标签归档：单克隆

Abways 兔单克隆抗体CY10001

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Abways 兔单克隆抗体

简要描述：Abways产品供应 Abways 兔单克隆抗体 Abways是一抗的制造商。我们在范围内提供优质的抗体和相关产品，药物发现和学术实验室。

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Abways 兔单克隆抗体

  • 货号 P08236
  • 摩尔重量
    78kDa
  • 其他名称
    β-葡萄糖醛酸酶;β-G1;古斯布;
  • 免疫原
    一种来源于人GUSB的合成肽
  • 存储
    兔IgG在磷酸盐缓冲盐水中，pH 7.4，150mM NaCl，0.02%叠氮hua钠和50%甘油。短期储存在 +4°C。长期储存在-20°C。避免冻融循环。
  • 纯化
    亲和色谱
  • 同种型
    兔免疫球蛋白酶
  • 克隆性
    单 克隆
  • 描述
    在皮肤素和角质硫酸盐的降解中起重要作用。
应用
  • 反应
    人
  • 应用
    WB，IHC，ICC/IF，FC
  • 推荐稀释度
    WB 1：500~1：2000 IHC 1：50~1：200 ICC/IF 1：50~1：200 FC 1：50
Abways 兔单克隆抗体CY10001



















K562细胞裂解物中GUSB表达的蛋白质印迹分析。

Abways是一抗的制造商。我们在范围内提供优质的抗体和相关产品，药物发现和学术实验室。我们的重点是涵盖影响健康和疾病的主要研究领域的目标，包括癌症，新陈代谢，心血管，神经科学和干细胞。Abways技术的使命是通过为生命科学开发和营销*的产品来加速科学发现。所有Abways产品均提供详细的技术信息和持续的支持。通过为利基市场和新兴市场提供服务，Abways与我们的客户建立了牢固的合作伙伴关系。

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域，以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及，细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。

Abways 兔单克隆抗体

ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体IQ431

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ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体

简要描述：ImmuQuest成立于 2002 年。ImmuQuest 提供一系列*和新颖的单克隆和多克隆抗体，这些抗体在科学研究以尽可能高的质量制造。 ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体

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ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体


主要描述： C4d 补体 [LP69]
目标抗原： C4d 补体
目录号： 智商431
数量： 0.1毫克
专注： 1毫克/毫升
克隆： LP69
主持人： 老鼠
同种型： 免疫球蛋白G1
免疫原： 从正常人血浆中补充 C4d
物种反应性： 人类
纯化： 蛋白G亲和层析
格式： 含有 PBS + 10mM 纯化抗体
应用： IHC-P、IHC-Fr
稀释： 最佳抗体稀释度应通过滴定确定，但 IHC-P 的指导原则是使用 1:25-1:50
也称为： DADB-112B14.11、C4B1、C4B12、C4B2、C4B3、C4B5、C4F、CH、CO4、CPAMD3、FLJ60561、MGC164979
已发布 ID： 34231390、27146825、23443736
Entrez 基因 ID： 100293534、100507685、720、721
SwissProt ID： p0c0l4, p0c0l5
Omim ID(s):： 120810, 120820

协议

免疫荧光实验方案 – 甲醛固定

  1. 从 Tcunit 收集细胞，并使用吸力从培养皿中取出培养基。

  2. 用 1x PBS 清洗并去除。

  3. 将细胞在预温 (37°C) 多聚甲醛中在定轨摇床上室温孵育 12 分钟。

  4. 除去PFA并在1x PBS中的0.5% Triton X-100中在室温下孵育5分钟。

  5. 准备封闭试剂，这也是抗体稀释液。

  6. 在室温下用 1x PBS 洗涤细胞 2x，在轨道摇床上洗涤 4 分钟/洗涤。

  7. 用 1% NCS 和 1x PBS 在室温下封闭 30 分钟。

  8. 准备一抗（50μl/盖玻片）和湿染色室。

  9. 在室温下用 lx PBS 清洗细胞 2x，并短暂风干。

  10. 在染色室中、黑暗中、室温下与一抗一起孵育 1 小时。在此期间准备二抗。

  11. 用 1x PBS 清洗细胞 5 次（更换烧杯 5 次/每个烧杯计数 5 次）

  12. 在染色室中、黑暗中、室温下与二抗一起孵育 1 小时。

  13. 用 1x PBS 清洗细胞 5x。

  14. 坐于大皮。

溶液（染色当天新鲜配制）。

  • * 1x 磷酸盐缓冲盐水。

  • * 封闭试剂：1% NCS，溶于 1x PBS（使用新鲜的 10x PBS）。

  • * 固定液：3.5% 多聚甲醛。

1.75g PFA 溶于 20 ml d.H2O 加 5 滴 1M NaOH 中。在 50-60°C 的热板上搅拌直至溶解。添加 4 滴 HCl 并检查 pH 指示条。 PH值应为7.4。用 d.H2O 补足体积至 25ml，并添加 25ml 2xPBS。添加到盖玻片之前检查 pH 值。

