Wako和光纯药 尿素 219-00175

Wako和光纯药 尿素 219-00175
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日本和光纯药试剂
备 货 期: 部分现货或2-3周
Wako和光纯药 尿素 219-00175
英文名称:Urea
中文名称:尿素
品牌:Wako
品牌中文简称:和光纯药
CAS No.:57-13-6
储存条件:室温
纯度:-
Wako和光纯药 尿素 219-00175

品牌 产品编号 产品名称 等级 规格 CAS No.
Wako 和光纯药 212-00187 Urea 尿素 Wako 1st Grade 20 kg 57-13-6
Wako 和光纯药 213-00617 Urea 尿素 for Biochemistry 10 kg 57-13-6
Wako 和光纯药 219-01297 Urea 尿素 Japanese Pharmacopoeia Grade 10 kg 57-13-6
Wako 和光纯药 219-00175 Urea 尿素 JIS Special Grade 500 g 57-13-6
Wako 和光纯药 213-00173 Urea 尿素 JIS Special Grade 100 g 57-13-6
Wako 和光纯药 219-01351 Urea Standard 尿素标准品 for Amino Acid Analysis 500 mg 57-13-6
Wako 和光纯药 213-01295 Urea 尿素 Japanese Pharmacopoeia Grade 500 g 57-13-6
Wako 和光纯药 636-14491 Urea 尿素 10 g
Wako 和光纯药 215-00172 Urea 尿素 JIS Special Grade 25 g 57-13-6
Wako 和光纯药 215-00611 Urea 尿素 for Biochemistry 100 g 57-13-6
Wako 和光纯药 215-00616 Urea 尿素 for Biochemistry 1 kg 57-13-6
Wako 和光纯药 216-00185 Urea 尿素 Wako 1st Grade 500 g 57-13-6
Wako 和光纯药 217-00171 Urea 尿素 JIS Special Grade 5 kg 57-13-6
Wako 和光纯药 217-00615 Urea 尿素 for Biochemistry 500 g 57-13-6

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究)

蛋白磷酸化研究的预制胶
新品速递图wako.jpg
SuperSep Phos-tag
SuperSep Phos-tag是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag
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Phos-tag?是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag? Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag SDS-PAGE 的原理
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◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
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◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag? SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。
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100 μM Phos-tag ? 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;
– 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【参考文献】
Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ? SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 – 1143.
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
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我们可以确定在片段中含有目的激酶!
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag  SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【参考文献】
The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)
二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ? SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
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同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
? Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备:
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理:
另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。
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◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag?,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
83×100×3.9mm
Mini-PROTEAN?
Tetra Cell
(Bio-Rad Laboratories, Inc.)
5 块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
83×100×3.9mm
5 块

用于Life Technologies电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
100×100×6.6mm
XCell SureLock?
Mini-Cell
(Life Technologies, Inc.)
 
5 块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
100×100×6.6mm
5 块
产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag?  (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块

WAKO 122-02651 脂肪酶 Lipase 9001-62-1

WAKO 122-02651 脂肪酶 Lipase 9001-62-1

基本信息

中文名称:脂肪酶
中文别名:脂肪酶;脂肪水解酶;脂酶;胰脂肪酶;脂及酶
英文名称:Lipase
英文别名:Lipase AS Amano;Lipase AK Amano;Lipase Ays Amano;Lipase Cal-B;Lipase Mml;Lipase PS Amano

基本属性

外观:近白色冻干粉末或乳黄色粉末,溶于水,最适温度35~370C.

