日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案

日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案

日立氨基酸分析仪在国内应用较为普遍,有不少人在选择配套试剂时存在各种问题,难以取舍。上海金畔生物提供日立氨基酸分析仪配套试剂-缓冲液、显色液的解决方案。

日立氨基酸分析仪配套试剂 - 西宝生物推荐使用

日立全自动氨基酸分析仪配套试剂与耗材

日立全自动氨基酸分析仪具有40多年的历史,全球拥有2000多用户,在中国市场的占有率超过80%,广泛应用于食品、饲料、医药质量监控、生化研究、临床研究等领域。日立全自动氨基酸分析仪以其显著特点、多项专利技术和可靠的性能长期以来受到用户的一致认可,是全球唯一的能在保留时间重现性、峰面积重现性及检出限有绝对保证的全自动氨基酸分析仪。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪
日立L-8900全自动氨基酸分析仪
国内使用的型号主要为L-8500型,L-8500A型,L-8800型,L-8900型等多种型号,采用柱后衍生、用茚三酮作为衍生试剂的离子交换色谱法,配套缓冲液作为洗脱试剂的工作方式。有不少用户在选择配套试剂时存在各种问题,难以取舍。希望以下有关如何选择日立氨基酸分析仪配套试剂的一些小窍门能对您有所帮助。

为什么要使用配套试剂和耗材?

氨基酸分析仪是一种专门用于氨基酸分析的高效设备,应当由具备化学分析基础知识的专业人员进行操作。如果分析仪器、化学试剂和样品使用不当,不仅可能造成错误的分析数据,而且还可能对安全带来不利的影响,因此厂家的建议是所有的试剂都应该使用氨基酸分析专用品或特极品。
国内已经有许多使用自配试剂替代进口试剂的研究见诸报道。如果是经验丰富的检测人员完全是可以采取自配试剂来替代以达到降低成本的目的。但是需要指出的是,由于各种试剂的供应商和指标的差异,自配方案和厂家提供的配比是略有出入的,需要分析人员根据实际的检测进行调整。对于较大检测需求的项目而言,自配试剂需要投入额外的配制时间和工作量,考虑到人工成本,综合考量并不一定是最佳选择。

配套试剂的构成

日立(Hitachi)本身并不生产试剂,其仪器的配套试剂是由日本几家大型试剂生产商提供。不论是什么型号的配套试剂,基本都分4部分:
日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
缓冲液和再生液是由三菱化学MCI生产,茚三酮是由和光WAKO提供,而氨基酸分析使用的氨基酸混合标准品则是由味之素和日本和光纯药提供的。
货号
品名
包装
608-07461 MCI Buffer L-8500-PH Kit
MCI缓冲液L-8500-PH套装
包含:PH-1 1L*2, PH-2 1L*1, PH-3 1L*1, PH-4 1L*2, PH-RG 1L*1
1KIT
605-07471 MCI Buffer L-8500-PF Kit
MCI缓冲液L-8500-PF套装
包含:PF-1 1L*2, PF-2 1L*1, PF-3 1L*1, PF-4 1L*2, PF-RG 1L*1
1KIT
632-07401 MCI Buffer L-8900 PFS Kit
MCI缓冲液L-8900-PFS套装
包含:PFS-1 1L*2, PFS-2 1L*2, PFS-3 1L*1, PFS-4 1L*1, PFS-RG 1L*1
1KIT
299-70501 Ninhydrin Coloring Solution Kit For HITACHI
日立氨基酸分析仪配套茚三酮显色液(L-8500,L-8900均适用)
1L*2
013-08391 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
氨基酸混合标准溶液, H型
5ml
015-14461 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2
氨基酸混合标准溶液, AN-2型
5ml
016-08641 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B
氨基酸混合标准溶液, B型
5ml
上海金畔生物提供氨基酸分析试剂,咨询热线:18301939375

缓冲液

缓冲液是氨基酸分析的重要试剂之一,虽然主要成分是柠檬酸、柠檬酸钠、氯化钠等常见有机试剂,但对于试剂的纯度,配置有一定要求。试剂不当,轻则影响试验结果,重者造成仪器异常,甚至损伤。原装配套的缓冲液和显色液在试剂纯度,稳定性上都有保证,且省去了配置试剂的时间,可以大大提供测定准确的和工作效率。
日立前期推出的包括835型,L-8500型,L-8500A型,L-8800型氨基酸分析仪配套的缓冲液都分PH和PF系列,适用于不同的样本和检测目的。L-8900型可以使用L-8500型的配套试剂,但是如果希望具有高吞吐能力,则需要使用L-8900型专用的PFS系列。
  • PH系列: 钠盐系列,适用蛋白质水解产物分析
  • PF系列: 锂盐系列,适用生物液体分析
  • PFS系列: 适用生物液体分析,相比PF具有高吞吐能力
三菱化学生产的MCI L-8500系列缓冲溶液,均可用于L-8900系列。如下图所示,PH-RG是再生液,其主要成分为碱标准溶液。
日立L-8900全自动氨基酸分析仪内部一览
日立L-8900全自动氨基酸分析仪内部

如何选择合适的缓冲溶液

L-8500 L-8900
PH系列缓冲液
PF系列缓冲液
PFS系列缓冲液
茚三酮显色液
生物液体 蛋白水解液 生物液体 蛋白水解液 高吞吐*
    (1)符合下列条件,适合使用PH系列配套试剂:

  • 仪器是L-8500型,L-8500A型,L-8800型,L-8900型
  • 检测样本为蛋白质水解产物
MCI缓冲液L-8500-PH套装
608-07461 MCI Buffer L-8500-PH Kit
(包含:PH-1 1L*2, PH-2 1L*1, PH-3 1L*1, PH-4 1L*2, PH-RG 1L*1)
1KIT
634-12471 MCI Buffer L-8500-PH-1 1L×2
604-07463 1L×10
608-07466 MCI Buffer L-8500-PH-2 1L×10
631-12481 1L×2
638-12491 MCI Buffer L-8500-PH-3 1L×2
606-07462 1L×10
631-12501 MCI Buffer L-8500-PH-4 1L×2
602-07464 1L×10
638-12511 MCI Buffer L-8500-PH-RG 1L×2
600-07465 1L×10
    (2)符合下列条件,适合使用PF系列配套试剂:

  • 仪器是L-8500型,L-8500A型,L-8800型,L-8900型
  • 检测样本为生物液体
MCI L-8500-PF缓冲液
605-07471 MCI Buffer L-8500-PF Kit
包含:PF-1 1L*2, PF-2 1L*1, PF-3 1L*1, PF-4 1L*2, PF-RG 1L*1
1 kit
601-07473 MCI Buffer L-8500-PF-1 1L×10
639-12421 1L×2
607-07475 MCI Buffer L-8500-PF-2 1L×10
636-12431 1L×2
633-12441 MCI Buffer L-8500-PF-3 1L×2
605-07476 1L×10
630-12451 MCI Buffer L-8500-PF-4 1L×2
609-07474 1L×10
603-07472 MCI Buffer L-8500-PF-RG 1L×10
637-12461 1L×2
    (3)符合下列条件,适合使用PFS系列配套试剂:

  • 仪器是L-8900型
  • 高吞吐能力
632-07401/PFS-KIT MCI Buffer L-8500-PF Kit
包含:PFS-1 1L*2、PFS-2 1L*2、PFS-3 1L*1、PFS-4 1L*1、PFS-RG 1L*1
1 kit
639-07411/PFS-RG MCI Buffer L-8900-PFS-1 1L×10
636-07421/PFS-4 MCI Buffer L-8900-PFS-2 1L×10
633-07431/PFS-3 MCI Buffer L-8900-PFS-3 1L×10
630-07441/PFS-2 MCI Buffer L-8900-PFS-4 1L×10
637-07451/PFS-1 MCI Buffer L-8900-PFS-RG 1L×10
299-70501 NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI FOR 2L
* 如需日立氨基酸分析仪配套试剂,请致电:18301939375

显色液

日立氨基酸分析仪配套的茚三酮显色液成套试剂(Ninhydrin Coloring Solution Kit, #299-70501),适合L-8500,L-8800和L-8900等多种型号日立氨基酸分析仪,但不包括R3。
  • R1: 茚三酮
  • R2: 茚三酮缓冲溶液
  • R3: 5% 乙醇
茚三酮显色剂+缓冲液套装
299-70501 NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI FOR 2L
* 如需日立835型氨基酸分析仪配套缓冲液和显色液,请致电:18301939375

氨基酸混合标准溶液

氨基酸分析标准品 – 氨基酸混合标准溶液, H型
本产品含有17种常用的氨基酸,谷氨酸和谷氨酰胺水解形成的氯化铵,用于氨基酸分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或者测序。
日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
013-08391
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
氨基酸混合标准溶液, H型
5ml
019-08393
1mLx5A
氨基酸分析标准品 – 氨基酸混合标准溶液, AN-2型
本产品用于使用氨基酸分析仪和高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸组分分析和序列分析。本产品除了包含14种常规酸性和中性氨基酸以外,还包含12种化合物。
日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
011-14463
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2
1mLx5A
015-14461
5mL
氨基酸分析标准品 – 氨基酸混合标准溶液, B型
本产品用于使用氨基酸分析仪和高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸组分分析和序列分析。本产品除了3种常规酸性和中性氨基酸以外,还包含9种化合物。
日立氨基酸分析仪配套试剂解决方案
012-08643
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B
氨基酸混合标准溶液, B型
1mLx5A
016-08641
5mL

