145-0014 145-0013-Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014

【简单介绍】

加工定制

Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014,Verification Side for Autmomated Cell Counter,20um.应用于TC20自动细胞计数仪。TC20 采用基于图像的分析方法,允许用户实时查看细胞,可通过目测证实 TC20 细胞计数器已正确识别细胞。

【详细说明】

Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014

TC20 自动细胞计数器采用富有创新的自动聚焦技术和精密的细胞计数算法,只需简单的一步即可在 30 秒内计算出哺乳动物细胞的准确数量。一旦插入载玻片,TC20 细胞计数器即可快速提供细胞总数(无论是否采用台盼蓝染色)并通过台盼蓝染料评估细胞活性。TC20 采用基于图像的分析方法,允许用户实时查看细胞,可通过目测证实 TC20 细胞计数器已正确识别细胞。

1450003 Cell Ctng Kit, Ctng Slides & Trypan Blue
1450005 THERMAL PRINTER, 100-240V, CC
1450007 DIRECT THRM LBL,2″x2″,500/ROLL
1450011 Cell Counting Slides, 30 2-well slides
1450014 VERIFICATION SLIDE,CELL COUNT.
1450015 Cell Ctng Slides, 5 x 30 2-well slides
1450016 Cell Ctng Slides, 10 x 30 2-well slides
1450017 Cell Ctng Slides, 20 x 30 2-well slides
1450018 Cell Ctng Slides, 30 x 30 2-well slides
1450019 Cell Ctng Slides, 40 x 30 2-well slides
1450020 Cell Ctng Slides, 80 x 30 2-well slides
1450013 Trypan Blue 1 x 1.5 ml
1450021 Trypan Blue 5 x 1.5 ml
1450022 Trypan Blue 10 x 1.5 ml

Bio-Rad伯乐细胞计数校正板1450014 

17-0891-01-GE Percoll 细胞分离液17-0891-02

【简单介绍】

GE Percoll 细胞分离液17-0891-02,1、在温和的条件下,分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子(可小至~70S),保持其存活和形态的完整性;2、对细胞无毒性;3、可调整到生理状态下的离子强度和pH;4、使用角转头,以中速离心,即可形成梯度;5、等渗梯度,密度Z大可达到1.3 g/ml。

【详细说明】

GE Percoll 细胞分离液17-0891-02

•  在温和的条件下,分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子(可小至~70S),保持其存活和形态的完整性

 •  对细胞无毒性

 •  可调整到生理状态下的离子强度和pH

 •  使用角转头,以中速离心,即可形成梯度

 •  等渗梯度,密度zui大可达到1.3 g/ml。

Percoll为低粘度的密度梯度介质,用于分离细胞、亚细胞结构和较大的病毒分子。粘度低,因此使用低的离心力(200-1000× g),只需几分钟就可形成梯度对细胞进行分离。Percoll供货时已经消毒,并且易于再次消毒。包装于易打开,并可再次密封的250ml和1升瓶中。

* 注意:Percoll仅限于体外研究

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂,助力血液恶性肿瘤研究

#流式细胞术细胞内染色方法介绍

流式细胞术及细胞内蛋白质生物标记物免疫染色技术,为细胞表型和功能特性的研究和临床诊断开辟了多种新的选择。事实上,某些细胞类型的表型鉴定需要同时标记细胞表面和细胞内的标记物。此外,典型膜分子的细胞质定位被证明是最可靠的谱系标记物,如未分化白血病的胞质CD3和CD22。因此,许多细胞生物学和功能研究中,细胞内免疫染色是必要的。为此,Nordic-MUbio公司提供了一类先进的FIX&PERM®细胞固定/透化试剂产品,使得我们在分析细胞内抗原时,变得与分析细胞表面抗原一样容易。

#FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒介绍

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒包含2种试剂:固定试剂(试剂A)和破膜试剂(试剂B)。首先用试剂A将细胞固定在悬浮液中,然后用试剂B渗透细胞膜,这个过程使抗体能够进入细胞内结构,并使细胞的形态散射特征保持完整,特定配方在减少背景的同时,允许同时添加破膜试剂和荧光染料标记抗体,用于膜蛋白及胞内成分的染色,如胞浆酶、核蛋白、癌蛋白、细胞因子、免疫球蛋白等。FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒用于所有市售流式细胞仪,可分析来自各种人类生物样本(血液,骨髓等)的正常和恶性白细胞群。

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂,助力血液恶性肿瘤研究

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂系列产品列表

货号

产品名称

规格

产品介绍

GAS-002

FIX&PERM® Kit

8*5ml

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒,适用于使用流式细胞术分析来自各种人类生物样本(血液,骨髓等)的正常和恶性白细胞群。

GSA-002-1

FIX&PERM® Kit 1000

2*100ml

GAS-002M

FIX&PERM® Sample Kit

2*5ml

GSA-002A-1

FIX&PERM® Solution A(Fix)

1*100ml

FIX&PERM® Kit中的固定试剂A,用于细胞固定

GSA-002B-1

FIX&PERM® Solution B(Perm)

1*100ml

FIX&PERM® Kit中的破膜试剂B,用于渗透细胞膜

所有FIX&PERM®系列产品均符合CE认证标准

# FIX&PERM®细胞固定/透化试剂优势

  • 温和固定细胞,保留其流式细胞仪散点特性
  • 可同时表征细胞内和细胞表面标志物
  • 整个过程不到一小时,随时分析或储存24小时
  • 严格的QC程序,用质控血样测定每批的质量,分析比较得到白细胞群的散点特征,保证批间结果的一致性和可靠性
  • 适用于一系列针对细胞膜和细胞内抗原的单克隆抗体

#FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒在血液恶性肿瘤研究中的应用

血液恶性肿瘤,如白血病和淋巴瘤,是一种始于骨髓等血液形成组织细胞的癌症。Ki-67是位于细胞核内的细胞增殖标记物,在这些血源性癌症患者中表达水平对临床有一定指示作用。在组织病理学中常用免疫组织化学方法检测Ki-67,而流式细胞术应用的较少,因此在不同来源的骨髓细胞群中可检测到的参数有限。 Nies等人利用流式细胞术分析了解Ki-67在癌症患者中的表达,通过对Ki-67在骨髓造血、单核细胞生成和造血细胞成熟阶段的表达情况分析,建立健康个体对于不同造血细胞谱系的参考值。采用FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒结合Ki-67免疫染色和流式细胞仪软件测定不同成熟途径中细胞的增殖变化。因此,可以在不同的血细胞谱系和成熟阶段确定这个细胞周期参数的参考值。

上海金畔生物科技有限公司作为专业服务中国生命科学领域16年的供应商,以专业和优质的服务赢得了众多客户的支持和信赖!目前已成为多家世界知名跨国企业中国区研发和生产基地、制药企业与诊断企业以及各大高校与科研院所官方采购平台的指定供应商。其中上海金畔生物科技有限公司代理的Nordic-MUbio品牌FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒广泛应用于医院和高校等科研机构,小编汇总了部分适用于FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒的抗体产品表,更多FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒产品相关信息欢迎致电上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765或登录官网www.jinpanbio.cn查询和了解。

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂盒适用的部分小鼠抗人单克隆抗体产品列表

Antigen

Clone

Isotype

Format

Quantity

Cat. No.

CD3

UCHT1

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4011

FITC-labeled

100 tests

GM-4012

PE-labeled

100 tests

GM-4013

CD22

RFB4

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4051

FITC-labeled

100 tests

GM-4052

PE-labeled

100 tests

GM-4053

MPO-C2

8E6

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4191

FITC-labeled

100 tests

GM-4192

PE-labeled

100 tests

GM-4193

Lactoferrin

4C5

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4111

PE-labeled

100 tests

GM-4113

Lysozyme

LZ-2

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4131

FITC-labeled

100 tests

GM-4132

CD68

Ki-M7

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4152

 

 

FIX&PERM®细胞固定/透化试剂,助力血液恶性肿瘤研究

Nordic-MUbio是荷兰的一家知名的免疫学试剂生产厂家,2013年2月14日,Nordic收购MUbio并正式更名为Nordic-MUbio。同年12月,收购An Der Grub Bio Research GmbH ( ADG ),增加FIX&PERM®细胞固定/透化试剂产品线。Nordic-MUbio严格遵守IS09001标准生产高质量的抗体,主要包括针对细胞粘附蛋白、核蛋白和骨架蛋白等抗体,80%以上的抗体经过冷冻组织免疫组化检测,近70%的产品通过流式细胞术验证,50%的产品通过WB验证。同时Nordic-MUbio也是斑马鱼抗体开发的引领者,拥有50多种可用于斑马鱼荧光检测的抗体。更多免疫学产品信息欢迎致电上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765或登录官网www.jinpanbio.cn查询和了解。

参考文献:

  1. Nies, K.P.H. et al. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. 2018 93(11):1097-1105. PMID: 30176186.
  2. Integration of the Ki-67 proliferation index into the Ogata score improves its diagnostic sensitivity for low-grade myelodysplastic syndromes. Leuk Res. 2022 Feb;113:106789. doi: 10.1016/j.leukres.2022.106789.
  3. Optimized gating strategy and supporting flow cytometry data for the determination of the Ki-67 proliferation index in the diagnosis of myelodysplastic syndrome. Data Brief. 2022 Feb 22;41:107976. doi: 10.1016/j.dib.2022.107976.
  4. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. (2018) 93, 1097-1105 . doi: 10.1002/cyto.a.23564

支原体污染解决方案, 给细胞更多的安全与保护

什么是支原体?