产品说明

储存条件:2-8°C

WAKO 122-02651 脂肪酶 Lipase 9001-62-1

Wako 和光纯药 326-91202 Lipase PS IM Amano,Immobilized on Diatomaceous Earth 脂肪酶PS IM“天野”,固定化于硅藻土 25 g
Wako 和光纯药 122-02651 Lipase 脂肪酶 for Biochemistry 100 mg 9001-62-1
Wako 和光纯药 328-91201 Lipase PS IM Amano,Immobilized on Diatomaceous Earth 脂肪酶PS IM“天野”,固定化于硅藻土 5 g
Wako 和光纯药 129-04501 Lipoprotein Lipase 脂蛋白脂肪酶 for Biochemistry 250 mg (9004-02-8)
Wako 和光纯药 121-06543 Lipase AK Amano 脂肪酶AK“天野” 50g 9001-62-1
Wako 和光纯药 124-06533 Lipase PS Amano SD 脂肪酶PS天野SD for Organic Synthesis 50 g 9001-62-1
Wako 和光纯药 128-06531 Lipase PS Amano SD 脂肪酶PS天野SD for Organic Synthesis 10 g 9001-62-1
Wako 和光纯药 323-58391 Lipase AK Amano 脂肪酶AK“天野” 10 g 9001-62-1
Wako 和光纯药 329-58393 Lipase AK Amano 脂肪酶AK“天野” 50 g 9001-62-1
Wako 和光纯药 127-06501 Lipase PS IM Amano, Immobilized on Diatomaceous Earth Amano 脂肪酶 PS-IM(硅藻土载体固定) For Organic Synthesis 5 g
Wako 和光纯药 321-58353 Lipase F-AP15 脂肪酶F-AP15 50 g 9001-62-1
Wako 和光纯药 321-88523 Lipase PS Amano SD 脂肪酶PS”天野”SD 50 g 9001-62-1
Wako 和光纯药 125-06502 Lipase PS IM Amano, Immobilized on Diatomaceous Earth Amano 脂肪酶 PS-IM(硅藻土载体固定) for Organic Synthesis 25 g
Wako 和光纯药 125-06541 Lipase AK Amano 脂肪酶AK“天野” 10g 9001-62-1
Wako 和光纯药 325-58373 Lipase AYS Amano 脂肪酶AYS“天野” 50 g 9001-62-1

WAKO过氧化氢特异性荧光探针

WAKO过氧化氢特异性荧光探针

品牌: Wako(和光纯药)
货号: 028-17811
CAS号: 728912-55-8
供应商: 和光纯药株式会社
规格: 1mg
过氧化氢特异性荧光探针BES-H2O2-Ac / BES-H 2O2
• 比二氯荧光黄 (DCFH) 有更高的特异性
• 可动态监测活细胞内的过氧化氢
• BES-H2O2-Ac 可穿透细胞膜,无需打孔
• 极易溶于水,可制成水溶液使用
• 可用于荧光显微镜、流式细胞仪

BES-So-AM:使用举例

图1)是Jurkat T细胞在含33μM BES-So-AM的培养基中37°C培养1小时,使探针进入细胞,然后添加4mM丁酸(O2•-诱导剂),37°C培养1小时;图2)是Jurkat T细胞在含33μM BES-So-AM的培养基中37°C培养1小时,使探针进入细胞,然后不添加丁酸,37°C再培养1小时;图3)是Jurkat T细胞在含33μM BES-So-AM的培养基中37°C培养1小时,然后添加5mM的丁酸,继续培养一个小时。参考文献
1) Maeda, H. et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 43, 239 (2004).
2) Maeda, H. et al.: Chem. Pharm. Bull., 49, 294 (2001).1. Features
•Much higher selectivity compared to conventionally-used DCFH probes•Responds specifically to hydrogen peroxide, enabling detection of intracellular hydrogen peroxide activity•BES-H2O2-Ac is cell membrane permeable•Superior water solubility allows use with aqueous solutions•Can be used in flow cytometry

2. Application


H2O2-produced stimulation No H2O2-produced stimulation
Fluorescent images
Phase-contrast images
Fluorescent images of Jurkat T cells with BES- H2O2 -Ac and the same-fi eld phase-contrast images
Jurkat T cells were cultured in a medium with 50μM BES-H2O2-Ac for 1 hour. Then, one group of them was cultured in a medium with 5 mM butyric acid (H2O2-produced stimulation), whereas the other in a medium without butyric acid (No H2O2– produced stimulation), each for 1 hour. (Courtesy: Professor Hatsuo Maeda, PhD., School of Pharmacy, Hyogo Univ. of Health Sciences)

 

3. References


  1. “Fluorescent probe for hydrogen peroxide based on a non-oxidative mechanism”, Maeda, H. et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 43, 2389-91 (2004).
  2. “Hydrogen peroxide-induced deacetylation of acetyl resorufin as a novel indicator reaction for fluorometric detection of glucose using only glucose oxidase”, Maeda, H. et al.: Chem. Pharm. Bull., 49, 294-8 (2001).