氨基酸分析仪配件

氨基酸分析仪用各种类型分析柱
855-4506 标准蛋白水解分析柱:4.6mm I.D. X 60mm L #2622
855-4507 标准生理体液分析柱:4.6mm I.D. X 60mm L #2622
855-4508 蛋白水解高分离度柱:4.6mm I.D. X 80mm L #2622
855-4509 生理体液高分离度柱:4.6mm I.D. X 80mm L #2622
855-4513 特殊氨基酸分析柱:4.6mm I.D. X 80mm L #2820M
氨基酸分析仪用耗材
855-4506 标准蛋白水解分析柱:4.6mm I.D. X 60mm L #2622
655-2991 L-5050型氨基酸分析仪用软管
TEFZEL TUBE, For L-5050
706-2141 氨基酸分析仪用过滤芯
Filter, Installed to: Z-8000F
805-2236 氨基酸分析仪样品瓶(玻璃)
835-0136 氨基酸分析仪用密封圈
MECHANICAL SEAL ASSY
835-2030 氨基酸分析仪用离子交换树脂
835-2314 L-8500型氨基酸分析仪用流通池
FLOW CELL (6), L-8500
852-2047 L-8900型氨基酸分析仪用密封垫
INJECTION PORT SEAL SUPPORT, For L-8900
852-2084 L-8900型氨基酸分析仪用塑料软管
PIPE IV 6 ASSY, L-8900
852-4010 L-8900型氨基酸分析仪用流通池
FLOW CELL ASSY, L-8900
852-4523 L-8900型氨基酸分析仪用软管
M2-IN TUBE ASSY,L-8900
852-4524 L-8900型氨基酸分析仪用软管
M2-2 TUBE ASSY,L-8900
852-4526 L-8900型氨基酸分析仪用软管
M3-IN ASSY,L-8900
852-4528 L-8900型氨基酸分析仪用软管
M3-OUT ASSY,L-8900
852-4529 L-8900型氨基酸分析仪用软管
M2-1 TUBE ASSY,L-8900
852-4544 L-8900型氨基酸分析仪用流通池
P30A2,P42A FLOW CELL INLET TUBE, For L-8900
852-6565 L-8900型氨基酸分析仪用电磁阀
Solenoid Valve
852-6573 L-8900型氨基酸分析仪用两通电磁阀
2 WAY VALVE, For L-8900
852-6574 L-8900型氨基酸分析仪用三通电磁阀
3 WAY VALVE, L-8900
855-3523 氨基酸分析仪用除氨柱
AMMONNIA FILTER COLUMN, For AAA
855-3524 氨基酸分析仪用除氨柱
AMMONNIA FILTER COLUMN, For HIGH RESOLUTION COLUMN
855-3533 氨基酸分析仪用反应柱
REACTION COLUMN 4.6mmID X 40mm,For AAA
855-3643 氨基酸分析仪用过滤器
FILTER (5PCS/SET),For L-8800/8800A
855-3693 氨基酸分析仪用离子交换树脂
ION EXCHANGE RESIN,FOE AAA,#2622(SC)(0.5G)
855-4069 L-8800型 氨基酸分析仪用废液瓶
POLYETHYLENE BOTTLE(1L),For L-8800
855-4506 氨基酸分析仪用分析柱
STANDARD ANALYSIS COLUMN 4.6mm X 60mm
855-5087 L-8800型氨基酸分析仪用密封垫
855-5155 L-8800型氨基酸分析仪用样品瓶瓶盖及连接管
RUBBER PLUG ASSY (R1)(ED), For L-8800
855-5198 L-8800型氨基酸分析仪用电磁阀 R-2
855-5239 L-8800型氨基酸分析仪用分离柱后管(ED),v14
855-5251 L-8800型氨基酸分析仪用管路
PIPE AS-LF, For L-8800
855-5253 L-8800型氨基酸分析仪用塑料管
PIPE LF-C(l-8800)(ed),For L-8800, v14 Remarks
855-5401 L-8800型氨基酸分析仪用空分析柱
EMPTY COLUMN 4.6 X 60mm
855-5450 L-8800型氨基酸分析仪用在线过滤器
FILTER ASSY, For L-8800, v14, v14
855-5694 L-8800型氨基酸分析仪用反应柱柱前管
PIPE (M1-C), For L-8800, v14
855-5859 L-8800A型氨基酸分析仪用过滤膜
FILTER(10) 2, For L-8800A
890-1105 氨基酸分析仪用排放阀
DRAIN VALVE ASSY, L-2100
890-3191 氨基酸分析仪用液相色谱仪用进样针固定臂杆接头,进样针固定臂杆4 紫外分光光度计用
890-3200 氨基酸分析仪用弹簧
SPRING, For L-2200,L-8900; 85P-72, CP100A
890-3235 氨基酸分析仪用六通阀
HIGH PRESSURE VALVE, For L-2200
890-3294 氨基酸分析仪用液相色谱仪用进样针固定臂杆接头,进样针固定臂杆4 紫外分光光度计用电源板C
NEEDLE ARM, For L-2160U, v14
891-1364 氨基酸分析仪用密封垫,液相色谱仪用单向阀密封B(厚),马达用密封圈
PACKING 1.8(ET-C)B, For L-2160U, v14
891-3955 氨基酸分析仪用进样针
NEEDLE U,For L-2200,L-2200U
891-5077 氨基酸分析仪用色谱柱
Hitachi LaChrom NH2,Particle Size(5um),size: 4.6 X 250mm
893-0815 氨基酸分析仪用进样注射器
Syringe(175ul), For Chromaster 5110 Pump
L369053 氨基酸分析仪用连接件
MAIN UNIT: 6420 UC-VIS
LOGO69080-10 氨基酸分析仪用管子接头 SN1/8 10PCS
855-5993 氨基酸分析仪用标准样品 Standard Sample
L-8900消耗品配件包(货号:852-7100)是日立L-8900型全自动氨基酸分析仪专用的配件,包括了以下配件
855-5030 泵密封垫 8
855-5034 清洗密封垫 8
855-5859 过滤器(10) 2
890-3183 进样器密封垫 1
080-3276 注射器顶套 3
885-1200 钨灯 2
855-3643 在线过滤器 2
L-8900维护配件包(货号:852-7101)是日立L-8900型全自动氨基酸分析仪专用配件,包括了以下配件
855-5086 阀密封垫(1) 8
855-5087 阀密封垫(2) 4
855-2920 排放阀密封垫 2
810-1128 排放阀密封圈 2
890-3253 1
852-2043 针套管 1
638-1424 密封垫 2
080-3276 注射器杆密封 1
890-3243 转子 1
590-3234 注射器杆密封 1
706-2141 过滤器 10

230-01861 50ml 物体表面湿润张力测试液体No.34.0

230-01861 50ml 物体表面湿润张力测试液体No.34.0

表面湿润张力试验用混合液(Wetting Tension Test Mixture)  ぬれ張力試験用混合液 ( ぬれ張力試験用)
表面湿润张力试验用混合液,用于“塑料薄膜及薄板表面湿润张力试验法”的试剂。
试验方法
用含有试剂的棉棒在试验材料(薄膜)上横向涂抹一次,必需注意涂上的混合液的量会极大影响试验的正确度。涂上试剂后2秒,判定液膜中央部分的状态。当液膜没有产生破裂时,判定为“可润湿”;产生破裂时,判定为“不可润湿”。
ぬれ張力試験用混合液  Wetting Tension Test Mixture  详细产品信息如下:
( ぬれ張力試験用)
(和光纯药Wako中国)  另还常年供应以下表面张力的型号:
235-01791                  No.22.6                  50ml
238-01801                  No.25.4                  50ml
235-01811                  No.27.3                  50ml
232-01821                  No.30.0                  50ml
和光纯药WAKO:Wetting Tension Test Mixture No.34.0  物体表面湿润张力测试液体No.34.0   230-01861  50ml
239-01831                  No.31.0                  50ml
236-01841                  No.32.0                  50ml
233-01851                  No.33.0                  50ml
237-01871                  No.35.0                  50ml
234-01881                  No.36.0                  50ml
231-01891                  No.37.0                  50ml
234-01901                  No.38.0                  50ml
231-01911                  No.39.0                  50ml
238-01921                  No.40.0                  50ml
235-01931                  No.41.0                  50ml
232-01941                  No.42.0                  50ml
239-01951                  No.43.0                  50ml
236-01961                  No.44.0                  50ml
239-01971                  No.45.0                  50ml
230-01981                  No.46.0                  50ml
237-01991                  No.48.0                  50ml
234-02001                  No.50.0                  50ml
231-02011                  No.52.0                  50ml
238-02021                  No.54.0                  50ml
235-02031                  No.56.0                  50ml
和光纯药WAKO:Wetting Tension Test Mixture No.34.0  物体表面湿润张力测试液体No.34.0   230-01861  50ml
232-02041                  No.58.0                  50ml
239-02051                  No.59.0                  50ml
236-02061                  No.60.0                  50ml
233-02071                  No.61.0                  50ml
230-02081                  No.62.0                  50ml
237-02091                  No.63.0                  50ml
230-02101                  No.64.0                  50ml
237-02111                  No.65.0                  50ml
234-02121                  No.67.0                  50ml
231-02131                  No.70.0                  50ml
238-02141                  No.73.0                  50ml

wako Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞/巨噬细胞特异性抗体

wako Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞/巨噬细胞特异性抗体

先关产品:

wako Anti Iba1, Rabbit For Immunocytochemistry)

wako Anti Iba1, Rabbit  016-20001 (for Western Blotting)

Iba1: ionized calcium binding adapter molecule 1 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体

