酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

随着反相快速色谱法在反应混合物纯化中的使用增加,出现了很多问题,因为许多化学家不像正相或硅胶柱色谱法那样熟悉这项技术。化学家提出的问题之一是关于 pH 调节剂(特别是酸)的使用及其纯化。

在反相占主导地位的 HPLC 领域,通常使用酸(甲酸、乙酸等),通常浓度为 0.1%。其基本原理是,如果样品成分在溶液中可电离,则其色谱保留和峰形可能会受到影响,并且其定量也会受到挑战。

电离/可电离化合物在溶液中时在带电状态和中性状态之间保持平衡。这些分子在中性溶剂系统中进行色谱分析时,可以显示为前峰(想想滑雪坡),因为电离部分比中性状态更易溶于水,因此洗脱得更快。添加 pH 调节剂,无论是酸还是碱,都可以迫使平衡全进入中性状态或进入电离状态。当全电离时,化合物会提前洗脱;当中性时,该化合物更具疏水性,并且其在柱上的保留增强。

例如,我们来看看通过琥珀酸酐和 α-甲基苄胺的微波反应生成的合成 N-(1-苯乙基)琥珀酰亚胺的纯化,如图 1 所示。

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

图 1. 使用 Biotage® Initiator+ 微波反应器进行琥珀酸酐与 α-甲基苄胺的反应

当使用中性溶剂纯化时,产品前沿很差,表明它处于电离态和中性态之间的平衡,图 2。

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

图 2. 使用中性水和乙腈的反应混合物反相快速色谱显示前沿产物峰。

产品作为非高斯前沿峰洗脱的问题是,它是一个宽广的峰,并且收集在多个柱体积 (CV) 中。这意味着收集的产物被稀释在比典型或期望更多的溶剂中,这增加了蒸发馏分溶剂的体积和时间,并增加了较低纯度和回收率的可能性。事实上,该反应混合物中存在较早洗脱的副产物,其污染了早期产物级分。是的,这些馏分可以被丢弃,但这会降低回收的产品产量,这不一定是理想的解决方案。

通过将酸(在本例中为0.2%冰醋酸)引入到水和乙腈中,可电离的反应混合物组分质子化。质子化产物的洗脱带减少(锐化),从而增加了其浓度以及与污染副产物的分离,图 3。副产物也质子化,导致其比中性流动相更早洗脱。结果是大大改善了分离,产物以更集中的谱带洗脱,并且与副产物的分离度更高。

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

图 3. 使用酸化溶剂系统纯化反应混合物,使产物峰尖锐并降低干扰副产物的保留。

然而,化学家在使用 pH 值修改的流动相时需要小心,因为潜在的化合物保留随 pH 值变化而变化。在前面的例子中,电离化合物移动是有帮助的,但质子化化合物并不总是朝着有利的方向移动。当 pH 值发生变化时,洗脱的化合物可能会相互靠近甚至共洗脱。

我们可以看到这种情况发生在由靛红酸酐和 α-甲基苄胺微波反应生成的合成产物 2-氨基-N-(1-苯乙基)苯甲酰胺中,图 4。

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

图 4. 靛红酸酐与 α-甲基苄胺的微波反应

当使用中性水/甲醇梯度纯化时,我们可以看到一些极性副产物在产品之前洗脱,以及强烈保留的副产物在产品后面以 9.5 至 14 CV 之间的宽峰形式洗脱,图 6。

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

图 6. 反应混合物的 pH 中性反相快速色谱

在两种洗脱溶剂中添加 0.2% 冰醋酸后,洗脱化合物的保留率发生显着变化。副产物在中性 pH 值下以 4 CV 洗脱,在酸性条件下离子化并以 1.5 CV 洗脱。尾随的疏水性副产物也电离并移近产物,图 7。

酸性 pH 调节剂如何影响快速色谱?

图 7. 使用酸化水/甲醇梯度纯化反应混合物,改变了两种副产物的保留。

随着产物和尾随副产物之间分辨率的降低,该反应纯化的负载能力降低,这意味着需要更大的柱(和更多的溶剂)来充分纯化反应产物。

因此,虽然流动相 pH 值调整有助于改善纯化,但请注意,洗脱体积和选择性可能会发生变化,从而可能降低纯化效率。

用于创建此数据的设备包括:

    • Biotage®引发剂+微波反应器

  • Biotage® Selekt Single 快速色谱系统

  • Biotage® Sphere C18 色谱柱,12 克

植物生长调节剂:玉米素及玉米素核苷

植物生长调节剂,是用于调节植物生长发育的一类化学物质,包括人工合成的化合物和从生物中提取的天然植物激素。对目标植物而言,植物生长调节剂是外源的非营养性化学物质,通常可在植物体内传导至作用部位,以很低的浓度就能促进或抑制其生命过程的某些环节,使之符合人类的需要发展。