支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径 0.2μm)并独立生活的微生物,没有细胞壁,表面由胞质膜构成,约有 1%的支原体可通过滤菌器。支原体污染细胞后,培养液可不发生混浊,多数情况下细胞病理变化轻微或不显著。细微变化也可由于传代、换液而缓解,因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢,甚至从培养器皿脱落。支原体污染细胞后会影响下游试验结果。

为什么要重视细胞培养中的支原体污染?

1、污染率高:在细胞研究领域,支原体是臭名昭著的污染源,二十世纪九十年代的支原体污染率是四分之一,而目前有仍然有超过十分之一的基因表达研究(许多曾发表在顶尖杂志上),表现出支原体污染的迹象;

2、影响日趋严重:虽然支原体污染并不一定意味着研究结果无效,但它会影响数百个基因的表达,并与细胞竞争营养阻碍细胞的生长。在目前测试的一组受污染的数据中(淋巴瘤细胞),已经鉴定出 61 个被支原体改变的基因,干扰了实验结果。这无疑是对时间,资源,经费很大的浪费;

3、难察觉:支原体污染完全是不留痕迹的,污染后的细胞生长速率一般并未发生显著的影响,无法用肉眼识别,除非采用专门的支原体检测方法检测;

4、污染源多:“草率操作”、细胞系流通的交叉污染、操作人员自身都是很重要的污染源;

5、难去除:支原体体积小,无细胞壁,约有 1%的支原体可通过过滤器,且一般抗生素根本无法有效抑制或者去除支原体,另外,部分抗生素使用后会对细胞产生敏感效果,从而影响细胞的状态;

6、重视程度日益增加:学术杂志发表实验结果需验证支原体污染影响,在国际上,支原体污染检测已经日益成为细胞培养污染常规检测之一,同时也是有效规避支原体污染的重要方法之一。

世界性难题!!!!Nature 収布癿文献表明细胞研究领域中存在严重的支原体污染问题

Ewen Callaway. Contamination hits cell work. Nature, 29 July 2014; doi:10.1038/511518a


如何保护细胞细胞不受支原体的污染?

上海金畔生物科技有限公司代理的德国 PanReac Applichem 所提供 Myco 系列支原体清除产品可以直接整合到质膜上破坏支原体的完整性,从而有效地清除支原体污染,而且没有细胞毒性。另有支原体检测与预防系列产品可以给细胞提供更多的安全保护。

一、AppliChem 支原体清除系列

对于普通细胞系,遭受污染以后可以通过重新复苏,购买等途径更换样本,但是对于一些较难获得的珍贵样本,如干细胞,原代细胞,经过特殊处理的,或订购困难的细胞,一旦遭受支原体污染后,一定要马上进行处理。AppliChem研发的支原体清除的 Myco 系列产品,可以直接整合到质膜上破坏支原体的完整性,从而有效的清除支原体污染,并可以针对不同程度,不同细胞样本进行针对性处理,处理过程简单,对细胞不会造成任何副作用。

支原体污染解决方案, 给细胞更多的安全与保护

名称

主要成分

适用样本

使用斱法

Myco-3

(货号 A5240)

环丙沙星

贴壁细胞,可清除大多数支原体污染

100 倍稀释加入培养基,每 2-3 天换液,连续处理14天

Myco-1

(货号 A5222)

泰妙菌素

贴壁细胞,配合能解决顽固型支原体或者使用 Myco-3 处理停用后又出现支原体污染的情况

100 倍稀释加入培养基,与 Myco-2 配合使用。使用 Myco-1 处理 4 天后换 Myco-2 处理 3 天,如此重复 2-3 次即可

Myco-2

(货号 A5233)

二甲胺四环素

二、AppliChem 细胞污染预防系列

有效保护细胞的最好方式是对于细胞培养环境的预防,如工作环境定期消毒处理,严格实验操作,保证器皿无菌等各方面。在实验室中,CO2 培养箱,CO2 培养箱水盘,水浴锅是非常重要的污染源。AppliChem 研发有系列污染预防系列产品专门针对这 3 大污染源,可有效预防真菌(及芽孢)、细菌、病毒等污染。使用方便,无腐蚀性,安全高效。
支原体污染解决方案, 给细胞更多的安全与保护

名称

适用环境

预防微生物

使用斱法

Incubator-Clean

(货号 A5230)

CO2 培养箱, 工作等台等

支原体,真菌及芽孢、细菌、病毒(包拪 HIV,HBV 等)

即用型,喷雾处理完全湿润即可,无需转移出细胞,建议每 2 周处理一次

Incuwater-Clean

(货号 A5219)

C02 培养箱水盘

支原体,真菌及芽孢、细菌、病

毒(包拪 HIV,HBV 等)

100 倍稀释加入水盘灭菌水中,建议每 2-4 周更换灭菌水

Aquabator-Clean

(货号 A9390)

水浴锅

细菌,真菌

100 倍稀释加入水浴锅,建议每 1-2 周吐水浴锅加入一次,每 4-6 周给水浴锅更换一次水

三、Applichem 支原体检测系列

传统的支原体检测方法包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、DNA 荧光染色检测以及 PCR 检测,除 PCR 检测方法以外,其他检测方法大多耗时长,要求检测人员具有丰富的经验,并且无法获得足够的灵敏度和特异性,对于一些稀有的支原体亚种无法有效检测。

AppliChem 设计的支原体检测试剂盒系列产品均是基于 PCR 方法,根据支原体 16S rRNA 保守序列设计引物,经过 PCR 反应扩增其 16S rRNA 片段,后采用琼脂糖电泳方法检测 270bp 条带。相对传统方法而言,具有强大优势:

  • 高灵敏度:敏感度高达 100~1000CFU/ml,仅需  要 0.5 – 1.0 ml 细胞上清样本即可检测;
  • 检测品种广泛:可检测常规品种,同时对于稀有  亚 种 也 能 同 效 检 测 , 如 M. pneumoniae,  Acholeplasma laidlawii, M. synoviae, M. pulmonis,M.bovis,几乎覆盖自然界 80 余个品种;
  • 快速:操作时间只需 30 分钟,全程 5 个小时内  即可得到检测结果;
  • 可靠:试剂盒中包括有阳性对照 DNA,可保证  实验结果的可重复性,减小因操作带来的误差;
  • 安全性:无支原体培养过程,有效避免污染扩大。

支原体污染解决方案, 给细胞更多的安全与保护

支原体污染解决方案, 给细胞更多的安全与保护

产品型号

检测方法

适用仪器

试剂盒组分

PCR Mycoplasma Test Kit

(货号 A3744)

普通 PCR-电​泳检测

普通​ PCR 仪器

Reaction Mix Buffer Solution

Positive Template Control

qPCR Mycoplasma Test Kit

(货号 A9019)

荧光定量 PCR

LightCycler®1.2, 1.5, 2.0, 480, Rotor-Gene™ 3000, 6000, ABI Prism® 7000, iCycler iQ®, iQ™5, Opticon 2, Chromo 4, MX300P®, MX4000®.

