸硫胺素 1967-3-8 98.0+% (HPLC)(Calculated on dried basis) 500g
205-18481 (+/-)-α-Tocopherol Acetate (+/ – )-α-生育酚醋酸酯 7695-91-2 96.0+% (HPLC) 100g
209-00853 Thiamin Hydrochloride 盐酸硫胺素 1967-3-8 98.0+% (HPLC)(Calculated on dried basis) 100g
210-01021 Ubiquinone-10 Standard 辅酶Q-10标准品 303-98-0 99.5+% (HPLC)(E-form + Z-form) 200mg
220-00363 Cholecalciferol 维生素D3 67-97-0 97.0+% (HPLC) 1g
223-00331 Vitamin A Palmitate, in Oil 维生素A棕榈酸酯,中石油 79-81-2 Vitamin A: (0.95 – 1.20)×106 IU/g 1g
224-00361 Cholecalciferol 维生素D3 67-97-0 97.0+% (HPLC) 100mg
227-00611 Vitachange, Activated Vitachange,激活 250g
229-00333 Vitamin A Palmitate, in Oil 维生素A棕榈酸酯,中石油 79-81-2 Vitamin A: (0.95 – 1.20)×106 IU/g 5g
302-07111 Vitamin E Reference Standard 维生素E参考标准品 1Set
303-06921 dl-Tocol DL-母育酚

 

wako反式脂肪酸分析相关产品

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C18反式脂肪酸甲酯

反式亚油酸甲酸

[GC分析条件]

色谱柱:forteBPX90

尺寸:内径:0.25mm   长度:100m   膜厚:0.25μm

   检测器:FID

   升温条件:100℃(2min)→10℃/min→175℃(30min)→10℃/min→280℃(20min)

   检测器槽:280℃

   样品气化室:250℃

   液化气:氦1.0ml/min

   Split比:1/20

   注入量:10mg/ml丙酮溶液, 1μl

分析条件为本公司产品试验时的条件。

C18反式脂肪酸甲酯

产品编号

品名

规格

包装

133-16271

9,12-亚油酸酸甲基标准品 (cis-, trans-混合物)
(亚油酸甲酸反式化物)

食品分析

200mg

130-16281

9,12,15-亚麻酸甲基标准品(cis-, trans-混合物)
(α-亚麻酸甲酯反式化物)

食品分析

200mg

分析色谱柱

产品编号

品名

长度(m)

内径(mm)

膜厚(μm)

包装

515-80721

forteBPX90

100

0.25

0.25

1支

相关产品

内部标准品

产品编号

品名

规格

包装

084-08661

十七烷酸(珠光脂酸)标准品

食品分析

100mg

甲酯化剤

产品编号

品名

规格

包装

029-06172

三氟化硼甲醇錯体甲醇溶液About 14~15% (BF3)

气相色谱

25g

021-06171

400g

脂肪酸甲酯

产品编号

品名

C

规格

包装

饱和脂肪酸甲酯

135-07963

甲基十六烷酸(棕榈酸)标准品

16

气相色谱

1g

136-07971

甲基硬脂酸标准品

18

气相色谱

5g

325-92291

甲基花生酸

20

Wako

5g

511-49661

甲基二十二烷酸

22

Accu  SFA-016N

100mg

518-49671

甲基二十四烷酸(木焦油酸)

24

Accu  SFA-018N

100mg

单不饱和脂肪酸(cis)

515-49681

甲基cis-9-十六碳烯酸

16

Accu UFA‐001N

100mg

512-49691

甲基cis-6-十八碳烯酸(油酸)

18

Accu UFA‐003N

100mg

139-08583

甲基十八碳烯酸(油酸)标准品(9-cis)

18

气相色谱

1g

512-49711

甲基cis-11-十八碳烯酸(油酸)

18

Accu UFA‐007N

100mg

519-49721

甲基cis-5-二十碳烯酸

20

Accu UFA‐019N

100mg

516-49731

甲基cis-8-二十碳烯酸

20

Accu UFA‐017N

100mg

513-49741

甲基cis-11-二十碳烯酸

20

Accu UFA‐018N

100mg

510-49751

甲基cis-13-二十二碳烯酸

22

Accu UFA‐027N

100mg

517-49761

甲基cis-15-二十四碳烯酸

24

Accu UFA‐033N

100mg

单不饱和脂肪酸(trans)

514-49911

甲基trans-9-十六碳烯酸

16

Accu UFA‐002N

100mg

514-49771

甲基trans-6-十八碳烯酸(油酸)