4. Products List


< All products are for Cellbiology;   Keep at room temperature >

Cell Permeability Product Name Package Size Wako Catalog No.
Thiol/Selenol
selective probe
x
BES-Thio
1 mg
025-15481
H2O2 Probes
o
<Detection of
cell-derived H2O2
BES-H2O2-Ac
1 mg
028-17811
x
BES-H2O2   (Cell-impermeant)
1 mg
021-16201
Superoxide
selective probe
o
<Detection of
cell-derived superoxide>
BES-So-AM
1 mg
021-17801
x
BES-So   (Cell-impermeant)
1 mg
028-16211

说明书下载:

http://www.wako-chem.co.jp/english/labchem/product/life/BES-H2O2/pdf/WPUb1_p15-7.pdf

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究)

蛋白磷酸化研究的预制胶
新品速递图wako.jpg
SuperSep Phos-tag
SuperSep Phos-tag是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag
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Phos-tag?是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag? Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag SDS-PAGE 的原理
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◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
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◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag? SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。
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100 μM Phos-tag ? 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;
– 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【参考文献】
Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ? SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 – 1143.
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
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我们可以确定在片段中含有目的激酶!
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag  SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【参考文献】
The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)
二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ? SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
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同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
? Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备:
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理:
另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。
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◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag?,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
83×100×3.9mm
Mini-PROTEAN?
Tetra Cell
(Bio-Rad Laboratories, Inc.)
5 块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
83×100×3.9mm
5 块

用于Life Technologies电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
100×100×6.6mm
XCell SureLock?
Mini-Cell
(Life Technologies, Inc.)
 
5 块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
100×100×6.6mm
5 块
产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag?  (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究)

蛋白磷酸化研究的预制胶
新品速递图wako.jpg
SuperSep Phos-tag
SuperSep Phos-tag是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag
blob.png
Phos-tag?是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag? Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag SDS-PAGE 的原理
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◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
blob.png
◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag? SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。
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100 μM Phos-tag ? 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;
– 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【参考文献】
Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ? SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 – 1143.
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
blob.png
我们可以确定在片段中含有目的激酶!
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag  SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【参考文献】
The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)
二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ? SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
blob.png
同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
? Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备:
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理:
另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。
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◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag?,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
83×100×3.9mm
Mini-PROTEAN?
Tetra Cell
(Bio-Rad Laboratories, Inc.)
5 块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
83×100×3.9mm
5 块

用于Life Technologies电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
100×100×6.6mm
XCell SureLock?
Mini-Cell
(Life Technologies, Inc.)
 
5 块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
100×100×6.6mm
5 块
产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag?  (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块

Wako 077-03155 Gelatin 明胶

Wako 077-03155 Gelatin 明胶
英文名称:Gelatin
中文名称:明胶
品牌:Wako
品牌中文简称:和光纯药
CAS No.:9000-70-8
储存条件:室温
纯度:-
Wako 077-03155 Gelatin 明胶