植物生长调节剂有很多用途,因品种和目标植物不同而有许多功能,主要分类有:生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸、矮化剂等。常用的植物生长调节物质有吲哚丁酸、6-BA、萘乙酸、激动素、赤霉素、2,4-D、脱落酸等。其中属于细胞分裂素的玉米素是比较常见的植物生长调节剂,玉米素(Zeatin)是由D·S·莱萨姆等于1963年从幼嫩的玉米种子里分离出一种细胞分裂素,根据其来源被命名为玉米素。随后还发现了一些在结构上与玉米素相近的活性物质,1967年证明了椰子乳中主要的活性物质就是玉米素核苷。

植物生长调节剂:玉米素及玉米素核苷

玉米素(Zeatin)分子式为C10H13N5O。外观为白色结晶或粉末,难溶于水,溶于醇和DMF,是植物体内存在的一种天然细胞分裂素,它是从甜玉米灌浆期的籽粒中提取并结晶出的第1个天然细胞分裂素,已能人工合成。玉米素在结构上有顺、反两种异构体,起调节作用的主要是反式形式,顺式形式的调节作用很不明显。反式玉米素生物活性要更强些,常以核糖核苷或核糖核苷酸的形态存在。玉米素可以促进细胞分裂并且可以影响细胞周期的其他环节,其功能还包括阻止叶绿素和蛋白质降解,减慢呼吸作用,保持细胞活力,延缓植株衰老,逆转对叶的毒性作用,抑制根的生成,并且高浓度时可以促进芽的生成。

植物生长调节剂:玉米素及玉米素核苷

玉米素核苷是一种化学物质,分子式是C15H21N5O5。目前玉米素及玉米素核苷两者之间的关系暂时没有非常完整明确的定论,但基本能确定的是玉米素核苷是细胞分裂素的转运形式,并不是玉米素的活性形式[1][2]。

植物生长调节剂:玉米素及玉米素核苷

上海金畔生物科技有限公司代理的全球知名植物培养基品牌PhytoTech LABs为广大植物学研究客户提供了不同包装规格的原装进口反式玉米素及反式玉米素核苷:

货号

品名

规格

Z125

ZEATIN 玉米素(反式)

10mg

Z125

ZEATIN 玉米素(反式)

50mg

Z125

ZEATIN 玉米素(反式)

100mg

Z125

ZEATIN 玉米素(反式)

250mg

Z125

ZEATIN 玉米素(反式)

500mg

Z125

ZEATIN 玉米素(反式)

1g

Z860

ZEATIN SOLUTION (1mg/mL) 玉米素溶液(反式)

10mL

Z899

ZEATIN RIBOSIDE 玉米素核苷(反式)

10mg

Z899

ZEATIN RIBOSIDE 玉米素核苷(反式)

50mg

Z899

ZEATIN RIBOSIDE 玉米素核苷(反式)

100mg

Z899

ZEATIN RIBOSIDE 玉米素核苷(反式)

250mg

Z899

ZEATIN RIBOSIDE 玉米素核苷(反式)

1g

Z875

ZEATIN RIBOSIDE SOLN (1mg/mL)玉米素核苷溶液(反式)

10mL

Z875

ZEATIN RIBOSIDE SOLN (1mg/mL)玉米素核苷溶液(反式)

25mL

上海金畔生物科技有限公司代理的PhytoTech LABs是美国知名的植物培养基供应商,公司从1997年成立不断发展壮大,其优质植物基础培养基、植物凝胶、植物生长调节剂、抗生素享有盛名,成为全球植物科研工作者的主选品牌。PhytoTech LABs产品涵盖广泛、批次差异小、方便保存、性价比高、品质可靠,满足多样化的实验需求,节省组培实验所需大量人力和时间,提高植物组培环节的效率。PhytoTech LABs通过ISO 9001:2000质量体系认证,所有产品按照cGMP标准生产和包装,生产过程受到严格质量控制,每个产品的物理学、化学、生物学特性都经过了严格检测,并经过组织培养检测。

若对产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司客服热线021-50837765或登录网站www.jinpanbio.cn了解更多信息。

[1] Durán-Medina Y, Díaz-Ramírez D, Marsch-Martínez N. Cytokinins on the Move. Front Plant Sci. 2017 Feb 8;8:146. doi: 10.3389/fpls.2017.00146. PMID: 28228770; PMCID: PMC5296302.