18

Accu UFA-004N

100mg

511-49781

甲基trans-9-十八碳烯酸(油酸)
(甲基反油酸)

18

Accu UFA-006N

100mg

518-49791

甲基trans-11-二十碳烯酸

20

Accu UFA‐016N

100mg

511-49801

甲基trans-13-二十二碳烯酸

22

Accu UFA‐028N

100mg

高度不饱和脂肪酸(all-cis)

518-49811

甲基亚油酸

18

Accu UFA-010N

100mg

515-49821

甲基α‐亚麻酸

18

Accu UFA-014N

100mg

511-49921

甲基γ‐亚麻酸

18

Accu UFA-015N

100mg

512-49831

甲基cis-11,14-二十碳二烯酸

20

Accu UFA‐020N

100mg

519-49841

甲基cis-11,14,17-二十碳三烯酸

20

Accu UFA‐023N

100mg

518-49931

甲基cis-花生四烯酸

20

Accu UFA‐024N

100mg

516-49851

甲基5,8,11,14,17-二十碳五烯酸(EPA)

20

Accu UFA‐025N

100mg

513-49861

甲基cis-13,16-二十二碳二烯酸

22

Accu UFA‐029N

100mg

510-49871

甲基cis-13,16,19-二十二碳三烯酸

22

Accu UFA‐030N

100mg

517-49881

甲基cis-7,10,13,16-二十二碳四烯酸

22

Accu UFA‐031N

100mg

514-49891

甲基cis-4,7,10,13,16,19-二十二碳四烯酸(DHA)

22

Accu UFA‐032N

100mg

[参考文献]标准油脂分析试验法:暂定 17-2007反式脂肪酸含量(毛细管气相色谱法)

wako磷酸化蛋白电泳试剂- Phos-tag (TM) Acrylamide

磷酸化蛋白电泳试剂——wako Phos-tag (TM) Acrylamide
什么是Phos-tag™
Phos-tag ™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子,结合特异性与氨基酸的种类和序列无关,无放射性,无需特意制备磷酸化抗体。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot 检测(Phos-tag ™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag ™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag ™ Mass Analytical Kit) 。
Phos-tag的基本结构:

 
 
 
 
 
 
1. Phos-tag™ Acrylamide

Phos-tag Acrylamide SDS-PAGE可根据迁移率不同,区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。该方法只需在常规的SDS-PAGE胶中添加Phos-tag Acrylamide和MnCl2即可进行实验(制胶过程中添加,如需详细说明请联系我们)。

特点
# 非放射性元素,非荧光物质
# 磷酸化蛋白亚型可以在同一电泳道分离出多条带
# 操作简便,与常规SDS-PAGE蛋白电泳相似
# Phos-tag™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
# Phos-tag™ SDS-PAGE实验后,可进行常规的免疫组化、质谱等
# 性质稳定,溶于蒸馏水后可以稳定保存至少3个月
# 磷酸化和非磷酸化蛋白可以同时被分离检测
# 不同位点磷酸化修饰以及磷酸化程度不同的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来

原理

应用


1、黄色粘性油状物质;
2、在4度可保存至少一年;
3、Phos-tagTM与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合分离磷酸化和非磷酸化蛋白。
SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。
在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。
Phos-tag® Acrylamide可根据迁移率不同,区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。无放射性、非化学物质标记。不同位点磷酸化修饰的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来。
操作过程与普通SDS-PAGE相类似。Phos-tagTM的特异性结合与氨基酸种类、序列无关。
适用于免疫印迹、质谱分析等后续工作。可识别磷酸化和非磷酸化蛋白。
Phos-tagTM母液可稳定保存至少3个月。
可检测出具有不同磷酸基团数目的蛋白。无需特意制备磷酸化抗体。

产品编号 产品名称 规格 原价
304-93526 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3ml 2670
300-93523 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 4450
304-93521 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 10680

Phos-tag Acrylamide (AAL-107)     Wako Cat. #304-93521 (10 mg)]Protocol(点击进入下载)

Phos-tag Acrylamide (AAL-107)   Wako Cat. #300-93523 (2 mg)]Protocol(点击进入下载)
 
 
References  参考文献:

    1. “Recognition of phosphate monoester dianion by an alkoxide-bridged dinuclear zinc (II) complex”, E. Kinoshita, M. Takahashi, H. Takeda, M. Shiro, and T. Koike, Dalton Trans., 21, 1189-1193 (2004).