品牌 产品编号 产品名称 等级 规格 CAS No.
Wako 和光纯药 071-01791 Gelatin, Capsules No. 00  明胶,胶囊No. 00 for Electron Microscopy 100 pcs N/A
Wako 和光纯药 074-01801 Gelatin, Capsules No. 0 明胶,胶囊No. 0 for Electron Microscopy 100 pcs N/A
Wako 和光纯药 190-15805 StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution StemSure 0.1w/v%明胶溶液 for Cell Culture 500 ml
Wako 和光纯药 071-06291 Gelatin, from Bovine Bone 明胶,来自牛骨 100 g 9000-70-8
Wako 和光纯药 073-06295 Gelatin, from Bovine Bone 明胶,来自牛骨 500 g 9000-70-8
Wako 和光纯药 077-03155 Gelatin 明胶 Wako 1st Grade 500 g 9000-70-8
Nippi 日皮 305-34331 gelatin, M.W.8,000±2,000, High Grade  明胶,M.W.8,000±2,000, 高纯 10 g 9015-54-7
Nippi 303-34413 gelatin, M.W.100,000 明胶,分子量100,000 1 g
Nippi 301-34333 gelatin, M.W.8,000±2,000, High Grade 明胶,分子量8,000±2,000 1 g 9015-54-7
Nippi 301-34414 gelatin, M.W.100,000 明胶,分子量100,000 5 g
Nippi 308-34343 gelatin, M.W.60,000, High Grade 明胶,分子量60,000 10 g
Hokudo 301-13931 Gelatinase A 明胶酶A 10 ug
Hokudo 308-13941 Gelatinase B 明胶酶B 10 ug
Hokudo 302-13841 Anti Gelatinase B Polyclonal Antibody 抗明胶酶A多克隆抗体 100 ul

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究)

蛋白磷酸化研究的预制胶
新品速递图wako.jpg
SuperSep Phos-tag
SuperSep Phos-tag是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag
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Phos-tag?是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag? Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag SDS-PAGE 的原理
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◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
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◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag? SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。
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100 μM Phos-tag ? 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;
– 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【参考文献】
Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ? SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 – 1143.
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
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我们可以确定在片段中含有目的激酶!
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag  SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【参考文献】
The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)
二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ? SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
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同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
? Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备:
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理:
另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。
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◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag?,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
83×100×3.9mm
Mini-PROTEAN?
Tetra Cell
(Bio-Rad Laboratories, Inc.)
5 块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
83×100×3.9mm
5 块

用于Life Technologies电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
100×100×6.6mm
XCell SureLock?
Mini-Cell
(Life Technologies, Inc.)
 
5 块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
100×100×6.6mm
5 块
产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag?  (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶

wako 193-16711-SuperSep Phos-tag™ 预制胶(蛋白磷酸化研究)

蛋白磷酸化研究的预制胶
新品速递图wako.jpg
SuperSep Phos-tag
SuperSep Phos-tag是研究蛋白磷酸化的方法,无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag
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Phos-tag?是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phostag? Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后,胶可用于考马斯亮蓝染色,免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag SDS-PAGE 的原理
blob.png
◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
blob.png
◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变,产生3种突变体(Ser8突变体:S8A,Thr138突变体:T138A,Ser8和Thr138双突变体:2A)。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag? SDS-PAGE和Western blotting 进行检测(检测抗体:p35抗体)。
blob.png
100 μM Phos-tag ? 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系!
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道5(条带M1):p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化;
– 泳道1(条带L2和L4)和泳道3(条带L2和L4):在无激酶活性Cdk5的作用下,大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化,同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 (条带M1)和泳道6(条带L3和L4):Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点;
– 泳道5(条带M1)、泳道7(条带L1和L2)和泳道8(条带M2):条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带;
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带;条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带;
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【参考文献】
Quantitative Measurement of in Vivo Phosphorylation States of Cdk5 Activator p35 by Phos-tag ? SDS-PAGE. T. Hosokawa, T. Saito, A. Asada, K. Fukunaga, and S. Hisanaga,Mol. Cell. Proteomics, Jun 2010;9: 1133 – 1143.
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永(Dr. T. Hosokawa)
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市(Dr. S. Hisanaga)
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
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我们可以确定在片段中含有目的激酶!
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1(1-290)结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1(1-290)作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag  SDS-PAGE 用于Western blotting,确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【参考文献】
The DNA-binding activity of mouse DNA methyltransferase 1 is regulated by phosphorylation with casein kinase 1delta/epsilon. Y. Sugiyama, N. Hatano, N. Sueyoshi, I. Suetake, S. Tajima, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and I. Kameshita, Biochem. J.,
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪(Dr. Y. Sugiyama)
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇(Dr. I. Kameshita)
二维电泳中的应用:分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ? SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
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同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
? Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics, Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备:
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感,尤其是螯合剂,钒酸,无机盐,表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理:
另一个必须的步骤是在转膜前,用EDTA去除凝胶中的金属离子(Mn2+或者Zn2+);
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,至少20分钟,温和摇晃。更换新缓冲液,重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer,10分钟,温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜,以提高转膜效率。
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◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag?,出厂前均根据其产品规格进行测试,以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白,以及他们的分离成都在正常参数内。
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
83×100×3.9mm
Mini-PROTEAN?
Tetra Cell
(Bio-Rad Laboratories, Inc.)
5 块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
83×100×3.9mm
5 块