Primer/Probe/Nucleotide Mix(RED) Rehydration Buffer(BLUE)

Positive Control DNA(GREEN) Internal Control DNA(YELLOW) PCR Grade Water(WHITE)

上海金畔生物科技有限公司是PanReac Applichem 中国一级代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

Cell Biolabs代理|一级代理|

Cell Biolabs代理 上海金畔

Cell Biolabs公司坐落于美国加利福尼亚州圣地亚哥市,一直致力于开发生命科学研究领域的技术和工具,并将所开发的创新性技术成果商业化。Cell Biolabs孜孜不倦专注于提供完善的产品,以期使细胞功能和疾病机制研究达到新高度。Cell Biolabs公司的产品*特色并且处于行业前沿水平。众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs产品。Cell Biolabs核心产品线包括:细胞分析(血管生成、自噬、细胞粘附、细胞迁移、细胞转化、肿瘤细胞分离等),病毒表达和纯化试剂盒(AAV、ADV、Lentiviral expression、Retroviral expression),氧化应激与损伤分析(DNA损伤与修复、活性氧检测、蛋白质氧化、脂过氧化等),代谢分析(脂蛋白分析、肾功能分析),细胞信号传导和蛋白生物学(G蛋白信号传导、激酶分析、报告基因分析等)。

Cell Biolabs核心产品线:

  1. 细胞分析Cell Based Assays

Cell Biolabs提供多种细胞为基础的检测产品CytoSelectTM系列,具有高准确性和高通量特点。每一个基于细胞的特色检测产品都可实现完全定量的结果,而且不需要人工细胞计数。此外,Cell Biolabs还正在积极开发新的基于细胞的检测方法,以促进癌症、免疫学和干细胞领域的研究。

Cell Biolabs细胞分析产品包括:血管生成;细胞粘附;细胞共培养系统;细胞收缩分析;细胞自噬、增殖、衰老、毒性、缺氧等分析;细胞迁移、侵袭及伤口愈合;细胞转化;吞噬分析;干细胞、肿瘤细胞研究等。

  1. 细胞信号转导与蛋白生物学Cell Signaling and Protein Biology
  2. Cell Biolabs可提供多种具有特色的,创新的化验和试剂,提升科研效率。此外,Cell Biolabs还开发了用于研究蛋白质磷酸化和蛋白表达的新型试剂和试剂盒。

Cell Biolabs细胞信号转导与蛋白生物学产品包括:CRISPR / Cas系统检测试剂盒;特色标签抗体与检测试剂盒;激酶分析试剂盒;蛋白检测工具;报告分子检测;血清蛋白检测;小G蛋白检测/G蛋白信号转导(Small GTPase/ G-Protein Signaling)等。

  1. 代谢研究Metabolism Research

Cell Biolabs提供多种代谢领域研究相关的检测试剂盒、蛋白质和抗体,包括脂代谢、氨基酸代谢和碳水化合物代谢。另外,Cell Biolabs的肾功能检测试剂盒还可用于评估肾功能和相关疾病。

Cell Biolabs代谢研究产品包括:酒精/乙醇分析;氨基酸代谢分析;碳水化合物代谢分析;离子与辅助因子分析;脂代谢分析;核酸代谢分析;肾功能检测试剂盒等。

  1. 氧化应激Oxidative & Cellular Stress
  2. (ROS)而引起的,能够破坏细胞内一些生物活性分子,包括DNA、RNA、蛋白质和脂质,进而影响细胞正常生理功能的状态。氧化应激与自然老化过程以及多种疾病状态有关,包括肿瘤、代谢病、神经系统疾病(如阿尔兹海默病和帕金森病)等。

Cell Biolabs氧化应激产品包括:抗氧化分析;DNA/RNA损伤与修复分析;脂质过氧化分析;氧化酶/过氧化物酶活性检测;蛋白质氧化/硝化;活性氧(ROS)检测等。

  1. 病原体和毒素检测Pathogen and Toxin Assays

Cell Biolabs提供科研级的病原体和毒素检测试剂盒,在基础研究中可以更加方便、高效检测常见病毒蛋白与毒素因子。

Cell Biolabs病原体和毒素检测产品包括:BPDA DNA加合物、BPDA蛋白加合物、双酚A(BPA)等毒素检测试剂盒;乙肝病毒(HBV)、丙肝病毒(HCV)、人乳头瘤病毒(HPV)、小鼠白血病病毒(MuLV)等病毒蛋白检测试剂盒。

  1. 重组病毒表达Viral Expression

Cell Biolabs提供常用于细胞转导的四种病毒载体及相关产品,包括腺病毒(Adenovirus)、腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒(Retrovirus)和慢病毒(Lentivirus)。

Cell Biolabs重组病毒表达产品包括:腺病毒(Adenovirus)、腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒(Retrovirus)和慢病毒(Lentivirus)这四种常用重组病毒的全套载体质粒;重组病毒纯化试剂盒;重组病毒滴度检测试剂盒以及重组病毒转导试剂盒等。

Cell Biolabs代理 上海金畔

上海金畔科技是PanReac AppliChem代理,Phytotech代理,seracare KPL代理,博百欧代理,Alzet代理,Lifespan代理,Jena Bioscience代理,Cell Biolabs代理,Mybiosource代理,Mirus代理,PCT代理,Advanced Biomatrix代理,Cygnus代理,Pfanstiehl代理,Kerry代理, Agrisera代理,Everest Biotech代理,Exalpha代理,Nordic-MUbio代理

上海金畔是Cell Biolabs代理,Cell Biolabs中国代理,Cell Biolabs北京代理,Cell Biolabs一级代理,Cell Biolabs一级代理,Cell Biolabs*代理,Cell Biolabs经销,Cell Biolabs上海代理,Cell Biolabs全国代理,Cell Biolabs西北代理,Cell Biolabs西南代理,Cell Biolabs东北代理,Cell Biolabs华北代理,Cell Biolabs华南代理,Cell Biolabs华中代理

上海金畔生物科技有限公司上海金畔生物科技有限公司是Cell Biolabs中国区代理,提供完善的Cell Biolabs售前售后服务支持。

关于细胞凋亡,你应该知道这些!

细胞凋亡(Apoptosis),又称程序性死亡,是身体用来消除衰老和不必要细胞的一个有组织的过程。细胞凋亡是生命的重要组成部分,这一过程对正常胚胎发育、子宫内膜循环和产后子宫肌萎缩具有重要意义。

凋亡的特征具有明显的形态变化以及特定caspase和线粒体控制通路的激活。凋亡细胞出现细胞体积缩小,与周围细胞脱离,然后细胞质密度增加,通透性改变,染色质浓缩和核碎裂,并显示出称为膜起泡的典型变形的膜,膜内侧磷酯酰丝氨酸外翻到膜表面,胞膜结构仍然完整,无内容物外溢,不引起周围的炎症反映。膜起泡可导致在垂死细胞边缘形成小囊泡,称为凋亡小体。凋亡小体可迅速被周围的吞噬细胞吞噬。凋亡可以通过内在或外在通路触发,内在通路可以通过细胞应激、DNA损伤、发育信号、存活因子缺失被激活,外在通路则是通过检测到来自其他细胞的细胞外死亡信号来触发的。

关于细胞凋亡,你应该知道这些!

凋亡是多基因严格控制的过程,凋亡通路涉及许多保守的信号转导蛋白,并取决于线粒体膜的完整性。Bcl-2家族中蛋白质活性之间的平衡严格控制这一过程,Bcl-2家族蛋白包含凋亡因子Bax、Bak、Bad、Bid、Puma、Bim和Noxa,以及抗凋亡因子Bcl-2、Bcl-xl、Bcl-w、Mcl-1构成。含有BH3结构域的促凋亡家族成员(如Bad、Bid)在细胞应激期间被激活时,就会触发凋亡。然后促凋亡蛋白Bax和Bak诱导线粒体外膜通透性的变化,导致细胞色素c从线粒体释放。然后,游离细胞色素c与凋亡小体Apaf-1形成复合物,该复合物激活caspase-9,后者再激活caspase-3和其它下游caspase,触发一系列凋亡事件。Bax被认为与另一促凋亡因子Bak具有显著的功能同源性,有研究表明,破坏Bax或Bak对细胞死亡影响不大,但同时缺乏这两个基因的细胞显示凋亡能力降低[1]。抗凋亡因子可阻遏细胞凋亡,延长细胞寿命,这些蛋白在癌细胞中呈过度表达。

Fas又称CD95,是由325个氨基酸组成的受体分子,它与其配体FASLG(CD178)结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。Fas具有特殊的死亡结构域(DD,death domain),三聚化的Fas和FASLG结合后,使三个DD相聚成簇,吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。FADD是死亡信号转录中的一个连接蛋白,它由两部分组成:C端(DD结构域)和N端(DED)部分。C端与Fas的DD结构域结合,N端连接另一个带有DED的后续成分,由此引起N端DED随即与无活性的caspase-8发生反应,进而引起caspases级联反应,诱发细胞凋亡。Fas/FASLG涉及许多癌症和免疫疾病的发病机制,如多发性硬化症[2]。

关于细胞凋亡,你应该知道这些!