 

    1. “Phosphate-binding tag, a new tool to visualize phosphorylated proteins”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, K. Takiyama, and T. Koike, Mol. Cell.
      Proteomics
      , 5, 749-757 (2006).

 

    1. “A single nucleotide polymorphism genotyping method using phosphate-affinity polyacrylamide gel electrophoresis”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, Anal. Biochem., 361, 294-298 (2007).

 

    1. “Label-free kinase profiling using phosphate affinity polyacrylamide gel electrophoresis”, E. Kinoshita-Kikuta, Y. Aoki, E. Kinoshita, and T. Koike, Mol. Cell. Proteomics, 6, 356-366 (2007).

 

    1. “Separation of a phosphorylated-His protein using phosphate-affinity Polyacrylamide gel”, S. Yamada, H. Nalkamura, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and Y. Shiro, Anal. Biochem., 360, 160-162 (2007).

 

    1. “A mobility-shift detection method for DNA methylation analysis using phosphate-affinity polyacrylamide gel electrophoresis”, E. Kinoshita-Kikuta, E. Kinoshita, and T. Koike, Anal. Biochem., 378, 102-104 (2008).

 

    1. “Separation of phosphoprotein isotypes having the same number of phosphate groups using phosphate-affinity SDS-PAGE”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, M. Matsubara, S. Yamada, H. Nakamura, Y. Shiro, Y. Aoki, K. Okita, and T. Koike, Proteomics, 8, 2994-3003 (2008).

 

    1. “FANCI phosphorylation functions as a molecular switch to turn on the Fanconi anemia pathway”, M. Ishiai, H. Kitao, A. Smogorzewska, J. Tomida, A. Kinomura, E. Uchida, A. Saberi, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, S. Tashiro, S. J. Elledge, and M. Takata, Nature Struct. Mol. Biol., 15, 1138-1146 (2008).

 

    1. “Two-dimensional phosphate affinity gel electrophoresis for the analysis of phosphoprotein isotypes”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, M. Matsubara, Y. Aoki, S. Ohie, Y. Mouri, and T. Koike, Electrophoresis, 30, 550-559 (2009).

 

    1. “Phosphate-affinity Gel Electrophoresis Using a Phos-tag Molecule for Phosphoproteome Study”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, Current Proteomics, 6, 104-121 (2009).

 

    1. “Mobility shift detection of phosphorylation on large proteins using a Phos-tag SDS-PAGE gel strengthened with agarose”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, H. Ujihara, and T. Koike, Proteomics, 9, 4098-101 (2009).

 

  1. “Separation and detection of large phosphoproteins by using Phos-tag SDS-PAGE”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, Nature Protocols, 4, 1513-21 (2009).

wako 用于磷酸化蛋白的WB检测– Phos-tag™ Biotin

wako  Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag,用于磷酸化蛋白的WB检测
Phos-tag™ Biotin是与生物素结合的Phos-tag™,可代替western blot检测中的磷酸化抗体。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可灵敏检测PVDF膜上的磷酸化蛋白。现推出液体型。
特点:

  • 无辐射
  • 无需PVDF膜的封闭处理
  • Phos-tag™的特异性结合与氨基酸种类、序列无关
  • 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续工作
  • Phos-tag™-BTL母液可稳定保存至少6个月
  • 实验流程与使用HRP标记抗体相类似
  • 可用于所有的磷酸化蛋白检测
  • 与普通WB检测相似。但无需使用磷酸化抗体
【Phos-tag™ Biotin免疫印迹原理】
应用实例:

应用实例:使用Phos-tagBTL-104进行斑点印迹检测
非磷酸化蛋白:Bovine Serum Albumin, Human Serum Albumin, Carbonic Anhydrase, β- Galactosidase
磷酸化蛋白:α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
去磷酸化蛋白: (用碱性磷酸酶处理) α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
Application (3): Western Blotting:
Phos-tag Biotin BTL-104 [Wako Cat. #301-93531 (10 mg)]Protocol(点击进入)

Phos-tag Biotin BTL-105 [Wako Cat. #304-93541 (10 mg)]Protocol(点击进入)
产品描述
1、粉末;
2、在4度可保存至少一年;
3、检测磷酸化蛋白;
4、Phos-tagTM与生物素(Biotin)结合可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。
可用于免疫印迹实验,二维电泳。
产品编号 产品名称 规格 原价
305-99411 Phos-tag™ Biotin BTL-104 1mM Aqueous 0.3ml 2700
308-97201 Phos-tag™ Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml 3560
301-93531 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg 12460
308-93541 Phos-tag™ Biotin BTL-105 10mg 12460