用于Life Technologies电泳仪

货号 品名 电泳仪 规格
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well,
100×100×6.6mm
XCell SureLock?
Mini-Cell
(Life Technologies, Inc.)
 
5 块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well,
100×100×6.6mm
5 块
产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag?  (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag? (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag? 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep? Phos-tag? (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag? 预制胶,Life Technologies型
5块

Wako和光纯药  Charcoal 活性炭

Wako和光纯药  Charcoal 活性炭

品牌 产品编号 产品名称 等级 规格 CAS No.
Wako  和光纯药 034-02125 Charcoal, Activated, Granular 活性炭,粒状 Wako Special Grade 100 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 034-09325 Charcoal, Activated, pretreated, 1.18 – 2.36mm (8 – 14mesh) for Oxidant Automated Analyzer 500 ml 7440-44-0
Wako  和光纯药 034-18051 Charcoal, Activated, Broken, 0.2 – 1mm for Column Chromatography 100 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 034-18073 Charcoal, Activated, Rod for Column Chromatography 1 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 030-02127 Charcoal, Activated, Granular  活性炭,粒状 Wako Special Grade 10 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 035-18101 Charcoal, Activated, Powder, Neutral for Column Chromatography 100 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 030-18053 Charcoal, Activated, Broken, 0.2 – 1mm 活性炭,0.2~1mm for Column Chromatography 1 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 031-02135 Charcoal, Activated 活性炭 for Chromatography 500 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 031-18061 Charcoal, Activated, Broken, 2 – 5mm 活性炭,2~5mm for Column Chromatography 100 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 031-18083 Charcoal, Activated, Powder, Acid Washed 活性炭,粉末,酸洗的 for Column Chromatography 1 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 031-18103 Charcoal, Activated, Powder, Neutral 活性炭,粉末,中性 for Column Chromatography 1 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 037-02115 Charcoal, Activated, Powder 活性炭,粉状 Wako Special Grade 500 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 037-02137 Charcoal, Activated for Chromatography 10 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 032-09321 Charcoal, Activated, pretreated, 1.18 – 2.36mm (8 – 14mesh) 活性炭,前处理剂,1.18~236mm(8~14目) for Oxidant Automated Analyzer 300 ml 7440-44-0
Wako  和光纯药 037-18063 Charcoal, Activated, Broken, 2 – 5mm for Column Chromatography 1 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 032-18091 Charcoal, Activated, Powder, Basic  活性炭,粉末,碱性 for Column Chromatography 100 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 033-02117 Charcoal, Activated, Powder 活性炭,粉末 Wako Special Grade 10 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 038-18071 Charcoal, Activated, Rod for Column Chromatography 100 g 7440-44-0
Wako  和光纯药 038-18093 Charcoal, Activated, Powder, Basic for Column Chromatography 1 kg 7440-44-0
Wako  和光纯药 038-02145 Charcoal, Bone 骨炭 No grade 500 g 7440-44-0