内在和外在通路最终都取决于caspase家族特定成员的蛋白酶活性。Caspase活化具有两种机制,即同源活化和异源活化,一般后者是前者的结果。发生同源活化的caspase又被称为启动caspase(initiator caspase),包括caspase-8,-9,-10,-2,和-12。通常caspase-8,-10,-2介导死亡受体通路的细胞凋亡,分别被募集到Fas和TNFR1复合物;而caspase-9则参与线粒体通路的细胞凋亡,被募集到Cytc/d ATP/Apaf-1组成的凋亡体。Caspase-10裂解并激活caspase-3和-7,而其本身则由caspase-8加工,该基因突变与IIA型自身免疫淋巴增生性综合征、非霍奇金淋巴瘤和胃癌有关。同源活化是细胞凋亡过程中最早发生的caspase水解活化事件,启动caspase活化后,即开启细胞内的死亡程序,通过异源活化方式水解下游caspase将凋亡信号放大。异源活化的caspase又被称为执行caspase(executioner caspase),包括caspase-3,-6,-7。Caspase-3裂解并激活caspase-6,-7,本身则由caspase-8,-9,-10加工。执行caspase不像启动caspase,不能被募集或结合复合体,它们必须依赖启动caspase才能被活化。

上海金畔生物科技有限公司代理的LifeSpan BioSciences(以下简称LifeSpan)为广大客户提供细胞凋亡研究相关检测试剂盒及抗体。除下面列表外,LifeSpan还提供细胞凋亡相关其它蛋白TNF、APAF-1、ROCK1、Pannexin 1、XIAP、Annexin、TP53等的产品。

品牌

货号

品名

LifeSpan

LS-F16937

Human BAX (Custom ELISA) ELISA Kit

LifeSpan

LS-F20858

Human BCL2 / Bcl-2 (Sandwich ELISA) ELISA Kit

LifeSpan

LS-F11021

Human CASP8 / Caspase 8 (Sandwich ELISA) ELISA Kit

LifeSpan

LS-F35447

Human CASP10 / Caspase 10 (Sandwich ELISA) ELISA Kit

LifeSpan

LS-F11014

Human CASP3 / Caspase 3 (Sandwich ELISA) ELISA Kit

LifeSpan

LS-B16617

PathPlusTM BCL2 / Bcl-2 Antibody (aa41-54, clone 124)

LifeSpan

LS-B2005

PathPlusTM Polyclonal Rabbit anti‑Mouse LMNA / Lamin A+C Antibody

LifeSpan

LS-B15991

IHC-plus™ CYCS / Cytochrome c Antibody

LifeSpan

LS-C21950

CD95 / FAS Antibody

LifeSpan

LS-B16569

PathPlusTM CASP10 / Caspase 10 Antibody

LifeSpan

LS-B3404

PathPlusTM CASP3 / Caspase 3 Antibody

LifeSpan是全球知名抗体、蛋白及ELISA试剂盒生产公司,成立于1995年,主要提供免疫病理产品,特别是药物靶点蛋白抗体、蛋白定位及免疫组化等产品。LifeSpan产品线丰富;检测物种齐全,包括人、猴、大鼠、小鼠、马、猪、羊等30多种;种类繁多,包括细菌抗体和小分子化合物抗体等稀有抗体;标记类型齐全;具有良好的售后服务。上海金畔作为LifeSpan品牌中国代理,为广大客户提供一站式售前售后服务。

[1]Mitochondrial biogenesis fails in secondary biliary cirrhosis in rats leading to mitochondrial DNA depletion and deletions. Arduini A, Serviddio G, Escobar J, Tormos AM, Bellanti F, Via J, Monsalve M, Sastre J. American journal of physiology. Gastrointestinal and liver physiology. 2011 301:G119-27. [PubMed:21415417]

[2] Cell Death and Differentiation. 11 Suppl 1 (Suppl 1): S23–7, PMID: 15143352; Nature. 465 (7297): 492–6, PMID: 20505730; PLoS One. 2013 Aug 7;8(8):e71553, PMID: 23940767; Lab Invest. 1998 Apr;78(4):401-11, PMID: 9564885

多肽合成技术进展及误区

生物活性多肽在内源性物质中占有非常重要的地位,除酶、受体、金属蛋白等生物大分子外,许多合成或分离的多肽对生理过程或病理过程,对疾病的发生、发展或治疗过程有重要意义。多肽中的氨基酸残基彼此以酰胺键(也称肽键)相连接。一般来说,含有的氨基酸少于10个的肽段就称作寡肽,超过的就称为多肽。多肽与蛋白质只有肽链长短之别,二者间并没有严格的区分。

多肽合成技术进展及误区伴随着分子生物学、生物化学技术的飞速发展,多肽研究取得了惊人的的飞跃。人们发现存在于生物体的多肽有数万种,并且发现所有的细胞均能合成多肽。同时,几乎所有的细胞也都受多肽调节,它涉及激素、神经、细胞生长与生殖等各个领域。事实上,肽类药物开发与应用已走出科学家们的实验室,变成了现实,并发挥着其独特的功效。例如,神经紧张肽(NT)能降低血压,对肠和子宫具有收缩作用;促甲状腺素释放激素(TRH)是一种能促进产妇乳汁分泌的多肽;能治疗糖尿病、胃溃疡、胰腺炎的多肽是一种环状的14肽;临床上常用的催产素是一种多肽;近日来在中国及日本已开始使用的糖肽辅助治疗肿瘤,其作用机理是使淋巴系统活化等等。应用多肽技术开发的医用蛋白质芯片(肽芯片)只有指甲盖大小,放置了与肾炎、胃溃疡和胃癌等相关的抗原分子,只要通过芯片阅读仪便可检测到有关疾病的功能状态与变异情况。肽芯片的广泛应用,已在医学临床检测业引发一场技术革命。

自从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成(SPPS)方法以来,经过不断的改进和完善,到今天这个方法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,许多普通的单位都可以通过现成的多肽合成方案进行合成。对于新手来说,了解一定的多肽合成的原理,对于认识多肽合成的过程,排除合成中碰到的问题都是有好处的。简单来说,最基本的程序化的多肽合成工艺无非就是树脂溶胀、脱保护、偶联、再脱保护、再偶联……其他特殊的合成都是在这个基础上建立的。对于多肽合成的新手来说,有几个误区需要注意:

多肽合成误区一:合成时间越长越好。多肽合成的效率经过多年的摸索和优化,每一步的合成效率在短时间内都能达到99%以上,过长的反应时间对正面的反应产率提高非常有限,却大大增加了副反应发生的机率,所以过长的反应时间并不好。

多肽合成误区二:万能的切肽试剂。大部分的多肽都可以用一套切肽试剂的组合从树脂上切下来,而对于有特殊侧链保护的氨基酸,往往需要调整这种组合,而对于没有侧链保护的多肽序列,是需要加入98%TFA和2%水的溶液就可以完成,要灵活运用切肽试剂的组合。

多肽合成误区三:氨基酸的侧链保护都一样。带有活泼侧链的氨基酸在合成中需要保护,根据侧链的不同,保护基也有不同的选择。选择适当的保护基可以有效地减少合成的难度。多肽合成技术进展及误区

美国Cali-Bio拥有多肽合成过程中最先进的技术和工艺,已经为美国众多的科研机构、大专院校及生物公司成功合成了数以万计的高纯度的多肽,应用于抗体制备、药物研发及多肽疫苗的研制等各个领域。上海金畔生物科技有限公司将Cali-Bio的多肽合成服务引进中国,结合中国国情,旨在为中国客户提供国外多肽合成的品质、享有国内合成价格的特殊服务。为回馈客户对上海金畔生物科技有限公司产品和服务的支持,现提供美国Cali-Bio多肽合成服务85折特价回馈!详情请点击:多肽合成-美国Cali-Bio多肽合成服务85折特价回馈

如果您对上述多肽合成服务感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司(上海请致电021-63599871/63599872到上海金畔生物科技有限公司上海分公司)垂询相关的定制合成服务,我们会为您完成订单,上海金畔生物科技有限公司会为您做的更多!