BTL-104、BTL-105、BTL-111三者连接链(Linher)长度不一,但使用上基本相同.BTL-111灵敏度最高,推荐使用溶解性比较高的BTL-104。
wako  Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag使用的先关问题解答

Wako维生素E标准品套装

Wako维生素E标准品套装

产品编号

产品名

产品中文名

包装

302-07111

Vitamin E Reference Standard

维生素E标准品套装

1set

试剂盒包含以下几种物质::

1. d-α-生育酚  250mg x1瓶

2. d-β-生育酚 250mg x1瓶

3. d-γ-生育酚 250mg x1瓶

4. d-δ-生育酚 250mg x1瓶

5. 3,4-二氢-2,2,5,7,8-五甲基-2H-1-苯并吡喃-6-酚(PMC) 250mg x1瓶

注意: PMC 是用作HPLC分析维生素E的内标物质,不适用于GC分析。

.

分子式,分子量及产品纯度

物质名称

分子式

分子量

最大吸收波长

吸收系数

E1% 1cm

纯度

外观

d-α-生育酚

C29H50O2

430.71

292 nm

78.1

98.5+%

淡黄色、粘稠液体

d-β-生育酚

C28H48O2

416.69

296 nm

89.2

98.5+%

d-γ-生育酚

C28H48O2

416.69

297 nm

94.4

98.5+%

d-δ-生育酚

C27H46O2

402.66

297 nm

92.9

98.5+%

PMC

C14H20O2

220.31

292 nm

99.0+%

白色晶体

保存和稳定条件

每小瓶试剂都是用附有氧吸附剂的铝盖包装的。一旦打开了瓶子,请将此试剂于惰性气体环境中的冰箱中(2~10℃)保存。在此条件下,试剂可保持6个月的稳定性。

使用指南(溶液的制备)

1. 用天平称取每种试剂各50~100mg,质量确定到0.1mg。

2. 将这些试剂分别溶解在乙醇或己烷溶剂中,直至各维生素同系物的浓度为1mg/mL。再将这些溶液密封保存于5℃,可保存一个月。

3. 在使用前将原液稀释,即可得到每个同系物的标准溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英  文  名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产  地: 日本
商  家: Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆  Phos-tagTM 的简介
Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆  Phos-tagTM 系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗)
Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 免疫印迹(正常SDS-PAGE)
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构
特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理
◆应用
样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色
相关产品

产品名称 用  途
 Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
 SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
 Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
 Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit
 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度

 
Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 
SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块

Phos-tag™ Biotin(生物素)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 
优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样
◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品

产品编号 产品名称 规  格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?
如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。
如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。
备注:
1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-
       23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。
2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸
     化反应。
2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?
收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。
备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细
          胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。
3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标
    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?
Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。
4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?
如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。
也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。
5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?
该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英  文  名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产  地: 日本
商  家: Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆  Phos-tagTM 的简介
Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆  Phos-tagTM 系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗)
Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 免疫印迹(正常SDS-PAGE)
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构
特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理
◆应用
样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色
相关产品

产品名称 用  途
 Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
 SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
 Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
 Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit
 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度

 
Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 
SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块

Phos-tag™ Biotin(生物素)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 
优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样
◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品

产品编号 产品名称 规  格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?
如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。
如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。
备注:
1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-
       23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。
2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸
     化反应。
2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?
收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。
备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细
          胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。
3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标
    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?
Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。
4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?
如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。
也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。
5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?
该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英  文  名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产  地: 日本
商  家: Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆  Phos-tagTM 的简介
Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆  Phos-tagTM 系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗)
Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 免疫印迹(正常SDS-PAGE)
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构
特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理
◆应用
样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色
相关产品

产品名称 用  途
 Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
 SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
 Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
 Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit
 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度

 
Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 
SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块

Phos-tag™ Biotin(生物素)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 
优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样
◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品

产品编号 产品名称 规  格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?
如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。
如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。
备注:
1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-
       23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。
2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸
     化反应。
2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?
收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。
备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细
          胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。
3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标
    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?
Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。
4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?
如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。
也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。
5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?
该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。

wako阿尔茨海默病研究先关试剂

wako阿尔茨海默病研究先关试剂

阿尔茨海默病研究(老年痴呆)

