cytion贴壁细胞传代技术概述
贴壁细胞的有效传代培养需要将它们从培养容器中分离出来。采用多种方法,每种方法适合不同的细胞类型和条件。选择解离方法时,考虑细胞系的具体需求和实验目标至关重要。定期监测细胞活力,目标是在传代培养时细胞活力超过 90%,这对于培养物的持续健康和生产力至关重要。以下是这些过程的概述:
程序 |
解离剂 |
典型应用 |
机械抖落 |
通过摇动或移液轻轻或剧烈搅拌 |
用于松散贴壁或处于有丝分裂期的细胞。 |
机械刮削 |
物理工具,例如细胞刮刀 |
适用于蛋白酶敏感细胞,尽管它可能很苛刻并且具有潜在的破坏性。 |
酶处理 |
胰蛋白酶溶液 |
对于牢固粘附在培养容器上的细胞有效。 |
酶处理 |
胰蛋白酶+胶原酶 |
非常适合致密细胞培养或多层生长的细胞,特别是成纤维细胞。 |
酶处理 |
分散酶 |
可以去除完整片材中的表皮细胞,保持细胞间的连接。 |
酶处理 |
TrypLE™ 酶 |
适用于牢固贴壁细胞的强解离选项,适用于需要非动物源试剂的实验方案。 |
酶处理 |
Accutase |
胰蛋白酶的温和替代品,对多种细胞类型有效,包括干细胞和原代细胞。 |
酶处理 |
胰蛋白酶+EDTA |
用于通过螯合二价阳离子来增强细胞脱离、促进酶活性的组合。 |