六月新品上市,先睹为快

Mirus新品电转仪及配套产品上市

电转仪 Ingenio® EZporator® Electroporation System (货号MIR 51000)

六月新品上市,先睹为快

一款操作简单,性价比高,可以高效转染哺乳动物细胞和昆虫细胞的开放型电转染平台。

产品特点:

  • 适用于任意细胞系的转染,尤其是常规方法难以转染的细胞,如原代细胞、干细胞、神经细胞等;

  • 仅需一款电转液就可以用于各种细胞,方便高效且经济实惠;

  • 程序可灵活调节,便于针对不同细胞优化最佳电转条件;

  • 仪器附赠电转液和电转杯,可以做8次电转染实验。

电转染试剂(盒)及耗材

六月新品上市,先睹为快 六月新品上市,先睹为快

适用仪器:Ingenio® EZporator®,Lonza Amaxa®,BioRad,Nucleofector® II/2b,Harvard-BTX® 等,基本覆盖常用电转仪品牌。

产品特点:

  • 相比仪器原装配套试剂盒,价格便宜货期稳定;

  • 转染效率不错;

  • 对细胞有保护作用;

  • 适用范围:用常规方法难转染的细胞系,如神经细胞、原代细胞或干细胞等,转染效果显著。



Phyrtotech新品培养基上市

X6 Medium(货号:X8458)

葡萄维持培养基,根据2001年V.vinifera L. cv.Thompson Seedless发表文章而制定。

BDS Basal Medium(货号:B1459)

B5改良培养基,包含Dustan和Short在1977年发表文章中提到的大量和微量元素,可用于洋葱组织培养。

BABI Basal Medium(货号:B1471)

B5改良培养基,包含Greenway在2012年发表文章中提到的大量元素、微量元素和维生素。可用于玉米、水稻、棉花、烟草、洋葱和覆盆子等多种植物组织培养。

高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

在科研和临床诊断中,因流式细胞术可以对细胞内的生物标志物进行免疫染色和鉴定,其在鉴定细胞表型和功能中的应用已越来越重要。在细胞表型鉴定工作中,由于一些典型的膜分子定位在细胞质内,如未分化白细胞的CD3和CD22定位在细胞质中,因此除了对细胞表面分子的染色,细胞内生物分子的免疫染色是必不可少的。

高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

为了使细胞内生物分子的免疫染色达到更好的效果,Nordic-MUbio推出了一款适用于流式细胞固定和通透的试剂盒FIX&PERM®,该试剂盒可以同时对细胞表面和细胞内的生物标志物进行免疫染色,将整个流式细胞免疫染色时间缩短到1h以内,为细胞内生物分子的鉴定提供了一种更好、更高效的选择。有研究者使用FIX&PERM®试剂盒,对多种细胞表面CD分子和细胞内Ki-67(一种细胞内的增殖标志物)进行双重染色,通过流式分析增殖细胞(Ki-67阳性)数量,来证明疾病状态之间存在着显著差异。

FIX&PERM®试剂盒由A液和B液两个试剂构成,其中A液能够温和地固定细胞,B液则起到通透细胞膜的作用。FIX&PERM®试剂盒的独特配方能有效地降低背景,把通透液和抗体一起加入细胞,还能让抗体更高效地穿过细胞膜,与细胞内生物分子结合(如细胞质或核酶、癌蛋白、细胞因子、免疫球蛋白等)。

FIX&PERM® Cell Fixation and Permeabilization Kit

货号: GAS-002

规格:8 x 5ml

应用:Flow Cytometry

FIX&PERM®优势特点:

  • 固定细胞更加温和,保持细胞在流式细胞仪中的分散性;
  • 可同时对细胞内和细胞表面的生物分子进行双重染色;
  • 用时更短——-整个处理过程可在1h内完成,处理后的细胞可以立即检测,也可以暂时保存后检测(不超过24h);
  • 质控更严格——每个批次产品都要用已标定的血液样本检测,通过比较获得的白细胞分散性特征来确保不同批次试剂盒的一致性和稳定性。
  • FIX&PERM®试剂盒还可搭配Nordic-MUbio的细胞内生物标志物抗体,使流式检测效果更佳。

FIX&PERM®使用方法

  1. 取50µl待测样品(如全血、骨髓或单核细胞悬液)于5ml离心管中;
  2. 加入100µl A液(固定液),室温孵育15min;
  3. 加入5ml PBS,300g离心5min;
  4. 移除上清,加入100µl B液(通透液)和20µl流式抗体,低速涡旋1-2s;
  5. 室温孵育15min;
  6. 参照第3步,用PBS再洗一遍细胞;
  7. 移除上清,用鞘液重悬细胞后做流式分析;如不能立即检测,可用0.5ml 1.0%甲醛重悬细胞,2-8℃避光保存,并在24h内检测。

Nordi-MUbio热销单克隆流式抗体

Nordic-MUbio还提供了一些列小鼠抗人PE/FITC耦连单克隆流式抗体,与FIX&PERM®试剂盒配合使用效果更佳。

抗原

克隆

IgG类型

抗体偶联物

规格

货号

CD3

UCHT1

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4011

FITC-labeled

100 tests

GM-4012

PE-labeled

100 tests

GM-4013

CD22

RFB4

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4051

FITC-labeled

100 tests

GM-4052

PE-labeled

100 tests

GM-4053

Lactoferrin

4C5

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4111

PE-labeled

100 tests

GM-4113

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4191

(MPO-C2)

FITC-labeled

100 tests

GM-4192

PE-labeled

100 tests

GM-4193

Lysozyme

LZ-2

IgG1

Purified

0.2 mg

GM-4131

FITC-labeled

100 tests

GM-4132

CD68

Ki-M7

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4152

IL-1 beta

FIB3

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4162

IFN-gamma

GZ4

IgG1

FITC-labeled

100 tests

GM-4172

Negative control

Vl-AP

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-201

PE-labeled

50 tests

Lysozyme

LZ-2

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-206

Lactoferrin

4C5

IgG1

PE-labeled

50 tests

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-212

Lactoferrin

4C5

IgG1

PE-labeled

50 tests

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-213

CD3

UCHT1

IgG1

PE-labeled

50 tests

Myeloperoxidase

8E6

IgG1

FITC-labeled

50 tests

GIC-214

CD22

RFB4

IgG1

PE-labeled

50 tests

高效实现细胞表面与胞内蛋白共染的流式细胞处理方法

图1  Flow cytrometric analysis of normal bone marrow (BM) after fixation and pemeabilization using GAS-002, followed by immunostaining for lactoferrin and MPO-C2.

图2  Immunostaining with Nordic-MUbio CD22-PE conjugate of undifferentiated leukemia cells of B-ALL type.

图3  Immunostaining with Nordic-MUbio CD3-PE conjugate of surface CD3-negative undifferentiated leukemia cells of T-ALL type.

上海金畔生物科技有限公司作为一站式生物试剂采购供应商,致力于整合全球优质资源,为生物研究领域客户提供丰富的产品与专业的服务。上海金畔是Nordic-MUbio品牌中国区一级代理,为客户提供完善的技术支持与售后服务。如对上述产品感兴趣,欢迎随时拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录上海金畔生物科技有限公司官网www.jinpanbio.cn查询订购。

参考文献:

Nies KPH, Kraaijvanger R, Lindelauf KHK, Drent RJMR, Rutten RMJ, Ramaekers FCS, Leers MPG. Determination of the proliferative fractions in differentiating hematopoietic cell lineages of normal bone marrow. Cytometry A. (2018) 93, 1097-1105 . doi: 10.1002/cyto.a.23564.