货号 名称 规格
8951516 β-Amyloid (1-40), Ultra Pure,TFA β淀粉样蛋白(1 – 40),超纯,TFA 2.5mg
294-64701 Human/Rat?Beta Amyloid(40) ELISA?Kit Wako?II 人/大鼠β淀粉体(40)ELISA试剂盒 96T
8951516 β-Amyloid (1-40), Ultra Pure,TFA β淀粉样蛋白(1 – 40),超纯,TFA 0.5mg
298-64601 Human?Beta Amyloid(1-40) ELISA?Kit Wako?II 人β淀粉体(1-40)ELISA试剂盒 96T
8953770 β-Amyloid (1-40), rat β淀粉样蛋白(1 – 40),大鼠 2.5mg
8953770 β-Amyloid (1-40), rat β淀粉样蛋白(1 – 40),大鼠 0.5mg
8953771 β-Amyloid Peptide (1-42), rat β淀粉样多肽(1 – 42),大鼠 2.5mg
292-64501 Human/Rat Beta Amyloid(42) ELISA?Kit Wako, High Sensitive 人、大鼠β淀粉体(42)ELISA试剂盒,高灵敏度 96T
296-64401 Human Beta Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人β淀粉体(1-42)ELISA试剂盒,高灵敏度 96T
8953771 β-Amyloid Peptide (1-42), rat β淀粉样多肽(1 – 42),大鼠 0.5mg
8952487 β-Amyloid (1-42), human β淀粉样蛋白(1 – 42),人 2.5mg
151-01801 Osthole Standard 蛇床子素 20mg
8952487 β-Amyloid (1-42), human β淀粉样蛋白(1 – 42),人 0.5mg
074-04961 Gomisin N Standard 五味子酯N标准品 10mg
077-04951 Gomisin A Standard 五味子醇甲标准品 10mg
192-10441 Schizandrin Standard 五味子素标准品 20mg
197-13551 Schizandrin  五味子素 20mg
334-00491 Amyloidβ-Protein (Human,37-43) antiserum 50ul
33-00221 Amyloidβ-Protein (Human,37-42) antiserum 50ul
336-00211 Amyloidβ-Protein (Human,34-40) antiserum 50ul
330-00111 Amyloidβ-Protein (Human,1-40) antiserum 50ul
330-00231 Amyloidβ-Protein (Human,1-16) antiserum 50ul
339-32171 Nma-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-Thr-Val-Lys(Dnp)-D-Arg-D-Arg-D-Arg-NH2 1mg
333-32191 (3,5-Difluorophenylacetyl)-Ala-Phg-OBut 5mg
333-43941 L-685,458 1mg
556-65811 β-secretase activity kit 100T
334-32121 MOCAC-SER-GLU-VAL-ASN-LEU-ASP-ALA-GLU-PHE-ARG-LYS(DNP)-ARG-A 1mg
339-43781 LYS-THR-GLU-GLU-ILE-SER-GLU-VAL-ASN-STA-VAL-ALA-GLU-PHE 1mg
337-44201 Amyloidβ-Protein(42-1) 0.1mg
332-44131 Amyloidβ-Protein(40-1) 0.1mg
337-43581 β-Sheet breaker peptide iAβ5 5mg
336-43671 Amyloidβ-Protein (Human,3-42) 0.5mg
334-43091 Amyloidβ-Protein (Human,25-35) 0.5mg
334-43591 Amyloidβ-Protein (Human,1-16) 0.5mg
333-43701 Amyloidβ-Protein (Human,1-43) 0.5mg
338-43491 Amyloidβ-Protein (Human,1-42) 0.5mg
336-43791 Amyloidβ-Protein (Human,1-40) [HCl Form] 0.5mg
330-43071 Amyloidβ-Protein (Human,1-40) 0.5mg
011-18961 Amyloid beta-Protein (1-42) (Hydrochloride) β淀粉样蛋白(1 – 40),冻干粉 1mg
016-18771 Amyloid beta-Protein (1 – 42) β淀粉样蛋白(1 – 42) 0.5mg
014-18951 Amyloid beta-Protein (1-40) (Hydrochloride) β淀粉样蛋白(1 – 40),冻干粉 1mg
019-18761 Amyloid beta-Protein (1 – 40) β淀粉样蛋白(1 – 40) 1mg
014-20281 Anti Phosphorylated alpha-Synuclein,Monoclonal Antibody 抗磷酸化α突触核蛋白单抗 50ul
299-57301 Phosphorylated Tau Immunohistostain Kit 磷酸化τ免疫组织染色试剂盒 100T
299-56701 Amyloid beta-Protein Immunohistostain Kit β淀粉样蛋白免疫组织染色试剂盒 50T

