透析袋产品使用方法

透析袋产品使用方法
透析通过在半透膜两侧,从高浓度一侧向低浓度一侧的扩散过程,去除小分子。只有小于膜孔径的分子可以通过膜,在全部料液中达到平衡。一旦达到平衡后,底物不再有“净”移动,因为分子将以相同的速率,通过膜孔,进入透析单元或出来。相反,不能通过膜孔的大分子,将被截留在其所处的膜的原有一侧。

为去除不需要的底物,需要更换透析缓冲液,以形成新的浓度梯度。更换缓冲液后,颗粒会继续从高浓度一侧向低浓度一侧移动,直到再次达到平衡。每次更换透析缓冲液,膜内部的底物按两个部分的体积差,被进一步纯化。例如,在100mL的透析缓冲液中透析1ml的样品,平衡时,可透析底物的浓度将被稀释100倍。每更换100mL新的缓冲液,将使样品再稀释100倍。如更换3次100mL的透析缓冲液,且假定每次更换透析缓冲液前,均达到完全平衡,样品种底物的稀释倍数将为100x100x100,即1,000,000倍。
影响透析速率的因素有很多,包括:1)透析缓冲液体积;2)缓冲液组成;3)缓冲液更换次数;4)透析时间;5)温度以及6)颗粒粒径与膜孔径的比值。相比仅稍小于膜孔的底物,远小于膜孔的底物会更快地达到平衡,即需要透过的分子的分子量与膜孔的截留分子量(MWCO)差别越大,透析速率越快。

从透析的影响因素可见,特定样品所需的透析时间很难预测。为彻底更换缓冲盐,一般实验时,多使用样品体积200-500倍的透析缓冲液,在室温条件下透析6-8h,并至少更换3次透析缓冲液。最后一次更换后,再4℃透析一日。这种方法也适合用于去除生物素标记或交联实验中过量的标记试剂和反应副产物。

此外,由于在透析过程中,分子是双向透过半透膜的,且每种底物达到其自身平衡的过程与其它底物无关,所以,较易发生样品稀释。如果某一底物的浓度在膜外侧较高,且粒径足够小,可以自由通过膜孔,其会有从透析缓冲液进入膜内部样品的“净”移动。
而水是非常小的分子,可以通过几乎所有规格透析膜的膜孔。当以较稀释的缓冲液透析高溶质浓度的样品时,会有通过膜进入透析膜的水的“净”移动。当样品中含有甘油和某些糖时,因其具有较强的吸湿性,扩散通过膜达到平衡后,会显著影响水的渗透性,导致样品体积变化。
为降低水的移动及其所导致的样品体积的变化,透析时可使用“步进式”方法,即需要使用低溶质浓度缓冲液透析高溶质浓度的样品时,可先用稍高浓度的透析缓冲液进行透析,之后每次更换缓冲液时,再逐步降低缓冲液浓度,并最终达到所需的缓冲液浓度,从而降低在透析过程每个阶段,样品和透析缓冲液的水“浓度”的影响。
四、透析袋应用:
样品溶液的缓冲液置换和PH值的调节
去除盐类,表面活性剂和溶剂
DNA电洗脱
浓缩蛋白质,多肽和抗体
小分子污染物清除
电泳前稀释蛋白的制备
组织培养的提取纯化
结合研究
透析袋的区别:
纤维素透析袋 再生纤维素透析袋 普通型透析袋
分子量 100-500.500-1000 5k 10k,20k,50k,100k,300k 1k,2k.3.5k,8k,10k,25k,50k 3.5k,7k,8-14k
化学兼容性 适用于:甲醇,乙醇和异
不适用于:强极性溶剂(如丙酮,甲乙酮,二恶烷)
适用于:烃,卤代烃,醇酮,酯,氧化物,含氮溶剂。不适用于盐酸(浓度>25%),硝酸(浓度>25%),96%硫酸,25%高氯酸,1N氢氧化钠和10%苯酚水溶液 与很多盐兼容,比
如CaCl2、(NH4)2SO4,还可以有分子生物学和酶学常用的水溶液和有机溶液兼容,如异丙醇、乙醇、丙酮。
有机抗性 中等
污染物水平 不含重金属和硫化物 不含重金属和硫化物 破化物<0.3%,重金属<50ppm
包装 温型,0.05%叠氮化钠 温型,0.05%叠氮化钠 干型
扁平宽度 10,16,24,31mm 10,12,18,24,28,38,45,50,53mm 25,34,44,77mm
PH范围 2-9 2-12 5-9
温度限度 37℃ 60℃ 可煮沸,可高压灭菌
化学兼容性 无需预处理,只需用蒸馏水清洗即可使用 无需预处理,只需用蒸馏水清洗即可使用 在沸水或1mmol/l EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟
五、透析袋的选择:

正确选择合适的戴留分子量
线留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础的。为达到合理有效的分端,分一的两种物质分子量的比率至少为25。选择做留分子量的经验法则:选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少90%的保留率。
选择截留分子量值约为要保
留的大分子分子量的一半,以获得至少90%的保留家。
正确选择扁平宽度

进析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管园扩数距滴较长较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15厘米的进析袋。

