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2011年12月29日 — 赛默飞世尔科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶，是为快速DNA酶切专门研发的进阶版限制性内切酶。在30年的内切酶研究当中，我们积累的限制性内切酶生产菌株库是业内最大的限制性内切酶生产菌株库之一。大量可供选择的同裂酶和优异的生产能力促进了这个包含176种FastDigest快酶的独特系统的诞生。所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest缓冲液和FastDigest Green绿色缓冲液中都具有100%活性，并可在5-15分钟内迅速完成酶切。这就使得任意限制酶组合都能够在同一反应管中同时反应，避免了连续酶切。此外，FastDigest Green绿色缓冲液兼具上样缓冲液的功能，可直接将反应物上样凝胶电泳，操作更为便利。
FastDigest快速酶可用于酶切质粒、基因组DNA、病毒DNA以及PCR产物。酶切时间和实验方案已经过实验验证，每种快速酶及其作用的模板都有相应的酶切时间和实验方案提供。FastDigest系列尤其适合对于反应组分纯度、性能稳定性和反应体系配制简单化要求极高的应用。
特点
- 所有FastDigest快酶在通用缓冲液中都具有100%活性
- 5-15分钟完全酶切
- FastDigest通用缓冲液与所有下游应用100%兼容
- 直接上样凝胶电泳
- 共有176种FastDigest快酶可供选择
应用
- 快速克隆分析
- 快速制备克隆用DNA
- PCR产物酶切
- 快速RFLP基因分型
- 难切割DNA片段的酶切
FastDigest 通用缓冲液与所有下游应用100%兼容DNA/RNA 修饰酶 在FastDigest缓冲液和FastDigest Green绿色缓冲液中的活性 DNA Polymerase I, E.coli 100% Klenow Fragment 100% Klenow Fragment, exo 100% T7 DNA Polymerase 100% T4 DNA Ligase* 75-100% FastAPTM Thermosensitive Alkaline Phosphatase 100% T4 Polynucleotide Kinase 100% 通用缓冲液和直接凝胶上样所有FastDigest快酶在FastDigest Green绿色缓冲液中都具有100%活性。此外FastDigest Green绿色缓冲液中还包含密度试剂和两种示踪染料，从而可直接将反应产物添加到点样孔中。蓝色染料在1%琼脂糖凝胶
中的迁移率与3-5kb DNA片段接近， 并在424nm时出现激发峰；而黄色染料在1%琼脂糖凝胶中的迁移速度稍快于10bp DNA片段，在615nm时出现激发峰。FastDigest Green绿色缓冲液和无色缓冲液一样可进行高性能的DNA酶切和下游应用。对于需要用荧光激发进行酶切产物分析的应用（例如，在紫外光下测量浓度），我们建议使用无色的FastDigest缓冲液。
FastDigest Green绿色缓冲液
含有FastDigest Green绿色缓冲液的反应混合物
A: 电泳前，加入点样孔中的反应混合物；B: 电泳后，在凝胶中得到分离的条带
用FastDigest快速酶在FastDigest Green绿色缓冲液中5分钟内进行质粒DNA的三重酶切和连接
M：Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder （#SM1551）
C：未酶切的质粒DNA对照
1：在FastDigest缓冲液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI对质粒DNA进行三重酶切；2：在FastDigest缓冲液中的酶切和连接反应混合物
3：在FastDigest Green绿色缓冲液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI对质粒DNA进行三重酶切；4：在FastDigest Green绿色缓冲液中的酶切和连接反应混合物
5分钟内酶切DNA
- 在1种缓冲液中5-15分钟内可 进行双重和多重酶切
- 高通量应用的理想选择
- 所有种类的DNA模板都提供相应的酶切时间：质粒DNA、PCR产物、基因组DNA
- 任何模板都不需要酶切过夜
- 没有星活性——无需延长孵育时间
用FastDigest酶和传统内切酶进行质粒DNA酶切的比较M：GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder；C：未酶切的质粒DNA
1：用FastDigest Xhol 5分钟内酶切质粒DNA；2：用FastDigest ApaI 5分钟内酶切质粒DNA
3：用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分钟内双酶切质粒DNA；4：用Apal酶切质粒DNA 1小时
5：用Xhol酶切质粒DNA 1小时；6：在1X Tango缓冲液中用4倍的ApaI过量酶切质粒DNA 1小时，然后在2X Tango缓冲液中用XhoI再酶切1小时
双酶切可节省超过2个小时
FastDigest限制性内切酶为DNA酶建立新的标准
业内领先的生产工艺● 所有生产均在符合欧盟指令和ISPE规范标准的D级洁净空间内进行
● 严格的质控● 依照ISO9001质量管理体系和ISO14001环境管理体系运作，确保产品均一性和批间重复性
● IVD产品生产符合ISO13845医疗器械管理体系标准
● 根据要求进行cGMP生产
业内领先的生产工艺
FastDigest限制性内切酶应用视频：http://v.youku.com/v_show/id_XMzM3MDAxMTcy.html
如需更多信息请登录： www.thermoscientific.com/fastdigest
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