WAKO定量分析的甜叶菊标准品

WAKO定量分析的甜叶菊标准品

和光(WAKO)定量分析的甜叶菊标准品类STEVIA STANDARDS

环境

定量分析的甜叶菊标准品类
STEVIA STANDARDS

        甜叶菊是南美原产的菊科植物。甜叶菊含有甜菊苷、甜菊双糖甙等甜菊醇糖甙类。甜叶菊提取物被收录于第八版食品添加物法定文件,作为低卡路里天然甜调味品被广泛使用。同时,在第68次JECFA(WHO/FAO食品添加物专家委员会)中,正式决定甜叶菊提取物的规格,也决定了美国FDA的甜菊双糖甙规格。本公司产品是质量分析用高纯度标准品。还可用于更高精度的定量用。

产品编号

品名

包装

098-05681

Isosteviol Standard

1g

183-02361

Rebaudioside A Standard

1g

187-02401

Rebaudioside B Standard

100mg

193-15351

Stevioside Standard

1g

194-15401

Steviol Standard

100mg

193-15471

Steviolbioside Standard

100mg

* 本品只可用于实验、研究目的,不得用于家庭、医疗等其它用途。

wako水分析用标准品

wako水分析用标准品

货号

名称

规格

081-08171

Heptaethylene Glycol Monododecyl Ether Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 十二烷基七聚乙二醇醚

1mLx5A

086-07261

Halogenated Acetic Acid Mixture Standard Solution (each 1mg/ml t-Butyl Methyl Ether Solution) 卤化醋酸标准溶液

2mLx10A

072-03421

Geosmin Standard Solution (0.1mg/ml Methanol Solution) 土臭素标准溶液

1ml

077-01911

Geosmin Standard 土臭素标准品

20mg

063-04511

Formaldehyde Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 甲醛标准溶液

1mLx5A

069-04471

FLUOROBENZENE STANDARD SOLUTION (1MG/ML METHANOL SOLUTION) 氟苯标准溶液

1mLx5A

042-29021

1,4-Dioxane-d8 Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 1,4-二氧六环-d8标准溶液

1mLx5A

049-28791

1,4-Dioxane Standard Solution(1mg/ml Methanol Solution) 1,4-二氧六环标准溶液

2mLx10A

041-23991

Dichloromethane Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 二氯甲烷标准溶液

2mLx10A

044-23981

Dichloromethane Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 二氯甲烷标准溶液

2mLx10A

046-25641

p-Dichlorobenzene Standard Solution(1mg/ml Methanol Solution) 对二氯苯标准溶液

2mLx5A

048-24481

Dichloroacetonitrile Standard Solution (1mg/ml Acetonitrile Solution) 氰化二氯甲烷标准溶液

2mLx10A

041-24471

Dichloroacetic Acid Standard Solution (1mg/ml t-Butyl Methyl Ether Solution) 二氯乙酸标准溶液

2mLx10A

046-18791

1,1-Dichloroethylene Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 1,1-二氯乙烯标准溶液

10ml

047-22011

1,1-Dichloroethylene Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 1,1-二氯乙烯标准溶液

2mLx10A

048-24361

1,2-Dichloropropane Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 1,2-二氯丙烷标准溶液

2mLx10A

043-18941

1,2-Dichloroethane Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 1,2-二氯乙烷标准溶液

10ml

040-22001

1,2-Dichloroethane Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 1,2-二氯乙烷标准溶液

2mLx10A

043-22591

trans-1,2-Dichloroethylene Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 反-1,2-二氯乙烯标准溶液

2mLx10A

047-18961

trans-1,2-Dichloroethylene Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 反-1,2-二氯乙烯标准溶液

10ml

043-18963

trans-1,2-Dichloroethylene Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 反-1,2-二氯乙烯标准溶液

2mLx10A

049-25631

cis-1,2-Dichloroethylene Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 顺-1,2-二氯乙烯标准溶液

2mLx5A

043-24551

Dibromochloromethane Standard Solution(1mg/ml Methanol Solution) 二溴氯甲烷标准溶液

2mLx10

039-13861

Dibromochloromethane Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 二溴氯甲烷标准溶液