免疫组化试验抗体选择及常用染色方法

免疫组化试验抗体选择及常用染色方法一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)
免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性和特异性,其特点是将形态学改变与功能、代谢变化结合起来,直接在组织切片,细胞涂片或培养细胞爬片上定位一些蛋白质和多肽类物质的存在,并可精确到亚细胞结构水平,结合电子计算机图像分析系统或激光扫描共聚集显微术等技术,对被检物质进行定量分析。
免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
石蜡切片为什么要做抗原修复?有哪些方法
石蜡切片标本均用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。
常用的抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。

二、免疫组化实验用抗体的选择
1、一抗选择要点
(1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆抗体特异性强,但亲和力相对小,检测抗原灵敏度相对较低;而多克隆抗体特异性稍弱,抗体的亲和力强,灵敏度高,但易出现非特异性染色(可以通过封闭等有所避免)。
(2)种属来源。一般家兔来源的抗体多是多克隆;而小鼠来源的抗体多是单克隆,但也有另外。这条主要要与后面的二抗来源相匹配。
(3)实验目的是检测什么种属的抗原,即species reactivity。这一点很重要,一般说明书上都有注明,如小鼠Ms、大鼠Rat、人Hum等等。
(4)能否做免疫组化。一般一抗说明书都会注明做WB、IHC、ICC、IF等,建议最好选择注明的抗体,因为一般都是经过文章证明。
(5)检测标本类型。用于检测石蜡切片还是冰冻切片,一般能做石蜡切片的抗体,可能都可以用来检测冰冻切片,但能做冰冻切片的抗体,不一定能检测石蜡切片中的抗原。
(6)生产厂家。国外著名抗体生产商原装抗体质量一般没问题,尤其是美国Lifespan公司生产的IHCPlusAntibodies系列抗体,全部经过病理组织切片检测验证,100%质量保证,国内上海金畔生物科技有限公司有售,就是价格有点贵;而国内分装厂家用的一抗工作液,价格便宜,但有时结果的稳定性和重复性稍差,不同批次重复性较差。
(7)价格与质量的矛盾。我个人认为一抗原装质量可能会好点,因为许多一抗避免反复冻融,且在稀释液中稳定性较差(若时间长),但价格较贵。

2、二抗选择要点
(1)种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源,如一抗是小鼠来源,那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗,以与后面的SP结合反应;而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗,如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。
(3)选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就选择IgM;反之,一抗是IgG,则二抗选择IgG。
(4)生产厂家。一般SP三步法我们实验室选择中杉金桥的二抗染色试剂盒,内含有工作液的二抗,故试验中只需摸索一抗的浓度即可,效果还可以;而免疫荧光的二抗我一般选择KPL公司,效果还不错。

三、免疫组化常用的染色方法有哪些
根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。
免疫组织化学染色方法 IHC染色方法有很多种,按部标记物的性质可分为荧光法(荧光素标记),酶法(辣根过氧化物酶,碱性磷酸酶),免疫金银及铁标记技术等;按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步,三步或多步法);按结合方式可分为抗原-抗体结合,如PAP法和标记的葡聚糖聚合物(labeled dextran polymer,LDP)法,以及亲和连接,如ABC法、标记的链亲和素-生物素(labeled streptoavidin-biotin ,LSAB)法等,其中LSAB是最常用的使用方法。
影响免疫组化染色质量的因素很多,在实验中应注意组织的取材和固定,选择质量好的商品化抗体,恰当的选择和使用封闭和抗原修复手段,严格的技术操作和对照等。由于组织内待测抗原已被分解破坏,或抗原含量过低、或固定剂的使用不当及抗体质量不佳和稀释度不当等可出现假阴性反应;反之,由于抗体与非待检抗原发生交叉反应,或组织对抗体的非特异性吸附及内源性过氧化酶(endogenousperoxidase)没有被阻断等还可出现假阳性结果。这些可造成判断的失误。

爆款!细胞培养专用二亚基亚砜DMSO

细胞冻存过程中,为防止细胞内液冰晶形成、渗透压改变、细胞结构紊乱等导致的损伤, 需要冷冻保护剂。二甲基亚砜(DMSO)能够快速穿透细胞膜进入细胞中,降低冰点、延缓冻存过程, 同时提高细胞内离子浓度, 减少细胞内冰晶的形成, 从而减少细胞损伤,是目前广泛使用的的细胞冷冻保护剂。

爆款!细胞培养专用二亚基亚砜DMSO

AppliChem的专业细胞培养级二甲基亚砜(货号A3672),原产地德国,以其高纯度,超低金属离子含量等质控数据,严格符合细胞培养级标准。与血清或细胞培养基配合使用,为细胞提供全方位的保护。质优价廉,一直受到广大客户的青睐,年销售数千瓶 。

产品详情

货号

A3672

规格

100ML250ML

CAS-No.

67-68-5

熔点

18°C

沸点

189°C

分子式

C2H6OS

分子量

78.13 g/mol

内毒素检测

passes test

纯度

min. 99.5 %

金属离子

max. 0.00002 %


DMSO/二甲基亚砜除作为细胞冻存剂外,还可作为无机溶剂,广泛应用于生化试验、高效液相色谱HPLC、气相色谱GC、辅料等领域。配合这些应用,AppliChem还可以提供:

品牌 货号

品名

AppliChem

191954

二甲基亚砜/DMSO 药典级

AppliChem

361954

二甲基亚砜/DMSO 色谱级

AppliChem

161954

二甲基亚砜/DMSO 合成级

AppliChem

A7248

二甲基亚砜/DMSO 无菌


重组胰酶:安全、高效、稳定

胰蛋白酶以下简称胰酶)属于丝氨酸蛋白酶家族成员,是一种肽链内切酶,可以在赖氨酸和精氨酸C端切断肽链是生物制品生产过程中应用非常广泛的一种生物原材料。在细胞培养过程中,胰酶主要功能是分解细胞间的粘蛋白和糖蛋白,使细胞彼此分开,然后进行细胞传代培养。胰酶除了具有消化细胞的功能外,在某些病毒疫苗生产过程中,如细胞培养制备的流感疫苗轮状病毒疫苗,往往需要在病毒培养阶段加入适量胰酶,使病毒抗原暴露并与细胞受体结合,从而提高病毒感染效率对于某些重组蛋白制品,如重组胰岛素,通常使用胰酶作为剪切酶,将胰岛素原转化为具有生物活性的胰岛素。


当前使用最广泛的胰酶主要是由动物胰脏浸出液提纯冻干后制备而成,其原料主要来自牛或胰脏。尽管胰酶制备要经过适当的纯化工艺,但由于动物本身可能携带多种病毒(如疯牛病病毒朊病毒猪瘟病毒受到制备工艺、生物原材料特点以及当前检测手段所限,动物源胰酶存在较高的外源病毒污染风险影响了生物制品的安全性2010葛兰素史克(GSK生产的口服轮状病毒疫苗就曾检测出PCV1病毒序列,经溯源发现有可能是制备轮状病毒疫苗所用Vero细胞被胰酶引入了PCV1病毒污染所致加之近年来非洲猪瘟、COVID-19人兽共患病毒传染病引发的公共安全危机,在生物制品生产过程中使用安全性更高、风险更可控的重组生物原材料替代动物已经主要趋势

重组胰酶:安全、高效、稳定

 

上海金畔科技有限公司代理的KERRY重磅推出了一款重组胰蛋白酶Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶采用基因工程技术生产,生产过程中不添加任何动物源成分,无外源病毒污染风险,安全性高,纯度高,活性强非常适用于细胞培养疫苗/重组病毒生产、干细胞培养以及治疗性原代细胞培养等应用是一款应用效果和风险控制方面动物源胰酶更好的替代产品。


传统动物源胰酶相比,KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF优势特点主要以下几个方面


  • 质量控制方面Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶无动物源成分(ACF),避免了引入外源病毒污染风险,生物安全性更高,符合CDE生物制品生产用原材料的质量控制要求
  • 从产品性能方面,其适用细胞类型广泛(Vero、HEK、MRC-5消化效率更加温和,不伤细胞,主要表现为消化传代后的细胞倍增时间更短,细胞活率更高。
  • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶的基因序列是微生物胰酶,蛋白稳定性更配成液体室温放置一个月,胰酶活性不降低。
  • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶消化细胞无需洗细胞面也无需添加胰酶抑制剂直接加入新鲜培养基继续培养细胞即可


与其他商品化重组胰酶相比KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF表现出同等甚至更优的性能(如下图所示)主要表现为KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF消化细胞所需要的时间更短,消化传代后细胞的生长表现更好并且批间稳定性也非常可靠。

重组胰酶:安全、高效、稳定

 

KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF产品信息/参数指标

货号

30624799

规格

1g/ 5g/ 如需更大包装可联系上海金畔生物科技有限公司

性状

浅棕色颗粒状粉末

酶活性

≥800 U/mg

菌落数

<10000 cfu/g

稳定性

0-25℃条件可稳定保存至少2

 

 

重组胰酶:安全、高效、稳定

 

美国KERRY集团旗下Sheffield Bio-Science服务全球超过70年,作为全球生物制药疫苗行业规模大专业性强的细胞营养原料供应商,已成为全球单个药物年销售额超过10亿美金的10个“生物炸弹药”中7个生物药的培养基原料供应商,是全球少有的同时生产酵母粉和蛋白胨并针对不同细胞株/菌种开发提供非动物源性复合添加物系统的生产商,引领全球制药、疫苗、无血清培养基、传统发酵和诊断培养基工业的发展。

北京金畔生物科技有限公司是KERRY品牌细胞培养产品线中国一级代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

参考文献

1.洪小栩. 关于加强生物制品生产用胰酶质量控制的思考. 中国生物制品学杂志,2014, 27(7):981-984.