        钙离子是已知的所有细胞,包括中枢神经系统(CNS)细胞中最重要的信号调解人之一。钙离子通过与各种钙结合蛋白结合发挥信号活动,其中许多钙结合蛋白被划分成一个大的蛋白家族,EF手性蛋白家族。Iba1是一个17 kDa的EF手性蛋白,在巨噬细胞和小胶质细胞中表达,并在这些细胞的活化过程中表达升高。
本抗体以合成的的Iba1羧基末端序列为抗原,该序列是人,大鼠和小鼠Iba1蛋白质保守序列。本抗体(免疫组化用)特异性与小胶质细胞/巨噬细胞反应,免疫双重染色与单克隆抗体结合,可与GFAP单克隆抗体((胶质纤维酸性蛋白,Glial Fibrillary Acidic Protein)联合使用对脑组织和细胞培养物进行双重染色。

特点

S特异性检测小胶质细胞与/巨噬细胞,不与神经细胞与星形胶质细胞发生交叉反应。可与人,大鼠,小鼠的Iba1反应

Wako 016-26721 Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24) for Immunochemistry 50ul
Wako 012-26723 Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24) for Immunochemistry 10ul
Wako 013-26471 Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome(635)-conjugated for Immunochemistry 100ul
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635)
Wako 016-26461 Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated for Immunochemistry 100ul
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合生物素)
Wako  019-19741 Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry) for Immunochemistry 50μg
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)
Wako 016-20001 Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting) for Immunochemistry 50μg
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹)

应用

石蜡切片应用方法:
1. 固定
2. 用0.01M PBS缓冲液清洗二次
3. 使用含有0.3% 过氧化氢的甲醇孵育30分钟
4. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
5. 使用封闭液(含有1.5%的山羊血清和1%BSA的0.001M PBS缓冲液)室温孵育2小时
6. 使用含有Anti Iba1 polyclonal antibody的封闭液4℃孵育过夜
7. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
8. 使用含有生物素标记的抗兔IgG(1:200)的封闭液室温孵育1小时
9. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
10. 使用Elite ABC试剂(含有试剂A1:50,试剂B1:50的0.01M PBS溶液)
11. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次

12. 过氧化物酶溶液(含有0.01% 过氧化氢和0.05% DAB的0.05M Tris溶液)

巨噬细胞/小胶质细胞特异性蛋白抗体Iba1的应用

免疫细胞化学⇒和光 Cat. No. 019-19741 (50μg (100μL))
说明书下载地址

http://www.siyaku.com/uh/Flh.do?file_path=/ANTI_FILES/W01/W01W0101-1974/D0010.pdf&now=1481080836480

免疫印迹⇒和光Cat. No. 016-20001 (50μg (100μL))
众所周知,钙离子是中枢神经系统细胞信号传递的重要介质。钙离子通过与各种钙结合蛋白关联激活信号,其中大多数蛋白属于EF手性蛋白家族。
 Iba1属于17-kDa EF蛋白,在巨噬细胞和小胶质细胞中特异性表达,起到正向调节的作用。
和光提供的兔多抗可识别Iba1羧基末端序列的合成肽,这段Iba1蛋白序列在人、大鼠和小鼠中均存在。这些抗体可特异性的识别小胶质细胞和巨噬细胞,适用于脑组织的双重免疫染色,以及细胞培养中与GFAP单抗联合使用(GFAP单抗可特异性的识别星形胶质细胞)。
 
特征:特异性识别人、大鼠、小鼠的小胶质细胞及巨噬细胞,无法作用于神经元和星形胶质细胞。
 
大鼠原代的细胞培养的双重免疫染色和同一位置的对比图像
绿色:Iba1,小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体作用 (Wako Cat. #019-19741)
红色:星形胶质细胞,与GFAP单抗作用
      (此数据由 日本神经系统科学国家研究所神经化学部提供)

Iba1抗体用于免疫细胞化学(Wako Cat. #019-19741)试验过程

   石蜡切片应用
1)去石蜡
100%二甲苯 10分钟  2次
100%乙醇   5分钟     2次
80%乙醇   5分钟 
70%乙醇   5分钟 
一蒸馏水    5分钟      2次
2)用0.01M缓冲液冲洗两次;
3)在含0.3%过氧化氢的甲醇里孵育30分钟;
4))用0.01M缓冲液冲洗三次;
5)在室温下,放进含有1.5%山羊血清和1%牛血清蛋白的0.001MPBS的封闭液里孵育2小时;
6)在4度下,与 Anti Iba1 Antibody (0.5 μg/mL)(Wako Catalog No. 019‐19741)在封闭液中孵育过夜;
7)用0.01M PBS冲洗3次;
8)在室温下,与生物素标记的anti‐Rabbit IgG Antibody (1:200)在封闭液中孵育1小时;
9)用0.01M PBS冲洗3次;
10)在室温下,与ABC试剂(试剂A(1:50)和试剂B(1:50)与0.01MPBS混匀)孵育1小时
11)用0.01MPBS冲洗3次;
12)在过氧化物酶溶液(含0.01%过氧化氢,0.05%DAB的0.05MTris缓冲液)中孵育;

Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)   019-19741 介绍

小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)

鉴定小胶质细胞的标记物。众多文献引用。产品质量稳定。小胶质细胞属于神经免疫细胞,在当前神经生物学研究的热点。包括从事眼科研究,神经退行性疾病的客户会用到该产品。
文献报道可用于石蜡切片和冰冻切片的免疫组化(IHC)实验。

品牌:Wako
CAS No.:
储存条件:-20℃
纯度:0.5mg/ml

详细介绍:
This product is for research use only. Do not administer it to human.
Antibodies against Macrophage/Microglia-specific Protein Iba1
Calcium ions are known to be one of the most important signal mediators in all cells including central nervous system (CNS) cells. Calcium ions exert their signaling activity through association with various calcium binding proteins, many of which are classified into a large protein family, the EF hand protein family. Iba1 is a 17-kDa EF hand protein that is specifically expressed in macrophages/ microglia and is upregulated during the activation of these cells.Wako has launched rabbit polyclonal antibodies were raised against a synthetic peptide corresponding to the Iba1 carboxy-terminal sequence, which was conserved among human, rat and mouse Iba1 protein sequences. These antibodies are specifically reactive to microglia/ macrophages, are appropriate for immuno-double staining of brain tissues and cell culture in combination with monoclonal antibody to GFAP, which specifically reacts to astrocyte.
Rabbit Anti Iba1 antibody is raised a synthetic peptide corresponding to C-terminus of Iba1.
Preparation: Purified by the antigen affinity chromatography from rabbit antisera and prepared in TBS solution. Contains no preservatives and stabilizers.
Specificity: Specific to microglia and macrophage, but not cross-reactive with neuron and astrocyte. Reactive with human, mouse and rat Iba1.
Working Concentration: Immunocytochemistry 1-2 μg/mL
Storage:Store at -20°C. After opening, aliquot contents and freeze at -20°C.
Package Size: 50 μg (100 μL)
Specificity:
Specific to microglia and macrophage, but not cross-reactive with neuron and astrocyte. Reactive with human, mouse and rat Iba1.
References:参考文献

  1. Imai, Y., Ibata, I., Ito, D., Ohsawa, K. and Kohsaka, S.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 224, 855 (1996).
  2. Ito, D., Imai, Y., Ohsawa, K, Nakajima, K, Fukuuchi, Y. and Kohsaka, S.: Brain Res. Mol. Brain Res., 57, 1 (1998).
  3. Ohsawa, K., Imai, Y., Kanazawa, H., Sasaki, Y. and Kohsaka, S.: J. Cell Sci., 113, 3073 (2000).
  4. Sasaki, Y., Ohsawa, K., Kanazawa, H., Kohsaka, S. and Imai, Y.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 286, 292 (2001).
  5. Kanazawa, H., Ohsawa, K., Sasaki, Y., Kohsaka, S. and Imai, Y.: J. Biol. Chem., 277, 20026(2002).

 

iba1小胶质细胞抗体 免疫印迹⇒ 016-20001 (50μg (100μL))

wako Anti Iba1, Rabbit  016-20001 (for Western Blotting)

钙离子作为信号转导通道中的第一信使,在所有细胞包括中枢神经细胞的生命活动中起重要作用。钙离子与不同的钙结合蛋白结合后进行级联反应。Iba1 是能与巨噬细胞和小胶质细胞发生特异性结合的钙结合蛋白,当这些细胞激活后,Iba1 的表达量上调,因此Iba1 通常作为鉴定小胶质细胞的标记物使用。近来研究发现,小胶质细胞除了提供营养、保护神经的作用外,还被证明可产生NO、TNF- α、IL-1 β等物质,因此将小胶质细胞定义为中枢神经系统中的巨噬细胞样吞噬细胞,具有重要的免疫细胞作用。当病原菌,病毒入侵中枢神经系统时会起免疫监视的作用。近来研究发现,该细胞可能与神经退行性疾病的发生和发展有关。本产品是可与小胶质细胞发生特异性反应的兔多抗,配合对星形胶质细胞有特异性的GFAP 单抗,可进行双染色。
抗原:合成肽(Iba1 的C 末端序列)
外观:TBS 溶液(1mg/ml)
提纯:抗原亲和提纯
特异性:对小胶质细胞、巨噬细胞特异反应。不会与神经元、星形胶质细胞发生交叉反应。
能与人、小鼠、大鼠Iba1 反应。
用法: ① Iba1 抗体,兔源(Immunocytochemistry 用)
适合Immunocytochemistry。
只需1 ~ 2 ug/ml 即可进行实验。
② Iba1 抗体,兔源(Western blotting 用)适合Western blotting。
只需0.5 ~ 1ug/ml 即可进行实验。

绿色:Iba1 抗体,兔源(Immunocytochemistry 用)(小胶质细胞)
红色:抗GFAP 抗体(星形胶质细胞)
数据提供:日本国立精神• 神经中心神经研究所代谢研究部