2mLx10

037-18781

p-Cresol Standard

1g

033-18761

o-Cresol Standard

1g

030-18771

m-Cresol Standard

1g

032-13851

Chloropicrin Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 氯化苦标准溶液

2mLx10A

039-15681

Chloroform Standard Solution(1mg/ml Methanol Solution) 氯仿标准溶液

2mLx10A

036-13871

Chloroform Standard Solution(1mg/ml Hexane Solution) 氯仿标准溶液

2mLx10A

034-19031

1-Chlorodecane Standard Solution (1mg/ml Hexane Soluiton) 1-氯癸烷标准溶液

1mLx5A

038-16871

Chloroacetic Acid Standard Solution(1ml/mg t-Butyl Methyl Ether Solution) 氯乙酸标准溶液

2mLx10A

030-19251

5 Chlorinated Phenols Mixture Standard Solution (each 1mg/ml in Acetone Solution) 5钟氯化酚混合物标准溶液

1mLx5A

035-19321

3 Chlorinated Acetic Acids Mixutre Standard Solution (each 1mg/ml t-Butyl Methyl Ether Solution) 3种氯化醋酸混合物标准溶液

1mLx5A

030-19631

3 Chlorinated Acetic Acid Methyl Esters Mixture Standard Solution (each 1mg/ml t-Butyl Methyl Ether Solution) 3种氯化醋酸甲酯混合物标准溶液

2mLx5A

036-15711

Chloral Hydrate Standard Solution (1mg/ml t-Butyl Methyl Ether Solution) 水合氯醛标准溶液

2mLx10A

023-15301

t-Butyl Methyl Ether Standard Solution(1mg/ml Methanol Solution) 甲基异丁基醚标准溶液

2mLx5A

020-12251

Bromoform Standard Solution(1mg/ml Methanol Solution) 三溴甲烷标准溶液

2mLx10A

025-10241

Bromoform Standard Solution(1mg/ml Hexane Solution) 三溴甲烷标准溶液

2mLx10A

029-15021

p-Bromofluorobenzene-Fluorobenzene Mixture Standard Solution (each 1mg/ml Methanol Solution) 对溴氟苯-氟苯混合物标准溶液

1mLx5A

021-12041

p-Bromofluorobenzene Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 对溴氟苯

2mLx10A

027-12261

Bromodichloromethane Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 溴二氯甲烷标准溶液

2mLx10A

022-10251

Bromodichloromethane Standard Solution (1mg/ml Hexane Solution) 溴二氯甲烷标准溶液

2mLx10A

024-13251

Bromoacetic Acid Standard Solution 溴乙酸标准溶液

2mLx10A

024-12031

Benzene Standard Solution (1mg/ml Methanol Solution) 苯标准溶液

2mLx10A

013-20131

Anionic Surfactants Mixture Standard Solution (each 1mg/ml Methanol Solution) 阴离子表面活性剂混合物标准溶液

1mLx5A

011-17241

Ammonium Nitrogen Standard Solution (NH4+ 1,000) 氨氮标准溶液

50ml

013-19881

Acenaphthene-d10 Standard Solution (1mg/ml in Acetone Solution) 苊-d10标准溶液

1mLx5A

wako 用于磷酸化蛋白的WB检测– Phos-tag™ Biotin

wako  Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag,用于磷酸化蛋白的WB检测
Phos-tag™ Biotin是与生物素结合的Phos-tag™,可代替western blot检测中的磷酸化抗体。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可灵敏检测PVDF膜上的磷酸化蛋白。现推出液体型。
特点:

  • 无辐射
  • 无需PVDF膜的封闭处理
  • Phos-tag™的特异性结合与氨基酸种类、序列无关
  • 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续工作
  • Phos-tag™-BTL母液可稳定保存至少6个月
  • 实验流程与使用HRP标记抗体相类似
  • 可用于所有的磷酸化蛋白检测
  • 与普通WB检测相似。但无需使用磷酸化抗体
【Phos-tag™ Biotin免疫印迹原理】
应用实例:

应用实例:使用Phos-tagBTL-104进行斑点印迹检测
非磷酸化蛋白:Bovine Serum Albumin, Human Serum Albumin, Carbonic Anhydrase, β- Galactosidase
磷酸化蛋白:α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
去磷酸化蛋白: (用碱性磷酸酶处理) α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
Application (3): Western Blotting:
Phos-tag Biotin BTL-104 [Wako Cat. #301-93531 (10 mg)]Protocol(点击进入)

Phos-tag Biotin BTL-105 [Wako Cat. #304-93541 (10 mg)]Protocol(点击进入)
产品描述
1、粉末;
2、在4度可保存至少一年;
3、检测磷酸化蛋白;
4、Phos-tagTM与生物素(Biotin)结合可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。
可用于免疫印迹实验,二维电泳。
产品编号 产品名称 规格 原价
305-99411 Phos-tag™ Biotin BTL-104 1mM Aqueous 0.3ml 2700
308-97201 Phos-tag™ Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml 3560
301-93531 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg 12460
308-93541 Phos-tag™ Biotin BTL-105 10mg 12460