2.Heuer AH. Engineering and vaccine production for an influenza pandemic [J]. The Bridge, 2006, 36(3):3-5.

3. Angel J, Franco MA, Greenberg HB. Rotavirus vaccines: recent developments and future considerations [J]. Nat Rev Microbio, 2007, 5(7):529-539.


胰蛋白酶以下简称胰酶)属于丝氨酸蛋白酶家族成员,是一种肽链内切酶,可以在赖氨酸和精氨酸C端切断肽链是生物制品生产过程中应用非常广泛的一种生物原材料。在细胞培养过程中,胰酶主要功能是分解细胞间的粘蛋白和糖蛋白,使细胞彼此分开,然后进行细胞传代培养。胰酶除了具有消化细胞的功能外,在某些病毒疫苗生产过程中,如细胞培养制备的流感疫苗轮状病毒疫苗,往往需要在病毒培养阶段加入适量胰酶,使病毒抗原暴露并与细胞受体结合,从而提高病毒感染效率对于某些重组蛋白制品,如重组胰岛素,通常使用胰酶作为剪切酶,将胰岛素原转化为具有生物活性的胰岛素。

当前使用最广泛的胰酶主要是由动物胰脏浸出液提纯冻干后制备而成,其原料主要来自牛或胰脏。尽管胰酶制备要经过适当的纯化工艺,但由于动物本身可能携带多种病毒(如疯牛病病毒朊病毒猪瘟病毒受到制备工艺、生物原材料特点以及当前检测手段所限,动物源胰酶存在较高的外源病毒污染风险影响了生物制品的安全性2010葛兰素史克(GSK生产的口服轮状病毒疫苗就曾检测出PCV1病毒序列,经溯源发现有可能是制备轮状病毒疫苗所用Vero细胞被胰酶引入了PCV1病毒污染所致加之近年来非洲猪瘟、COVID-19人兽共患病毒传染病引发的公共安全危机,在生物制品生产过程中使用安全性更高、风险更可控的重组生物原材料替代动物已经主要趋势

重组胰酶:安全、高效、稳定

上海金畔科技有限公司代理的KERRY重磅推出了一款重组胰蛋白酶Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶采用基因工程技术生产,生产过程中不添加任何动物源成分,无外源病毒污染风险,安全性高,纯度高,活性强非常适用于细胞培养疫苗/重组病毒生产、干细胞培养以及治疗性原代细胞培养等应用是一款应用效果和风险控制方面动物源胰酶更好的替代产品。


传统动物源胰酶相比,KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF优势特点主要以下几个方面


  • 质量控制方面Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶无动物源成分(ACF),避免了引入外源病毒污染风险,生物安全性更高,符合CDE生物制品生产用原材料的质量控制要求
  • 从产品性能方面,其适用细胞类型广泛(Vero、HEK、MRC-5消化效率更加温和,不伤细胞,主要表现为消化传代后的细胞倍增时间更短,细胞活率更高。
  • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶的基因序列是微生物胰酶,蛋白稳定性更配成液体室温放置一个月,胰酶活性不降低。
  • Sheffield™ rTrypsin ACF重组胰酶消化细胞无需洗细胞面也无需添加胰酶抑制剂直接加入新鲜培养基继续培养细胞即可


与其他商品化重组胰酶相比KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF表现出同等甚至更优的性能(如下图所示)主要表现为KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF消化细胞所需要的时间更短,消化传代后细胞的生长表现更好并且批间稳定性也非常可靠。

重组胰酶:安全、高效、稳定

KERRY重组胰酶Sheffield™ rTrypsin ACF产品信息/参数指标

货号

30624799

规格

1g/ 5g/ 如需更大包装可联系上海金畔生物科技有限公司

性状

浅棕色颗粒状粉末

酶活性

≥800 U/mg

菌落数

<10000 cfu/g

稳定性

0-25℃条件可稳定保存至少2

重组胰酶:安全、高效、稳定

美国KERRY集团旗下Sheffield Bio-Science服务全球超过70年,作为全球生物制药疫苗行业规模大专业性强的细胞营养原料供应商,已成为全球单个药物年销售额超过10亿美金的10个“生物炸弹药”中7个生物药的培养基原料供应商,是全球少有的同时生产酵母粉和蛋白胨并针对不同细胞株/菌种开发提供非动物源性复合添加物系统的生产商,引领全球制药、疫苗、无血清培养基、传统发酵和诊断培养基工业的发展。

北京金畔生物科技有限公司是KERRY品牌细胞培养产品线中国一级代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

参考文献

1.洪小栩. 关于加强生物制品生产用胰酶质量控制的思考. 中国生物制品学杂志,2014, 27(7):981-984.

2.Heuer AH. Engineering and vaccine production for an influenza pandemic [J]. The Bridge, 2006, 36(3):3-5.

3. Angel J, Franco MA, Greenberg HB. Rotavirus vaccines: recent developments and future considerations [J]. Nat Rev Microbio, 2007, 5(7):529-539.

重组胰酶:安全、高效、稳定
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细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

肿瘤是指细胞在致瘤因素作用下,基因发生了改变,失去对其生长的正常调控,导致异常增生。在癌变过程中,发生转化的细胞也具有上述特征,如生长过程中对外源生长刺激因子的依赖减少、失去细胞接触抑制效应,并通常导致永生化,这种锚定-不依赖性生长是肿瘤细胞的标识之一,也是检测恶性转化细胞最准确和严谨的标识。软琼脂培养法常用于检测肿瘤细胞和转化细胞系,该分析方案是监测锚定-不依赖性生长的常用手段。软琼脂培养法原理是利用癌细胞接触抑制效应的丧失,能在悬浮状态下能很好地成簇生长(一般正常的非转化细胞不能在悬浮状态下生长)。

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒常规软琼脂克隆形成实验是将细胞置于包含有软琼脂半干培养基的100mm或者60mm大小培养皿中,让细胞在软琼脂中培养3-4周以形成克隆,然后手动计数细胞克隆的形成数。该方法较为繁琐并耗时,不适合同时监测大量样品,而且在手动计数过程中带有非常大的不确定性,特别是当形成的细胞克隆大小差异较大时,很难得到更有效、精确的数据。

Cell BioLabs的CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成分析试剂盒(CytoSelect™  96-Well Cell Transformation Assay)克服了上述难题,使用该试剂盒不再需要3-4周漫长的克隆形成过程,只需要6-8天;而且无需进行手动计数,而是应用MTT(普通光分析)或CyQuant® GR Dye荧光染料(荧光分析),最终使用分光光度计或荧光计读取数值。由于采用上述技术,该软琼脂克隆形成分析试剂盒提供了一个定量的、高通量的方案来精确的检测细胞转化;另外,由于减少了细胞培养时间(6-8天),因此非常适用于一些原癌基因或siRNA的瞬时转染实验中的细胞分析。

常规软琼脂克隆形成分析 高级软琼脂克隆形成分析(可回收)

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

  • 克隆形成时间由原来的2-3周减少为仅需要一周
  • 结果可以直接使用荧光计读取,无需手动计数
  • 克隆形成时间由原来的2-3周减少为仅需要一周
  • 结果可以直接使用分光光度计或荧光计读取,无需手动计数
  • 经形成实验分析后的细胞可以回收并能用于后继实验
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    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    CytoSelect™ 96-Well Cell Transformation Assay (Soft Agar Colony Formation)  CBA-130 荧光法检测,一次96孔板分析
    CBA-130-5 荧光法检测,五次96孔板分析
    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    CytoSelect™ 96-Well Cell Transformation Assay (Cell Recovery Compatible)    CBA-135 光度计检测,一次96孔板分析
    CBA-135-5 光度计检测,五次96孔板分析
    CBA-140 荧光计检测,一次96孔板分析
    CBA-140-5 荧光计检测,五次96孔板分析

    Cell BioLabs的CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成分析试剂盒分两种,一种是常规软琼脂克隆形成分析,另一种是改进后的高级软琼脂克隆形成分析。常规软琼脂形成试剂盒能大大减少实验时间,并使用荧光染料提高了数据的准确性;高级软琼脂克隆形成分析试剂盒则提供了细胞回收方案,而且还分为分光光度计和荧光剂两种检测手段,您可根据您的实验要求选择最合适的细胞转化分析方案。