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英  文  名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产  地: 日本
商  家: Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆  Phos-tagTM 的简介
Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆  Phos-tagTM 系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗)
Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 免疫印迹(正常SDS-PAGE)
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构
特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理
◆应用
样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色
相关产品

产品名称 用  途
 Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
 SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
 Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
 Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit
 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度

 
Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 
SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块

Phos-tag™ Biotin(生物素)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 
优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样
◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品

产品编号 产品名称 规  格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?
如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。
如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。
备注:
1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-
       23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。
2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸
     化反应。
2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?
收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。
备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细
          胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。
3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标
    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?
Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。
4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?
如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。
也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。
5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?
该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。

WAKO过氧化氢特异性荧光探针

WAKO过氧化氢特异性荧光探针

品牌: Wako(和光纯药)
货号: 028-17811
CAS号: 728912-55-8
供应商: 和光纯药株式会社
规格: 1mg
过氧化氢特异性荧光探针BES-H2O2-Ac / BES-H 2O2
• 比二氯荧光黄 (DCFH) 有更高的特异性
• 可动态监测活细胞内的过氧化氢
• BES-H2O2-Ac 可穿透细胞膜,无需打孔
• 极易溶于水,可制成水溶液使用
• 可用于荧光显微镜、流式细胞仪

BES-So-AM:使用举例

图1)是Jurkat T细胞在含33μM BES-So-AM的培养基中37°C培养1小时,使探针进入细胞,然后添加4mM丁酸(O2•-诱导剂),37°C培养1小时;图2)是Jurkat T细胞在含33μM BES-So-AM的培养基中37°C培养1小时,使探针进入细胞,然后不添加丁酸,37°C再培养1小时;图3)是Jurkat T细胞在含33μM BES-So-AM的培养基中37°C培养1小时,然后添加5mM的丁酸,继续培养一个小时。参考文献
1) Maeda, H. et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 43, 239 (2004).
2) Maeda, H. et al.: Chem. Pharm. Bull., 49, 294 (2001).1. Features
•Much higher selectivity compared to conventionally-used DCFH probes•Responds specifically to hydrogen peroxide, enabling detection of intracellular hydrogen peroxide activity•BES-H2O2-Ac is cell membrane permeable•Superior water solubility allows use with aqueous solutions•Can be used in flow cytometry

2. Application


H2O2-produced stimulation No H2O2-produced stimulation
Fluorescent images
Phase-contrast images
Fluorescent images of Jurkat T cells with BES- H2O2 -Ac and the same-fi eld phase-contrast images
Jurkat T cells were cultured in a medium with 50μM BES-H2O2-Ac for 1 hour. Then, one group of them was cultured in a medium with 5 mM butyric acid (H2O2-produced stimulation), whereas the other in a medium without butyric acid (No H2O2– produced stimulation), each for 1 hour. (Courtesy: Professor Hatsuo Maeda, PhD., School of Pharmacy, Hyogo Univ. of Health Sciences)

 

3. References


  1. “Fluorescent probe for hydrogen peroxide based on a non-oxidative mechanism”, Maeda, H. et al.: Angew. Chem. Int. Ed., 43, 2389-91 (2004).
  2. “Hydrogen peroxide-induced deacetylation of acetyl resorufin as a novel indicator reaction for fluorometric detection of glucose using only glucose oxidase”, Maeda, H. et al.: Chem. Pharm. Bull., 49, 294-8 (2001).

4. Products List


< All products are for Cellbiology;   Keep at room temperature >

Cell Permeability Product Name Package Size Wako Catalog No.
Thiol/Selenol
selective probe
x
BES-Thio
1 mg
025-15481
H2O2 Probes
o
<Detection of
cell-derived H2O2
BES-H2O2-Ac
1 mg
028-17811
x
BES-H2O2   (Cell-impermeant)
1 mg
021-16201
Superoxide
selective probe
o
<Detection of
cell-derived superoxide>
BES-So-AM
1 mg
021-17801
x
BES-So   (Cell-impermeant)
1 mg
028-16211

说明书下载:

http://www.wako-chem.co.jp/english/labchem/product/life/BES-H2O2/pdf/WPUb1_p15-7.pdf

wako食品中的总黄曲霉素

用ELISA法检测食品中的总黄曲霉素:Myco Judge总黄曲霉素

Myco Judge总黄曲霉素

“Myco Judge总黄曲霉素”是利用抗原抗体反应的ELISA试剂盒,能在短时间内得到检查结果。

另外,本试剂盒的分析结果和按照日本厚生劳动省通知的HPLC分析结果的相关性很高,是筛选食品中的总黄曲霉素的有效试剂盒。

特点:

高灵敏度

能高灵敏度(2.5ppb以上)地检测食品中的总黄曲霉素(B1、B2、G1、G2的合计数)。

短时间

从提取到检测大约需30分钟。

日本生产

是目前市面上正在出售的ELISA试剂盒中的唯一的日本生产产品。

最适合筛选

试剂前处理简便。能快速、正确地检测。

检测原理

“Myco Judge总黄曲霉素”用的是竞争ELISA法。如下所示,利用抗原抗体反应的竞争性抑制,再根据产生的发光(吸光值)的减少程度来定量。

检测方法

产品编号

品名

包装

309-95411

Myco Judge总黄曲霉素

96tests

刊登的试剂只使用于试验·研究目的,不能作为“医药品”、“食品”、“家庭用品”等使用。

 

Wako 3-MCPD及其脂肪酸酯标准品

Wako 3-MCPD及其脂肪酸酯标准品

 3-氯-1,2-丙醇(3-MCPD)是在食品的加工和储藏过程中所形成的一种氯丙醇化合物。3-MCPD的其主要污染来源于酸水解植物蛋白(HVP)以及食用油的精制中的副产品,是公认的食品污染物,具有潜在致癌性。
3-MCPD可作为一个单独的化合物,也可与脂肪酸发生酯化反应。3-MCPD酯是一种稳定的中间体,由脂肪(油)转换成3-MCPD的一种副产物。研究表明3-MCPD酯存在于很多加工和未加工的食品以及食品调料中。一般来说,任何食品和食品调料中单独的3-MCPD的量都要远远小于由3-MCPD酯水解出来的3-MCPD量。
  相关的国标:
  GB/T 5009.191-2006 食品中氯丙醇含量的测定
本标准第一法适用于水解植物蛋白液、调味品、香肠、奶酪、鱼、面粉、淀粉、谷物和面包中3-氯-1 2-丙二醇(3-MCPD)含量的测定。
第二法适用于酱油、食醋、鸡精、蚝油等调味品、水解植物蛋白液、香肠、方便面调味包等食品中单氯取代的3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)和2-氯-1 3-丙二醇(2-MCPD)以及双氯取代的1 3-二氯-2-丙醇(1 3-DCP)和2 3-氯-1-丙二醇(2 3-DCP)含量的测定。
第三法适用于酱油、食醋、鸡精、水解植物蛋白液等食品、调味品中3-MCPD、1 3-DCP和2 3-DCP 含量的测定。
  GB/T 18782-2002 调味品中3--1,2-丙醇的测定
本标准适用于酱油、酱油粉、酸水解植物蛋白调味液(粉)和其他调味液(粉)中3-氯-1,2-二氯含量的测定。
  文献:油脂性食品中脂肪酸氯丙醇酯检测方法的研究进展
  可提供的产品信息

产品编号

产品名

中文名

CAS

包装

037-21851 3-Chloro-1,2-propanediol 1-Linoleate Standard 3-氯-1,2-丙二醇亚油酸酯标准品 74875-98-2 100mg
034-21861 3-Chloro-1,2-propanediol 1-Linolenate Standard 3-氯-1,2-丙二醇亚麻子油酸酯标准品 74875-99-3 100mg
039-21791 3-Chloro-1,2-propanediol 1-Oleate Standard 3-氯-1,2-丙二醇油酸酯标准品 10311-82-7 100mg
032-21781 3-Chloro-1,2-propanediol 1-Palmitate Standard 3-氯-1,2-丙二醇棕榈酸酯标准品 30557-04-1 100mg
030-21841 3-Chloro-1,2-propanediol 1-Stearate Standard 3-氯-1,2-丙二醇硬脂酸酯标准品 22094-20-8 100mg
035-21891 3-Chloro-1,2-propanediol Dilinoleate Standard 3-氯-1,2-丙二醇二亚麻子油酸酯标准品 74875-96-0 100mg
031-21871 3-Chloro-1,2-propanediol Dilinolenate Stadanrd 3-氯-1,2-丙二醇二亚麻酸酯标准品 74875-97-1 100mg
031-21511 3-Chloro-1,2-propanediol Dioleate Standard 3-氯-1,2-丙二醇二油酸酯标准品 69161-73-5 100mg
137-16051 3-MCPD Standard 3-氯-1,2-丙二醇标准品 96-24-2 100mg
037-21471 3-Chloro-1,2-propanediol Dipalmitate Standard 3-氯-1,2-丙二醇双棕榈酸酯标准品 51930-97-3 100mg
038-21881 3-Chloro-1,2-propanediol Distearate Standard 3-氯-1,2-丙二醇二硬脂酸酯标准品 72468-92-9 100mg

Wako 077-03155 Gelatin 明胶

Wako 077-03155 Gelatin 明胶
英文名称:Gelatin
中文名称:明胶
品牌:Wako
品牌中文简称:和光纯药
CAS No.:9000-70-8
储存条件:室温
纯度:-
Wako 077-03155 Gelatin 明胶

