钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1-AAT Bioquest荧光染料

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钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1

产品参数
Ex (nm) 501 Em (nm) 521
分子量 994.86 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素, AM是美国AAT Bioquest生产的用于钙离子定量的试剂,与钙黄绿素相比,钙黄绿素 AM 具有增强的疏水性,因此它很容易穿过活细胞的细胞膜。钙黄绿素 (calcein AM) 的乙酰甲氧基 (AM) 衍生物广泛用于标记活细胞,因为它可以通过细胞膜转运到活细胞中。 AM酯基掩盖了螯合钙的分子部分。在转运到活细胞中后,细胞酯酶切断 AM 基团,分子与细胞内的钙结合(产生强烈的绿色荧光),并被保留在细胞内。由于死细胞缺乏酯酶,因此只有活细胞被标记。此功能使其对于测试细胞活力和短期标记细胞非常有用。与其他活细胞标记试剂(如 BCECF-AM 和羧基荧光素二乙酸酯)相比,calcein-AM 是适合用于染色活细胞的荧光探针,因为它的细胞毒性低。钙黄绿素不会显着影响细胞功能,例如淋巴细胞的增殖或趋化性。此外,使用钙黄绿素的活力测定是可靠的,并且与标准的 51Cr 释放测定具有良好的相关性。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素,AM。

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30  nm 
通道: FITC通道

 


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们在溶液中易于水解。 它们应在使用前用高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)溶解。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯可以稳定数月。

        以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。

注意:不建议长期储存含有Pluronic®F-127的AM酯。

b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议终浓度范围为4至5μM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂)中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以保证每个细胞的平均荧光。

e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

 

参考文献

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