BTL-104、BTL-105、BTL-111三者连接链(Linher)长度不一,但使用上基本相同.BTL-111灵敏度最高,推荐使用溶解性比较高的BTL-104。
wako  Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag使用的先关问题解答

低聚果糖标准品套装

低聚果糖标准品套装
品牌:日本wako
规格:1套
单价:¥2693.0
货期:现货
客户群:食品、糖类、果汁饮品生产厂家和第三方检测机构。
低聚果糖是指2~5个果糖基为链节,以一个葡萄糖基为链的端基,以果糖基→果糖连接键为主体骨架连结形成的碳水化合物。即是指1~4个果糖基以β-2,1键连接在蔗糖的D-果糖基上而形成的蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)和蔗果六糖(GF5)的混合物。
低聚果糖是一种天然活性物质。甜度为蔗糖的0.3-0.6倍。既保持了蔗糖的纯正甜味性质,又比蔗糖甜味清爽。是具有调节肠道菌群,增殖双歧杆菌,促进钙的吸收,调节血脂,免疫调节,抗龋齿等保健功能的新型甜味剂,被誉为继抗生素时代后最具潜力的新一代添加剂——促生物质;在法国被称为原生素(PPE),已在乳制品、乳酸菌饮料、固体饮料、糖果、饼干、面包、果冻、泠饮等多种食品中应用。目前低聚果糖产品在日本、韩国、欧美国家及台湾地区已得到广泛应用,中国也与2009年推出了低聚果糖的国家标准
产品信息:
295-73401 Fructooligosaccharides Set   1套 2693.0  货期:现货
套装所包含的产品:
蔗果三糖(1-Kestose) 99.0+% (HPLC) 1 vial x 250mg
蔗果四糖(Nystose) 99.0+% (HPLC) 1 vial x 250mg
蔗果五糖(1F-Fructofuranosyl nystose) 80.0+ % (HPLC) 1 vial x 250 mg
用于饮料和食品中包含的低聚果糖成分分析
级别;HPLC用
保存:室温

wako低聚果糖标准品套装 蔗果三糖、四糖、五糖

 wako低聚果糖标准品套装 蔗果三糖、四糖、五糖

      许多植物储存碳水化合物以菊糖形式或者淀粉形式。菊糖是以β(2-1)键连接果糖形成典型的末端葡萄糖结构。天然的菊糖包含一系列结构,聚合度从3到60。低聚果糖由菊糖水解得到,具有小店聚合度。低聚果糖通过GFn(Glucose and Fructose数目)

低聚果糖是一种益生元,有益于人体健康。低聚果糖是一种天然活性物质。甜度为蔗糖的0.3-0.5倍。

       果聚糖广泛应用于农产品工业,菊糖和低聚果糖用于脂肪和糖,减少食品热量,比如冰淇淋、乳制品、糖果和烘焙食品。

低聚果糖标准品套装
低聚果糖是指2~5个果糖基为链节,以一个葡萄糖基为链的端基,以果糖基→果糖连接键为 主体骨架连结形成的碳水化合物。即是指1~4个果糖基以β-2,1键连接在蔗糖的D-果糖基上而形成的蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)和蔗果六糖(GF5)的混合物。
低聚果糖是一种天然活性物质。甜度为蔗糖的0.3-0.6倍。既保持了蔗糖的纯正甜味性质,又比蔗糖甜味清爽。是具有调节肠道菌群,增殖双歧杆菌,促进钙的吸收,调节血脂,免疫调节,抗龋齿等保健功能的新型甜味剂,被誉为继抗生素时代后最具潜力的新一代添加剂——促生物质;在法国被称为原生素(PPE),已在乳制品、乳酸菌饮料、固体饮料、糖果、饼干、面包、果冻、泠饮等多种食品中应用。目前低聚果糖产品在日本、韩国、欧美国家及台湾地区已得到广泛应用,中国也与2009年推出了低聚果糖的国家标准

低聚果糖套装
货号:295-73401
中文名称:蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖
英文名称:低聚果糖套装
规格:3*250mg

货号  品名  描述  检测项目  包装规格
295-73401    低聚果糖套装          Fructooligosaccharides Set  蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖  3*250mg