品牌 产品编号 产品名称 等级 规格 CAS No.
Wako 和光纯药 071-01791 Gelatin, Capsules No. 00  明胶,胶囊No. 00 for Electron Microscopy 100 pcs N/A
Wako 和光纯药 074-01801 Gelatin, Capsules No. 0 明胶,胶囊No. 0 for Electron Microscopy 100 pcs N/A
Wako 和光纯药 190-15805 StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution StemSure 0.1w/v%明胶溶液 for Cell Culture 500 ml
Wako 和光纯药 071-06291 Gelatin, from Bovine Bone 明胶,来自牛骨 100 g 9000-70-8
Wako 和光纯药 073-06295 Gelatin, from Bovine Bone 明胶,来自牛骨 500 g 9000-70-8
Wako 和光纯药 077-03155 Gelatin 明胶 Wako 1st Grade 500 g 9000-70-8
Nippi 日皮 305-34331 gelatin, M.W.8,000±2,000, High Grade  明胶,M.W.8,000±2,000, 高纯 10 g 9015-54-7
Nippi 303-34413 gelatin, M.W.100,000 明胶,分子量100,000 1 g
Nippi 301-34333 gelatin, M.W.8,000±2,000, High Grade 明胶,分子量8,000±2,000 1 g 9015-54-7
Nippi 301-34414 gelatin, M.W.100,000 明胶,分子量100,000 5 g
Nippi 308-34343 gelatin, M.W.60,000, High Grade 明胶,分子量60,000 10 g
Hokudo 301-13931 Gelatinase A 明胶酶A 10 ug
Hokudo 308-13941 Gelatinase B 明胶酶B 10 ug
Hokudo 302-13841 Anti Gelatinase B Polyclonal Antibody 抗明胶酶A多克隆抗体 100 ul

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法
英  文  名: Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
产  地: 日本
商  家: Wako(和光纯药工业株式会社)
wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域
磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究
◆  Phos-tagTM 的简介
Phos-tagTM(Phosphate-binding tag)是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下,该空间恰好能容纳一个磷酸基团,使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团,广泛运用于细菌,酵母,昆虫等物种研究。
◆  Phos-tagTM 系列产品
利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点,研发了Phos-tagTM 系列产品,运用于常见的蛋白实验,比如SDS-PAGE,免疫印迹,亲和层析,质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺(Acrylamide,SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子(Zn2+或者Mn2+)和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中,磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合,导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE(单一蛋白)
免疫印迹(多种蛋白混合液,例如细胞裂解液,组织均浆液,体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗)
Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素(Biotin)结合 可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。 免疫印迹(正常SDS-PAGE)
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖(Agarose)结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注:除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外,其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法!
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离(Phos-tag™ Acrylamide)、Western Blot检测(Phos-tag™ Biotin)、蛋白纯化 (Phos-tag™ Agarose)及质谱分析MALDI-TOF/MS (Phos-tag™ Mass Analytical Kit)。
◆Phos-tag™ 的基本结构
特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物
◆原理
◆应用
样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性,可用于人、植物(拟南芥 水稻 棉花等)、动物(斑马鱼 灵长类等)、微生物(酵母 细菌 真菌等) 昆虫(果蝇 蚕等)
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa,文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液,固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶,50μM约8块;10mg包装20μM可制100块胶,50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色
相关产品

产品名称 用  途
 Phos-tag™ Acrylamide  分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
 SuperSep Phos-tag™  分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
 Phos-tag™ Biotin  检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
 Phos-tag™ Agarose  纯化: 通用柱层析,纯化磷酸化蛋白
 Phos-tag™ Mass
Analytical Kit
 分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析,提高磷酸化分子的检测灵敏度

 
Phos-tag Acrylamide(丙烯酰胺)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 
SuperSep Phos-tag™ (丙烯酰胺预制胶)

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶
5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶
5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶
5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶
5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶
5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶
5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶
5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶
5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶,BioRad型
5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶,Life Technologies型
5块

Phos-tag™ Biotin(生物素)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose(琼脂糖)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit(质谱分析试剂盒)

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用!
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶,预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide,打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子,在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好,得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 
优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存(6个月)
·操作与普通SDS-PAGE一样
◆案例、应用
电泳条件:30 mA(恒电流), 60分钟
样品:5 ug/Lane α-酪蛋白(含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白)(产品编号038-23221)
普通SDS-PAGE只观察到一条条带,而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液:Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液:SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色:QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well (不含Phos-tag™)
◆相关产品

产品编号 产品名称 规  格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应,激酶和底物都带有标签,反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物,如何检测底物的磷酸化情况?
如果底物和激酶分子量差别大,通过正常的SDS-PAGE能够区分,建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验,用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团(需记录底物的条带位置)。可通过剥离(strip)方式剥离Phos-tagTM Biotin,用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。
如果底物和激酶分子量差别不大,可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜,用底物的非磷酸化抗体检测(没有使用激酶的抗体,所以检测不到激酶的带)。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离,用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后,观察所有的条带,非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合,所以迁移速度较快,磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化,分析磷酸化底物的含量。
备注:
1) Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中,建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated(038-
       23221),该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein,确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。
2)如果没有非磷酸化底物,可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)(018-10693)对底物进行去磷酸
     化反应。
2. 如何检测EGF(表皮生长因子)刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平?
收集EGF刺激的细胞,制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测(检测所有的MAPK,包括磷酸化和非磷酸化)。正常SDS-PAGE实验中,磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离,而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离,所以转膜后,用MAPK抗体检测,可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验,多出来的条带就是磷酸化的MAPK。
备注:该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化,细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细
          胞内不含有磷酸化的MAPK,则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。
3. 研究蛋白相互作用的实验中,构建带有不同标签的2种融合蛋白,共转染细胞,在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标
    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白,是否可用Phos-tagTM Agarose纯化,进行后续免疫共沉淀实验(Co-IP)实验?
Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白,采用高盐的洗脱方式,没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱,蛋白不发生变性,可进行后续的Co-IP实验。
4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白,分子量很接近,如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化?
如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近,通过正常的SDS-PAGE实验无法区分,建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。
也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后,先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测,剥离(strip)后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的 话,剥离(strip)会去除一些蛋白,可能会影响检测的效果。
5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit,样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响?
该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高,样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。

wako 用于磷酸化蛋白的WB检测– Phos-tag™ Biotin

wako  Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag,用于磷酸化蛋白的WB检测
Phos-tag™ Biotin是与生物素结合的Phos-tag™,可代替western blot检测中的磷酸化抗体。Phos-tag™ Biotin BTL-104和BTL-105可灵敏检测PVDF膜上的磷酸化蛋白。现推出液体型。
特点:

  • 无辐射
  • 无需PVDF膜的封闭处理
  • Phos-tag™的特异性结合与氨基酸种类、序列无关
  • 可适用于免疫印迹和质谱分析等后续工作
  • Phos-tag™-BTL母液可稳定保存至少6个月
  • 实验流程与使用HRP标记抗体相类似
  • 可用于所有的磷酸化蛋白检测
  • 与普通WB检测相似。但无需使用磷酸化抗体
【Phos-tag™ Biotin免疫印迹原理】
应用实例:

应用实例:使用Phos-tagBTL-104进行斑点印迹检测
非磷酸化蛋白:Bovine Serum Albumin, Human Serum Albumin, Carbonic Anhydrase, β- Galactosidase
磷酸化蛋白:α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
去磷酸化蛋白: (用碱性磷酸酶处理) α-Casein, β-Casein, Ovalbumin, Pepsin
Application (3): Western Blotting:
Phos-tag Biotin BTL-104 [Wako Cat. #301-93531 (10 mg)]Protocol(点击进入)

Phos-tag Biotin BTL-105 [Wako Cat. #304-93541 (10 mg)]Protocol(点击进入)
产品描述
1、粉末;
2、在4度可保存至少一年;
3、检测磷酸化蛋白;
4、Phos-tagTM与生物素(Biotin)结合可与亲和素标记的HRP结合,检测磷酸化蛋白。
可用于免疫印迹实验,二维电泳。
产品编号 产品名称 规格 原价
305-99411 Phos-tag™ Biotin BTL-104 1mM Aqueous 0.3ml 2700
308-97201 Phos-tag™ Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml 3560
301-93531 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg 12460
308-93541 Phos-tag™ Biotin BTL-105 10mg 12460

BTL-104、BTL-105、BTL-111三者连接链(Linher)长度不一,但使用上基本相同.BTL-111灵敏度最高,推荐使用溶解性比较高的BTL-104。
wako  Phos-tag™ Biotin–生物素共轭的Phos-tag使用的先关问题解答

Phos-tag(TM) Acrylamide Phos-tag丙烯酰胺

Phos-tag(TM) Acrylamide Phos-tag丙烯酰胺
货号:300-93523; 304-93521; 304-93526
包装:2mg;10mg;0.3ml
英文名:Phos-tag Acrylamide
品牌:Wako
使用Phos-tag(TM) SDS-PAGE和Phos-tag Acrylamide分离磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白。