免疫荧光实验方案 – 甲醇/丙酮固定

  1. 从 TCunit 收集细胞，并使用吸力从培养皿中取出培养基。

  2. 用 1x PBS 清洗并去除。

  3. 用冷甲醇:丙酮 1:1 在冰上固定细胞 10 分钟。

  4. 准备封闭剂，这也是抗体的稀释剂。

  5. 除去固定剂并在室温下用1x PBS洗涤细胞3x，在定轨摇床上洗涤4分钟/洗涤。

  6. 在 RT 下用 1% NCS 和 1x PBS 封闭 30 分钟。

  7. 准备一抗（50μl/盖玻片）和湿染色室。

  8. 在 RT 下用 1 x PBS 清洗细胞 2x，并风干约 7 分钟。

  9. 在染色室中在黑暗中与一抗一起在室温下孵育 1 小时。在此期间准备二抗。

  10. 用 1x PBS 清洗细胞 5 次（更换烧杯 5 次/每个烧杯计数 5 次）

  11. 在染色室中在黑暗中与二抗一起在室温下孵育 1 小时。

  12. 用 1x PBS 清洗细胞 5x。

  13. 坐于大皮。

溶液（染色当天新鲜配制）

  • * 1x 磷酸盐缓冲盐水。

  • * 封闭试剂：1% NCS 溶于 1x PBS（使用新鲜的 10x PBS）。

  • * 固定液：甲醇:丙酮 1:1 冰冷。

蛋白质印迹实验方案

  1. 将凝胶转移到 PDVF 或硝酸纤维素膜上

  2. 将膜放入塑料托盘中，并在封闭缓冲液中搅拌一小时

  3. 在洗涤缓冲液中冲洗

  4. 在洗涤缓冲液加一抗中孵育一小时

  5. 用洗涤缓冲液洗涤 6 X 5 分钟

  6. 在加二抗的洗涤缓冲液中孵育一小时

  7. 用洗涤缓冲液洗涤 6X 5 分钟

  8. 检测（例如 ECL、Amersham 根据制造商说明）

洗涤缓冲液

PBS + 0.1% 吐温 20

封闭缓冲液

洗涤缓冲液+5%奶粉

所用抗体的浓度取决于每种抗体、抗原的量和所用的检测方法。一般来说，稀释度在几百倍到几千倍稀释范围内，但通常必须凭经验确定。

ImmuQuest公司提供一系列*和新颖的抗体，以尽可能高的质量制造，处于科学研究的前沿。 我们所做的每一件事都是根据研究人员的需要来开发的。只要有可能，我们的抗体就会在WB、ELISA、IHC(冰冻切片和石蜡切片)和ICC/IF等应用程序中进行测试，并在我们的数据表中公布。许多都可以以定制的格式提供。Immuquest的大多数抗体都是在我们自己的严格控制下制造的。这意味着你将永远知道你点的东西是高质量的。

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域，以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及，细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司与国内外生物试剂供应商保持着密切的合作关系，有着非常好的货源渠道， 可以在为用户提供前沿和完备的产品和物流服务。公司的目标成为中国生命科学和生物技术等领域坚强的后盾，为这些领域的发展提供服务。以“质量是企业的生命，诚信是经营的资本”为警醒 ,严把所售出商品的质量关,不做任何有损顾客利益的事情。公司代理国内外众多生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品，公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。


ImmuQuest抗体：C4d补体片段单克隆抗体

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

发表于由

抗体筛选是开发单克隆抗体药物、ADC药物和双特异抗体等药物的必经之路。目前常见的抗体筛选方法有杂交瘤技术、噬菌体展示技术、单B细胞抗体筛选技术等。不同于传统的杂交瘤细胞技术或噬菌体展示技术，基于单B细胞筛选的新一代单克隆抗体开发平台能够快速获取具有生物学功能的全天然单克隆抗体。

经典免疫学背景知识

人和动物接受了外源性免疫原（如细菌、病毒、非同源蛋白等）的刺激后，获得性免疫（Adaptive Immunity）被激活，并在T淋巴细胞、巨噬细胞和树突状细胞等免疫细胞的协同作用下，由B淋巴细胞产生针对于该病原体（或免疫原）的抗体分子；B淋巴细胞经过一系列的成熟和分化之后，最终形成浆细胞（Plasma cell）将大量的IgG分泌到血液等循环系统中；而特定的某一个B淋巴细胞在经历了V-D-J重排、ClassSwitch和Somatic maturation之后，只含有一对编码IgG重链和轻链的基因。因此，经过B淋巴细胞表面标记物和抗原特异性筛选，可以获得针对特异性抗原的单个B淋巴细胞，然后通过分子生物学手段从中获得编码抗体IgG的重链和轻链基因，并在体外重组表达验证，这也是目前获得单克隆抗体最有效和快速的技术。

