7-AAD(7-氨基放线菌素D)CAS 7240-37-1-AAT Bioquest荧光染料

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7-AAD(7-氨基放线菌素D)CAS 7240-37-1价格 1095
产品规格

1 mg

产品货号

7-AAD(7-氨基放线菌素D)CAS 7240-37-1

产品参数
Ex (nm) 549 Em (nm) 648
分子量 1270.43 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

7-AAD 7-氨基放线菌素 D是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂,7-氨基放线菌素D(7-AAD)是一种非渗透性染料,可用于鉴定死细胞。染料可以进入具有受损质膜或受损/无细胞代谢的细胞。 一旦进入细胞内,染料与细胞内DNA结合,产生高度荧光的结合物,这些结合物将细胞鉴定为无活力。 它广泛用于流式细胞术。 7-AAD可以被488nm激光氩激光线激发,荧光检测到650nm以上。 尽管7-AAD的发射强度低于碘化丙锭(PI),但由于光谱重叠小,因此与其他488 nm激发的荧光染料(如FITC和PE)相结合,更长的发射波长使其更适用于多重测定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的细胞凋亡检测试剂/试剂盒。 

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实验方案

染色细胞分析方案

        通常7-AAD染色的染色在细胞染色的后一步,并且它只能染死细胞。 以下程序适用于大多数细胞类型。 生长培养基,细胞密度,细胞类型和其他因素可能会影响染色。玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色,导致在没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

1)制备1-10mM DMSO储备溶液。如果储存在-20°C,DMSO储备液可以保存6个月。

2)使用适合您样品的固定方案。

3)通过离心沉淀细胞,并将细胞重悬于缓冲盐溶液或培养基中,在pH 7.4下进行佳染料染色。 培养物中的贴壁细胞可以在盖玻片上或细胞培养孔中原位染色。

4)使用0.5至5μM的浓度添加7-AAD染色,并将其孵育15至60分钟。

注意:在初的实验中,好在整个建议的范围内尝试几种染料浓度,以确定产生佳染色的浓度。

5)在Ex / Em = 545 / 650nm处测量荧光强度(使用FL3进行流式细胞分析)

注意:7-AAD是一种潜在的致癌物质。 建议用户戴上手套,防护服和眼睛/面部保护装置,以免接触皮肤和眼睛。

 

参考文献

Resources-Application Notes Phenotypic and Epigenetic Mechanism of Action Determinations of Histone Methylase and Demethylase Inhibitors using Digital Widefield Microscopy
Authors: Brad Larson, Peter Banks
Journal: Experimental Biology (2017)