Phos-tag 丙烯酰胺 Phos-tag Acrylamide
使用Phos-tag 进行磷酸化蛋白质的迁移率测定
– 使用丙烯酰胺标记的Phos-tag 进行磷酸蛋白亲和电泳层析
Phos-tag Acrylamide AAL-107
Phos-tag<sup>™</sup> Acrylamide
Phos-tag是由广岛大学高分子科学系开发的一种中性pH环境(生理pH)下的新型磷酸结合标记。Phos-tag SDS-PAGE这种电泳方法可以同时分析磷酸化蛋白异构体和配对二价锰的非磷酸化蛋白,是一种使用Pho-tag琼脂糖用于分离,纯化和富集磷酸化蛋白质的全新方法。该方法只需在常规的SDS-PAGE胶中添加Phos-tagAcrylamide (Phos-tag 丙烯酰胺)和锌离子或者锰离子即可实验。
Phos-tag磷酸化亲和电泳原理
Phos-tag<sup>™</sup>磷酸化亲和电泳原理
 Phos-tag  丙烯酰胺
Phos-tagTM SDS-PAGE 特点:
■ 不含放射性元素,非荧光物质
■ 不同位点磷酸化修饰的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来
■ 操作过程与常规 SDS-PAGE相类似
■ Phos-tag ™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
■ Phos-tag ™ SDS-PAGE实验后,可进行常规的免疫印迹或者质谱实验,也可进行 2 维电泳
■ 可区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白
■ Phos-tag ™ 母液可稳定保存至少 3 个月
Phos-tag ™应用
Phos-tag Acrylamide - 上海金畔生物,专业的Phos-tag产品供应商
Phos-tag 丙烯酰胺 Phos-tag Acrylamide 相关产品
货号
厂商编号
产品名称
规格
304-93526
AAL-107S1
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107 5mM水溶液
0.3 ml (约0.9 mg)
300-93523
AAL-107M
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107
2 mg
304-93521
AAL-107
10 mg
Phos-tag™ Acrylamide在配胶中的使用浓度
货号
产品名称
使用浓度
20uM
50uM
100uM
304-93526
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107 5mM水溶液
约10块
约4块
约2块
300-93523
Phos-tag™ Acrylamide AAL-107
Phos-tag™ 丙烯酰胺 AAL-107
约20块
约8块
约4块
304-93521
约100块
约40块
约20块

wako Phos-tag™ Acrylamide丙烯酰胺

Phos-tag™ Acrylamide
SDS-PAGE分离不同磷酸化水平的蛋白!
在不使用放射性同位素的情况下,利用Phos-tag™ SDS-PAGE即可分离不同条带中的磷酸化和非磷酸化蛋白。分离后的凝胶可用于Western blotting和质谱分析等后续实验。
Phos-tag™ SDS-PAGE操作简单,只需在常规SDS-PAGE胶中加入Phos-tag™ Acrylamide 和Mn2+或者Zn2+即可进行实验。在电泳过程中,磷酸化蛋白的磷酸基团与Phos-tag™中的二价金属离子相结合,降低其迁移速度,从而可区分磷酸化与非磷酸化蛋白。
上海金畔生物科技有限公司
服务热线:18301939375   QQ:3258089810    3259632176
Email:  info@jinpanbio.com
◆原理
◆优点、特色

  • 采用Phos-tag™ SDS-PAGE可轻松分离磷酸化蛋白

无任何放射性元素及化学标记!

  • 可检测不同磷酸化水平的磷酸化蛋白

无需任何磷酸化抗体!

  • 适用于内源性蛋白的磷酸化分析!

◆案例、应用
【使用Phos-tag™ SDS-PAGE的磷酸化/非磷酸化蛋白比较】
我推荐使用Phos-tag ™ ——东京大学研究院医学研究科 小川觉之
Phos-tag ™ 是专为研究磷酸化蛋白而新开发出来的试剂。此产品使用方便,不但可用于体外实验,还能定量分析体内蛋白的磷酸化水平。Phos-tag ™ SDS-PAGE 可用于常规电泳实验,无需购买特殊设备,性价比高。传统蛋白磷酸化的研究需要特异的磷酸化抗体、RI 等其它试剂,操作复杂,花费大,且放射性元素会有安全隐患,而Phos-tag ™ 的出现恰恰可以弥补这些缺点,为磷酸化蛋白研究提供新的方向。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白利用Phos-tag ™ SDS-PAGE 的分离效果图
Lane 1 为非磷酸化蛋白,Lane 2-5 为磷酸化蛋白,各蛋白因磷酸化状态不同而条带迁移率也有所不同。
磷酸化/ 非磷酸化蛋白的数量比、磷酸化程度、磷酸化蛋白的丰度等都可根据条带迁移和条带浓度求得。
【资料提供】
日本东京大学研究生院医学系研究科
【二维电泳中的应用:分析hnRNP K 磷酸化异构体】
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后,裂解细胞,经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中,一维是IPG 胶,二维是Phos-tag ™ SDS-PAGE,可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪,可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
二维电泳
同一个等电点的位置上,不同位点发生磷酸化都可以被区分开来(例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7)
【参考文献】
Characterization of multiple alternative forms of heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K by phosphate-affinity electrophoresis. Y. Kimura, K. Nagata, N Suzuki, R. Yokoyama, Y. Yamanaka, H. Kitamura, H. Hirano, and O. Ohara, Proteomics , Nov 2010; 10(21): 3884-95.
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生(Dr. Y. Kimura)、平野久(Dr. H. Hirano)理化学研究所RCAI 小原收
【EGF 刺激前后MAPK 磷酸化水平的变化】
常规SDS-PAGE 和Phos-tagTM SDS-PAGE 后迚行克疫印迹实验分析EGF 刺激的A431 细胞中MAPK 磷酸化水平。
摘自Kinoshita-Kikuta, E. et al., Mol.Cell. Proteomics. (2007)6: 356.

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
304-93526  Phos-tag Acrylamide AAL-107
5mM Aqueous Solution Phos-tag 丙烯酰胺5mM水溶液
0.3mL 蛋白研究
300-93523  Phos-tag Acrylamide AAL-107
Phos-tag 丙烯酰胺
2mg 蛋白研究
304-93521  Phos-tag Acrylamide AAL-107
Phos-tag 丙烯酰胺
10mg 蛋白研究
134-15302 Manganese(II) Chloride Tetrahydrate氯化锰四水合物 25g for Molecular Biology

 

WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖

WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖

Phos-tagTM与琼脂糖(Agarose)结合利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。  Phos-tag™ Agarose可用于磷酸化蛋白通过柱层析富集,分离,纯化。不使用表面活性剂或还原剂,磷酸化蛋白可以在一个类似体内环境下获得。

Phos-tag™ Agarose为分离、浓缩天然磷酸化的蛋白和生物样品(生理条件下)中磷酸化多肽提供一种高效的方法。
特点:

  • 缓冲液不含有还原剂和去污剂
  • 与亲和层析方法类似
  • 可在1小时内纯化磷酸化蛋白
  • Phos-tag™ Agarose捕获结合到Tyr、Thr、Ser、Asp、His等氨基酸、糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根
  • 蛋白可在生理条件(PH7.5)下捕获
  • 无需表面活性剂和还原剂

WAKO 亲和层析法纯化磷酸化蛋白–Phos-tag 琼脂糖说明书下载
Phos-tag Agarose AG-501  [Wako Cat. #302-93561 (0.5 mL)]⇒ Protocol(点击进入下载)

Phos-tag Agarose AG-503  [Wako Cat. #308-93563 (3 mL)]⇒ Protocol点击进入下载)

 
Phos-tag™ Agarose亲和层析原理

应用实例
【纯化细胞裂解液中的磷酸化蛋白】

 M:标准蛋白Marker
Lane 1:全蛋白,未经纯化
Lane 2:纯化后的蛋白洗脱液
Lane 3:漂洗流出液
将Phos-tag™ Agarose填充到柱子中,加入细胞裂解液。

SYPRO Ruby染色(左图),Anti-pTyr抗体进行western blot检测(右图)。
结果显示使用Phos-tag™ Agarose可高效纯化磷酸化蛋白。

产品编号 产品名称 规格 原价
308-99401 Phos-tag™ Agarose 0.5ml 2700
308-93563 Phos-tag™ Agarose 3ml 17440
产品描述

1、悬浮液填料;
2、悬浮液在4度中,可保存至少半年;
3、Phos-tagTM与琼脂糖(Agarose)结合利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合,纯化磷酸化蛋白。
可用于亲和层析法进行磷酸化蛋白纯化。
Phos-tag® Agarose为分离、浓缩天然磷酸化蛋白和生物样品中磷酸化多肽提供一种高效的方法。
提供各种规格产品,以便用于不同样品的检测。
缓冲液不含有还原剂和去污剂。与亲和层析方法类似。
Phos-tag® Agarose捕获结合到Tyr、Thr、Ser、Asp、His等氨基酸,糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根。
 

wako阿尔茨海默病研究先关试剂

wako阿尔茨海默病研究先关试剂

阿尔茨海默病研究(老年痴呆)

