Amplite 比色法尿素定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。尿素是动物蛋白质和氨基酸代谢的终降解产物。它在肝脏中产生，由肾脏分泌并通过尿液排泄。尿素的测定在临床实验室中用于监测健康状况是非常有用的。血尿素氮（BUN）测试是尿素形式的血液中氮的量的量度，主要用于肌酸酐测试，以评估肾功能，帮助诊断肾脏疾病。我们的Amplite 比色尿素分析试剂盒提供了一种简单灵敏的比色法，用于定量生物样品中的尿素浓度，如血清，血浆和尿液等。该分析基于尿素在分析缓冲液中的酶偶联反应，后生产出蓝色的产品。产生的颜色强度与样品中尿素的浓度成比例，其可以在660-670nm处比色测量。这种Amplite 比色尿素分析试剂盒提供了一种简单的分析方法，可在150μL分析体积中检测低至10μM的尿素。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行，并且易于适应自动化而无需分离步骤。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法尿素定量试剂盒。 

适用仪器

样品实验方案

简要概述

1.准备氯化铵标准品或测试样品（50μL）
2.添加分析缓冲液I（50μL）
3.在室温或37°C孵育5分钟
4.添加分析缓冲液II（50μL）
5.在室温下孵育30-60分钟
6.监测吸光度增加到660 – 670 nm

溶液制备 

1.标准溶液

1.1氯化铵标准
将1μL1.0M氯化铵标准品（组分C）加入999μLDPBS中，生成1000μM氯化铵标准溶液（AS7）。 取1000μM氯化铵标准溶液（AS7），进行1：3连续稀释，得到连续稀释的氯化铵标准品（AS6-AS1）和DPBS。

样品分析

表1.在96孔微孔板中的氯化铵标准品和测试样品的布局。 AS =氯化铵标准品（AS1-AS7,1至1000μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备氯化铵标准品（AS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向每个氯化铵标准品，空白对照和测试样品的孔中加入50μL测定缓冲液I（组分A），使总测定体积为100μL/孔。对于384孔板，在每个孔中加入25μL测定缓冲液I，总体积为50μL/孔。

3.将反应在室温或37℃下孵育5分钟。

4.向每个孔中加入50μL测定缓冲液II（组分B）以使总测定体积为150μL/孔。对于384孔板，每孔加入25μLAssayBuffer II，总体积为75μL/孔。

5.在室温下孵育反应30-60分钟。

6.用吸光度酶标仪在660-670nm处监测吸光度的增加。注意：加入分析缓冲液II（组分B）后颜色变为黄色，含氯化铵标准品的孔或样品孵育后会显示蓝绿色。颜色的强度将在30-60分钟内达到大值。

参考文献

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