    Cell BioLabs为您提供全套的细胞分析检测方案,针对于细胞的克隆形成及细胞转化,除了上述软琼脂克隆形成试剂盒外,还有针对细胞包括肿瘤细胞的药物敏感性分析和克隆性肿瘤细胞分离试剂盒提供。另外,Cell Biolabs还开发出其他多方位的基于细胞功能特征,特别是肿瘤细胞的特性的细胞粘附分析、细胞转移与浸润、细胞吞噬快速分析、细胞活力/死亡/毒性分析、细胞衰老及收缩检测,以及血管生成分析等多种分析试剂盒。如果您对上述细胞分析方案感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询细胞研究的相关实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

    细胞培养基重要的原料——维生素

    细胞培养基是为了提供一个能支持细胞体外生长和维持,以及生产蛋白类大分子药物,如单克隆抗体的环境,其主要成分包括氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子以及血清、细胞因子等。其中,维生素是生物体内一类量微、化学结构各异、具有特殊功能的小分子化合物,是维持细胞生长的重要生物活性物质。这类物质既不是构成细胞的原料,也不是能量的来源,通常以辅酶或辅基的形式参与体内酶促反应体系,在代谢过程中起重要调节作用。大部分维生素在细胞内不能合成或合成量不足,因而是细胞培养基中不可缺少的重要成分。

    常用于细胞培养基添加的维生素包括B族维生素(如核黄素、维生素B12、叶酸、生物素等)和维生素C等。上海金畔生物科技有限公司代理的Applichem品牌可提供多种高品质维生素(详见下表),是生物制品细胞培养工艺添加原料的不二之选。

    名称

    作用机制

    货号

    规格

    CAS No.

    级别

    核黄素(维生素B2)

    Riboflavin

    与特定的蛋白质结合生成黄酶。黄酶在物质代谢中起传递氢的作用,参与组织的呼吸过程。

    A6279

    100g, 250g

    83-88-5

    药典级

    叶酸(维生素B9)

    Folic acid

    是合成四氢叶酸的重要原料,四氢叶酸在核酸的生物合成和蛋白质的生物合成过程中起重要作用。

    A7092

    25g, 100g

    59-30-3

    药典级

    钴胺素(维生素B12)

    Vitamin B12

    作为甲基转移酶的辅因子,参与蛋氨酸、胸腺嘧啶等的合成,从而促进蛋白质的生物合成;保护叶酸在细胞内的转移和贮存。

    A8454

    1g, 25g, 500g

    68-19-9

    药典级

    泛酸钙(维生素B5)

    D-Pantothenic Acid Calcium Salt

    是辅酶A的组成部分,只有右旋体(D-)具有维生素活性,参与蛋白质、脂肪、糖等多种物质代谢;参与类固醇、卟啉、乙酰胆碱等物质的合成。

    A2088

    100g

    137-08-6

    生化级

    盐酸吡哆醇(维生素B6)

    Pyridoxine Hydrochloride

    是多种酶如转氨基酶、脱羧酶、消旋酶、脱氢酶、合成酶和羟化酶等的辅酶,且可帮助糖类和蛋白质的分解利用;维生素B6还能增加氨基酸及钾离子逆浓度进入细胞的运转速度。

    A8093

    100g

    58-56-0

    药典级

    生物素(维生素B7)

    D(+)-Biotin

    是一些特异羧化酶的组成部分,参与糖代谢和脂肪酸的合成过程。

    143977

    1g, 50g

    58-85-5

    药典级

    肌醇(维生素B8)

    myo-Inositol

    用于合成肌酸磷脂膜磷脂、鞘脂等前体物质,为多种细胞生长所必需。

    A1716

    100g, 250g, 10kg

    87-89-8

    生化级

    烟酰胺

    Nicotinamide

    是辅酶I和辅酶II的组成部分,也是许多脱氢酶的辅酶。

    A0959

    250g

    98-92-0

    药典级

    烟酸

    Nicotinic Acid

    可转化为烟酰胺,再与核糖腺嘌呤等组成辅酶I和辅酶II,为脂质氨基酸、蛋白、嘌呤代谢,组织呼吸的氧化作用和糖原分解所必需。

    A0963

    100g, 250g

    59-67-6

    药典级

    抗坏血酸(维生素C)

    L(+)-Ascorbic Acid

    是一种高效抗氧化剂,用来减轻细胞的氧化应激反应;还参与细胞内重要的生物合成过程。

    141013

    1000g, 5kg

    50-81-7

    药典级

    氯化胆碱

    Choline Chloride

    是乙酰胆碱、卵磷酯和神经磷酯的组成部分,主要参与调节脂肪的代谢与转化,促进氨基酸的再形成,提高氨基酸的利用率。

    A0785

    1kg

    67-48-1

    生化级

    硫辛酸

    DL-α-Lipoic Acid

    是丙酮酸脱氢酶复合物、酮戊二酸和氨基酸氢化酶复合物的辅助因子,具有抑制脂质氧化,阻止蛋白质的糖基化,抑制醛糖还原酶,阻止葡萄糖或半乳糖转化成为山梨醇等作用。

    A4065

    5g

    1077-28-7

    生化级

    盐酸吡哆醛

    Pyridoxal Hydrochloride

    是氨基酸代谢中转氨酶及脱羧酶的辅酶,能促进谷氨酸脱羧,促进γ-氨基丁酸的生成;它还可以催化包括α-氨基酸与α-酮酸的转氨基和α-氨基酸的脱羧基等作用。

    A0960

    25g, 1kg

    65-22-5

    生化级

    细胞培养基重要的原料——维生素

    PanReac AppliChem是来自欧洲品质优良的生物化学试剂与制药原料生产商之一,已通过多项ISO 9001质量体系认证,是全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业企业的重要供应商。作为全球多家知名培养基生产企业和制药企业长期固定供应商,Applichem全面提供细胞培养级、符合药典级、生化级、超纯级等培养基化学品组分,包括氨基酸、蛋白质、维生素、抗生素、脂类、无机盐、缓冲液、泡沫稳定剂、指示剂等和制药工艺中常用化学品如尿素、Tris、葡聚糖等。上海金畔生物科技有限公司是PanReac AppliChem的中国区一级代理,为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

    胶原蛋白,让细胞突破空间局限

    胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏器官外基质的主要成分,胶原蛋白种类很多,常见类型包括I型、II型、III型、IV型等等。其中,I型胶原蛋白(CollagenTypeI)因广泛分布于皮肤、骨骼、肌腱及其他纤维结缔组织中而常常被应用于细胞的体外培养。当用做凝胶基质时,胶原蛋白有助于增强细胞形态特异性和维持细胞功能,促进细胞贴壁等作用,同时还是一种天然粘附剂。

    传统细胞培养方式主要是让细胞生长在玻璃或塑料平面上,细胞只能沿二维平面延伸,这种培养方式称为2D培养。由于某些原代细胞如神经细胞以及干细胞等难以在常规平面附着,需要包被胶原作为促进细胞贴壁的基质,所以胶原包被常常在原代细胞和干细胞2D培养中发挥着重要作用。

    与之相比,由胶原蛋白配置的3D固体凝胶形成的三维立体网状结构,能更真实地模拟体内组织结构及微环境,满足复杂细胞组织间相互作用,为细胞提供更好的生长和分化条件。因此,细胞3D培养比传统2D培养的应用前景更为广泛,3D培养主要用于以下几个方面:

    ü 肿瘤研究应用 3D培养能更好地代表组织结构和细胞微环境,三维癌症模型主要目标是缩小二维细胞系、动物模型和临床研究之间的差距,能够更加真实的模拟体内肿瘤微环境。

    ü 药物药理研究应用 3D细胞培养在早期药物发现中将有广泛应用,如疾病建模、目标识别和验证、筛选、药物疗效和安全评估等。

     

    ü 干细胞研究应用 三维生物系统可以提高人类胚胎干细胞衍生的多能干细胞和成人成体干细胞植入体内后的生存率和再生能力,使干细胞分化在疾病建模和再生医学中的潜力得以发挥。

    Advanced BioMatrix(以下简称ABM)是美国知名的胶原蛋白生产公司,拥有25年的研发和制造经验,为满足研究人员不断发展的需求,致力于为组织工程、细胞分析及细胞增殖等研究领域提供优质稳定的产品。

     

    ABM热销的三款I型胶原蛋白纯度都达到95%以上,且均通过无菌检验,非常适用于细胞培养器皿包被和制备3D凝胶。

    胶原蛋白,让细胞突破空间局限