货号 名称 规格
8951516 β-Amyloid (1-40), Ultra Pure,TFA β淀粉样蛋白(1 – 40),超纯,TFA 2.5mg
294-64701 Human/Rat?Beta Amyloid(40) ELISA?Kit Wako?II 人/大鼠β淀粉体(40)ELISA试剂盒 96T
8951516 β-Amyloid (1-40), Ultra Pure,TFA β淀粉样蛋白(1 – 40),超纯,TFA 0.5mg
298-64601 Human?Beta Amyloid(1-40) ELISA?Kit Wako?II 人β淀粉体(1-40)ELISA试剂盒 96T
8953770 β-Amyloid (1-40), rat β淀粉样蛋白(1 – 40),大鼠 2.5mg
8953770 β-Amyloid (1-40), rat β淀粉样蛋白(1 – 40),大鼠 0.5mg
8953771 β-Amyloid Peptide (1-42), rat β淀粉样多肽(1 – 42),大鼠 2.5mg
292-64501 Human/Rat Beta Amyloid(42) ELISA?Kit Wako, High Sensitive 人、大鼠β淀粉体(42)ELISA试剂盒,高灵敏度 96T
296-64401 Human Beta Amyloid(1-42) ELISA Kit Wako, High Sensitive 人β淀粉体(1-42)ELISA试剂盒,高灵敏度 96T
8953771 β-Amyloid Peptide (1-42), rat β淀粉样多肽(1 – 42),大鼠 0.5mg
8952487 β-Amyloid (1-42), human β淀粉样蛋白(1 – 42),人 2.5mg
151-01801 Osthole Standard 蛇床子素 20mg
8952487 β-Amyloid (1-42), human β淀粉样蛋白(1 – 42),人 0.5mg
074-04961 Gomisin N Standard 五味子酯N标准品 10mg
077-04951 Gomisin A Standard 五味子醇甲标准品 10mg
192-10441 Schizandrin Standard 五味子素标准品 20mg
197-13551 Schizandrin  五味子素 20mg
334-00491 Amyloidβ-Protein (Human,37-43) antiserum 50ul
33-00221 Amyloidβ-Protein (Human,37-42) antiserum 50ul
336-00211 Amyloidβ-Protein (Human,34-40) antiserum 50ul
330-00111 Amyloidβ-Protein (Human,1-40) antiserum 50ul
330-00231 Amyloidβ-Protein (Human,1-16) antiserum 50ul
339-32171 Nma-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-Thr-Val-Lys(Dnp)-D-Arg-D-Arg-D-Arg-NH2 1mg
333-32191 (3,5-Difluorophenylacetyl)-Ala-Phg-OBut 5mg
333-43941 L-685,458 1mg
556-65811 β-secretase activity kit 100T
334-32121 MOCAC-SER-GLU-VAL-ASN-LEU-ASP-ALA-GLU-PHE-ARG-LYS(DNP)-ARG-A 1mg
339-43781 LYS-THR-GLU-GLU-ILE-SER-GLU-VAL-ASN-STA-VAL-ALA-GLU-PHE 1mg
337-44201 Amyloidβ-Protein(42-1) 0.1mg
332-44131 Amyloidβ-Protein(40-1) 0.1mg
337-43581 β-Sheet breaker peptide iAβ5 5mg
336-43671 Amyloidβ-Protein (Human,3-42) 0.5mg
334-43091 Amyloidβ-Protein (Human,25-35) 0.5mg
334-43591 Amyloidβ-Protein (Human,1-16) 0.5mg
333-43701 Amyloidβ-Protein (Human,1-43) 0.5mg
338-43491 Amyloidβ-Protein (Human,1-42) 0.5mg
336-43791 Amyloidβ-Protein (Human,1-40) [HCl Form] 0.5mg
330-43071 Amyloidβ-Protein (Human,1-40) 0.5mg
011-18961 Amyloid beta-Protein (1-42) (Hydrochloride) β淀粉样蛋白(1 – 40),冻干粉 1mg
016-18771 Amyloid beta-Protein (1 – 42) β淀粉样蛋白(1 – 42) 0.5mg
014-18951 Amyloid beta-Protein (1-40) (Hydrochloride) β淀粉样蛋白(1 – 40),冻干粉 1mg
019-18761 Amyloid beta-Protein (1 – 40) β淀粉样蛋白(1 – 40) 1mg
014-20281 Anti Phosphorylated alpha-Synuclein,Monoclonal Antibody 抗磷酸化α突触核蛋白单抗 50ul
299-57301 Phosphorylated Tau Immunohistostain Kit 磷酸化τ免疫组织染色试剂盒 100T
299-56701 Amyloid beta-Protein Immunohistostain Kit β淀粉样蛋白免疫组织染色试剂盒 50T