[2] Davey, J.E., van Staden, J. Cytokinin translocation: Changes in zeatin and zeatin-riboside levels in the root exudate of tomato plants during their development. Planta 130, 69–72 (1976). https://doi.org/10.1007/BF00390846

现货提供PhytoTech常用组培生长调节剂

植物生长调节剂,是用于调节植物生长发育的一类农药,包括人工合成的化合物和从生物中提取的天然植物激素。广义上也包括天然植物激素,是植物组织培养基中的关键物质,在植物组培过程中起着重要和明显的调节作用。

植物生长调节剂有很多用途,因品种和目标植物而不同有许多功能,主要分类有:生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸、多胺、抗有丝分裂物、矮化剂等。例如:低浓度生长素促进植物生长,高浓度生长素抑制植物生长;细胞分裂素促进细胞分裂和调控其分化、诱导芽的形成和促进芽的生长;赤霉素打破种子休眠、促进种子萌发;脱落酸促进落花落果、促进球茎和块茎的形成。值得注意的是有些植物生长调节剂在高浓度下和低浓度下的对不同的植物所起的作用也会有所不同,所以用量需要根据具体实验来选择合适的植物生长调节剂的类型及使用浓度。

PhytoTechnolgy Laboratories (简称PhytoTech) 是美国植物培养基供应商,公司从1997年成立不断发展壮大,至今已成为的植物研究领域的试剂与原料供应商,服务于全世界各研究院所,生产研发企业等。官方网站: www.phytotechlab.com

主要优势有:

1. 全球很早通过ISO 9001:2000 质量体系认证的组培试剂生产商;

2. 拥有超过30 年的植物组培产品开发经验;

3. 全部产品通过植物组培验证;

4. 近千种产品供选择,满足组培的各种需求;

5. 用量小、速度快、效益高、残毒少。

主要产品分类:

一、植物生长促进剂

1.生长素类;2.赤霉素类;3.细胞分裂素类;4.其它;

二、植物生长延缓剂

1.脱落酸类;2. 乙烯利;3.其它生长延缓剂;

三、植物生长抑制剂

产品明细列表:

货号  品名  中文名称

I885  INDOLE‐3‐ACETIC ACID  吲哚乙酸(IAA)

I364  INDOLE‐3‐ACETIC ACID SOLUTION  吲哚乙酸溶液(IAA)

I538  INDOLE‐3‐BUTYRIC ACID  吲哚丁酸(IBA)

I560  INDOLE‐3‐BUTYRIC ACID (K‐IBA)  吲哚丁酸钾盐(K‐IBA)

I460  INDOLE‐3‐BUTYRIC ACID SOLUTION  吲哚丁酸溶液(IBA)

I409  INDOLE‐3‐PROPIONIC ACID  吲哚丙酸(IPA)

N600  a‐NAPHTHALENEACETIC ACID  α‐萘乙酸(NAA)

N605  a‐NAPHTHALENEACETIC ACID SOL  α‐萘乙酸溶液(NAA)

N610  NAPHTHALENEACETIC ACID, K‐NAA  α‐萘乙酸钾盐(K‐NAA)

N564  b‐NAPHTHOXYACETIC ACID  β‐萘氧乙酸(NOA)

D309  2,4‐D ACID SOLUTION (10 mg/mL)  2,4‐D溶液

D295  2,4‐D ACID SOLUTION (1mg/mL)  2,4‐D溶液

C213  p‐CHLOROPHENOXYACETIC ACID  CPA/4‐氯苯氧乙酸

P717  PICLORAM  毒莠定

D159  DICAMBA  麦草畏/麦草威/百草敌

D165  DICAMBA SOLUTION (1MG/ML)  麦草畏/麦草威/百草敌溶液

A147  AUXINDOLE  生长素

B800  6‐BENZYLAMINOPURINE (BA)  6‐BA

B130  6‐BA SOLUTION (1.0 mg/mL)  6‐BA溶液(1.0 mg/mL)

D525  6‐y,y‐DIMETHYLALLYLAMINOPURINE  2iP粉末

D217  2iP SOLUTION  2iP溶液

D341  2iP‐HCl  2iP盐酸盐

K750  KINETIN  激动素(KT)

K483  KINETIN SOLUTION  激动素溶液(KT)

T438  THIDIAZURON (95%)  噻苯隆/赛苯隆/脱叶灵/脱叶脲(TDZ)

T888  THIDIAZURON (99%)  噻苯隆/赛苯隆/脱叶灵/脱叶脲(TDZ)

C279  4‐CPPU  氯吡脲/调吡脲/吡效隆醇/吡效隆

Z125  ZEATIN  玉米素(反式)

Z860  ZEATIN SOLUTION (1MG/ML)  玉米素溶液(反式)

Z899  ZEATIN RIBOSIDE  玉米素核苷(反式)