上海金畔生物科技有限公司(www.jinpanbio.com)提供生命科学研究领域系列产品,包括生化试剂、诊断试剂、色谱标准品和实验仪器耗材。主营Lumiprobe Cy系列活性荧光染料;修饰性PEG(Laysan bio、NANOCS、Avanti等进口品牌PEG以及定制合成修饰性聚乙二醇、单分散小分量PEG);Sigma、Amresco、TCI、MP bio生化试剂;WAKO日本和光纯药、日本关东化学Kanto试剂、日本三菱、日本柴田科学SIBATA;Megazyme食品分析检测试剂盒、日本共立理化学;Research diets、Harlan饲料、Bio-Serv、日本CLEA Japan品牌的动物饲料;Oxoid、Nissui日水、日本荣研、BD difco、Himedia品牌微生物培养基;免疫诊断试剂包括:Bethyl抗体;Biolegend流式抗体、Abcam、CST、Santa Cruz抗体;Roche、TOYOBO、NEB品牌的酶;中检所、TRC、药典USP、EP、Reagecon标准品;耗材和仪器包括Whatman、日本Advantec滤膜、Millipore品牌的各种滤膜、滤器和柱子填料等、Hampton蛋白结晶试剂耗材、老鼠软管灌胃针、动物毛发记号笔、Labnet、Wheaton瓶子、Bio-Rad伯乐、康宁Corning、Axygen、Falcon 、Eppendorf、Nunc、Nalgene、Nest品牌的培养皿、培养板、离心机、离心管、移液枪及枪头等实验室常用仪器耗材。
上海金畔生物科技有限公司
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Wako 016-17431 消泡剂SI

Wako 016-17431 消泡剂SI
英文名称:Antifoam SI
中文名称:消泡剂SI
品牌:Wako
品牌中文简称:和光纯药
CAS No.:N/A
储存条件:25℃以下
纯度:-
细胞培养消泡剂
消泡剂 SI,PE-H,PE-M,PE-L
特点:

  • SI(Silicone)

本品为硅系消泡剂,同时具有非常优异的破泡性和抑泡性。因此,低浓度时,也可得到消泡效果。而且,添加到培养基时,具有浑浊少的特点。

  • PE-H(Pdyether-High), PE-M(Polyether-Medium), PE-L(Polyether-Low)

本品为聚醚系消泡剂,可将细胞毒性抑制到非常低的程度。根据粘度的不同,分为PE-H,PE-M,PE-L三种。一般来说,粘度越低分散性越好。
添加量:对于细胞培养,添加适量本品用于确认各系统的最终浓度保持在0.25~0.5%(1L培养基中含0.25~0.5ml)。
用途: 用于细菌·细胞等培养时去除泡沫.
参考数据:1.消泡效果和浑浊(度)的测定.
方法:在小试验管中注入5ml培养基,剧烈振荡后,加入消泡剂。
添加后分别测定10秒钟、5分钟、15分钟的起泡程度,以及当时的浑浊(度)。
2.细胞毒性试验.
细胞:Vero细胞的subclone(O78株)
Viability的判定:Alamar Blue.
方法:添加Alamar Blue, 测定LD50.
注意:细胞毒性非常低,用于培养没有问题。可用于各系统的培养。

产品编号 产品名称 包装
016-17431 Antifoam SI   消泡剂 SI 100ml
018-17435 Antifoam SI   消泡剂 SI 500ml
010-17191 Antifoam PE-H 消泡剂 PE-H (参考)在20℃时,粘度约983cP 100ml
012-17195 Antifoam PE-H 消泡剂 PE-H (参考)在20℃时,粘度约983cP 500ml
010-17211 Antifoam PE-M 消泡剂 PE-M (参考)在20℃时,粘度约325cP 100ml
012-17215 Antifoam PE-M 消泡剂 PE-M (参考)在20℃时,粘度约325cP 500ml
013-17201 Antifoam PE-L 消泡剂 PE-L (参考)在20℃时,粘度约160cP 100ml
015-17205 Antifoam PE-L 消泡剂 PE-L (参考)在20℃时,粘度约160cP