透析袋的化学相容性
化学相容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。温度,浓度,长时间哪光等因素的改变可能影响产品的使用。建议您自设条件进行测试。

透析袋分类:
两种材质的透析膜——纤维素酯和再生纤维素,同时提供两种不同处理规模,标准级和生物技术级,后者更适于对纯度较为敏感的生物学实验,如涉及亲和研究和核酸的实验。此外,仕必纯提供预组装的即用型透析装置,用于小量样品的透析处理,这种装置操作简便,且可保证较高的样品收率,可用于HPLC样品制备、载体药物的体外溶出等实验。
高精度、即用型透析袋(生物级,使用前无需处理,去除了硫化物和重金属离子,含0.05%叠氮钠防腐液)

生物读术进析较的制通过程或有重金属污染及破化物,无需预处理,只需用去离子水清洗而可使用,满足对不同实验室透析量求,有两种不同生物技术等级通析袋:
纤维素透析袋和再生纤维素透析镜。
优点:
韧性膜材料,不易破损
杂质含量极少,可无需预处理,只需用去高子水清洗即可使用 的
孔径标准均一
对溶质的吸附性小
可选分子量范围广100-300000
多种扁平宽度可选
特有生物技术膜,不含硫化物及金属杂质
二、普通干型透析袋(美国联合碳化,甘油涂层,使用前需处理)
技术参数:
△.PH稳定范围5-9
△污染物水平·硫化物<0.3%,重金属<50ppm
△化学兼容性:与很多盐兼容,比如CaCl2.NHH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水落剂、有机溶剂兼容,比如异丙醇、乙醇和丙酮。
△蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1 ng
透析袋储存条件:
透析袋可存放于10-29度;每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。

 
使用前处理:(试验要求不高的可以使用简易处理方法:在沸水中煮沸10分钟左右即可使用)
1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。
2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。

货号 品名 产品简介 截留分子量 产地品牌
131060 透析袋31-100D CE膜,宽度31mm,直径20mm 100D 美国光谱医学
131096 透析袋31-500D CE膜,宽度31mm,直径20mm 500D 美国光谱医学
132636 透析袋18-1000D RC膜,宽度18mm,直径11.5mm 1000D 美国光谱医学
132640 透析袋45-1000D RC膜,宽度45mm,直径29mm 1000D 美国光谱医学
1-0150-45 透析袋45-1000D RC膜,宽度45mm,直径29mm 1000D 美国MFPI
132620 透析袋18-2000D RC膜,宽度18mm,直径11.5mm 2000D 美国光谱医学
132633 透析袋45-2000D RC膜,宽度45mm,直径29mm 2000D 美国光谱医学
132590 透析袋18-3500D RC膜,宽度18mm,直径11.5mm 3500D 美国光谱医学
132592 透析袋45-3500D RC膜,宽度45mm,直径29mm 3500D 美国光谱医学
1-0550-18 透析袋18-5000D RC膜,宽度18mm,直径11.5mm 5000D 美国MFPI
1-0550-30 透析袋30-5000D RC膜,宽度30mm,直径19.1mm 5000D 美国MFPI
1-0550-40 透析袋40-5000D RC膜,宽度40mm,直径25.5mm 5000D 美国MFPI
132579 透析袋12-8000D RC膜,宽度12mm,直径7.5mm 8000D 美国光谱医学
132586 透析袋50-8000D RC膜,宽度50mm,直径32mm 8000D 美国光谱医学
132570 透析袋12-10000D RC膜,宽度12mm,直径7.5mm 10KD 美国光谱医学
132576 透析袋45-10000D RC膜,宽度45mm,直径29mm 10KD 美国光谱医学
132560 透析袋12-15000D RC膜,宽度12mm,直径7.5mm 15KD 美国光谱医学
132566 透析袋45-15000D RC膜,宽度45mm,直径29mm 15KD 美国光谱医学
131348 透析袋31-20000D CE膜,宽度31mm,直径20mm 20KD 美国光谱医学
132550 透析袋12-25000D RC膜,宽度12mm,直径7.5mm 25KD 美国光谱医学
132554 透析袋34-25000D RC膜,宽度34mm,直径22mm 25KD 美国光谱医学
132544 透析袋34-50000D RC膜,宽度34mm,直径22mm 50KD 美国光谱医学
131420 透析袋31-100000D CE膜,宽度31mm,直径20mm 100KD 美国光谱医学
131450 透析袋16-300000D CE膜,宽度16mm,直径10mm 300KD 美国光谱医学
131486 透析袋16-1000000D CE膜,宽度16mm,直径10mm 1000KD 美国光谱医学
六、透析袋的使用:
下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、
顺的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适
当的变化。
1.把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的样品)。
2.裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的20%)作为头部空间
3.把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋。
4.由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹。
5.把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6.透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许过夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。建议在(透析后)2-4小时,6-8小时和10-14小时(第2天早晨)更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。
注:对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。
7.透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃,再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。

 

七、透析袋的贮存和保质期:
在适当的储存情条件下,保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或4℃储存在聚乙烯袋中。未开封的透析袋4℃储存。一旦变湿,透析袋应浸泡在下列之一的溶液中:005%叠氮化钠,1%的苯甲酸钠或1%%甲醛。(备注:一旦变潮湿,不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌)。

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