Z875  ZEATIN RIBOSIDE SOLUTION  玉米素核苷溶液(反式)

T841  META‐TOPOLIN  细胞分裂素META‐TOPOLIN

T7885  META‐TOPOLIN SOLUTION  细胞分裂素META‐TOPOLIN溶液

G500  GIBBERELLIC ACID  赤霉素GA3

G198  GIB ACID SOLUTION (1 mg/mL)  赤霉素GA3溶液  (1 mg/mL)

G362  GIB ACID SOLUTION (13mg/mL)  赤霉素GA3溶液  (13mg/mL)

G358  GIBBERELLINS A4 + A7  赤霉素  GA4+GA7

A102  (+) ABSCISIC ACID  脱落酸(ABA)

P733  PUTRESCINE  腐胺/丁二胺

S837  SPERMIDINE  亚精胺

O630  ORYZALIN  氨磺乐灵/氨磺灵

T828  TRIFLURALIN  氟乐灵/茄科宁/特福力/氟特力

A123  ANCYMIDOL  嘧啶醇/醇草啶

C207  CHLORMEQUAT CHLORIDE  矮壮素

P687  PACLOBUTRAZOL  多效唑

T761  TRINEXAPAC‐ETHYL  抗倒酯

J389  (+/‐) JASMONIC ACID  茉莉酸甲酯

E244  24‐EPIBRASSINOLIDE  24‐表‐油菜素内酯/芸苔素内酯

B148  4‐BROMOPHENOXYACETIC ACID  4‐溴苯氧基乙酸(BPA)

B131  BIALAPHOS  双丙氨膦

B1730  BIALAPHOS SOLUTION (1 mg/mL)  双丙氨膦溶液

玉米素(Zeatin)及玉米素核苷-PhytoTech植物生长调节剂

植物生长调节剂是人工合成的能调节植物的生长、分化、发育的化学物质,广义上也包括天然植物激素,是植物组织培养基中的关键物质,在植物组培过程中起着重要和明显的调节作用。常用的植物生长调节物质有吲哚丁酸、6-BA、萘乙酸、激动素、赤霉素、2,4-D-脱落酸等。其中属于细胞分裂素的玉米素是比较常见的植物生长调节剂,玉米素(Zeatin)是由D·S·莱萨姆等于1963年从幼嫩的玉米种子里分离出一种细胞分裂素,根据其来源被命名为玉米素,随后还发现了一些在结构上与玉米素相近的活性物质,1967年证明了椰子乳中主要的活性物质也是玉米素核苷。

玉米素(Zeatin)及玉米素核苷-PhytoTech植物生长调节剂 玉米素(Zeatin)及玉米素核苷-PhytoTech植物生长调节剂

作为世界著名的植物培养基供应商,PhytoTech的优质植物基础培养基、植物凝胶、琼脂粉、植物生长调节剂、抗生素享有盛名,成为全球植物科研工作者的主选品牌。其中针对植物生长调节剂及植物激素,则有吲哚乙酸、萘乙酸、吲哚丁酸等细胞生长素以及玉米素、赤霉素等细胞分裂素等多种产品供应。PhytoTech的所有植物培养产品均经过组织培养级别测试,以确保您的实验体验和效果。

玉米素在结构上有顺、反两种异构体,反式玉米素生物活性要更强些,常以核糖核苷或核糖核苷酸的形态存在。在功能上可以促进细胞分裂并且可以影响细胞周期的其他环节,其功能还包括阻止叶片衰老,逆转对叶的毒性作用,抑制根的生成,并且高浓度时可以促进芽的生成。反式玉米素为白色针状结晶。熔点208-210℃,溶于NaOH。上海金畔生物科技有限公司向您推荐PhytoTech植物组织培养级玉米素(Zeatin)及玉米素核苷产品:

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
Zeatin, Trans Isomer Z125 植物组织培养级反式玉米素
Zeatin Riboside, Trans Isomer Z899 植物组织培养级反式玉米素核苷

世界著名的植物培养基供应商PhytoTechnology Laboratories™ 的优质植物基础培养基、植物凝胶、琼脂粉、植物生长调节剂、抗生素享有盛名。作为PhytoTech的中国一级代理,上海金畔生物科技有限公司为您提供最专业和全面的植物培养系列产品,并备有全系列现货。上海金畔生物科技有限公司为您提供从8g、100g、250g、500g、1kg、2.5kg到5kg不同包装规格的原装进口PhytoTech植物组培级玉米素及玉米素核苷产品。上述玉米素类生长调节剂产品经过至少2种以上植物的组织培养级别测试,能完全满足您的植物组织培养要求。

如果您对PhytoTech植物组织培养产品及原料耗材等感兴趣,请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。