一、抗体筛选技术

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

1.1杂交瘤单克隆抗体

杂交瘤单克隆抗体技术起源于1975年，英法两国科学家将分泌抗体的鼠B淋巴细胞同具有无限扩增特性的骨髓瘤细胞融合形成兼具两者特性的杂交瘤细胞。相比于多克隆抗体，单克隆抗体具有高度的抗原识别特异性和蛋白生产的均一性，在已批准上市的治疗性抗体中，多数药物是采用基于小鼠的杂交瘤技术路线。

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

1.2噬菌体展示技术

噬菌体展示技术（phage display）是由 George P. Smith 于 1985 年开发的一种体外筛选抗体的方法。将不同的外源基因分别插入噬菌体载体中，随着噬菌体的传代，外源蛋白会展现在噬菌体表面，形成噬菌体文库。随后用特定蛋白对噬菌体文库进行筛选，便可快速得到与该蛋白具有高亲和力的抗体。该技术无需B细胞培养过程，但得到的抗体并非在B细胞中表达，可能导致构象改变，从而失去特异性。同时，重链和轻链的随机组合使得抗体重链轻链无法保持天然配对。

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

1.3单 B 细胞筛选技术

单个B细胞抗体技术作为新一代抗体开发技术，可以从单个B细胞中高效、快速的分离抗体，是继杂交瘤、噬菌体展示后又一抗体产生技术的突破。其基本原理是从免疫动物或患者的组织或外周血中分离抗原特异性B细胞，筛选出分泌目标抗体分子的B细胞，结合单细胞PCR技术 ，扩增出IgG重链和轻链可变区基因，构建表达载体，进行表达、纯化，筛选和鉴定，以获取有效功能性抗体。

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

二、达普生物Comet高通量筛选平台

达普生物 Comet 高通量筛选平台基于液滴微流控技术，通过荧光标记及介电泳力对油包水液滴进行高通量分选。分选前将单细胞与反应检测体系包裹成油包水微液滴，在液滴中实现 ELISA 检测，并基于反应体系荧光信号（即细胞功能）对阳性细胞液滴进行高通量分选，可依据细胞胞外分泌靶蛋白或胞膜或胞内生物标志物对功能性细胞筛选，将 ELISA 检测与流式分选整合为一体，摒弃传统费时费力的孔板法 ELISA 筛选。基于 Droplet ELISA 的功能细胞分选方式，单次可实现高达千万级反应液滴即百万级细胞分选，并可根据需要将阳性液滴打印至 96 孔板，自动保存对应孔的照片用于单克隆确认。相较于传统的抗体制备技术，该技术保留了丰富的基因多样性，重链轻链可变区天然配对，具有抗原特异性强、亲和性高、物种不受限、后续筛选工作量低等优势，大大节省人力和试剂成本，结合单细胞测试技术可直接获得抗体基因序列，方便下游抗体工程改造，在抗体药物研发、快速应对病原微生物传染病方面具有巨大优势。

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

三、达普生物Comet高通量筛选平台特点

达普生物 Comet 高通量筛选平台，可极大加速抗体药物开发流程，缩减研发及生产成本，该平台与目前市场上主流的基于微流控腔室技术的单细胞光导系统相比，有如下显著优势：

  • 高通量：单次可实现高达千万级反应液滴即百万级细胞分选
  • 速度快：将传统数周的功能单细胞筛选工作缩减至 1-2 天内完成
  • 成本低：减少样本和试剂用量，试剂成本降至传统方法的百万分之一
  • 可兼容：FRET法、磁珠法、微珠法、报告细胞法
  • 更灵活：液滴生成后可灵活孵育条件、场所及显微观测
  • 损伤：基于荧光标记和高压介电泳力对油包水液滴分选，对细胞无损伤

高效抗体发现-达普生物COMET高通量筛选平台

达普生物科技有限公司孵化于香港科技大学，于 2018 年由多位海归博士共同创立。在深圳、嘉兴、香港三地设有研发中心，研发团队近 100 人，建立了集微流控芯片、仪器及试剂生产为一体的 GMP 厂房。达普生物是中国液滴微流控领军企业，致力于提供世界领先的生命科学解决方案。达普生物已商业化多款基于液滴微流控技术的科学仪器，包括单细胞高通量筛选系统（Comet High ThroughputSorting System）、星海单细胞测序建库系统（ Galaxy Single CellAnalysis System）与星云数字 PCR 系统（Nebula dPCR System）。应用于癌症研究、癌症早期筛查、靶向治疗、无创产前诊断、病毒定量检测、高通量药物和抗体筛选等领域。上海金畔生物科技有限公司是达普生物的代理商，如对产品感兴趣，欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或者登录网站www.xmsjci.com了解更多信息。