wako LabAssay系列试剂盒–游离脂肪酸定量检测试剂盒

wako LabAssay系列试剂盒–游离脂肪酸定量检测试剂盒
WAKO LabAssay系列试剂盒
编号 名称 包装
6390192  LabAssay™ A/G(白蛋白与球蛋白比值检测试剂盒) 1000次
6590190  LabAssay™ Creatinine(肌氨酸酐定量检测试剂盒) 500次
6570198  LabAssay™ Glucose(葡萄糖定量检测试剂盒) 1000次
6360194  LabAssay™ NEFA(游离脂肪酸定量检测试剂盒) 750次
6380196  LabAssay™ Phospholipid(磷脂定量检测试剂盒) 1300次
6370190  LabAssay™ Triglyceride(甘油三酯定量检测试剂盒) 1000次
5860191  LabAssay™ ALP(碱性磷酸酶定量检测试剂盒) 900次
6580194 LabAssay™ Cholestero(胆固醇定量检测试剂盒) 1000次
6400192 LabAssay™ Uric Acid(尿酸定量检测试剂盒) 1300次
可用于人,大鼠以及小鼠血清样本的检测
( 以上试剂盒仅为研究试剂,不可用于诊断或做其他用途。)
LabAssay™ NEFA 游离脂肪酸定量检测试剂盒
【摘要】
游离脂肪酸(NEFA)是脂肪细胞中的中性脂肪被分解后由血中被释放出来的物质,在血清中与白蛋白结合,被末梢组织搬运,成为末梢组织重要的能源来源。
检测游离脂肪酸的量,可用于调节由脂肪组织释放到肝脏的物质,有利于掌握类脂化合物代谢的动态。
【检测原理】
样品中的游离脂肪酸(NEFA)在辅酶A与(CoA)腺嘌呤核苷-5′-三磷酸二钠(ATP)的存在下,受酰基-CoA合成酶(ACS)作用,生成酰基-CoA、AMP及焦磷酸(PPi)。生成的酰基-CoA在酰基-CoA氧化酶(ACOD)的作用下被氧化,同时生成2,3-反式-烯酰-CoA及过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下,与3-甲基-N-乙基-N- (β-羟乙基甲基)-苯胺(MEHA)及4-氨基安替比林发生定量性氧化缩合,生成青紫色色素。测量这个青紫色色素吸光值,即可计算出样品中的NEFA浓度。
【特点】
?以实验动物为对象的生物化学检测试剂
?用微孔板检测,可用少量样品一次检测多个样品
LabAssay TM NEFA [ACS?ACOD法]
在血中游离脂肪酸(NEFA:Non-Esterified Fatty Acid),与白蛋白结合,被末梢组织搬运,成为末梢组织重要的能源来源。游离脂肪酸的浓度,可用于调节由脂肪组织释放到肝脏的物质,在末梢组织中的消耗。
本品可根据测量氧化缩合生成的青紫色色素的吸光值,检测样品中游离脂肪酸的量。
【特点】
?蒸馏水作为样品时,吸光值在0.07以下。
?检测已知浓度血清样品时,浓度为已知浓度±15%以内。
【检测波长】波长:550nm
【试剂盒组成】
显色剂A…10ml用×6瓶 ,
显色剂A溶解液…65ml×1瓶 ,
显色剂B…20ml用×6瓶,
显色剂B溶解液 …130ml×1瓶,
标准液(油酸 1mEq/l)…10ml×1瓶
【使用方法】
【试剂的配制】
显色试剂A:
1瓶显色剂A(10ml用)溶解于10ml显色剂A溶解液中,得到显色试剂A。
显色试剂B:
1瓶显色剂B(20ml用) 溶解于20ml显色剂B溶解液中,得到显色试剂B。
标准液:
附带的标准液可直接使用,也可经稀释作为标准系列使用。
【标准操作法】
向微孔板内添加4μl样品和80μl显色试剂A,充分混合,在37℃加热10分钟。加入160μl显色试剂B,在37℃加热10分钟。以此作为对照空白值,测量样品及标准液的吸光值。
【检测波长】
550nm (进行双波长检测时,主波长为546nm,副波长为660nm)
LabAssay™ ALP Alkaline Phosphatase Assay Kit 碱性磷酸酶定量检测试剂盒
【摘要】
碱性磷酸酶的活性检测试剂盒。常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。
碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于肝脏、骨、小肠之中。特别在骨代谢研究领域方面被用作为骨形成指标之一。本品是用p–硝基苯磷酸作为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒,利用微孔板,可进行多种样品的检测。
【检测原理】
样品在含有p-硝基苯磷酸的碳酸盐缓冲液(pH9.8)中反应,在样品中的碱性磷酸酶作用下,p-硝基苯磷酸分解为p-硝基酚和磷酸。生成的p-硝基酚为碱性,呈黄色。根据测量其405nm的吸光值,计算出样品中碱性磷酸酶的活性。
LabAssay TM ALP  [p-硝基苯磷酸基质法]
【性能】
检测范围:>0.06 mmol/L
标准曲线范围:0~0.5 mmol/L
再现性:C.V.<10%
【试剂盒组成】
底物———————20片(溶解时:p-硝基苯磷酸二钠 6.7mmol/L)
底物溶解液——-100ml×1瓶(2.0mmol/L氯化镁含有0.1mol/L碳酸盐缓冲液pH9.8)
反应终止液——-100ml×1瓶(0.2mol/L氢氧化钠溶液)
标准液—————10ml×1瓶(0.5mmol/L p-硝基酚溶液)
【试剂的配制】
1)底物缓冲液:1片底物溶解于5mL底物溶解液中。
2)反应终止液:直接使用。
3)系列稀释标准液:将标准液用蒸馏水依次稀释为0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀释液系列。
【标准操作法】
向96孔微孔板内添加100μl底物缓冲液和20μl样品,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,37℃孵育15分钟。
添加80μl反应终止液,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,用酶标仪测量405nm处的吸光值。同样方法进行空白(蒸馏水)对照和标准品的检测。
【活性单位的定义】
在pH9.8,37℃情况下,1分钟内生成1nmol p-硝基酚所需的酶的活性为1个活力单位(U)。
活性(U/μl)= C/15 ×a
C:由标准曲线得到的OD值(A实验值减去A空白值),计算p-硝基酚浓度(mmol/L=nmol/μl)      15:反应时间(min.)
a:样品的稀释倍数
当样品为成骨细胞时,使用本试剂盒前样本需要预处理
在48孔板上进行细胞培养后,除去培养基,用PBS冲洗感光板,各孔添加150μl 0.05%的曲拉通X,进行冻结→融化→冻结→融化操作。4℃,15,000rpm离心15分钟处理,将上清液移到新的辅助管,以此作为样品。
(注1)48孔板:培养时,一般不采用96孔板,多使用48孔板。
(注2) 曲拉通X的作用:溶解细胞膜,回收蛋白(细胞内含有ALP蛋白)的试剂。
(注3) 反复的冻结融化:原理不明,但这样做似乎可以提高ALP活性。
(注4) 也有不使用曲拉通X,用超声波降解法(超声波处理)对细胞造成物理性休克得到溶解产物的方法。
(注5) 曲拉通X的添加量:以150μL为例,孔中细胞约为20,000cell。
LabAssay™ Cholestero  胆固醇定量检测试剂盒
【摘要】
胆固醇是生物细胞膜的主要成分,是众多动物合成甾族化合物的前体物质。
本品是利用N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠(DAOS),通过酶浅蓝色显色反应,检测血清等样品中胆固醇量的试剂盒。与微孔板配套使用,可进行多样品检测。
【检测原理】
样品中的胆固醇酯类在胆固醇酯酶作用下,被分解为游离胆固醇和脂肪酸。在这里生成的游离胆固醇与既存的游离胆固醇类一起被胆固醇氧化酶氧化,产生过氧化氢。生成的过氧化氢,在过氧化物酶作用下,与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠(DAOS) 及4-氨基安替比林定量氧化缩合,产生浅蓝色色素。测量这个浅蓝色色素的吸光值,即可计算出样品中的胆固醇浓度。
LabAssay TM胆固醇 [胆固醇氧化酶、DAOS法]
【试剂盒组成】
缓冲液—————————–150ml×2瓶(MES缓冲液)
显色剂———————-150ml用×2瓶
(溶解时:胆固醇酯酶,胆固醇氧化酶,过氧化物酶,DAOS,4-氨基安替比林,抗坏血酸氧化酶)
标准液—————————10ml用×1瓶
【性能】
灵敏度
蒸馏水作为样品时,吸光值在0.11以下。
特定浓度的标准液(200mg/dl) 作为样品时,吸光值为0.13~0.65。
?特异性
可检测1,000mg/dl的总胆固醇浓度。
【检测波长】
主波长:600nm, 副波长:700nm
【试剂的配制】
显色剂:将1瓶显色剂(150mL用)溶解于1瓶缓冲液(150mL)中。
配制后,以2~10℃保存,可保存3星期。
【标准操作法】
向微孔板内添加2μl样品和300μl显色剂,充分混合,在37℃孵育5分钟。以此作为对照空白值,测量样品及标准液的吸光值。
LabAssay™ Uric Acid  尿酸定量检测试剂盒
【摘要】
尿酸是嘌呤衍生物的代谢产物,血清中的尿酸是核蛋白的分解产物和食物性物质,核蛋白代谢异常和肾脏机能障碍与尿酸量的变化存在联系。本品是利用尿酸酶与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-甲基苯胺钠(TOOS),进行酶促反应生成青紫色色素,根据生成物质的吸光值检测血清中、尿中的尿酸量的试剂盒。与微孔板配套使用,可进行多样品检测。
【检测原理】
尿酸酶氧化样品中的尿酸,产生过氧化氢。生成的过氧化氢,在过氧化物酶的作用下,与N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-甲基苯胺钠(TOOS) 及4-氨基安替比林定量氧化缩合,产生青紫色色素。测量这个青紫色色素的吸光值,计算出样品的尿酸浓度。
LabAssay TM尿酸 [尿酸酶、TOOS法]
与微孔板配套使用,可用于小鼠血清中尿酸的检测。
【特点】
蒸馏水作为样品时,吸光值为0.15以下。
测量已知浓度的血清时,结果在已知浓度的±15%以内。
【试剂盒组成】
缓冲液—————-100ml×4瓶(磷酸缓冲液(pH6.4),TOOS)
显色剂————100ml用×4瓶
(溶解时:尿酸酶,过氧化物酶,4-氨基安替比林,脂蛋白脂肪酶,抗坏血酸氧化酶)
尿酸标准液————10ml×1瓶
【试剂的配制】
显色剂:将1瓶显色剂(100mL用)溶解于1瓶缓冲液(100mL)中。
配制后,2~10℃保存,可保存3星期。
【标准操作法】
向微孔板内添加5μl样品和300μl显色剂,充分混合,37℃孵育5分钟。以此作为空白对照值,测量样品及标准液的吸光值。
【检测波长】
主波长555nm(副波长700nm)
【性能】
蒸馏水测量时的吸光值<0.15。
特定浓度标准液(尿酸10mg/dL)测量时的吸光值为0.04~0.26。
LabAssay™ A/G   白蛋白与球蛋白比值检测试剂盒
【摘要】
白蛋白作为易溶于水的纯蛋白,广泛分布在生物体内。在动物血清中, 白蛋白占总蛋白的大部分,作用是维持渗透压,与难溶于水的物质(脂肪酸和胆红素酸等)结合,负责这些物质的运输。在血清蛋白质中含量仅次于白蛋白的是球蛋白,其作用是负责甾类激素等的运输。白蛋白和球蛋白占血清蛋白的大部分。通常情况下认为白蛋白/球蛋白的比例保持在一定的范围内。不过,在肝脏和肾脏机能发生变化或处于某种疾病状态中,白蛋白/球蛋白的比例会发生变化。
【检测原理】
白蛋白(BCG法)
样品受显色剂作用,样品中的白蛋白与溴甲酚绿(BCG)结合,产生浅蓝色色素。测量这个浅蓝色色素的吸光值,计算样品中白蛋白的浓度。
总蛋白质(双缩脲法)
样品受总蛋白显色剂的作用,样品中的蛋白与铜离子产生紫红色络合物。测量紫红色络合物的吸光值,计算样品中总蛋白浓度。
球蛋白:总蛋白浓度减去白蛋白浓度,即可计算出样品中球蛋白的浓度。白蛋白浓度和球蛋白浓度的比称为白蛋白/球蛋白比(A/G比)。
*当样品是高脂肪血清时,请使用白蛋白修正缓冲液。
*高脂肪血清修正法
1) 在白蛋白测量中,当样品为高浓度乳浊血清时,请根据下列方法测量空白样品值,从样品的吸光值扣除进行修正。 “样品空白值测量法” 1μl血清加上250μl白蛋白修正缓冲液,充分混合后,作为对照品测量水在630nm处的吸光值。
2) 在总蛋白测量中,当样品为高浓度乳浊血清时,请根据下列方法测量空白样品值,从样品的吸光值扣除进行修正。 “样体空白值测量法”5μl血清加上250μl生理食盐水,充分混合后,作为对照品测量水在540nm处的吸光值。
LabAssay TMA/G [BCG法、双缩脲法]
本品是包含总蛋白显色剂(基于双缩脲法)、白蛋白显色剂(基于BCG法)、标准血清的检测试剂盒。可同时检测总蛋白及白蛋白浓度,计算出白蛋白/球蛋白比。
【特点】
〈白蛋白〉
蒸馏水作为样品时,吸光值为0.120~0.220。
测量已知浓度的血清时,结果在已知浓度的±12%以内。
〈总蛋白〉
蒸馏水作为样品时,吸光值为0.050~0.100。
测量已知浓度的血清时,结果在已知浓度的±10%以内。
【试剂盒组成】
白蛋白显色剂————-250ml×1瓶
总蛋白显色剂———- –250ml×1瓶
标准血清———————3ml用×1瓶
白蛋白修正缓冲液——–25ml×1瓶
LabAssay™ Creatinine 肌氨酸酐定量检测试剂盒
【摘要】
肌氨酸酐是肌肉中肌酸与ATP发生反应后所生成的代谢产物。
肌氨酸酐大部分在肾脏循环时被过滤,不再被吸收而被排出体外。肾功能障碍和肌肉中能量代谢变化时,样品中肌氨酸酐的量发生变化。
【检测原理】
向样品中加入除蛋白剂,离心分离,回收上清。上清中加入苦味酸及氢氧化钠溶液,在碱性条件下,肌氨酸酐和苦味酸发生缩合,产生橙红色的缩合物。测量这个橙红色缩合物的吸光值,计算样品中的肌氨酸酐浓度。
上海西宝生物科技有限公司 杨先生 13512172575 13788987962
LabAssay (TM) 肌氨酸酐[Jaffe′法]研究试剂
肌氨酸酐是由存在于肌肉、神经内的磷酸肌酸直接产生,或由肌酸脱水产生,经肾毛细血管球过滤后被排除体外的代谢产物。利用Jaffe法,在碱性条件下,通过检测苦味酸与肌氨酸酐反应生成的橙红色色素检测样品中肌氨酸酐含量。
【特点】
蒸馏水作为样品时,吸光值为0.010~0.020。
使用已知浓度的血清进行检测时,在已知浓度的±10%以内。
【试剂盒组成】
除蛋白剂…150ml×1瓶
苦味酸…50ml×1瓶
0.75mol/L 氢氧化钠溶液…50ml×1瓶
标准液 (肌氨酸酐10mg/dl)…15ml×1瓶
【试剂的制备】
除蛋白剂?苦味酸?0.75mol/L 氢氧化钠溶液:全部都可以直接使用
标准液: 附带的标准液可直接使用,或稀释后作为系列标准液。
【标准操作法】
将300μl除蛋白剂和50μl样品在样品管中混合,室温放置10分钟,离心分离(2,500rpm以上反应10分钟),回收上清。
向酶标板的孔中加入100μl上清,再加入50μl苦味酸和50μl 0.75mol/L氢氧化钠溶液,在25~30℃反应20分钟。
作为空白对照,检测样品及标准液的吸光值。
【检测波长】 520nm